CIRKOVIRUSOS MEGBEDEGEDÉSEK SZERBIA …mavsz.com/konferencia/20140328/PPP-PCV2-MAVSZ-Ujvidek...
Transcript of CIRKOVIRUSOS MEGBEDEGEDÉSEK SZERBIA …mavsz.com/konferencia/20140328/PPP-PCV2-MAVSZ-Ujvidek...
CIRKOVIRUSOS MEGBEDEGEDCIRKOVIRUSOS MEGBEDEGEDÉÉSEK SEK SZERBIA SERTSZERBIA SERTÉÉSSÁÁLLOMLLOMÁÁNYNYÁÁBANBAN
ÚÚjvidjvidéék 2k 20014. m14. máárcius 28rcius 28..--29.29.
BelgrBelgráádi di ÁÁllatorvostudomllatorvostudomáányi nyi Egyetem Egyetem --
SzerbiaSzerbia
Magyar Magyar ÁÁllatorvosok llatorvosok VilViláágszervezetegszervezete
..............................SRB SERTSRB SERTÉÉSTENYSTENYÉÉSZTSZTÉÉSESE..............................
1995 1995 ––
4.24.200.000 00.000
2011 2011 ––
3.280.0003.280.000
SVINJARSTVO - SRBIJA
0
500,000
1,000,000
1,500,000
2,000,000
2,500,000
3,000,000
3,500,000
4,000,000
4,500,000
SRBIJA 4,192,000 3,177,100 3,211,600 3,831,890 3,594,000 3,631,000
1995 2005 2006 2007 2008 2009
22%22%
1,4 1,4 Eu/kgEu/kg
Svinjarstvo - EVROPA
170,000,000
175,000,000
180,000,000
185,000,000
190,000,000
195,000,000
200,000,000
205,000,000
210,000,000
215,000,000
220,000,000
EVROPA 214,805,104 190,771,621 193,490,187 197,427,783 190,958,318 187,748,664
1995 2005 2006 2007 2008 2009
..........................EUREURÓÓPAPA SERTSERTÉÉSTENYSTENYÉÉSZTSZTÉÉSESE........................
1995 1995 ––
215.000.000 215.000.000
20200909
––
187187..75750.0000.00013%13%
SVINJARSTVO - SVET
870,000,000
880,000,000
890,000,000
900,000,000
910,000,000
920,000,000
930,000,000
940,000,000
950,000,000
SVET 899,253,461 907,783,318 926,637,620 919,629,726 936,355,887 941,776,122
1995 2005 2006 2007 2008 2009
........................A VILA VILÁÁG G SERTSERTÉÉSTENYSTENYÉÉSZTSZTÉÉSESE........................
1995 1995 ––
899899.000.000 .000.000
20200909
––
942942..75750.0000.00055%%
VVáálasztott malacok cirkovlasztott malacok cirkovíírus okozta sorvadrus okozta sorvadáása sa --
PMWSPMWS
FogFogéékony kony áállomllomáányban a vnyban a váálasztott malacok lasztott malacok betegszbetegszeneenek k
megmeg,,
nemnem
specifikusspecifikus
klinikaiklinikai
ttüünetekben.netekben.
-- progresszprogresszíív sv súúlyvesztlyvesztéés s ““sorvadsorvadááss””, ,
-- lléégzgzőőszervi tszervi tüünetek, netek,
-- hasmenhasmenéések, sek,
-- ananéémimiáás s áállapot, llapot,
-- esetenkesetenkéént snt sáárgasrgasáágg,,
-- **jelentjelentőős ms méértrtéékben megnagyobbodott nyirokcsomkben megnagyobbodott nyirokcsomóókk
**
.................................. IRODALMI IRODALMI ÁÁTTEKINTTTEKINTÉÉSS..............................
(Segales (Segales éés mtsai., 2003; Pensaert s mtsai., 2003; Pensaert éés mtsai., s mtsai., 2004; Rose 2004; Rose éés mtsai., 2011)s mtsai., 2011)
A PMWS legyakrabban 7A PMWS legyakrabban 7--15 hetes korban alakul ki15 hetes korban alakul ki
A vA váálasztott malacok a legfoglasztott malacok a legfogéékonyabbakkonyabbak
MorbiditMorbiditáás 3s 3--50%50%
MortalitMortalitáás aks akáár 80%r 80%
TransmisTransmissziszióó: : --
horizonthorizontáális lis
--
vvertikalisertikalis
(Segales (Segales éés mtsai., 2003; Pensaert s mtsai., 2003; Pensaert éés mtsai., 2004; Rose s mtsai., 2004; Rose éés mtsai., 2011)s mtsai., 2011)
PCV2PCV2--vel kapcsolatban level kapcsolatban leíírt krt kóórkrkéépek, PCVADpek, PCVAD
-- vváálasztott malacok cirkovirus okozta sorvadlasztott malacok cirkovirus okozta sorvadáása (PMWS)sa (PMWS)--
dermatitisz nefropdermatitisz nefropáátia tia sszindrzindróómama
(PDNS), (PDNS), egy
III. típusú
hiperszenzitivitási
reakció,
-- sertsertéések lsek léégzgzőőszervi tszervi tüünetegynetegyüüttesettese
(PRDC), (PRDC), -- magzati miokarditisz magzati miokarditisz éés reprodukts reproduktíív rendellenessv rendellenesséégekgek
(SAMS),(SAMS),-- granulgranulóómmáás enters enteríítisz, tisz, -- nekrotikus limfadennekrotikus limfadeníítisz, tisz, -- ekszudative epidermekszudative epidermíítisz tisz ééss-- congenitcongenitáális tremor.lis tremor.
