胡学军设计 2012.3.5 人体解剖生理学实验 坐骨神经 - 腓肠肌标本制备...

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胡学军设计 2012.3.5

人体解剖生理学实验坐骨神经 - 腓肠肌标本制备

观察电刺激神经的肌肉收缩反应坐骨神经标本制备

观察复合神经动作电位的记录

华南师范大学 . 生命科学学院

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引言:• 什么是坐骨神经—腓肠肌标本?• 什么是 Powerlab 实验系统?• 蛙类动物单毁髓与双毁髓• 什么是生理学实验技术?• 什么是生理学实验仪器?• 什么是电刺激?• 今次实验目的要求?

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实验材料• 蛙 (frog) 或蟾酴 (toad)

• 常用手术器械(手术剪、手术镊、手术刀、金冠剪、眼科剪、眼科镊、毁髓针、玻璃分针)、蜡盘、蛙板,玻璃板、固定针、锌铜弓、培养皿或不锈钢盘、污物缸、滴管、纱布、粗棉线、任氏液

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实验标本制备方法• 洗干净实验动物• 双毁髓 -> 剥制后肢 - 分离两后肢• 分离坐骨神经• 游离腓肠肌• 分离股骨头• 标本检验• 电刺激极性法则的验证

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标本的实验观察1. 观察完整的坐骨神经 - 腓肠肌标本。2. 用锌铜弓(最简单刺激器)刺激坐骨神经,观察腓肠肌

的收缩反应。3. 将标本安装到 Powerlab 生理学实验装备系统,固定神经

标本在电极支架上,用连结线挂起肌肉接到张力换能器的感应片上,换能器接 Powerlab 的桥式放大器输入口(通道 2 ),打开电源和 Chart 软件设置刺激参数和放大器参数,然后点开始进行单收缩和强直收缩实验演示。

4. 制备坐骨神经标本,通过神经屏蔽盒接入生物电放大器(通道 3 ),打开 Scope 软件设置刺激器和生物电放大器参数,点开始进行单刺激引起的复合动作电位实验演示。

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实验注意事项• 工作台面整洁有序:准备充分• 手术器械使用规范:防损坏• 严格按照步骤方法:节省时间提高效率• 避免直接接触动物或标本:防病毒细菌• 保持标本的生理活性:防损伤、滴任氏液

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作业:实验报告 实验报告要求文字通顺,简洁明了,书写工整。报告的项目及

要求如下: 1 .实验题目 2 .实验日期、室温、作者及合作者 3 .实验对象或材料 4 .实验方法 ( 简要说明 ) 5 .实验结果 ( 是报告的主要部分 ) 6 .讨论 (根据已知的理论知识对该实验结果进行解释和分析 )

7 .结论 (对实验结果中所能验证的概念、原则或理论,作出简明的概括和总结。必须注意在结论中不应罗列和重复具体的实验结果,更不能将实验中未能得到充分证实的理论和判断写入结论 ) 。

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用 Powerlab 记录肌肉收缩实验的步骤1. 制备标本2. 安装实验连接装置, 接通 USB 线,开机3. 打开 Powerlab 电源,然后打开 Chart54. 设置通道 2 (桥式放大器)或通道 1 (通

用): 量程 5mV,低通 10Hz,调零5. 设置“刺激器”,打开刺激器面板设置:脉冲,单个脉冲 1 ,手动,标记通道 1 ,频率 1Hz,量程 10V ,输出初始 10mV ,持续时间 1ms

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6. 点【开始】 调节“走纸速度” ,采样速度(右上角)

7. 开始单收缩及收缩总和实验8. 保存数据9.回放,选中计算,按 CTRL多选通道10. 点放大按钮 -编辑 - 复制 ZOOM窗口11.”M” 点计算,拉出计算窗口注意事项:1. 开机关机顺序2. 连接线: 红 + 黑 – 绿 : 地 3.插入注释4.对应通道调节

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拓展 1 :生理实验常用仪器介绍 • 生理学实验仪器的历史发展:模拟信号与数字化• 生理学实验仪器的恒久原理:刺激器 采集器 放大器 转换

器 记录器 本实验室的 Powerlab 生理学实验仪器: PowerLab 生理实验系统:整合刺激器 +4 通道接入,通过

USB 接口连接电脑,用 Chart5 和 Scope 软件控制刺激输出和输入放大进行实验记录分析。记录肌肉收缩和血压可用张力换能器 + 通道 2 ,记录神经动作电位等可用神经屏蔽盒 + 通道 3 。可改变采样速度和各种参数调节数据记录,便于分析实验结果,可通过放大截取复制粘贴以图片方式保存数据到 Word 文档作为实验结果,原始记录数据可保存,便于以后回放分析。

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拓展 2 :生理盐水的配制

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拓展 3 :探究实验设计和实验方法研究参考《生理学实验》第 3版 P27~35( 1 )实验设计:设计目的:科学思维、创新、钻研、科学态度设计要求:创新性、有文献、科学性与可行性设计原则:科学公正、条件一致、对照重复、量效关系、测试定标、统计处理、综合论证

( 2 )实验的组织和实施( 3 )生理学实验方法的研究( 4 )实验报告的撰写

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拓展 4 :动物生理学实验技术

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坐骨神经 - 腓肠肌收缩实验装置