CIRKOVIRUSOS MEGBEDEGEDÉSEK SZERBIA …mavsz.com/konferencia/20140328/PPP-PCV2-MAVSZ-Ujvidek...

Post on 09-Feb-2020

1 views 0 download

Transcript of CIRKOVIRUSOS MEGBEDEGEDÉSEK SZERBIA …mavsz.com/konferencia/20140328/PPP-PCV2-MAVSZ-Ujvidek...

CIRKOVIRUSOS MEGBEDEGEDCIRKOVIRUSOS MEGBEDEGEDÉÉSEK SEK SZERBIA SERTSZERBIA SERTÉÉSSÁÁLLOMLLOMÁÁNYNYÁÁBANBAN

ÚÚjvidjvidéék 2k 20014. m14. máárcius 28rcius 28..--29.29.

BelgrBelgráádi di ÁÁllatorvostudomllatorvostudomáányi nyi Egyetem Egyetem --

SzerbiaSzerbia

Magyar Magyar ÁÁllatorvosok llatorvosok VilViláágszervezetegszervezete

..............................SRB SERTSRB SERTÉÉSTENYSTENYÉÉSZTSZTÉÉSESE..............................

1995 1995 ––

4.24.200.000 00.000

2011 2011 ––

3.280.0003.280.000

SVINJARSTVO - SRBIJA

0

500,000

1,000,000

1,500,000

2,000,000

2,500,000

3,000,000

3,500,000

4,000,000

4,500,000

SRBIJA 4,192,000 3,177,100 3,211,600 3,831,890 3,594,000 3,631,000

1995 2005 2006 2007 2008 2009

22%22%

1,4 1,4 Eu/kgEu/kg

Svinjarstvo - EVROPA

170,000,000

175,000,000

180,000,000

185,000,000

190,000,000

195,000,000

200,000,000

205,000,000

210,000,000

215,000,000

220,000,000

EVROPA 214,805,104 190,771,621 193,490,187 197,427,783 190,958,318 187,748,664

1995 2005 2006 2007 2008 2009

..........................EUREURÓÓPAPA SERTSERTÉÉSTENYSTENYÉÉSZTSZTÉÉSESE........................

1995 1995 ––

215.000.000 215.000.000

20200909

––

187187..75750.0000.00013%13%

SVINJARSTVO - SVET

870,000,000

880,000,000

890,000,000

900,000,000

910,000,000

920,000,000

930,000,000

940,000,000

950,000,000

SVET 899,253,461 907,783,318 926,637,620 919,629,726 936,355,887 941,776,122

1995 2005 2006 2007 2008 2009

........................A VILA VILÁÁG G SERTSERTÉÉSTENYSTENYÉÉSZTSZTÉÉSESE........................

1995 1995 ––

899899.000.000 .000.000

20200909

––

942942..75750.0000.00055%%

VVáálasztott malacok cirkovlasztott malacok cirkovíírus okozta sorvadrus okozta sorvadáása sa --

PMWSPMWS

FogFogéékony kony áállomllomáányban a vnyban a váálasztott malacok lasztott malacok betegszbetegszeneenek k

megmeg,,

nemnem

specifikusspecifikus

klinikaiklinikai

ttüünetekben.netekben.

-- progresszprogresszíív sv súúlyvesztlyvesztéés s ““sorvadsorvadááss””, ,

-- lléégzgzőőszervi tszervi tüünetek, netek,

-- hasmenhasmenéések, sek,

-- ananéémimiáás s áállapot, llapot,

-- esetenkesetenkéént snt sáárgasrgasáágg,,

-- **jelentjelentőős ms méértrtéékben megnagyobbodott nyirokcsomkben megnagyobbodott nyirokcsomóókk

**

.................................. IRODALMI IRODALMI ÁÁTTEKINTTTEKINTÉÉSS..............................

(Segales (Segales éés mtsai., 2003; Pensaert s mtsai., 2003; Pensaert éés mtsai., s mtsai., 2004; Rose 2004; Rose éés mtsai., 2011)s mtsai., 2011)

A PMWS legyakrabban 7A PMWS legyakrabban 7--15 hetes korban alakul ki15 hetes korban alakul ki

A vA váálasztott malacok a legfoglasztott malacok a legfogéékonyabbakkonyabbak

MorbiditMorbiditáás 3s 3--50%50%

MortalitMortalitáás aks akáár 80%r 80%

TransmisTransmissziszióó: : --

horizonthorizontáális lis

--

vvertikalisertikalis

(Segales (Segales éés mtsai., 2003; Pensaert s mtsai., 2003; Pensaert éés mtsai., 2004; Rose s mtsai., 2004; Rose éés mtsai., 2011)s mtsai., 2011)

PCV2PCV2--vel kapcsolatban level kapcsolatban leíírt krt kóórkrkéépek, PCVADpek, PCVAD

-- vváálasztott malacok cirkovirus okozta sorvadlasztott malacok cirkovirus okozta sorvadáása (PMWS)sa (PMWS)--

dermatitisz nefropdermatitisz nefropáátia tia sszindrzindróómama

(PDNS), (PDNS), egy

III. típusú

hiperszenzitivitási

reakció,

-- sertsertéések lsek léégzgzőőszervi tszervi tüünetegynetegyüüttesettese

(PRDC), (PRDC), -- magzati miokarditisz magzati miokarditisz éés reprodukts reproduktíív rendellenessv rendellenesséégekgek

(SAMS),(SAMS),-- granulgranulóómmáás enters enteríítisz, tisz, -- nekrotikus limfadennekrotikus limfadeníítisz, tisz, -- ekszudative epidermekszudative epidermíítisz tisz ééss-- congenitcongenitáális tremor.lis tremor.