(West (West éés mtsai.,1999; Ladekjaer s mtsai.,1999; Ladekjaer éés mtsai., 2001; Kim s mtsai., 2001; Kim éés mtsai., 2004;s mtsai., 2004; Chae C., 2005; Cheng Chae C., 2005; Cheng éés mtsai. 2010)s mtsai. 2010)
(Tischer (Tischer éés mtsai., 1982; Studdert, 1993; Harding, 1997;s mtsai., 1982; Studdert, 1993; Harding, 1997; Mankertz Mankertz éés mtsai., 1997; Jiang s mtsai., 1997; Jiang éés mtsai., 2010)s mtsai., 2010)
Legkisebb Legkisebb áállati eredetllati eredetüü
DNS vDNS víírusrus
((virion virion 17nm17nm))
CsalCsaláádd::
CircoviridaeCircoviridaeGenusGenus::
CircovirusCircovirus
PoxvirusPoxvirus
300 nm300 nm
PCV2PCV2
PCV1 PCV1 --
apatogapatogéénn(Tischer (Tischer éés mtsai., 1986; Allan s mtsai., 1986; Allan éés mtsai., 1995) s mtsai., 1995)
PCV2PCV2
––
virulens patogvirulens patogéénn(Meehan (Meehan éés mtsai., 1996;s mtsai., 1996; Krakowka Krakowka éés mtsai., 2000)s mtsai., 2000)
KKéét tipust tipus::
egyes tegyes tíípuspusúú
sertsertéés cirkovs cirkovíírusrus
((PCV1PCV1))
kettes tkettes tíípuspusúú
sertsertéés cirkovs cirkovíírusrus
((PCV2PCV2))
(h(háármas trmas tíípuspusúú
(PCV1/2a) (PCV1/2a) (Gagnon (Gagnon éés mtsai., 2010)s mtsai., 2010)
KKéét genott genotíípus: pus: PCV2a PCV2bPCV2a PCV2b
(PCV2c)(PCV2c)
(Gagnon (Gagnon éés mtsai., 2008, 2010)s mtsai., 2008, 2010)
mutmutááns ns PCV2a/PCV2bPCV2a/PCV2b
(Guo (Guo éés mtsai., 2011)s mtsai., 2011)
(Clark, 1996)(Clark, 1996)
vaddisznvaddisznóó
hháázisertzisertééss
ORF2 gORF2 géén (Cap gn (Cap géén) PCV2 n) PCV2
kapskapszzidn idn fehfehéérjerje
((Cap Cap antigantigéénn))
27.8 kDa27.8 kDa
struktstruktúút proteint proteinimimmmunogunogéén n
(Nawagitgul (Nawagitgul éés mtsais mtsai., 2000; Cheung K., 2003; Liu ., 2000; Cheung K., 2003; Liu éés mtsais mtsai., 2006)., 2006)
PCV2 PCV2 ggenenóóm m ::
17671767--1768 nukleo1768 nukleottidaida
FFőő
szekvenciszekvenciáákk
(ORF1, ORF2, OFR3)(ORF1, ORF2, OFR3)
KapKapszid fehszid fehéérjerje
2727.8.8kDakDa
233233--234 a.s. immunoreakt234 a.s. immunoreaktíív domv doméénn
(Chae C., 2004, Csank és mtsai., 2011)
A PMWS elsA PMWS elsőő
leleíírráása egyes orszsa egyes orszáágokbangokban
19961996
19981998
20012001
20012001
19919966
20022002
20020033
20022002
19991999
20042004
2004200419981998
1998199819991999
20012001
1991996622000000
2002007720201111
20020000
(Grierson és mtsai., 2004; Staebler és mtsai., 2005)
RetrospektRetrospektíív szerolv szerolóógiai eredmgiai eredméényeknyek
19961996
19981998
20012001
20012001
19961996
20022002
1999199920022002
20022002
19991999
20042004
2004200419981998
20012001
19981998
19919933
1996199619861986
19891989
(Jacobsen és mtsai., 2009)
19961996
19981998
20012001
20012001
19961996
20022002
1999199920022002
20022002
20042004
2004200419981998
20012001
19981998
19919933
1986198619891989
1962196219691969
19731973
1985198519991999
19961996
RetrospektRetrospektíív kv kóórszrszöövettani eredmvettani eredméényeknyek
A PMWS diagnA PMWS diagnóózisa a sertzisa a sertéésekben akkor megalapozott, sekben akkor megalapozott, ha a kha a köövetkezvetkezőő
kritkritéériumokriumok
mindegyike teljesmindegyike teljesüüll::
-- a betegsa betegséégre jellemzgre jellemzőő
klinikai tklinikai tüünetek netek éés ks kóórbonctani rbonctani elvelvááltozltozáások kialakultak,sok kialakultak,
-- kkóórszrszöövettanilag a nyirokszvettanilag a nyirokszöövetekben a karakterisztikus vetekben a karakterisztikus elvelvááltozltozáások szintsok szintéén kialakultak,n kialakultak,
-- a PCV2 (antiga PCV2 (antigéén vagy nukleinsav) a limfoid ln vagy nukleinsav) a limfoid léézizióókbkbóól l kimutathatkimutathatóó..
