C- 反应蛋白及临床应用杨红玲

Protein Structure CRP 结构

C 反应蛋白的生理和生化 在细胞因子 IL-6 家族诱导下， CRP 在肝中合 成迅速。 正常合成率为 l ～ 10 mg ／ d ，急性炎症时每 天合成超过 lg/d 。 在急性相反应高峰时肝大量合成蛋白，其中 20 ％是合成 CRP 。 当 IL-6 刺激物缺乏时，在 2 ～ 4 h 内合成率降 至正常。 循环中 CRP 半衰期约 19h ，但一旦它与配体结 合，可快速的被清除。 肝外合成对血清水平影响作用很小。

CRP 的生物学功能

CRP 的生物学功能 - 机理结合坏死的内源性物质 在钙离子存在的情况下， CRP 能结合坏死的内源性物质和效应细胞 , 当正常的脂质双层结构被破坏致使内部磷脂暴露时， CRP 可发生与宿主细胞的结合。在系统性红斑狼疮的鼠模型中，注射 CRP 可改善 SLE 的状况。

– 人 CRP 基因的多态性导致的低基础水平表达增加了发生系统性狼疮的风险。– CRP 量的减少可能与 SLE 发病机理有关。 – CRP 量的减少使结合的细胞碎片减少。

CRP 的生物学功能 - 机理 结合外源性物质

– 细菌、真菌、寄生虫中的细胞壁磷酸胆碱。– CRP 具有保护机体抗细菌感染的能力。 – CRP 保护机体抵抗致命性的细菌脂多糖和各种炎症介子的能力。

CRP 的生物学功能 - 机理结合配体的 CRP 激活下列生物系统，导致配体的消除：

–CRP 对补体系统的激活 .–CRP 结合 IgGFcR ，增强自然杀伤细胞的活性。–CRP 的调理性质，调理即刺激细胞吞噬作用。–CRP 和血小板激活因子 (PAF) 结合　抑制 PAF刺激的血小板聚集。

CRP 的生物学功能 - 机理CRP 具有多效性的作用。

– 当抑制干扰素的合成时 ， CRP 可诱导 IL-1受体拮抗剂而增加抗炎细胞因子 IL-10 的释放 .– CRP 也可诱导炎症反应。 CRP 向上 - 调节内皮细胞粘附分子的表达，刺激许多细胞释放IL-8 ， 增加血浆纤维蛋白酶原催化剂抑制剂 -1 的表达和活性、增加 IL-1, IL-6, IL-18, 和肿瘤坏死因子的释放 .

CRP 诱导或抑制炎症反应依赖于环境。

CRP 功能 识别和启动靶效应细胞及其产物并将其从组织中清除。 吞噬溶解入侵微生物。

急性相蛋白 CRP 合成的生物调控CRP 基因位于 1 号染色体短臂，只有一个内含子，其分离编码信号肽的区域。肝脏 CRP 合成的调节主要发生在转录阶段。由IL-6 诱导， IL-1 可增加此作用。 CRP 启动子最近区为 STAT3 和 Rel 蛋白的结合部位。这些因子的相互作用增加 DNA 结合 C/EBP 家属成员的稳定性，从而有效地诱导了 CRP 基因的表达。神经元细胞、动脉硬化斑块、单核细胞和淋巴细胞也可以合成 CRP 。在这些部位的调节机制还不清楚。

修饰的 CRP(m-CRP) -"Modified" CRP

目前认为 m-CRP 是原 CRP 的单体。与天然 CRP不同 , 表现在分子大小 ,溶解度 , 抗原性 ,带电荷数等方面的差别 . m-CRP 具抗菌作用。m-CRP 具有强大地诱发炎症的作用。

方　法　　　　　　灵敏度　　　　　参考献试管内沉淀试验　　 - 　　　　　 JExpMed1930;52∶561毛细管内沉淀试验　　 10～ 20mg/L AmJMed1950;8∶445改良平板双扩散法　　 10～ 20mg/L IntArchAllergy1962改良琼脂柱扩散法　　 3.0mg/L ProcSocExpBiol1955改 良 单 扩 散 法 　 　 　 　 1.0mg/L

ActaPatholMicrobiolScand琼脂糖凝胶电泳法　　 1.0mg/L ClinChimActa1969放射电免疫扩散法　　 10μg/L JClinLabInvest1973补体结合试验　　　　 0.6mg/L ProcSocExpBiol1954胶乳凝集试验　　　　 1.0mg/L Nature(London)1961高敏乳胶增强浊度 0.35mg/ml Dade Germany2000荧光抗体法 — Nature(London)1961放射免疫测定法 3μg/L JLabClinMed1976

检测方法

CRP 检测方法 - 　免疫沉淀试验 检测 CRP 原始方法 . 将兔抗 CRP 血清吸入毛细管内。 把它浸入被测血浆或血清内 , 因毛细管虹吸作用被吸入 , 与抗 CRP 血清形成接触界面。 这种方法较粗糙 ,取得结果时间较长 , 也不太正确可靠 .

