FENOTIPAGENS ABO e RhD

Maria do Carmo Valgueiro Costa de Oliveira

FUNDAÇÃO HEMOPE

DISCREPÂNCIAS

GAL

Fuc

GALGLcNAcGLc

GLc GAL GLcNAc GALSubstância precursora

Sistema ABO

GALNAC

Fuc

2α-L-fucosil-transferase

Gene A

3α-N-acetil-D galactosaminil-transferase

Antígeno H

Antígeno A

Gene H

GLc GAL GLcNAc GAL

Gene BFuc

GLc GAL GLcNAc GAL

Gene A FucAntígeno A

GALNAC

Antígeno B

GAL

3α-D-galactosil-transferase

Sistema ABO

CURIOSIDADE :

O Sistema ABO é o único que possui anticorpos de ocorrência natural, sistematicamente, no soro dos indivíduos

Anti-AAnti-B

Anti-A,BHemA

HemB

Prova reversaProva direta

Fenotipagem ABO

Sistema ABO

Discrepâncias

Erros TécnicosBurocráticos

HemAHemB

Anti-A

Anti-B

Anti-A,B

Sistema ABO

- Manuseio da amostra de sangue e de reagentes

- Não observação das Instruções do fabricante e da técnica

Erros técnicos

Sistema ABO

Reações :

• Aquecimento

• Centrifugação não conforme

• Ressuspensão inadequada do botão hemácias

• Presença de hemólise e/ou aglutinação não valorizada

• Presença de fibrina

Antígenos

A expressão pode estar enfraquecida :

• translocação do cromossoma 9

• leucemias

• doenças que induzem estresse da hemopoiese

Sistema ABO

Discrepâncias

Sistema ABO

História clínica

Idade e diagnóstico

Relato de transfusãoe/ou gestação

Informações importantes

� Consultar o dossiê do paciente/doador

Discrepâncias

Medicações em uso

Nível de imunoglobulina

Uso de imunoglobulina

Sistema ABO

Antigenosde fraca reação ou ausente

Anticorpos de fraca reação ou ausente

Anormalidadeprotéica

Problemas diversos

Discrepâncias

Sistema ABO

Tipagem ABO

00++++0+++++++++

000+++++++

AutoHem OHem BHem AAnti-A,BAnti-BAnti-A

Antigenos de fraca reação ou ausente

� Subgrupo de A e/ou B

� Leucemias ou outras afecções malígnas

� Em casos de doença de Hodgkin

� Excesso de substância de grupo ( neoplasias )

� Fenômeno B adquirido

� Quimerismo

Discrepâncias

Sistema ABO

- Lavar as hemácias e ressuspender adequadamente em salina

- Realizar a tipagem com anti-soros de diferentes fabricantes

- Incluir o soro anti-A1

- Realizar o Teste Direto da Antiglobulina

Condutas iniciais Discrepâncias

Sistema ABO

000+++++++++0

0000++++0++++

AutoHem OHem BHem AAnti-A,BAnti-BAnti-A

Anticorpos de fraca reação ou ausente

� Recém-nascidos / idosos

� Gamaglobulina

- Leucemias LLC- Linfoma malígno- uso de imunossupressores

� Imunodeficiência ( doenças )

� Agamaglobulinemia congênita

Discrepâncias

Sistema ABO

Anormalidade protéica

++++++++000

++++++++++++++++++++

AutoHem OHem BHem AAnti-A,BAnti-BAnti-A

� Nível elevado de proteinas

- Mieloma- Waldenstron- Hodgkin

� Uso de expansores plasmáticos - Dextran / PVP

� Presença da gelatina de wharton

� Fibrinogênio elevado

Discrepâncias

Sistema ABO

- Testar o soro do paciente com três hemácias A1, A2, B, O

- Realizar a pesquisa de anticorpos irregulares

- Incluir sistematicamente um auto-controle,

- Testar o soro do paciente com hemácias de cordão

- Utilizar uma nova amostra de sangue de coleta diferente.

Condutas iniciais Discrepâncias

Sistema ABO

0++0++++++++

++++++++++++++++++++

AutoHem OHem BHem AAnti-A,BAnti-BAnti-A

Problemas diversos

� Infecção viral ou bacteriana poliaglutinabilidade

� Presença de auto-anticorpos frios

� Presença de complexos antígeno x anticorpos solúveis

� Fenômeno Cis AB

� Panaglutinação – anti-I

Sistema ABO

Discrepâncias

Presença de alo-anticorpos

Presença de anticorpos anti-A1

Eluir anticorpos frios

Utilizar reagentes à temperatura ambiente

Utilizar lectinas para definição de subgrupos

Opções de condutas diante dos resultados

Sistema ABO

Discrepâncias

Incubar a amostra coletada à 37ºC

Dissociar auto-anticorpos

Realizar auto-absorção do anticorpo

Identificar alo-anticorpos

Sistema Rh

Tipagem RhD

Sistema Rh

A expressão do antígeno D nas hemácias varia de acordo com o fenótipo e número de sítios antigênicos

Sítios antigênicos

. D normal - 10.000 - 33.000

. D fraco - 200 - 10.000

. D elevado - 75.000 - 200.000

Variações do antígeno D

. D negativo

. D parcial

Os antígenos do Sistema Rh são codificados pelos genes:

. RHD

. RHCE

. Híbridos : resultado da combinação RHD / RHCE

Publicados mais de 77 genes variantes RHD 22 genes variantes RHCE

Sistema Rh

Fenótipo D parcial

. Historicamente são classificados como RhD positivo normal

. Outros, são fenotipados como D fraco

. Na prática, só é reconhecido após a imunização pelo antígeno D

Hemácias de um mesmo indivíduo pode apresentar diferentes reações,

dependendo do anti-soro usado

Antigenosde fraca reação

ou ausente

Anormalidadeprotéica

Discrepâncias

Contaminação do soro anti-D

Tipagem RhD

Sistema Rh

Antigenos de fraca reação ou ausente

� Quimerismo

� D fraco

� D fraco parcial

Sistema RhDiscrepâncias

0++

00

Controle Rh (AGH)Anti-D (AGH)

00

00

Controle RhAnti-D

00

0++++

Controle Rh (AGH)Anti-D (AGH)

++++

+++++++

Controle RhAnti-D

Anormalidade protéica

� Uso de expansores plasmáticos - Dextran / PVP

� Presença da gelatina de wharton

Sistema RhDiscrepâncias

Problemas diversos

Sistema RhDiscrepâncias

� Auto-anticorpos contra antígenos intrínsecos das hemácias

� Aloanticorpos fixados às hemácias

� Proteínas ou drogas adsorvidas às hemácias

� Anticorpos contra drogas

� Patologias

Teste direto da antiglobulina positivo

Referência

1.Westhoff CM. Rh blood group system in review: A new face for the next

decade. Transfusion 2004; 44: 1663-1673.

2. Reid , lomas Francis C. the Blood group antigen facts book. San

Diego:Academic Press; 1997

3. Reid MA, Oyen R, Marsh WL. Summary of Clinical Significance of Blood

group Alloantibodies. Seminars in Hematology, 2000, 37:2;197-216