(West (West éés mtsai.,1999; Ladekjaer s mtsai.,1999; Ladekjaer éés mtsai., 2001; Kim s mtsai., 2001; Kim éés mtsai., 2004;s mtsai., 2004; Chae C., 2005; Cheng Chae C., 2005; Cheng éés mtsai. 2010)s mtsai. 2010)

(Tischer (Tischer éés mtsai., 1982; Studdert, 1993; Harding, 1997;s mtsai., 1982; Studdert, 1993; Harding, 1997; Mankertz Mankertz éés mtsai., 1997; Jiang s mtsai., 1997; Jiang éés mtsai., 2010)s mtsai., 2010)

Legkisebb Legkisebb áállati eredetllati eredetüü

DNS vDNS víírusrus

((virion virion 17nm17nm))

CsalCsaláádd::

CircoviridaeCircoviridaeGenusGenus::

CircovirusCircovirus

PoxvirusPoxvirus

300 nm300 nm

PCV2PCV2

PCV1 PCV1 --

apatogapatogéénn(Tischer (Tischer éés mtsai., 1986; Allan s mtsai., 1986; Allan éés mtsai., 1995) s mtsai., 1995)

PCV2PCV2

––

virulens patogvirulens patogéénn(Meehan (Meehan éés mtsai., 1996;s mtsai., 1996; Krakowka Krakowka éés mtsai., 2000)s mtsai., 2000)

KKéét tipust tipus::

egyes tegyes tíípuspusúú

sertsertéés cirkovs cirkovíírusrus

((PCV1PCV1))

kettes tkettes tíípuspusúú

sertsertéés cirkovs cirkovíírusrus

((PCV2PCV2))

(h(háármas trmas tíípuspusúú

(PCV1/2a) (PCV1/2a) (Gagnon (Gagnon éés mtsai., 2010)s mtsai., 2010)

KKéét genott genotíípus: pus: PCV2a PCV2bPCV2a PCV2b

(PCV2c)(PCV2c)

(Gagnon (Gagnon éés mtsai., 2008, 2010)s mtsai., 2008, 2010)

mutmutááns ns PCV2a/PCV2bPCV2a/PCV2b

(Guo (Guo éés mtsai., 2011)s mtsai., 2011)

(Clark, 1996)(Clark, 1996)

vaddisznvaddisznóó

hháázisertzisertééss

ORF2 gORF2 géén (Cap gn (Cap géén) PCV2 n) PCV2

kapskapszzidn idn fehfehéérjerje

((Cap Cap antigantigéénn))

27.8 kDa27.8 kDa

struktstruktúút proteint proteinimimmmunogunogéén n

(Nawagitgul (Nawagitgul éés mtsais mtsai., 2000; Cheung K., 2003; Liu ., 2000; Cheung K., 2003; Liu éés mtsais mtsai., 2006)., 2006)

PCV2 PCV2 ggenenóóm m ::

17671767--1768 nukleo1768 nukleottidaida

FFőő

szekvenciszekvenciáákk

(ORF1, ORF2, OFR3)(ORF1, ORF2, OFR3)

KapKapszid fehszid fehéérjerje

2727.8.8kDakDa

233233--234 a.s. immunoreakt234 a.s. immunoreaktíív domv doméénn

(Chae C., 2004, Csank és mtsai., 2011)

A PMWS elsA PMWS elsőő

leleíírráása egyes orszsa egyes orszáágokbangokban

19961996

19981998

20012001

20012001

19919966

20022002

20020033

20022002

19991999

20042004

2004200419981998

1998199819991999

20012001

1991996622000000

2002007720201111

20020000

(Grierson és mtsai., 2004; Staebler és mtsai., 2005)

RetrospektRetrospektíív szerolv szerolóógiai eredmgiai eredméényeknyek

19961996

19981998

20012001

20012001

19961996

20022002

1999199920022002

20022002

19991999

20042004

2004200419981998

20012001

19981998

19919933

1996199619861986

19891989

(Jacobsen és mtsai., 2009)