A kA kóórokozrokozóó
kimutatkimutatáása a PMWS diagnsa a PMWS diagnóózis zis megmegáállapllapííttáássáához nem elhoz nem eléégsgsééges, mivel ages, mivel aPCV2 tPCV2 tüünetmentes netmentes áállatokban is jelen lehet.llatokban is jelen lehet.
A diagnA diagnóózis felzis feláállllííttáássáához hoz kkóórszrszöövettani vizsgvettani vizsgáálat nlat néélklküüllöözhetetlenzhetetlen..
A PMWS diagnA PMWS diagnóózis felzis feláállllííttáássáához szhoz szüüksksééges mintges mintáák:k:nyirokcsomnyirokcsomóó, mandula, cs, mandula, csííppőőbbéél (Peyer plakk). l (Peyer plakk).
TTüüddőő, l, léép, vese vagy egyp, vese vagy egyééb szerv nem feltb szerv nem feltéétlentlenüül l szszüüksksééges.ges.(Segal(Segaléés, 2006).s, 2006).
..............................................CCÉÉLKITLKITŰŰZZÉÉSEKSEK................................................
A kivizsgA kivizsgáálláások elssok elsőődleges cdleges céélja a PCV2 infekcilja a PCV2 infekcióó
éés az s az
áálltala okozott PMWS elterjedlltala okozott PMWS elterjedéésséének nek éés prevalencis prevalenciáájjáának nak
felmfelméérréése a vajdasse a vajdasáági sertgi sertééstelepeken valamint 2 vaddisznstelepeken valamint 2 vaddisznóó
áállomllomáányban.nyban.
TovTováábbbbáá, a term, a terméészetes szetes úúton fertton fertőőzzőőddöött tt hháázisertzisertééseksek
éés s
vaddisznvaddisznóók immunrendszer kk immunrendszer káárosodrosodáássáának reszletes lenak reszletes leíírráása a sa a
PMWS vetPMWS vetüületletéébenben..
A kitA kitűűzzöött ctt céélok a klok a köövetkezvetkezőő
feladatok feladatok ááltal lettel ltal lettel vvéégrehajtva:grehajtva:
аа) ) a serta sertéések sek éés vaddiszns vaddisznóók k PCV2 fertPCV2 fertőőzzéésséének nek prevalenciprevalenciáájaja;;
bb))
a megbetegedett serta megbetegedett sertéések tsek tüüneteinek leneteinek leíírráása;sa;
cc))
a ka kóórszrszöövettani elvvettani elvááltozltozáások lesok leíírráása a limfatikus sa a limfatikus ((nyirokcsomnyirokcsomóók, mandulk, manduláák, lk, léép, Peyer plakk, p, Peyer plakk, illeocilleocöökkáális valvulalis valvula))
éés nem limfatikus (ts nem limfatikus (tüüddőő, m, mááj, j,
vesveséék k éés szs szíív)v);;
dd))
a ka kóórszrszöövettani lvettani léézizióók evaluk evaluáácicióója;ja;
ee))
a PCV2 Cap antiga PCV2 Cap antigéén n éés DNS kimutats DNS kimutatáása az sa az elvelvááltozott limfatikus ltozott limfatikus éés nem limfatikus szervekbs nem limfatikus szervekbőőll;;
ff) ) a ferta fertőőzzöött sejtek lett sejtek leíírráása sa éés immunopozits immunopozitíív szignv szignáál l ererőőssssééggéének meghatnek meghatáározrozáása sa ;;
gg) ) Azon sejtek feltAzon sejtek feltáárráása melyekben a vsa melyekben a víírus aktrus aktíívan van szaporodik.szaporodik.
....................................ANYAG ANYAG ÉÉS MS MÓÓDSZERDSZER..................................
hháázisertzisertééssvaddisznvaddisznóó
kkontroontroll
csoport csoport
A hA háázi sertzi sertéések 8 teleprsek 8 teleprőől szl száármaztak, Vajdasrmaztak, Vajdasáág g kküüllöömbmböözzőő
rréészeirszeirőől, l, éés nagyfoks nagyfokúú
nnöövvéésvisszamaradsvisszamaradáás jeleit s jeleit
mutattmutattáák.k.
