Validering av kjemiske analysemetoder
-
Upload
andershalvorsen -
Category
Science
-
view
152 -
download
2
Transcript of Validering av kjemiske analysemetoder
![Page 1: Validering av kjemiske analysemetoder](https://reader034.fdocument.pub/reader034/viewer/2022042615/55c23ea8bb61ebd06e8b47f3/html5/thumbnails/1.jpg)
Validering av kjemiske analysemetoder
Anders T. Halvorsen
Fagdag Kontroll og utvikling 01.04.2014
![Page 2: Validering av kjemiske analysemetoder](https://reader034.fdocument.pub/reader034/viewer/2022042615/55c23ea8bb61ebd06e8b47f3/html5/thumbnails/2.jpg)
Validering ≠ Skjemautfylling
![Page 3: Validering av kjemiske analysemetoder](https://reader034.fdocument.pub/reader034/viewer/2022042615/55c23ea8bb61ebd06e8b47f3/html5/thumbnails/3.jpg)
Validering ≠ Statistikk
![Page 4: Validering av kjemiske analysemetoder](https://reader034.fdocument.pub/reader034/viewer/2022042615/55c23ea8bb61ebd06e8b47f3/html5/thumbnails/4.jpg)
Anscombes kvartett
A B C D
X Y X Y X Y X Y10,
08,04
10,0
9,1410,
07,46 8,0 6,58
8,0 6,95 8,0 8,14 8,0 6,77 8,0 5,7613,
07,58
13,0
8,7413,
012,7
48,0 7,71
9,0 8,81 9,0 8,77 9,0 7,11 8,0 8,8411,
08,33
11,0
9,2611,
07,81 8,0 8,47
14,0
9,9614,
08,1
14,0
8,84 8,0 7,04
6,0 7,24 6,0 6,13 6,0 6,08 8,0 5,25
4,0 4,26 4,0 3,1 4,0 5,3919,
012,5
012,
010,8
412,
09,13
12,0
8,15 8,0 5,56
7,0 4,82 7,0 7,26 7,0 6,42 8,0 7,91
5,0 5,68 5,0 4,74 5,0 5,73 8,0 6,89
y = 0,5x + 3,0
R2 0,667SE (b1)
0,118
Σ(y-y)2 13,75
n 11
x 9,0
SD x 3,32Σ(x-x)2 110,0
y 7,58
SD y 2,03
![Page 5: Validering av kjemiske analysemetoder](https://reader034.fdocument.pub/reader034/viewer/2022042615/55c23ea8bb61ebd06e8b47f3/html5/thumbnails/5.jpg)
Anscombes kvartett
![Page 6: Validering av kjemiske analysemetoder](https://reader034.fdocument.pub/reader034/viewer/2022042615/55c23ea8bb61ebd06e8b47f3/html5/thumbnails/6.jpg)
Validering = Kompetanse
![Page 7: Validering av kjemiske analysemetoder](https://reader034.fdocument.pub/reader034/viewer/2022042615/55c23ea8bb61ebd06e8b47f3/html5/thumbnails/7.jpg)
Analytisk
Validering
Rapport
Medisinsk
Plan↔
![Page 8: Validering av kjemiske analysemetoder](https://reader034.fdocument.pub/reader034/viewer/2022042615/55c23ea8bb61ebd06e8b47f3/html5/thumbnails/8.jpg)
Interferenser i LC-MS/MS analyse av MMA
MetylmalonsyreAnalytt
RavsyreInterferens
Analytisk og medisinsk kompetanse i validering
OOH
HOO
OOOHHO
![Page 9: Validering av kjemiske analysemetoder](https://reader034.fdocument.pub/reader034/viewer/2022042615/55c23ea8bb61ebd06e8b47f3/html5/thumbnails/9.jpg)
Interferenser i LC-MS/MS analyse av MMA
Valproat
Pasienter på valproat produserer små syrer i
sera
Nyre- og leversvikt
Produserer har «skitne» sera
Medisinsk kompetanse
![Page 10: Validering av kjemiske analysemetoder](https://reader034.fdocument.pub/reader034/viewer/2022042615/55c23ea8bb61ebd06e8b47f3/html5/thumbnails/10.jpg)
Interferenser i LC-MS/MS analyse av MMA
Analytisk kompetanse
![Page 11: Validering av kjemiske analysemetoder](https://reader034.fdocument.pub/reader034/viewer/2022042615/55c23ea8bb61ebd06e8b47f3/html5/thumbnails/11.jpg)
Presisjon til en analytisk prosedyre
er den spredningen i resultater som
man får ved gjentatte målinger av
samme, homogene prøve under
gitte forhold.