19961996

19981998

20012001

20012001

19961996

20022002

1999199920022002

20022002

20042004

2004200419981998

20012001

19981998

19919933

1986198619891989

1962196219691969

19731973

1985198519991999

19961996

RetrospektRetrospektíív kv kóórszrszöövettani eredmvettani eredméényeknyek

A PMWS diagnA PMWS diagnóózisa a sertzisa a sertéésekben akkor megalapozott, sekben akkor megalapozott, ha a kha a köövetkezvetkezőő

kritkritéériumokriumok

mindegyike teljesmindegyike teljesüüll::

-- a betegsa betegséégre jellemzgre jellemzőő

klinikai tklinikai tüünetek netek éés ks kóórbonctani rbonctani elvelvááltozltozáások kialakultak,sok kialakultak,

-- kkóórszrszöövettanilag a nyirokszvettanilag a nyirokszöövetekben a karakterisztikus vetekben a karakterisztikus elvelvááltozltozáások szintsok szintéén kialakultak,n kialakultak,

-- a PCV2 (antiga PCV2 (antigéén vagy nukleinsav) a limfoid ln vagy nukleinsav) a limfoid léézizióókbkbóól l kimutathatkimutathatóó..

A kA kóórokozrokozóó

kimutatkimutatáása a PMWS diagnsa a PMWS diagnóózis zis megmegáállapllapííttáássáához nem elhoz nem eléégsgsééges, mivel ages, mivel aPCV2 tPCV2 tüünetmentes netmentes áállatokban is jelen lehet.llatokban is jelen lehet.

A diagnA diagnóózis felzis feláállllííttáássáához hoz kkóórszrszöövettani vizsgvettani vizsgáálat nlat néélklküüllöözhetetlenzhetetlen..

A PMWS diagnA PMWS diagnóózis felzis feláállllííttáássáához szhoz szüüksksééges mintges mintáák:k:nyirokcsomnyirokcsomóó, mandula, cs, mandula, csííppőőbbéél (Peyer plakk). l (Peyer plakk).

TTüüddőő, l, léép, vese vagy egyp, vese vagy egyééb szerv nem feltb szerv nem feltéétlentlenüül l szszüüksksééges.ges.(Segal(Segaléés, 2006).s, 2006).

..............................................CCÉÉLKITLKITŰŰZZÉÉSEKSEK................................................

A kivizsgA kivizsgáálláások elssok elsőődleges cdleges céélja a PCV2 infekcilja a PCV2 infekcióó

éés az s az

áálltala okozott PMWS elterjedlltala okozott PMWS elterjedéésséének nek éés prevalencis prevalenciáájjáának nak

felmfelméérréése a vajdasse a vajdasáági sertgi sertééstelepeken valamint 2 vaddisznstelepeken valamint 2 vaddisznóó

áállomllomáányban.nyban.

TovTováábbbbáá, a term, a terméészetes szetes úúton fertton fertőőzzőőddöött tt hháázisertzisertééseksek

éés s

vaddisznvaddisznóók immunrendszer kk immunrendszer káárosodrosodáássáának reszletes lenak reszletes leíírráása a sa a

PMWS vetPMWS vetüületletéébenben..

A kitA kitűűzzöött ctt céélok a klok a köövetkezvetkezőő

feladatok feladatok ááltal lettel ltal lettel vvéégrehajtva:grehajtva:

аа) ) a serta sertéések sek éés vaddiszns vaddisznóók k PCV2 fertPCV2 fertőőzzéésséének nek prevalenciprevalenciáájaja;;

bb))

a megbetegedett serta megbetegedett sertéések tsek tüüneteinek leneteinek leíírráása;sa;

cc))

a ka kóórszrszöövettani elvvettani elvááltozltozáások lesok leíírráása a limfatikus sa a limfatikus ((nyirokcsomnyirokcsomóók, mandulk, manduláák, lk, léép, Peyer plakk, p, Peyer plakk, illeocilleocöökkáális valvulalis valvula))

éés nem limfatikus (ts nem limfatikus (tüüddőő, m, mááj, j,

vesveséék k éés szs szíív)v);;

dd))

a ka kóórszrszöövettani lvettani léézizióók evaluk evaluáácicióója;ja;

ee))

a PCV2 Cap antiga PCV2 Cap antigéén n éés DNS kimutats DNS kimutatáása az sa az elvelvááltozott limfatikus ltozott limfatikus éés nem limfatikus szervekbs nem limfatikus szervekbőőll;;

ff) ) a ferta fertőőzzöött sejtek lett sejtek leíírráása sa éés immunopozits immunopozitíív szignv szignáál l ererőőssssééggéének meghatnek meghatáározrozáása sa ;;

gg) ) Azon sejtek feltAzon sejtek feltáárráása melyekben a vsa melyekben a víírus aktrus aktíívan van szaporodik.szaporodik.

....................................ANYAG ANYAG ÉÉS MS MÓÓDSZERDSZER..................................

hháázisertzisertééssvaddisznvaddisznóó

kkontroontroll

csoport csoport

A hA háázi sertzi sertéések 8 teleprsek 8 teleprőől szl száármaztak, Vajdasrmaztak, Vajdasáág g kküüllöömbmböözzőő

rréészeirszeirőől, l, éés nagyfoks nagyfokúú

nnöövvéésvisszamaradsvisszamaradáás jeleit s jeleit

mutattmutattáák.k.

