儿童 EBV 感染及其 相关疾病的实验室诊断
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四川大学华西第二医院
儿童 EBV感染及其相关疾病的实验室诊断
四川大学华西第二医院检验科
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EBV简介: EBV 是人疱疹病毒 4 型,在淋巴细胞中潜伏。 EBV 在正常人群中感染非常普遍,约 90% 以上的成人血清
EBV 抗体阳性 EBV 主要通过唾液传播,也可经输血传染 EBV 原发感染后,大多数无临床症状, 4-6 岁以下儿童大多表
现为隐性或轻型发病,多发生传染性单核细胞增多症。 一旦感染, EBV 在人体 B 细胞建立潜伏感染,受感染者将成
为终生带毒者 在机体免疫功能下降和某些因素触发下,潜伏的 EBV 可以被再
激活,引起病毒复制及临床疾病
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EBV相关疾病 传染性单核细胞增多症( Infectious mononucleosis,IM)
慢性活动性 EB 病毒感染( Chronic active EBVinfection , CAEBV )
EB 病毒相关性嗜血细胞综合征( EBV-associated hemophagocytic syndrome, EBVAHS)
Burkitts 淋巴瘤
何奇金淋巴瘤
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临床需要回答的问题
是否感染 EBV?
EBV 感染的时相? 是否 EBV 活动性感染? 疾病是否与 EBV 感染相关?
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EBV感染的实验室诊断方法简介 EBV 特异性抗体检测
原发性 EBV 感染过程中首先产生针对衣壳抗原( capsid antigen,CA) 的 IgM 和 IgG
在急性感染的晚期,抗早期抗原( early antigen,EA) 抗体出现
在恢复期晚期,抗核抗原( nuclear antigen,NA) 抗体产生
抗 CA-IgG 和抗 NA-IgG 可持续终生
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传统检测策略的问题5%新近 EBV感染不出现 CA-IgM抗体 在罕见的病例中抗 CA-IgM
会持续存在
约 20-30% 的新近感染不出现EA-IgG 抗体
抗EBNA-IgG 抗体可能呈现阴性,由于:- 慢性活动性 EBV 感染- 细胞免疫被抑制
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EBV抗体检测结果分析 1
NA-IgG (+)
CA-IgG(+) 和 EA-IgG(+) 和 / 或 CA-IgM(+) 或 CA-IgA强阳性
复发
只是高亲合力的CA-IgG
既往感染
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EBV抗体结果分析 2 NA-IgG(-)
CA-IgG(+)
NA-IgG 阴性
CA-IgG 和 IgM ( -)
未感染 EBV
CA-IgM(-) 和高亲和力的CA-IgG
CA-IgM(+) 和低亲和力 CA-IgG,EA-IgG可能阳性
原发感染
EA-IgG(+)
NA-1 抗体丢失的复发
EA-IgG(-)
NA-1 抗体丢失的既往感染
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EBV病毒核酸检测
实时荧光定量 PCR 是目前最主要的监测EBV 载量的方法
鉴别 EBV 健康携带者的低水平复制与 EBV
相关疾病患者高水平活动性感染。
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不同 EBV相关疾病中 EBV病毒载检测的标本选择疾病 感染细胞 检测病毒载量的标本类型
血浆或血清 单个核细胞 全血
传单 B 细胞 合适 不推荐 不推荐
移植后淋巴组织增生性疾病
B 细胞 有争议 合适 更好
何杰金淋巴瘤 何杰金细胞(B细胞来源)
合适 不推荐 ND
慢性活动性 EBV感染 T 细胞或NK细胞
预后 诊断 ND
鼻咽癌 鳞状上皮细胞 合适 不推荐 ND
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传单的 EBV感染实验室诊断 血清学检测:
同时满足下列 2 条者可以诊断为 EBV-IM: 1. 下列临床症状中的 3 项:发热、咽峡炎、颈淋巴结肿大、肝
肿大、脾肿大; 2. 原发性 EBV 感染的血清学证据,满足下列 2 条中任一项: ( 1 )抗 EBV-CA-IgM 和抗 EBV-CA-IgG 抗体阳性,且抗
EBV-NA-IgG 阴性 ( 2 )抗 EBV-CA-IgM 阴性,但抗 EBV-CA-IgG 阳性,且为低
亲和力抗体
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传单的 EBV感染实验室诊断
DNA 检测 :
IM 患者外周血中 EB 病毒载体在 2 周内达到峰值,随后很快下降。
至病程 14 天,多数 EBV-IM 患者血清中已检测不到病毒核酸,病程 22 天后,所有 EBV-IM 患者血清中均检测不到病毒核酸。
IM 患者不推荐进行 EB 病毒载量检测
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慢性活动性 EBV感染的实验室诊断 EBV 抗体检测抗体反应类型 EBV抗体 比例(%)
CA-IgG Ca-IgM EA-IgG NA-IgG
1 + - + + 54.9
2 + - + - 25.5
3 + + + + 5.9
4 + + + - 5.9
5 + - - + 3.9
6 + - - - 3.9
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慢性活动性 EBV感染的实验室诊断 DNA 检测 :
绝大多数 CAEBV 患者 PBMC 中 EBV-DNA 水平高于 102.5 拷贝 /ug DNA
部分 CAEBV 患者血浆 / 血清中 EBV-DNA 阴性 CAEBV 患者血浆 / 血清中 EBV-DNA 水平与病情严重程度和预
后有关
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EB病毒相关噬血淋巴组织细胞增生症 EBV-HLH 可以发生在原发性 EBV 感染时期,既往 EBV 感染再激
活时期 EBV-HLH 患者血清中 EBV 抗体反应呈多种反应类型,单纯血清
EBV 抗体检测对 EBV-HLH 的诊断意义不大。感染类型 EBV抗体 比例(%)
CA-IgG Ca-IgM EA-IgG NA-IgG
再次激活 + - + + 30.8
+ - - + 21.8
+ + + + 17.9
原发感染 + + - - 16.7
+ + + - 12.8
总阳性率(%) 100 47.4 48.7 70.5
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EB病毒相关噬血淋巴组织细胞增生症 DNA 检测 :
EBV-HLH 患者外周血单个核细胞和血浆 / 血清均含有很高的EBV-DNA 载量,结合血清学抗体检测,有助于 EBV-HLH 的诊断。
监测 EBV-HLH 患者血清中 EBV-DNA 载量有助于评估治疗效果。
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小结
人群 EBV 感染普遍, EBV 与许多疾病相关 EBV 血清学抗体检测有助于判断是否 EBV 感
染,以及感染的大致时相 EBV-DNA 定量检测有助于判断是否存在活动
性感染