3. laboratorijas darbs. Centrifugācijas metodes - diferenciālā centrifugācija.

20
20.09.2011 LU Mikrobioloģijas un bio tehnoloģijas katedra ML 1 3. laboratorijas darbs. Centrifugācijas Centrifugācijas metodes metodes - - diferenciālā diferenciālā centrifugācija. centrifugācija. Māris Lazdiņš [email protected] LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra Studiju kurss Bioloģija Bloks Šūnas bioloģija, bioķīmija, ģenētika

description

Studiju kurss Bioloģija. Bloks Šūnas bioloģija, bioķīmija, ģenētika. 3. laboratorijas darbs. Centrifugācijas metodes - diferenciālā centrifugācija. Māris Lazdiņš [email protected] LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra. Spēki. F = ma F g = mg F g - gravitācijas spēks (N) - PowerPoint PPT Presentation

Transcript of 3. laboratorijas darbs. Centrifugācijas metodes - diferenciālā centrifugācija.

Page 1: 3. laboratorijas darbs. Centrifugācijas metodes -     diferenciālā centrifugācija.

20.09.2011 LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

1

3. laboratorijas darbs.

Centrifugācijas metodesCentrifugācijas metodes --

diferenciālā centrifugācija.diferenciālā centrifugācija.Māris Lazdiņš [email protected]

LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra

Studiju kurss Bioloģija

Bloks Šūnas bioloģija, bioķīmija, ģenētika

Page 2: 3. laboratorijas darbs. Centrifugācijas metodes -     diferenciālā centrifugācija.

20.09.2011 LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

2

F = ma Fg = mg

Fg - gravitācijas spēks (N)m - ķermeņa masa (kg)g - brīvās krišanas paātrinājums, kura vērtība tuvu Zemes virsmai ir - 9,8 m/s2.

Spēki.Spēki.

Page 3: 3. laboratorijas darbs. Centrifugācijas metodes -     diferenciālā centrifugācija.

20.09.2011 LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

3

Pretēji darbojas berzes spēks

Fb

Tas atkarīgs no:- ķermeņa virsmas īpatnībām, - kustības vides blīvuma,- kustības vides viskozitātes.

Ja Fg >> Fb kustība būtiski netiek ietekmēta.

Spēki.Spēki.

Fg

Fb

Page 4: 3. laboratorijas darbs. Centrifugācijas metodes -     diferenciālā centrifugācija.

20.09.2011 LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

4

Centrbēdzes (centrtieces) spēks

Fc = mac

- m - ķermeņa masa,

- ac - centrbēdzes paātrinājums.

Spēki.Spēki.

Fb Fc

Page 5: 3. laboratorijas darbs. Centrifugācijas metodes -     diferenciālā centrifugācija.

20.09.2011 LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

5

Relatīvais centrbēdzes pātrinājums (RCP):

arc = (2r)/980

- leņķiskais griešanās ātrums (rad/sek)

= (n)/30=>

arc = (2n2r)/(302*980)

Spēki.Spēki.

Page 6: 3. laboratorijas darbs. Centrifugācijas metodes -     diferenciālā centrifugācija.

20.09.2011 LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

6

Relatīvais centrbēdzes pātrinājums (RCP):

arc = 1,119*10-5*n2*r

n - griešanās ātrums (apgr./min.) r - griešanās rādiuss (cm)

arc- relatīvais centrbēdzes paātrinājums - - rāda, cik reizes tiek pārsniegts g

Spēki.Spēki.

Page 7: 3. laboratorijas darbs. Centrifugācijas metodes -     diferenciālā centrifugācija.

20.09.2011 LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

7

- Suspensija;

Koloīdie maisījumi.Koloīdie maisījumi.

- Emulsija;

- Aerosols.

Page 8: 3. laboratorijas darbs. Centrifugācijas metodes -     diferenciālā centrifugācija.

20.09.2011 LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

8

centrifugēšana

Centrifugācija.Centrifugācija.

supernatants

nogulsnes

Page 9: 3. laboratorijas darbs. Centrifugācijas metodes -     diferenciālā centrifugācija.

20.09.2011 LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

9

centrifugēšana

Diferenciālā centrifugācija.Diferenciālā centrifugācija.

supernatants nogulsnes

supernatantu atdala no nogulsnēm

Page 10: 3. laboratorijas darbs. Centrifugācijas metodes -     diferenciālā centrifugācija.

20.09.2011 LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

10

Traucējoši faktori:

Diferenciālā centrifugācija.Diferenciālā centrifugācija.

Rmin

Fc

Rmax

Page 11: 3. laboratorijas darbs. Centrifugācijas metodes -     diferenciālā centrifugācija.

20.09.2011 LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

11

Diferenciālā centrifugācija.Diferenciālā centrifugācija.

Traucējoši faktori:

Page 12: 3. laboratorijas darbs. Centrifugācijas metodes -     diferenciālā centrifugācija.

20.09.2011 LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

12

Diferenciālā centrifugācija.Diferenciālā centrifugācija.

Traucējošos efektus var mazināt:

a) veicot supernatanta atkārtotu centrifugēšanu tādos pašos apstākļos kā iepriekš;

b) veicot nogulšņu "mazgāšanu".

Page 13: 3. laboratorijas darbs. Centrifugācijas metodes -     diferenciālā centrifugācija.

20.09.2011 LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

13

““Vortex” maisītājiVortex” maisītāji

Page 14: 3. laboratorijas darbs. Centrifugācijas metodes -     diferenciālā centrifugācija.

20.09.2011 LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

14

CentrifugasCentrifugas

Page 15: 3. laboratorijas darbs. Centrifugācijas metodes -     diferenciālā centrifugācija.

20.09.2011 LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

15

CentrifugasCentrifugas

Vāks

Page 16: 3. laboratorijas darbs. Centrifugācijas metodes -     diferenciālā centrifugācija.

20.09.2011 LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

16

CentrifugasCentrifugas

Page 17: 3. laboratorijas darbs. Centrifugācijas metodes -     diferenciālā centrifugācija.

20.09.2011 LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

17

Pie darba ?Pie darba ?

Page 18: 3. laboratorijas darbs. Centrifugācijas metodes -     diferenciālā centrifugācija.

20.09.2011 LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

18

Diferenciālā centrifugācija.Diferenciālā centrifugācija.

Page 19: 3. laboratorijas darbs. Centrifugācijas metodes -     diferenciālā centrifugācija.

20.09.2011 LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

19

Supernatants Nogulsnes

Uz jaunu stobriņupārnesam ar 200 l

vai 20 l pipeti

Diferenciālā centrifugācija.Diferenciālā centrifugācija.

1 ml1N

30 sek / 800

30 sek / 800

2 min. / 2000

+ 50 l3N (2N)

4 min. / 8000+ 10 l

3S

(3N)

1S 1N + 1 ml

XX+ 200 12N

Page 20: 3. laboratorijas darbs. Centrifugācijas metodes -     diferenciālā centrifugācija.

20.09.2011 LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

20

Veiksmi darbāVeiksmi darbā