A vaddisznA vaddisznóók kk kéét magyarorszt magyarorszáággal hatggal hatááros vadros vadáászteleprszteleprőől l szszáármaztak.rmaztak.

RRéészletes szletes klinikai tklinikai tüünetnet

éés s korbonctani lekorbonctani leíírasras

ututáán n kköövetkezett a szvetkezett a szöövet mintvet mintáázzáás a tovs a továábbi kivizsgbbi kivizsgáálláásokhoz.sokhoz.

A PCV2 fertA PCV2 fertőőzzööttsttséég meghatg meghatáárizrizáása sa PCR mPCR móódszerreldszerrel

ttöörtrtéént nt a ta tüüddőőbbőől, nyirokcsoml, nyirokcsomóóbbóól l éés ls léépbpbőől.l.

A genA genóóm 501bp ORF2 fragmentjm 501bp ORF2 fragmentjéének kimutatnek kimutatáássáára ra specifikus oligonukleotid prajmerek voltak alkalmazvaspecifikus oligonukleotid prajmerek voltak alkalmazva::

forward PCV2forward PCV2--2A: 2A: 55′′--CACCTTCGGATATACTGTCAACACCTTCGGATATACTGTCAA--33′′i reverse PCV2i reverse PCV2--2B: 52B: 5′′--TACATGGTTACACGGATATTGTATACATGGTTACACGGATATTGTA--33′′

A A kkóórszrszöövettani, vettani,

az immunohisztokaz immunohisztokéémiai miai éés az s az in situin situ hibridizhibridizáácicióóss

kivizsgkivizsgáálláásokhoz a ksokhoz a köövetkezvetkezöö

szervmintszervmintáák k

szolgszolgáálltak alapul: lltak alapul: -- nyirokcsomnyirokcsomóók (k (szubmandibulszubmandibulááris, mediasztinris, mediasztináális, mezenterilis, mezenteriáális lis éés s

ingviningvináális szuperficilis szuperficiáálislis));;-- mandulmanduláák,k,-- lléép,p,-- payer plakk,payer plakk,-- ttüüddőő, , -- mmááj, j, -- vesveséék,k,-- szszíív.v.

SzSzöövetfikszvetfikszáállááss

10% neutr10% neutráális formalinlis formalin,,

2424--48 48 óórara

SzSzöövet proceszuvet proceszuáállááss::

autautóómatikus szmatikus szöövetprocesszorvetprocesszor

SzSzöövetbevetbeáágyazgyazááss::

parafin blokkparafin blokk

SzSzüüvetmetszvetmetszééss: 5 : 5 µµm m

SzSzöövetfestvetfestéés: hematokszilins: hematokszilin

--

eozin (HE)eozin (HE)

A limfatikus szA limfatikus szöövetkvetkáárosodrosodáás ms méértrtéékkéének meghatnek meghatáározrozáásasa

ParaméterKritérium –

limfatikus szövetVáltozatlan

(BL)Enyhe

(I)Közepes

(II)Nagyfokú

(III)

Limfocita depléció Depléció

nélkül A T és B limfociták enyhe depléciója

Közepes mértékű

T és B limfocita depléció

Nagymértékű

T és B limfocitás depléció, a follikulusok hiánya

Makrofágos infiltrácio Makrofágos infiltráció

hiánya

Makrofágok jelenléte kis számban

Közepes számú

makrofág infiltráció

Nagymértékű

makrofág infiltráció

Infektív granulóma jelenléte Granulóma hiánya Granulóma hiánya Granulóma hiánya Granulóma gyakori

jelenléte

Gigantikus sejtek jelenléte Óriássejtek hiánya Óriássejtek hiánya Óriássejtek kisszámú

jelenléte

Óriássejtek nagyszámú

jelenléte

A limfatikus szövet arhitektúrájának változása

A szövet arhitektúrája változatlan

A szövet arhitektúrája változatlan

A szövet arhitektúrája továbbra is megőrzött

A szövet arhitektúra megváltozott, hianyzik a sztróma

(Chian(Chiannnini ini éés mtsai., 2003)s mtsai., 2003)

A szA szöövetek vetek immunohisztokimmunohisztokéémiaimiai

kivizsgkivizsgáálláása sa (LSAB2)(LSAB2)

PCV2 Cap antigPCV2 Cap antigéén detekcin detekcióó, disztrib, disztribúúcicióó éés s mennyismennyiséég meghatg meghatáározrozáásasa

A szA szöövetek vetek in situin situ hibridizhibridizáácicióóss

kivizsgkivizsgáálláása sa

(ISH CP (ISH CP éés ISH RFP)s ISH RFP)

PCV2 DNS detekciPCV2 DNS detekcióó, disztrib, disztribúúcicióó, mennyis, mennyiséég g meghatmeghatáározrozáása, vsa, víírusreplikrusreplikáácicióó bizonybizonyííttáása.sa.