A vaddisznA vaddisznóók kk kéét magyarorszt magyarorszáággal hatggal hatááros vadros vadáászteleprszteleprőől l szszáármaztak.rmaztak.
RRéészletes szletes klinikai tklinikai tüünetnet
éés s korbonctani lekorbonctani leíírasras
ututáán n kköövetkezett a szvetkezett a szöövet mintvet mintáázzáás a tovs a továábbi kivizsgbbi kivizsgáálláásokhoz.sokhoz.
A PCV2 fertA PCV2 fertőőzzööttsttséég meghatg meghatáárizrizáása sa PCR mPCR móódszerreldszerrel
ttöörtrtéént nt a ta tüüddőőbbőől, nyirokcsoml, nyirokcsomóóbbóól l éés ls léépbpbőől.l.
A genA genóóm 501bp ORF2 fragmentjm 501bp ORF2 fragmentjéének kimutatnek kimutatáássáára ra specifikus oligonukleotid prajmerek voltak alkalmazvaspecifikus oligonukleotid prajmerek voltak alkalmazva::
forward PCV2forward PCV2--2A: 2A: 55′′--CACCTTCGGATATACTGTCAACACCTTCGGATATACTGTCAA--33′′i reverse PCV2i reverse PCV2--2B: 52B: 5′′--TACATGGTTACACGGATATTGTATACATGGTTACACGGATATTGTA--33′′
A A kkóórszrszöövettani, vettani,
az immunohisztokaz immunohisztokéémiai miai éés az s az in situin situ hibridizhibridizáácicióóss
kivizsgkivizsgáálláásokhoz a ksokhoz a köövetkezvetkezöö
szervmintszervmintáák k
szolgszolgáálltak alapul: lltak alapul: -- nyirokcsomnyirokcsomóók (k (szubmandibulszubmandibulááris, mediasztinris, mediasztináális, mezenterilis, mezenteriáális lis éés s
ingviningvináális szuperficilis szuperficiáálislis));;-- mandulmanduláák,k,-- lléép,p,-- payer plakk,payer plakk,-- ttüüddőő, , -- mmááj, j, -- vesveséék,k,-- szszíív.v.
SzSzöövetfikszvetfikszáállááss
10% neutr10% neutráális formalinlis formalin,,
2424--48 48 óórara
SzSzöövet proceszuvet proceszuáállááss::
autautóómatikus szmatikus szöövetprocesszorvetprocesszor
SzSzöövetbevetbeáágyazgyazááss::
parafin blokkparafin blokk
SzSzüüvetmetszvetmetszééss: 5 : 5 µµm m
SzSzöövetfestvetfestéés: hematokszilins: hematokszilin
--
eozin (HE)eozin (HE)
A limfatikus szA limfatikus szöövetkvetkáárosodrosodáás ms méértrtéékkéének meghatnek meghatáározrozáásasa
ParaméterKritérium –
limfatikus szövetVáltozatlan
(BL)Enyhe
(I)Közepes
(II)Nagyfokú
(III)
Limfocita depléció Depléció
nélkül A T és B limfociták enyhe depléciója
Közepes mértékű
T és B limfocita depléció
Nagymértékű
T és B limfocitás depléció, a follikulusok hiánya
Makrofágos infiltrácio Makrofágos infiltráció
hiánya
Makrofágok jelenléte kis számban
Közepes számú
makrofág infiltráció
Nagymértékű
makrofág infiltráció
Infektív granulóma jelenléte Granulóma hiánya Granulóma hiánya Granulóma hiánya Granulóma gyakori
jelenléte
Gigantikus sejtek jelenléte Óriássejtek hiánya Óriássejtek hiánya Óriássejtek kisszámú
jelenléte
Óriássejtek nagyszámú
jelenléte
A limfatikus szövet arhitektúrájának változása
A szövet arhitektúrája változatlan
A szövet arhitektúrája változatlan
A szövet arhitektúrája továbbra is megőrzött
A szövet arhitektúra megváltozott, hianyzik a sztróma
(Chian(Chiannnini ini éés mtsai., 2003)s mtsai., 2003)
A szA szöövetek vetek immunohisztokimmunohisztokéémiaimiai
kivizsgkivizsgáálláása sa (LSAB2)(LSAB2)
PCV2 Cap antigPCV2 Cap antigéén detekcin detekcióó, disztrib, disztribúúcicióó éés s mennyismennyiséég meghatg meghatáározrozáásasa
A szA szöövetek vetek in situin situ hibridizhibridizáácicióóss
kivizsgkivizsgáálláása sa
(ISH CP (ISH CP éés ISH RFP)s ISH RFP)
PCV2 DNS detekciPCV2 DNS detekcióó, disztrib, disztribúúcicióó, mennyis, mennyiséég g meghatmeghatáározrozáása, vsa, víírusreplikrusreplikáácicióó bizonybizonyííttáása.sa.
