Post on 22-Jan-2016
description
20.09.2011 LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML
1
3. laboratorijas darbs.
Centrifugācijas metodesCentrifugācijas metodes --
diferenciālā centrifugācija.diferenciālā centrifugācija.Māris Lazdiņš lazda@latnet.lv
LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra
Studiju kurss Bioloģija
Bloks Šūnas bioloģija, bioķīmija, ģenētika
20.09.2011 LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML
2
F = ma Fg = mg
Fg - gravitācijas spēks (N)m - ķermeņa masa (kg)g - brīvās krišanas paātrinājums, kura vērtība tuvu Zemes virsmai ir - 9,8 m/s2.
Spēki.Spēki.
20.09.2011 LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML
3
Pretēji darbojas berzes spēks
Fb
Tas atkarīgs no:- ķermeņa virsmas īpatnībām, - kustības vides blīvuma,- kustības vides viskozitātes.
Ja Fg >> Fb kustība būtiski netiek ietekmēta.
Spēki.Spēki.
Fg
Fb
20.09.2011 LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML
4
Centrbēdzes (centrtieces) spēks
Fc = mac
- m - ķermeņa masa,
- ac - centrbēdzes paātrinājums.
Spēki.Spēki.
Fb Fc
20.09.2011 LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML
5
Relatīvais centrbēdzes pātrinājums (RCP):
arc = (2r)/980
- leņķiskais griešanās ātrums (rad/sek)
= (n)/30=>
arc = (2n2r)/(302*980)
Spēki.Spēki.
20.09.2011 LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML
6
Relatīvais centrbēdzes pātrinājums (RCP):
arc = 1,119*10-5*n2*r
n - griešanās ātrums (apgr./min.) r - griešanās rādiuss (cm)
arc- relatīvais centrbēdzes paātrinājums - - rāda, cik reizes tiek pārsniegts g
Spēki.Spēki.
20.09.2011 LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML
7
- Suspensija;
Koloīdie maisījumi.Koloīdie maisījumi.
- Emulsija;
- Aerosols.
20.09.2011 LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML
8
centrifugēšana
Centrifugācija.Centrifugācija.
supernatants
nogulsnes
20.09.2011 LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML
9
centrifugēšana
Diferenciālā centrifugācija.Diferenciālā centrifugācija.
supernatants nogulsnes
supernatantu atdala no nogulsnēm
20.09.2011 LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML
10
Traucējoši faktori:
Diferenciālā centrifugācija.Diferenciālā centrifugācija.
Rmin
Fc
Rmax
20.09.2011 LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML
11
Diferenciālā centrifugācija.Diferenciālā centrifugācija.
Traucējoši faktori:
20.09.2011 LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML
12
Diferenciālā centrifugācija.Diferenciālā centrifugācija.
Traucējošos efektus var mazināt:
a) veicot supernatanta atkārtotu centrifugēšanu tādos pašos apstākļos kā iepriekš;
b) veicot nogulšņu "mazgāšanu".
20.09.2011 LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML
13
““Vortex” maisītājiVortex” maisītāji
20.09.2011 LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML
14
CentrifugasCentrifugas
20.09.2011 LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML
15
CentrifugasCentrifugas
Vāks
20.09.2011 LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML
16
CentrifugasCentrifugas
20.09.2011 LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML
17
Pie darba ?Pie darba ?
20.09.2011 LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML
18
Diferenciālā centrifugācija.Diferenciālā centrifugācija.
20.09.2011 LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML
19
Supernatants Nogulsnes
Uz jaunu stobriņupārnesam ar 200 l
vai 20 l pipeti
Diferenciālā centrifugācija.Diferenciālā centrifugācija.
1 ml1N
30 sek / 800
30 sek / 800
2 min. / 2000
+ 50 l3N (2N)
4 min. / 8000+ 10 l
3S
(3N)
1S 1N + 1 ml
XX+ 200 12N
20.09.2011 LU Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML
20
Veiksmi darbāVeiksmi darbā