((Chiannini Chiannini éés mtsai., 2s mtsai., 2003)003)

A pozitA pozitíív szignv szignáál kvantifikl kvantifikáácicióójaja

IHC IHC éés ISHs ISH

( ( --

, , + , + , + + , + + , + + + )+ + + )

NNegategatíívv

kontrkontróólala

PozitPozitíív kontrv kontróólala

BakteriolBakteriolóógiagiai kivizsgi kivizsgáálláásoksok

(t(tüüddőő, v, véékonybkonybéél, ml, mááj)j)

AntibiotikumrezisztenciaAntibiotikumrezisztencia

meghatmeghatáározrozááss(amokszicilim klavulinsav, trimetoprim sulfometokszazol, linkomi(amokszicilim klavulinsav, trimetoprim sulfometokszazol, linkomicin cin

szpektinomicin, enrocin, gentamicin, nomicin, tulatromicin)szpektinomicin, enrocin, gentamicin, nomicin, tulatromicin)

………….. EREDMEREDMÉÉNYEK NYEK ÉÉS MEGBESZS MEGBESZÉÉLLÉÉSS ………………

100,00%

8,75%

81,67% 70,00%

41,66% 16,17%

86,67% 100,00%

90,00% 75,00%

76,67%

0 68,33%

31,67% 60,00%

Csapatmunka :) Csapatmunka :)

100,00% 26,67%

KvalitatKvalitatíív PCRv PCR

SzSzöövettani elvvettani elvááltozltozáásoksokéés a PCV2 immunodestrukts a PCV2 immunodestruktíív hatv hatáásasa

Ln.

med. H. S.,

HE

78,33% 13,33%

Tonsila, v.d.,

HE

Payer plakk,

v.d.

HE

Ln.mediastinalis, h.s.,

HE

A limfatikus szA limfatikus szöövetkvetkáárosodrosodáás ms méértrtéékkéének kimutatnek kimutatáása sa hháázisertzisertéés : vaddiszns : vaddisznóó

SzövetSzővetkárosodás mértéke

BL I II III

Házi- sertás

Nyirokcsomók 11,67a 10,00 53,33b 25,00c

Peyer plakk 20,00a 11,67 50,00b 18,33c

Illeocökális valvula 25,00a 18,33 48,33b 8,33

Mandula 18,33a 11,67 51,67b 18,33c

Lép 50,00a 5,00 35,00b 10,00A

Vad-disznó

Nyirokcsomók 65,00a 21,67 10,00b 3,33c

Peyer plakk 75,00a 16,67 6,67b 1,67c

Illeocökális valvula 78,33a 11,67 8,33b 1,67

Mandula 78,33a 13,33 6,67b 1,67c

Lép 90,00a 6,67 1,67b 1,67A

Legenda: a, b, c = p<0,01; A = p<0,05

78.3368.33

56.67

23.33

45.00

13.33 8.33 10.00 8.33 3.330

20

40

60

80

100

Limfničvorovi

Pajeroveploče

Ileocekalnavalvula

Tonzile Slezina

Divlje svinje

p<0,01p<0,01 p<0,01p<0,01 p<0,01p<0,01p<0,01p<0,01

p<0,01p<0,01

Diagram Diagram 11. . A limfatikus szA limfatikus szöövetvet

++ ++ éés +++s +++

ererőőssssééggűű

limfocitlimfocitáás depls depléécicióója ja (%)(%)

NyNyirok Payer Illeocirok Payer Illeocöök. Mandula Lk. Mandula Léépp

csomcsomóó plakk valvulaplakk valvula

HHáázi sert

zi sertééss

Vaddiszn

Vaddisznóó

p<0,01p<0,01

Tüdő, h.s.,100x, HE

Infekc plu opurtunim patog posled i

imunosupres PCV2

86,67%

Tüdő, h.s., HE85,00%

Tüdő, h.s., 1000x, HE

Máj, h.s.,

HE

78,33% 51,67%

Vese, v.d.,

HE

46,67% 51,67%

ImmunohisztokImmunohisztokéémiai miai éés s in situin situ hibridizhibridizáácicióós kivizsgs kivizsgáálláás s eredmeredméényeinyei

PCV2 Cap protPCV2 Cap prot

PCV2 DNSPCV2 DNS

szszöövettani metszetvettani metszet

Ln.submanib.