((Chiannini Chiannini éés mtsai., 2s mtsai., 2003)003)
A pozitA pozitíív szignv szignáál kvantifikl kvantifikáácicióójaja
IHC IHC éés ISHs ISH
( ( --
, , + , + , + + , + + , + + + )+ + + )
NNegategatíívv
kontrkontróólala
PozitPozitíív kontrv kontróólala
BakteriolBakteriolóógiagiai kivizsgi kivizsgáálláásoksok
(t(tüüddőő, v, véékonybkonybéél, ml, mááj)j)
AntibiotikumrezisztenciaAntibiotikumrezisztencia
meghatmeghatáározrozááss(amokszicilim klavulinsav, trimetoprim sulfometokszazol, linkomi(amokszicilim klavulinsav, trimetoprim sulfometokszazol, linkomicin cin
szpektinomicin, enrocin, gentamicin, nomicin, tulatromicin)szpektinomicin, enrocin, gentamicin, nomicin, tulatromicin)
………….. EREDMEREDMÉÉNYEK NYEK ÉÉS MEGBESZS MEGBESZÉÉLLÉÉSS ………………
100,00%
8,75%
81,67% 70,00%
41,66% 16,17%
86,67% 100,00%
90,00% 75,00%
76,67%
0 68,33%
31,67% 60,00%
Csapatmunka :) Csapatmunka :)
100,00% 26,67%
KvalitatKvalitatíív PCRv PCR
SzSzöövettani elvvettani elvááltozltozáásoksokéés a PCV2 immunodestrukts a PCV2 immunodestruktíív hatv hatáásasa
Ln.
med. H. S.,
HE
78,33% 13,33%
Tonsila, v.d.,
HE
Payer plakk,
v.d.
HE
Ln.mediastinalis, h.s.,
HE
A limfatikus szA limfatikus szöövetkvetkáárosodrosodáás ms méértrtéékkéének kimutatnek kimutatáása sa hháázisertzisertéés : vaddiszns : vaddisznóó
SzövetSzővetkárosodás mértéke
BL I II III
Házi- sertás
Nyirokcsomók 11,67a 10,00 53,33b 25,00c
Peyer plakk 20,00a 11,67 50,00b 18,33c
Illeocökális valvula 25,00a 18,33 48,33b 8,33
Mandula 18,33a 11,67 51,67b 18,33c
Lép 50,00a 5,00 35,00b 10,00A
Vad-disznó
Nyirokcsomók 65,00a 21,67 10,00b 3,33c
Peyer plakk 75,00a 16,67 6,67b 1,67c
Illeocökális valvula 78,33a 11,67 8,33b 1,67
Mandula 78,33a 13,33 6,67b 1,67c
Lép 90,00a 6,67 1,67b 1,67A
Legenda: a, b, c = p<0,01; A = p<0,05
78.3368.33
56.67
23.33
45.00
13.33 8.33 10.00 8.33 3.330
20
40
60
80
100
Limfničvorovi
Pajeroveploče
Ileocekalnavalvula
Tonzile Slezina
Divlje svinje
p<0,01p<0,01 p<0,01p<0,01 p<0,01p<0,01p<0,01p<0,01
p<0,01p<0,01
Diagram Diagram 11. . A limfatikus szA limfatikus szöövetvet
++ ++ éés +++s +++
ererőőssssééggűű
limfocitlimfocitáás depls depléécicióója ja (%)(%)
NyNyirok Payer Illeocirok Payer Illeocöök. Mandula Lk. Mandula Léépp
csomcsomóó plakk valvulaplakk valvula
HHáázi sert
zi sertééss
Vaddiszn
Vaddisznóó
p<0,01p<0,01
Tüdő, h.s.,100x, HE
Infekc plu opurtunim patog posled i
imunosupres PCV2
86,67%
Tüdő, h.s., HE85,00%
Tüdő, h.s., 1000x, HE
Máj, h.s.,
HE
78,33% 51,67%
Vese, v.d.,
HE
46,67% 51,67%
ImmunohisztokImmunohisztokéémiai miai éés s in situin situ hibridizhibridizáácicióós kivizsgs kivizsgáálláás s eredmeredméényeinyei
PCV2 Cap protPCV2 Cap prot
PCV2 DNSPCV2 DNS
szszöövettani metszetvettani metszet
Ln.submanib.