CRP 检测方法 - 　免疫浊度法 可溶性 CRP-Ag 与可溶性抗 CRP-Ab 反应 ,形成可见的网络状沉淀性 IC复合物点 . IC复合物对光具有散射作用 , 使溶液具有肉眼尚不可见的浊度。 在被测样品中加抗血清后一定时间 ,测定反应系统散射光强度或浊度变化 , 可对被检物及其浊度加以检测。 根据仪器的光学系统 ,浊度法分为散射浊度法和透射浊度法两类。 许多自动化生化分析仪和自动化免疫测定仪都可 CRP测定项目。

CRP 检测方法 - 　胶乳凝集试验(LAT) 将强化的兔抗 CRP 抗体固定于胶乳微粒上。 加入被测样品后与 CRP 在 3分钟内形成肉眼可见的凝集物。 胶乳强化浊度法的灵敏度优于传统浊度法 ,试剂稳定性佳。

检测方法 - 标记免疫测定 ELISA 和免疫发光法和化学发光法等都可用于 CRP 的测定。 化学发光法的灵敏度和定量精确度可与 RIA媲美 , 而无同位素污染 ,试剂稳定 , 分析速度快。 CRP-POCT(床边试验 )法－ ELISA 干片法。

– 把磷脂酰胆碱 (PC) 化学交联固定于载体。– 被测 CRP 与载体的 PC 结合。– 被酶标记的抗 CRP单抗结合。– 可灵敏、特异性检测 CRP, 约 5分钟可得结果 . 。

检测方法 - 胶乳增强试验（ shCRP ）：

常规 CRP检验方法可在感染或组织损伤时检测出 CRP>10mg/L 。

该检测方法具有较高的灵敏度。 这个水平（ 0.1～ 10mg/L）的 C 反应蛋白又被称为超敏 C 反应蛋白（ hsCRP ）。

   CRP检测的评估 1 、半定量：胶乳凝集试验等已弃用。 2、定量：

– 散射免疫比浊法、透射免疫比浊法：是目前常用方法。检测限度为 5～ 150 mg ／ L ， CV ＜ 5% 。

– 胶乳增强试验 -shCRP检测：很大程度提高了敏感度。酶免疫分析和荧光免疫分析：有潜在的灵敏度优势。– 胶乳增强试验 -shCRP检测方法很大程度提高了敏感度。

CRP检测对标本的采集也无特殊要求。 高浓度的类风湿因子可产生 CRP假性升高。 CRP筛查的费用远小于其他心血管检查的费用。

临床应用 ____参考范围CRP 参考范围 中值

成人和儿童 0.068 ～ 8.2 mg/L 0.58 mg/L

新生儿，脐血 ≤0.6 mg/L

出生后第 4 天至 1 个月的婴儿 ≤1.6 mg/L

分娩母亲 ≤47 mg/L

临床意义 器质性疾病的筛选

– 急性或慢性炎症如伴有细菌感染。– 自身免疫或免疫复合物病。– 组织坏死和恶性肿瘤。

临床意义—感染的诊断与鉴别 CRP 在细菌感染发生后 6 ～ 8h 即开始升高， 24 ～ 4

8h 达到高峰，在感染消除后其含量急骤下降，一周内可恢复正常。 CRP 在病毒感染时无显著升高。 革兰阴性感染：可发生最高水平的 CRP ，有时高达 500 mg ／ L 。 革兰阳性菌感染和寄生虫感染：通常引起中等程度的反应，典型的是在 100 mg ／ L 左右。 病毒感染：引起的反应最轻，通常不超过 50 mg ／

L ，极少超过 100 mg ／ L 。 在细菌感染的急性期， CRP显著升高，寡聚腺苷合成酶正常； 在病毒感染时 CRP 水平正常或轻微升高，寡聚腺苷合酶水平升高。

临床意义 C 反应蛋白是心血管疾病最强的危险指标， C 反应蛋白水平可预测将来心肌梗塞及中风的危险性。

– C 反应蛋白含量 >2.1mg/L 的人与 <1mg/L者比较 :