H.s., IHC

Ln.ingvinalis sup., h.s., IHC

Lnn, 400x, IHC

Lnn, 400x, IHC

Lnn, 600x, IHC

Ln.ingvinalis sup. h.s., IHC

73,33% 5,00%

Tonsila v.d., IHC

Lép, h.s.,

IHC

Payer plakk, v.d., IHC

Legenda: a, b, c, d, e = p<0,01; * = ingv.sup. ny.cs.; ni = kivizsgálatlan

Szövet

Ekszpresszió

intenzitásPCR

IHC

- + ++ +++ Σpozitiv

Σpozitiv

HáziSertés

Mandulák 30,00a 15,00 36,67b 18,33c 70,00d niPayer plakk 16,67a 10,00 50,00b 23,33c 83,33d ni

Illeocökálisvalvula 23,33a 13,33 46,67b 16,67c 76,67d ni

Lép 25,00a 11,67 48,33b 15,00c 75,00d 100,00e

Nyirokcsomók 15,00a 11,67 51,67b 21,67c 85,00d *100,00e

Vaddisznó

Mandulák 88,33a 10,00 1,67b 0,00c 11,67d ni

Payer plakk 86,67a 8,33 3,33b 1,67c 13,33d niIlleocökális valvula 86,67a 8,33 3,33b 1,67c 13,33d ni

Lép 91,67a 66,67 1,67b 0,00c 8,33d 26,67e

Nyirokcsomók 81,67a 13,33 3,33b 1,67c 18,33d *26,67e

Diagram Diagram 22. . A limfatikus szA limfatikus szöövetvet

++ ++ éés +++s +++

ererőőssssééggűű

PCV2 PCV2 CapCap antigantigéénn

ekspressziekspresszióójaja (%)(%)

73.33

p<0,01

73.33

p<0,01

63.33

p<0,01

55.00

p<0,01

63.33

p<0,01

5.00 5.00 5.00 1.67 1.670

20

40

60

80

100

Limfničvorovi

Pajeroveploče

Ileocekalnavalvula

Tonzile Slezina

Divlje svinjeNyNyirok Payer Illeocirok Payer Illeocöök. Mandula Lk. Mandula Léépp

csomcsomóó

plakk valvulaplakk valvula

HHáázi sertzi sertééssVaddiszn

Vaddisznóó

p<0,01p<0,01

Tüdő, h.s., IHC

Tüdő, h.s., IHC

Ln.mesent., h.s., CP ISH

75,00% 6,67%

Ln.mesent. v.d., CP ISH

Tonzila, v.d., CP ISH

Payer plakk, h.s., CP ISH

Tüdő, h.s., CP ISH

Tüdő, h.s., CP ISH

A PCV2 genA PCV2 genóóm ekszpresszim ekszpresszióója (%)ja (%)

Legenda: istim slovima a, b, c, d, e = p<0,01; * = ingv.

sup.l.čvor; ni = nije ispitano

TkivoCP ISH RFP ISH PCR

- + ++ +++ ΣPozit. - +

ΣPozit.

Domaće

svinje

Tonzile 26,67a 15,00 36,67b 21,67c 73,33d 66,67e 33,33f ni

Pajerove

pl. 15,00a 10,00 50,00b 25,00c 85,00d 60,00e 40,00f ni

Ileocek.valv. 21,67a 13,33 46,67b 18,33c 78,33d 61,67e 38,33f ni

Slezina 21,67a 13,33 48,33b 16,67c 78,33d 66,67e 33,33f 100,00g

Limfni

čv. 13,33a 16,67 51,67*b 23,33c 86,67d 53,33e 46,67f*100,00

g

Divlje

svinje

Tonzile 88,33a 10,00 1,67b 0,00c 11,67d 98,33e 1,67f ni

Pajerove

pl. 85,00a 8,33 5,00b 1,67c 15,00d 96,67e 3,33f ni

Ileocek.valv. 85,00a 8,33 5,00b 1,67c 15,00d 96,67e 3,33f ni

Slezina 91,67a 5,00 3,33b 0,00c 8,33d 98,33e 1,67f 26,67g

Limfni

čv. 80,00a 13,33 5,00b 1,67c 20,00d 93,33e 6,67f *26,67g

75.00 75.0065.00 58,33 65.00

6,67 6,67 6,67 1,67 3,33

0

20

40

60

80

100

Limfničvorovi

Pajeroveploče

Ileocekalnavalvula

Tonzile Slezina

Divlje svinje

p<0,01p<0,01

p<0,01p<0,01 p<0,01p<0,01 p<0,01p<0,01 p<0,01p<0,01 p<0,01p<0,01

Diagram Diagram 33. . A limfatikus szA limfatikus szöövetvet

++ ++ éés +++s +++

ererőőssssééggűű

CP ISHCP ISH

szignszignááljalja

(%)(%)

NyNyirok Payer Illeocirok Payer Illeocöök. Mandula Lk. Mandula Léépp

CsomCsomóó

plakk valvulaplakk valvula

HHáázi sert

zi sertééssVaddiszn

Vaddisznóó

100.00

78.33 73.33 75.00

26.67

50.00

18.75 25.00

0

20

40

60

80

100

PCR Histopatološki IHC CP ISH Divljesvinje

Domaćesvinje

Diagram 4.Diagram 4.

PMWS PMWS diagndiagnóózis a PCV2zis a PCV2--vel fertvel fertőőzzöött serttt sertééseknseknéél. l. KKüülobloböözzőő

diagnosztikai mdiagnosztikai móódszerek komparatdszerek komparatíív eredmv eredméényei. nyei.