H.s., IHC
Ln.ingvinalis sup., h.s., IHC
Lnn, 400x, IHC
Lnn, 400x, IHC
Lnn, 600x, IHC
Ln.ingvinalis sup. h.s., IHC
73,33% 5,00%
Tonsila v.d., IHC
Lép, h.s.,
IHC
Payer plakk, v.d., IHC
Legenda: a, b, c, d, e = p<0,01; * = ingv.sup. ny.cs.; ni = kivizsgálatlan
Szövet
Ekszpresszió
intenzitásPCR
IHC
- + ++ +++ Σpozitiv
Σpozitiv
HáziSertés
Mandulák 30,00a 15,00 36,67b 18,33c 70,00d niPayer plakk 16,67a 10,00 50,00b 23,33c 83,33d ni
Illeocökálisvalvula 23,33a 13,33 46,67b 16,67c 76,67d ni
Lép 25,00a 11,67 48,33b 15,00c 75,00d 100,00e
Nyirokcsomók 15,00a 11,67 51,67b 21,67c 85,00d *100,00e
Vaddisznó
Mandulák 88,33a 10,00 1,67b 0,00c 11,67d ni
Payer plakk 86,67a 8,33 3,33b 1,67c 13,33d niIlleocökális valvula 86,67a 8,33 3,33b 1,67c 13,33d ni
Lép 91,67a 66,67 1,67b 0,00c 8,33d 26,67e
Nyirokcsomók 81,67a 13,33 3,33b 1,67c 18,33d *26,67e
Diagram Diagram 22. . A limfatikus szA limfatikus szöövetvet
++ ++ éés +++s +++
ererőőssssééggűű
PCV2 PCV2 CapCap antigantigéénn
ekspressziekspresszióójaja (%)(%)
73.33
p<0,01
73.33
p<0,01
63.33
p<0,01
55.00
p<0,01
63.33
p<0,01
5.00 5.00 5.00 1.67 1.670
20
40
60
80
100
Limfničvorovi
Pajeroveploče
Ileocekalnavalvula
Tonzile Slezina
Divlje svinjeNyNyirok Payer Illeocirok Payer Illeocöök. Mandula Lk. Mandula Léépp
csomcsomóó
plakk valvulaplakk valvula
HHáázi sertzi sertééssVaddiszn
Vaddisznóó
p<0,01p<0,01
Tüdő, h.s., IHC
Tüdő, h.s., IHC
Ln.mesent., h.s., CP ISH
75,00% 6,67%
Ln.mesent. v.d., CP ISH
Tonzila, v.d., CP ISH
Payer plakk, h.s., CP ISH
Tüdő, h.s., CP ISH
Tüdő, h.s., CP ISH
A PCV2 genA PCV2 genóóm ekszpresszim ekszpresszióója (%)ja (%)
Legenda: istim slovima a, b, c, d, e = p<0,01; * = ingv.
sup.l.čvor; ni = nije ispitano
TkivoCP ISH RFP ISH PCR
- + ++ +++ ΣPozit. - +
ΣPozit.
Domaće
svinje
Tonzile 26,67a 15,00 36,67b 21,67c 73,33d 66,67e 33,33f ni
Pajerove
pl. 15,00a 10,00 50,00b 25,00c 85,00d 60,00e 40,00f ni
Ileocek.valv. 21,67a 13,33 46,67b 18,33c 78,33d 61,67e 38,33f ni
Slezina 21,67a 13,33 48,33b 16,67c 78,33d 66,67e 33,33f 100,00g
Limfni
čv. 13,33a 16,67 51,67*b 23,33c 86,67d 53,33e 46,67f*100,00
g
Divlje
svinje
Tonzile 88,33a 10,00 1,67b 0,00c 11,67d 98,33e 1,67f ni
Pajerove
pl. 85,00a 8,33 5,00b 1,67c 15,00d 96,67e 3,33f ni
Ileocek.valv. 85,00a 8,33 5,00b 1,67c 15,00d 96,67e 3,33f ni
Slezina 91,67a 5,00 3,33b 0,00c 8,33d 98,33e 1,67f 26,67g
Limfni
čv. 80,00a 13,33 5,00b 1,67c 20,00d 93,33e 6,67f *26,67g
75.00 75.0065.00 58,33 65.00
6,67 6,67 6,67 1,67 3,33
0
20
40
60
80
100
Limfničvorovi
Pajeroveploče
Ileocekalnavalvula
Tonzile Slezina
Divlje svinje
p<0,01p<0,01
p<0,01p<0,01 p<0,01p<0,01 p<0,01p<0,01 p<0,01p<0,01 p<0,01p<0,01
Diagram Diagram 33. . A limfatikus szA limfatikus szöövetvet
++ ++ éés +++s +++
ererőőssssééggűű
CP ISHCP ISH
szignszignááljalja
(%)(%)
NyNyirok Payer Illeocirok Payer Illeocöök. Mandula Lk. Mandula Léépp
CsomCsomóó
plakk valvulaplakk valvula
HHáázi sert
zi sertééssVaddiszn
Vaddisznóó
100.00
78.33 73.33 75.00
26.67
50.00
18.75 25.00
0
20
40
60
80
100
PCR Histopatološki IHC CP ISH Divljesvinje
Domaćesvinje
Diagram 4.Diagram 4.
PMWS PMWS diagndiagnóózis a PCV2zis a PCV2--vel fertvel fertőőzzöött serttt sertééseknseknéél. l. KKüülobloböözzőő
diagnosztikai mdiagnosztikai móódszerek komparatdszerek komparatíív eredmv eredméényei. nyei.
