MIOPATIAS MITOCONDRIAIS
Carolina Fischinger Moura de Souza
A MITOCNDRIAGlicose Responsvel pela energia celular Possui seu prprio DNAmtDNA Local de vrias rotas metablicas
A MITOCONDRIAGlicose Responsvel pela energia celular Possui seu prprio DNAmtDNA Local de vrias rotas metablicas Espao intermembranas Matriz: diversas protenas e ciclo de Krebs e o mtDNAMembrana interna: CRM Membrana externa crista
Subunidades codif.pelo mtDNASubunidades codif.pelo nDNA 7 0 1 3 2 = 13 39 4 10 10 12 = 75CADEIA RESPIRATRIA MITOCONDRIAL complexo I complexo II complexo III complexo IV complexo VSuccinato fumarato
gorduracarboidratoprotenasDigesto e absorocidos graxos + glicerol
glicose
amino cidosMITOCNDRIAAcetil CoACiclo de Krebs2HBeta -oxidaoADPATPO2H2OCRM
OXOPHOS: requer uma ao orquestrada de 5 complexos enzimticos com transferncia de eltrons pelos carreadores NADH e FADH2 para a molcula de oxignio
gradiente eletroqumico que converte ADP em ATP
Produo aerbia de energia:
AS DOENAS MITOCONDRIAISPatologias de expresso clnica heterognea caracterizadas por uma disfuno na produo de energia CERBROMSCULOCORAOMULTISSISTMICAS
MIOPATIAINSUF. MEDULA SSEAINSUF. HEPATICATUBULOPATIA RENALCARDIOMIOPATIA HIPERTRFICA OU DILATADA
DEFEITO DE CONDUO CARDACOALTERAES NA FIBRA MUSCULARFRAQUEZA FADIGAINTOLERNCIA AO EXERCCIONEUROPATIA PERIFRICA ALT. TIREIDEDIABETE MELITUSBAIXA ESTATURAENCEFALOPATIACONVULSESRETINITE PIGMENTARDEMNCIADEPRESSOATAXIAENXAQUECAAVCSURDEZ NEUROSSENSORIAL
HERANA MITOCONDRIAL
A herana materna:Cada clula humana contm 100 mitocndrias e cada uma contm 2 a 10 cpias de mtDNA
CLULA PROGENITORA
N
Proliferao mtDNA e
Citocinese
Segregao Randomizada
90%
70%
50%
30%
10%
Limiar para a
expresso fenotpica
FENTIPO FENTIPO
nN
37 genes:
2 RNAs ribossmicos
22 RNAstransportadores
13 RNAs mensageiros = 13 genes que codificam para as protenas da CRMmtDNA
DOENAS MITOCONDRIAISDevido ao nmero varivel de mitocndrias e de mtDNA nos diferentes tecidos co-existncia de mtDNA normal e mutado Heteroplasmia.
Mesma mutao diferentes manifestaes clnicas.
Diferentes mutaes manifestao clnica igual.
Crianas X adultos.
Elevada freqncia: 1/5.000- 10.000 nascidos vivos(McFarland R. et al, 2002).
Causadas por mutaes que envolvem o genoma mitocondrial e nuclear.
delees e duplicaes de larga escalaespordicoCLASSIFICAOMutaes do mtDNAMutaes do DNA nuclear
CPEO - Oftalmoplegia Externa Crnica Progressiva
KSS - Sndrome de Kearns Sayre alteraes cardacas, protenorraquia elevada, oftalmoplegia
PS Sndrome de Pearson alteraes na medula ssea pancitopenia, anemia sideroblstica
DOENA MULTISSISTMICAPADRO MIOPTICO
CPEO 17 ANOSKSS 35 ANOSKSS30 ANOSKSS 35 ANOSCPEO 30 ANOS
10 ANOS8 ANOS13 ANOS13 ANOS
CLASSIFICAOMutaes do mtDNAmutaes de ponto e microdeleoHerana materna> 200 tipos diferentes
tRNA:MELAS- Miopatia, Encefalopatia, Acidose Ltica e Episdios de Acidente Vascular Cerebral (Mutao A3243G)
MERRF- Epilepsia Mioclnica com Fibras Rotas Vermelhas (RRF) (Mutao A8344G)NARP- Neuropatia, Ataxia e Retinopatia Pigmentar (mutao T8993G)
Sndrome de LEIGH (DE TRANSMISSO MATERNA)- Encefalomiopatia Subaguda Necrotizante mRNA: gene ATPaseDOENA MULTISSISTMICAENCEFALOPATIA PROGRESSIVA
MELAS PACIENTE 18 ANOSMELAS PACIENTE 7 ANOSLEIGH PACIENTE 1 ANORRF
CLASSIFICAOMutaes do mtDNAMutaes do DNA nucleardefeitos bioqumicos na CRMHerana mendeliana
CLASSIFICAOMutaes do mtDNAMutaes do DNA nuclearDefeitos de sinalizao intergenmicadelees e duplicaes de larga escala