(II (II éés III intenzits III intenzitáássúú

kkóórszrszöövettani elvvettani elvááltozltozáások, sok, ++ ++ ééss

++++++

intenzitintenzitáássúú

ICH ICH éés CP ISH szig.)s CP ISH szig.)

p<0,01p<0,01

HHáázi sert

zi sertééssVaddiszn

Vaddisznóó

kkóórszrszöövettanvettan

A cirkovirussal fertA cirkovirussal fertőőzzöött malacokbtt malacokbóól izoll izoláált baktlt baktéériumokriumok

KKóórokozrokozóó FertFertőőzzööttsttséégg%%

TTüüddőő%%

MMáájj%%

VVéékonykonybelekbelek

%%1 1 E.coliE.coli 72.572.5 11.2511.25 26.2526.25 58.7558.75

2 2 Str. Str. SSuisuis 5050..0000 28.7528.75 31.2531.25 22.5022.50

3 3 E.ColiE.Coli ββ hemolitihemolitikuskus 27.527.500 2.502.50 8.758.75 23.7523.75

4 4 StrStreptococcuseptococcus porcinporcinuisuis 18.7518.75 13.7513.75 7.507.50 1.251.25

5 5 PasteurellaPasteurella multocidamultocida 16.2516.25 16.2516.25 3.753.75 1.251.25

6 6 MoraxellaMoraxella sp.sp. 13.7513.75 13.7513.75 3.753.75 00

7 7 Pseudomonas sp.Pseudomonas sp. 3.753.75 00 2.502.50 1.251.25

8 8 StaphStaphilococcusilococcus aureusaureus 3.753.75 00 3.753.75 00

9 9 PasteurellaPasteurella ppneumotropicaneumotropica 1.251.25 1.251.25 00 00

A cirkovirussal fertA cirkovirussal fertőőzzöött malacokbtt malacokbóól izoll izoláált baktlt baktéériumokriumok

KKóórokozrokozóó FertFertőőzzööttsttséégg%%

TTüüddőő%%

MMáájj%%

VVéékonykonybelekbelek

%%10 10 Salmonella Salmonella enteritidisenteritidis 2.502.50 1.251.25 1.251.25 2.2.5500

11 11 MainhaemiaMainhaemia haemolhaemolytiyticaca 1.251.25 00 00 1.251.25

12 12 Str. Str. PPneumoniaeneumoniae 1.251.25 1.251.25 00 00

13 13 Clostridium sp.Clostridium sp. 1.251.25 00 00 1.251.25

14 14 ArcanobacterArcanobacter pyogenespyogenes((TrueperellaTrueperella))

1.251.25 1.251.25 00 00

PCV2 PCV2 + + 1 fajta bakt1 fajta baktéériumrium 15%15%

PCV2 PCV2 + + 2 fajta bakt2 fajta baktéériumrium 46.25%46.25%

PCV2 PCV2 + + 3 fajta bakt3 fajta baktéériumrium 32.50%32.50%

PCV2 PCV2 + + 4 fajta bakt4 fajta baktéériumrium 5%5%

PCV2 PCV2 + + 5 fajta bakt5 fajta baktéériumrium 1.25%1.25%

PCV2PCV2--vel fertvel fertőőzzöött malacok bakteritt malacok bakteriáális fertlis fertőőzzééseisei

Biogram Biogram --

AntibiogramAntibiogram

KKóórokozrokozóó AntibiogramAntibiogramAmoksiAmoksiklavulklavul

Sulfo+Sulfo+TrimTrim

Spect+Spect+lincolinco EnrocinEnrocin GentamiciGentamici NeomicinNeomicin

TulathroTulathromicinmicin

ÉÉ II RR ÉÉ II RR ÉÉ II RR ÉÉ II RR ÉÉ II RR ÉÉ II RR ÉÉ II RR

E.coliE.coli3838 1919 11 77 1515 3636 33 3434 2121 2525 00 3333 2222 1919 1717 11 1919 3838 5656 22 00

E.ColiE.Coliββ

haemolitichaemoliticaa 1616 33 33 55 00 1717 66 33 1313 1919 11 22 99 77 66 44 99 99 2222 00 00

PasteurellaPasteurellapneumotropicapneumotropica

11 00 00 11 00 00 11 00 00 00 11 00 11 00 00 11 00 00 11 00 00

Pasteurella Pasteurella multocidamultocida

1414 00 00 1414 00 00 1313 11 00 1414 00 00 1313 11 00 1111 33 00 1414 00 00

ManhaemiaManhaemia

haemolitycahaemolityca11 00 00 11 00 00 11 00 00 11 00 00 11 00 00 00 11 00 11 00 00

Streptococcus Streptococcus suissuis

4040 00 00 3232 11 77 11 1212 2727 3131 00 99 2929 11 1010 3434 22 44 2929 00 1111

