Watson e Crick A=T C=G % desnaturação Temperatura o C Tm Desnaturação de DNA.
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Watson e Crick
Transcript of Watson e Crick A=T C=G % desnaturação Temperatura o C Tm Desnaturação de DNA.
Watson e Crick
A=T C=G
% d
esn
atu
raçã
o
Temperatura oCT’m
Desnaturação de DNA
Ligação cooperativa
quando rompida o efeito é
marcante.
% d
esn
atu
raçã
o
Temperatura oCT’m
Desnaturação de DNA
Desnaturação em função do conteúdo de GC
%C
G
T’m
Aumento deTemperatura
ou de pH
resulta em
desnaturação
Separando as fitas!
Reassociando
Temperatura e força iônica
Reassociação
Reassociação depende da concentração das seqüências
% r
eass
ocia
ção
Cot
A velocidade de reassociação depende da complexidade do
DNA
% r
eass
ocia
ção
Cot
Três classes de seqüências de DNA
Cot
% r
eass
ocia
ção
O segredo da Vida...
Como copia...
Replicação de DNA
Ligação fosfodiester
A reação de polimerização é feita pela DNA polimerase e necessita de nucleotídeos trifosfatos, uma extremidade “primer” ou iniciadora, que possui a hidroxila 3’ livre e um molde ou “template” para ser copiado.
A=T C=G ¿G=T? ¿C=A?
DNA polimerase I tem função editorial
“Bolha” de replicação
Como as seqüências são reconhecidas?
Domínio: Dedo de Zinco
Domínio: Hélice-Volta-Hélice
Seqüências simétricas!
homodímerospodem reconhecer a
seqüência
Replicação unidirecionalgera fragmentos:
Fragmentos de Okazaki
Replicação depende de diferentes atividades
enzimáticas!
Maquinaria de Replicação
é um complexo multienzimático!
Topoisomerases são realmente necessárias?
Tipo I Tipo II
Qual a velocidade de replicação?
• Em bactérias : 2000 bases/segundo
• Em eucariotos: 50 bases/segundo
Como fica o final do Cromossomo?
Empacotamento do DNA
Organização da cromatina
Seqüenciamento de DNA
Princípios
Reação com ddNTP
Produtos da reação
Leitura da seqüência