DIAGNSTICO DAS MIOPATIAS MITOCONDRIAISManifestaes Clnicas Msculo: CPEO, fraqueza, fadigaSNC: ataxia, surdez, atrofia pticaHF sugestivaInvestigao ClnicaSindrome mitocondrial?(MELAS, MERRF,NARP,LHON)SIMTestar mutaes comuns no sangueNegativoNOBIOQUMICAHISTOQUMICAMOLECULAR
ASPECTOS HISTOQUMICOSCorte transversal de tecido muscular: Paciente com S. de Kearns Sayre apresentando hiperatividade (RRF) em SDH e ausncia de atividade em Citocromo C Oxidase RRF na colorao de Tricromio de Gomori.RRF representada na reao SDH.Hipoatividade da citocromo C oxidase
ASPECTOS BIOQUMICOS Medida da atividade das enzimas da CRM por fluorimetria Idealmente com homogeneizado de tecido muscular fresco - Medida dos Complexos I, II, III, IV, V Trabalhoso Custo elevado Difcil padronizao Difcil interpretao Defeitos isolados ou mistos
ASPECTOS MOLECULARES Mutaes de ponto: A3243G, 3271-T, A8344G, T8356C e T8993G PCR e digesto por endonuclease de restrio. Deleo: Extrao de DNA (msculo) digesto com a PvuII separao dos fragmentos por eletroforese em gel de agarose 0,8% transferncia para membrana de nylon Hybond+ hibridizao com sonda previamente marcada com o kit ECLTM Direct nucleic acid labelling and detection system auto-radiografia da membrana. Seqenciamento:mtodo da terminao por fluorescncia em seqenciador automtico (ABI PrisMTM 310 - Applied Biosystems).
16.569 kb11.592 kbAuto-radiografia da deteco de delees no mtDNA
Arpa, J. et al. Prevalence and Progression of Mitochondrial Diseases: a study of 50 patientsMuscle Nerv 28: 690-695, 2003PROGNSTICO
TRATAMENTOAcompanhamento multidisciplinar: neuro, oftalmo, endcrino, cardio, nefro, gastro, fisioterapeuta, outros.Exerccio fsico regular individualizado e respeitando limitesEvitar stress fsico e mental, frio, calor, uso de alcool, nicotina, medicaes como corticides, c. Valprico, barbitricos, tetraciclina, cloranfenicol, etc.Dieta: regular, evitar jejum prolongado, reduo de gorduras e rica em CH.
TRATAMENTOVitaminas e outras medicaes: sem comprovao cientfica, tto emprico, mnimo benefcio:Aceptores de eltrons como a menadiona (vitamina K3) e filoquinona (vitamina K1), e cido ascrbico (vitamina C) tem sido usados no sentido de melhorar o transporte de eltrons na cadeia respiratria,Riboflavina (vitamina B2), na dose de 50-100 mg/dia age como cofator dos complexos I e II. Coenzima Q10 (5-15 mg/kg/dia)Creatina 100-200 mg/kg/diaDicloroacetato reduo dos nveis de lactato
UM ESTUDO CLNICO, BIOQUMICO, HISTOQUMICO E GENTICO-MOLECULAR DE PACIENTES COM DOENAS DO DNA MITOCONDRIAL
VARIVEL PROBABILIDADE Alta Combinao de sintomas multisistmicos patognomnicos de doena mitocondrial, incluindo, no mnimo, 3 sistemas (neurologico, muscular, cardaco, endcrino, gastrointestinal, renal, hematolgico, otolgico, oftalmolgico ou heptico); Apresentao de sndrome clssica como MELAS, MERRF, Kearns Sayre, Leigh com herana materna;Baixa Crianas com encefalopatia no especfica apresentando crises convulsivas, acidose ltica e/ou hipotonia; Pacientes com evoluo atpica de doena envolvendo SNC sem achados clnicos caractersticos e em que j foram excludas outras patologias; Sintomas isolados: AVC em pacientes jovens, cardiomiopatia, manifestaes endocrinolgica ou neurolgicas;
RESULTADOS anlise de mutaesMutao no mtDNA: 17 (39,5%)
RESULTADOS comparao dos positivos com negativos* Mdia do Rank
RESULTADOS comparao dos positivos com negativos* Mdia do Rank
Top Related