Biogram Biogram --

AntibiogramAntibiogramKKóórokozrokozóó AntibiogramAntibiogram

AmoksiAmoksiklavulklavul

Sulfo+Sulfo+TrimTrim

Spect+Spect+lincolinco EnrocinEnrocin GentamicnGentamicn NeomicinNeomicin TulathroTulathro

micinmicin

ÉÉ II RR ÉÉ II RR ÉÉ II RR ÉÉ II RR ÉÉ II RR ÉÉ II RR ÉÉ II RR

Streptococcus Streptococcus porcinusporcinus

1515 00 00 1414 00 11 33 11 1111 1313 11 11 99 11 55 11 00 1414 66 00 99

Staphylococcus Staphylococcus aureusaureus

33 00 00 33 00 00 11 00 22 11 00 22 33 00 00 33 00 00 33 00 00

Moraxella sp.Moraxella sp.1111 00 00 99 00 22 00 00 1111 1111 00 00 66 00 55 66 55 00 1111 00 00

Pseudomonas Pseudomonas sp.sp.

00 00 33 00 00 33 22 00 11 11 22 00 33 00 00 00 22 11 11 00 22

Salmonella Salmonella enteritidisenteritidis

22 00 11 33 00 00 22 00 11 33 00 00 33 00 00 33 00 00 33 00 00

Streptococcus Streptococcus pneumoniaepneumoniae 11 00 00 00 00 11 00 00 11 00 00 11 11 00 00 00 00 11 00 00 11

Arcanobacer Arcanobacer pyogenespyogenes 11 00 00 11 00 00 11 00 00 11 00 00 11 00 00 11 00 00 11 00 00

A PCR analA PCR analíízis eredmzis eredméényei megernyei megerőőssíítetttettéék a PCV2 k a PCV2 fertfertőőzzéést minden kivizsgst minden kivizsgáált sertlt sertééstelepen, valamint stelepen, valamint mindkmindkéét vaddisznt vaddisznóó

áállomllomáányban nyban

((100,00%100,00%

h.s.,h.s.,

26,67%26,67%v.d.,v.d.,

p<0.01p<0.01))

A kA kóórbonctani, krbonctani, kóórszrszöövettani, immunihisztokvettani, immunihisztokéémiai miai éés in situ s in situ hibridizacihibridizacióós eredms eredméények arra utalnak, hogy a kivizsgnyek arra utalnak, hogy a kivizsgáált lt hháázisertzisertéések sek 75,00% 75,00% PMWSPMWS--ben szenved, mben szenved, mííg a g a vaddisznvaddisznóóknknáál a kl a kóórkrkéépp

a kivizsga kivizsgáált egyedek lt egyedek 6,67%6,67%--ban lett ban lett

alalááttáámasztvamasztva..

++

++

......................................KKÖÖVETKEZTETVETKEZTETÉÉSS......................................

Patognomikus kPatognomikus kóórbonctani elvrbonctani elváálozlozáás nem tals nem taláálhatlhatóó

a a PMWSPMWS--ben szenvedben szenvedőő

egyedeknegyedeknééll..

A leggyakoribb kA leggyakoribb kóórszrszöövettani lelet a limfatikus vettani lelet a limfatikus szszöövetben jelenlevvetben jelenlevőő

kköözepes zepes éés intenzs intenzíív mv méértrtéékkűű

limfocita depllimfocita depléécicióó..

++

++

A limfocita deplA limfocita depléécicióó

a fa főő

oka az immunoszupresszoka az immunoszupresszíív v áállapotnak.llapotnak.

++

Nagy mennyisNagy mennyisééggűű

PCV2 Cap antigPCV2 Cap antigéén n éés DNS van jelen a s DNS van jelen a limfatikus szlimfatikus szöövetek sejtjeiben, elsvetek sejtjeiben, elsőősorban a makrofsorban a makrofáágokban, gokban, dendritikus sejtekben, APC sejtekben, alveoldendritikus sejtekben, APC sejtekben, alveolááris ris makrofmakrofáágokbangokban..

++

A PCV2 Cap antigA PCV2 Cap antigéén n éés DNS jelenls DNS jelenlééte bizonyte bizonyíított a tott a mandulmanduláákban, lkban, léépben, Payer plakkokban, pben, Payer plakkokban, nyirokcsomnyirokcsomóókban, illeockban, illeocöökkáális valvullis valvuláákban, tkban, tüüddőőben, ben, mmáájban, vesjban, veséékben kben éés szs szíívbenvben. . Lebnagyobb Lebnagyobb mennyismennyiséégben viszont a limfatikus szgben viszont a limfatikus szöövetekben vetekben taltaláálhatlhatóó

++

++ A A PCV2 PCV2 tropizmusa bebizonyosult a limfocittropizmusa bebizonyosult a limfocitáák, k, makrofmakrofáágok, alveolgok, alveolááris epitel, bronhiris epitel, bronhiáális lis epitel,vesetubulus epitel, epecsatorna epitel sejtjei epitel,vesetubulus epitel, epecsatorna epitel sejtjei iriráánt, valamint a hepatocitnt, valamint a hepatocitáák k éés enterocits enterocitáák irk iráánt is.nt is.