(II (II éés III intenzits III intenzitáássúú
kkóórszrszöövettani elvvettani elvááltozltozáások, sok, ++ ++ ééss
++++++
intenzitintenzitáássúú
ICH ICH éés CP ISH szig.)s CP ISH szig.)
p<0,01p<0,01
HHáázi sert
zi sertééssVaddiszn
Vaddisznóó
kkóórszrszöövettanvettan
A cirkovirussal fertA cirkovirussal fertőőzzöött malacokbtt malacokbóól izoll izoláált baktlt baktéériumokriumok
KKóórokozrokozóó FertFertőőzzööttsttséégg%%
TTüüddőő%%
MMáájj%%
VVéékonykonybelekbelek
%%1 1 E.coliE.coli 72.572.5 11.2511.25 26.2526.25 58.7558.75
2 2 Str. Str. SSuisuis 5050..0000 28.7528.75 31.2531.25 22.5022.50
3 3 E.ColiE.Coli ββ hemolitihemolitikuskus 27.527.500 2.502.50 8.758.75 23.7523.75
4 4 StrStreptococcuseptococcus porcinporcinuisuis 18.7518.75 13.7513.75 7.507.50 1.251.25
5 5 PasteurellaPasteurella multocidamultocida 16.2516.25 16.2516.25 3.753.75 1.251.25
6 6 MoraxellaMoraxella sp.sp. 13.7513.75 13.7513.75 3.753.75 00
7 7 Pseudomonas sp.Pseudomonas sp. 3.753.75 00 2.502.50 1.251.25
8 8 StaphStaphilococcusilococcus aureusaureus 3.753.75 00 3.753.75 00
9 9 PasteurellaPasteurella ppneumotropicaneumotropica 1.251.25 1.251.25 00 00
A cirkovirussal fertA cirkovirussal fertőőzzöött malacokbtt malacokbóól izoll izoláált baktlt baktéériumokriumok
KKóórokozrokozóó FertFertőőzzööttsttséégg%%
TTüüddőő%%
MMáájj%%
VVéékonykonybelekbelek
%%10 10 Salmonella Salmonella enteritidisenteritidis 2.502.50 1.251.25 1.251.25 2.2.5500
11 11 MainhaemiaMainhaemia haemolhaemolytiyticaca 1.251.25 00 00 1.251.25
12 12 Str. Str. PPneumoniaeneumoniae 1.251.25 1.251.25 00 00
13 13 Clostridium sp.Clostridium sp. 1.251.25 00 00 1.251.25
14 14 ArcanobacterArcanobacter pyogenespyogenes((TrueperellaTrueperella))
1.251.25 1.251.25 00 00
PCV2 PCV2 + + 1 fajta bakt1 fajta baktéériumrium 15%15%
PCV2 PCV2 + + 2 fajta bakt2 fajta baktéériumrium 46.25%46.25%
PCV2 PCV2 + + 3 fajta bakt3 fajta baktéériumrium 32.50%32.50%
PCV2 PCV2 + + 4 fajta bakt4 fajta baktéériumrium 5%5%
PCV2 PCV2 + + 5 fajta bakt5 fajta baktéériumrium 1.25%1.25%
PCV2PCV2--vel fertvel fertőőzzöött malacok bakteritt malacok bakteriáális fertlis fertőőzzééseisei
Biogram Biogram --
AntibiogramAntibiogram
KKóórokozrokozóó AntibiogramAntibiogramAmoksiAmoksiklavulklavul
Sulfo+Sulfo+TrimTrim
Spect+Spect+lincolinco EnrocinEnrocin GentamiciGentamici NeomicinNeomicin
TulathroTulathromicinmicin
ÉÉ II RR ÉÉ II RR ÉÉ II RR ÉÉ II RR ÉÉ II RR ÉÉ II RR ÉÉ II RR
E.coliE.coli3838 1919 11 77 1515 3636 33 3434 2121 2525 00 3333 2222 1919 1717 11 1919 3838 5656 22 00
E.ColiE.Coliββ
haemolitichaemoliticaa 1616 33 33 55 00 1717 66 33 1313 1919 11 22 99 77 66 44 99 99 2222 00 00
PasteurellaPasteurellapneumotropicapneumotropica
11 00 00 11 00 00 11 00 00 00 11 00 11 00 00 11 00 00 11 00 00
Pasteurella Pasteurella multocidamultocida
1414 00 00 1414 00 00 1313 11 00 1414 00 00 1313 11 00 1111 33 00 1414 00 00
ManhaemiaManhaemia
haemolitycahaemolityca11 00 00 11 00 00 11 00 00 11 00 00 11 00 00 00 11 00 11 00 00
Streptococcus Streptococcus suissuis
4040 00 00 3232 11 77 11 1212 2727 3131 00 99 2929 11 1010 3434 22 44 2929 00 1111
Biogram Biogram --
AntibiogramAntibiogramKKóórokozrokozóó AntibiogramAntibiogram
AmoksiAmoksiklavulklavul
Sulfo+Sulfo+TrimTrim
Spect+Spect+lincolinco EnrocinEnrocin GentamicnGentamicn NeomicinNeomicin TulathroTulathro
micinmicin
ÉÉ II RR ÉÉ II RR ÉÉ II RR ÉÉ II RR ÉÉ II RR ÉÉ II RR ÉÉ II RR
Streptococcus Streptococcus porcinusporcinus
1515 00 00 1414 00 11 33 11 1111 1313 11 11 99 11 55 11 00 1414 66 00 99
Staphylococcus Staphylococcus aureusaureus
33 00 00 33 00 00 11 00 22 11 00 22 33 00 00 33 00 00 33 00 00
Moraxella sp.Moraxella sp.1111 00 00 99 00 22 00 00 1111 1111 00 00 66 00 55 66 55 00 1111 00 00
Pseudomonas Pseudomonas sp.sp.