• 将来发生心肌梗塞的危险性为后者的 2.9倍；• 发生缺血性中风的危险性为后者的 1.9倍；• 发生外周动脉血管性疾病的危险性为后者的 4.1倍。

– 在痛疼开始后数小时内， CRP升高， 3~4d 达高峰，在 CK-MB回到正常后 7-10d 也降至正常。

临床意义－自身免疫或免疫复合物病。 　系统性红斑狼疮、多肌炎、系统性硬化症

CRP无明显改变，所以可用于与风湿性疾病鉴别。 若存在发热为并发感染而非疾病的恶化。

临床意义 -癌症 已升高或正在升高的 CRP预示着不良的预后及常提示转移。 结肠癌是导致死亡人数第二多的癌症。

研究显示，血液 C- 反应蛋白含量最高的那些人患结直肠癌的危险，是 C- 反应蛋白含量最低者的两倍 .

临床意义 评估疾病活动性和疗效监控

– CRP 为 10 ～ 50 mg ／ L 表示轻度炎症。– CRP升至 100mg ／ L 表示较严重的疾病，它的严重程度在必要时需静脉注射。– CRP > 100 mg ／ L 表示严重的疾病过程并常表示细菌感染的存在。

临床意义 - 抗生素的治疗监测 系列血浆 CRP 的测定，可用来作为下列情况的治疗监测：

– 在许多感染时最有效使用抗生素治疗。– 根据 CRP 水平的变化来决定抗炎药物的剂量。– 在 CRP 下降至正常时，中 断抗菌素治疗。– 在高危人群缺少微生物学诊断时，为抗生素治疗的指引。

临床意义 - 抗生素的治疗监测

临床意义 - 外科 患者施行手术后24～ 72h, 血中 CRP 水平明显升 高 , 约在第5～ 7天恢复正常。– 凡骤升后持续高水平多预示合并感染。– 对中、大手术患者 , 在术前和术后3～ 7天各作 常规检测一次。– 凡术后5～ 7天 CRP仍持续高水平者 , 理应怀疑 合并感染 , 并配合治疗作随访监测。　

临床意义 - 内科– 肺炎 : CRP ＞ 100mg/L ，强烈提示细菌感染，如化脓性支气管炎或肺炎 ;典型的病毒性肺炎不会超过 50mg/L 。 – 心血管病，在痛疼开始后数小时内， CRP升高， 3-4d达高峰，在 CK-MB回到正常后 7-10d也降至正常。–  代谢综合征 代谢综合征分组，根据 CRP 水平可将为

• 低危险组， <1 mg/Ｌ• 中危险组， 1 ～ 3 mg/Ｌ• 高危险组， >3 mg/Ｌ　

临床意义 -妇产科– 盆腔炎和子宫附件炎 . CRP值升高 – 盆腔肿块和子宫肌瘤通常多为阴性。– 诊断胎膜早破宫内感染 . 胎膜早破时，如母亲 CRP 在产前6-19h超过 50mg/L 可作为出现 AIS 的标准；产后第一天出现的 AIS 的 CRP 将比正常分娩时高出2-3倍。 – 无并发症的 CT 和 NG 感染不会引起 CRP升高。 但扩散到盆腔可引起急时相反应。

临床意义 -儿科新生儿浓毒血症 :–出生 3天前 CRP ＞ 10mg/L 表示感染 .–如果 CRP 在 24h内没有超过 10mg/L ，多无新生儿感染 .小儿发热 :– 患病超过 12h ， CRP显著＞ 40mg/L ， ESR显著＞30mm/h 应关注为细菌性感染。脑膜炎 : –CRP ＞ 20mg/L提示为细菌感染的可能；–＞ 100mg/L 时具有细菌感染诊断价值。–结脑 CRP 在 20-60 mg/L 。–成功的治疗可使 CRP 在一周内降至正常。

小 结CRP 是一五球体结构的高度保守的急时相蛋白。CRP 为一模式识别分子，与特殊的分子结构结合而发挥作用。为宿主先天性免疫应答的一部分，在机体平衡和自身保护中起着重要贡献。血 CRP浓度的升高在为炎症和组织损伤的标志。CRP 生物学的作用似乎相当复杂的，且为多效的。CRP 与许多疾病的发病机理有关。CRP 对机体许多疾病的早期诊断、鉴别诊断、疗效观察、预后评估以及指导临床抗菌素的合理应用等有重要的意 义。CRP 的检测，对于普通的炎症用常敏 CRP检测即可，而对于心血管疾病、代谢综合征、自身免疫性疾病、新生儿 疾病检测等则需用超敏 CRP检测方法方可。