00 00 33 00 00 33 22 00 11 11 22 00 33 00 00 00 22 11 11 00 22
Salmonella Salmonella enteritidisenteritidis
22 00 11 33 00 00 22 00 11 33 00 00 33 00 00 33 00 00 33 00 00
Streptococcus Streptococcus pneumoniaepneumoniae 11 00 00 00 00 11 00 00 11 00 00 11 11 00 00 00 00 11 00 00 11
Arcanobacer Arcanobacer pyogenespyogenes 11 00 00 11 00 00 11 00 00 11 00 00 11 00 00 11 00 00 11 00 00
A PCR analA PCR analíízis eredmzis eredméényei megernyei megerőőssíítetttettéék a PCV2 k a PCV2 fertfertőőzzéést minden kivizsgst minden kivizsgáált sertlt sertééstelepen, valamint stelepen, valamint mindkmindkéét vaddisznt vaddisznóó
áállomllomáányban nyban
((100,00%100,00%
h.s.,h.s.,
26,67%26,67%v.d.,v.d.,
p<0.01p<0.01))
A kA kóórbonctani, krbonctani, kóórszrszöövettani, immunihisztokvettani, immunihisztokéémiai miai éés in situ s in situ hibridizacihibridizacióós eredms eredméények arra utalnak, hogy a kivizsgnyek arra utalnak, hogy a kivizsgáált lt hháázisertzisertéések sek 75,00% 75,00% PMWSPMWS--ben szenved, mben szenved, mííg a g a vaddisznvaddisznóóknknáál a kl a kóórkrkéépp
a kivizsga kivizsgáált egyedek lt egyedek 6,67%6,67%--ban lett ban lett
alalááttáámasztvamasztva..
++
++
......................................KKÖÖVETKEZTETVETKEZTETÉÉSS......................................
Patognomikus kPatognomikus kóórbonctani elvrbonctani elváálozlozáás nem tals nem taláálhatlhatóó
a a PMWSPMWS--ben szenvedben szenvedőő
egyedeknegyedeknééll..
A leggyakoribb kA leggyakoribb kóórszrszöövettani lelet a limfatikus vettani lelet a limfatikus szszöövetben jelenlevvetben jelenlevőő
kköözepes zepes éés intenzs intenzíív mv méértrtéékkűű
limfocita depllimfocita depléécicióó..
++
++
A limfocita deplA limfocita depléécicióó
a fa főő
oka az immunoszupresszoka az immunoszupresszíív v áállapotnak.llapotnak.
++
Nagy mennyisNagy mennyisééggűű
PCV2 Cap antigPCV2 Cap antigéén n éés DNS van jelen a s DNS van jelen a limfatikus szlimfatikus szöövetek sejtjeiben, elsvetek sejtjeiben, elsőősorban a makrofsorban a makrofáágokban, gokban, dendritikus sejtekben, APC sejtekben, alveoldendritikus sejtekben, APC sejtekben, alveolááris ris makrofmakrofáágokbangokban..
++
A PCV2 Cap antigA PCV2 Cap antigéén n éés DNS jelenls DNS jelenlééte bizonyte bizonyíított a tott a mandulmanduláákban, lkban, léépben, Payer plakkokban, pben, Payer plakkokban, nyirokcsomnyirokcsomóókban, illeockban, illeocöökkáális valvullis valvuláákban, tkban, tüüddőőben, ben, mmáájban, vesjban, veséékben kben éés szs szíívbenvben. . Lebnagyobb Lebnagyobb mennyismennyiséégben viszont a limfatikus szgben viszont a limfatikus szöövetekben vetekben taltaláálhatlhatóó
++
++ A A PCV2 PCV2 tropizmusa bebizonyosult a limfocittropizmusa bebizonyosult a limfocitáák, k, makrofmakrofáágok, alveolgok, alveolááris epitel, bronhiris epitel, bronhiáális lis epitel,vesetubulus epitel, epecsatorna epitel sejtjei epitel,vesetubulus epitel, epecsatorna epitel sejtjei iriráánt, valamint a hepatocitnt, valamint a hepatocitáák k éés enterocits enterocitáák irk iráánt is.nt is.