![Page 12: Validering av kjemiske analysemetoder](https://reader034.fdocument.pub/reader034/viewer/2022042615/55c23ea8bb61ebd06e8b47f3/html5/thumbnails/12.jpg)
Presisjonsstudier
Innen serie presisjon (repeterbarhet)Samme måling gjort under like omstendigheter
Total-presisjon (reproduserbarhet)Samme måling gjort over tid, av forskjellige operatører osv.
![Page 13: Validering av kjemiske analysemetoder](https://reader034.fdocument.pub/reader034/viewer/2022042615/55c23ea8bb61ebd06e8b47f3/html5/thumbnails/13.jpg)
Presisjonsstudier
Nok data
Varier betingelser
Forsøksdesign (kjemometri)
Noen praktiske tips
![Page 14: Validering av kjemiske analysemetoder](https://reader034.fdocument.pub/reader034/viewer/2022042615/55c23ea8bb61ebd06e8b47f3/html5/thumbnails/14.jpg)
Lot til lot variasjon
Små forskjeller
Inkluderes i presisjon
Store forskjeller
Korrigere metoden
Av kalibratorer og kritiske reagenser
Det er viktig at kunde (rekvirenten) ikke skal være avhengig av å
vite hvilke instrument, lotnr på reagenser osv som er brukt.
Jo mindre forskjell, jo flere målinger kreves for å estimere denne.
![Page 15: Validering av kjemiske analysemetoder](https://reader034.fdocument.pub/reader034/viewer/2022042615/55c23ea8bb61ebd06e8b47f3/html5/thumbnails/15.jpg)
Linearitet til en analytisk prosedyre
er evnen til å gi et prøveresultat
som er direkte proporsjonalt med
konsentrasjonen av analytt i
prøven
![Page 16: Validering av kjemiske analysemetoder](https://reader034.fdocument.pub/reader034/viewer/2022042615/55c23ea8bb61ebd06e8b47f3/html5/thumbnails/16.jpg)
Linearitet
Ikke alltid relevant
Ikke et krav at metoden skal være linear
Lineær i kalibreringsområdet
![Page 17: Validering av kjemiske analysemetoder](https://reader034.fdocument.pub/reader034/viewer/2022042615/55c23ea8bb61ebd06e8b47f3/html5/thumbnails/17.jpg)
Linearitet
Metning av detektor
Deteksjonsgrense
![Page 18: Validering av kjemiske analysemetoder](https://reader034.fdocument.pub/reader034/viewer/2022042615/55c23ea8bb61ebd06e8b47f3/html5/thumbnails/18.jpg)
Linearitet X/Y diagram
![Page 19: Validering av kjemiske analysemetoder](https://reader034.fdocument.pub/reader034/viewer/2022042615/55c23ea8bb61ebd06e8b47f3/html5/thumbnails/19.jpg)
Linearitet residualdiagram
![Page 20: Validering av kjemiske analysemetoder](https://reader034.fdocument.pub/reader034/viewer/2022042615/55c23ea8bb61ebd06e8b47f3/html5/thumbnails/20.jpg)
Linearitet konstant respons-diagram
Lineært område
![Page 21: Validering av kjemiske analysemetoder](https://reader034.fdocument.pub/reader034/viewer/2022042615/55c23ea8bb61ebd06e8b47f3/html5/thumbnails/21.jpg)
Linearitet
Minst 6 konsentrasjonsnivåer, jevnt fordelt
QL til 120% av kalibreringsområdet
Anbefalte data
![Page 22: Validering av kjemiske analysemetoder](https://reader034.fdocument.pub/reader034/viewer/2022042615/55c23ea8bb61ebd06e8b47f3/html5/thumbnails/22.jpg)
Linearitet
X/Y plott med lineær regresjon og korrelasjon
Residualer mot konsentrasjoner (X-verdier)
Residualer mot respons (Y-verdier)
Konstant-responsdiagram
Anbefalte diagrammer
![Page 23: Validering av kjemiske analysemetoder](https://reader034.fdocument.pub/reader034/viewer/2022042615/55c23ea8bb61ebd06e8b47f3/html5/thumbnails/23.jpg)
Deteksjonsgrensen til en analytisk
prosedyre er den minste mengden
av analytt i en prøve som kan
skilles fra en blankprøve.
![Page 24: Validering av kjemiske analysemetoder](https://reader034.fdocument.pub/reader034/viewer/2022042615/55c23ea8bb61ebd06e8b47f3/html5/thumbnails/24.jpg)
Deteksjonsgrense
Signal til støy-forhold (S/N)
Måling av blank
Fortynningsrekke ned mot deteksjonsgrensen
![Page 25: Validering av kjemiske analysemetoder](https://reader034.fdocument.pub/reader034/viewer/2022042615/55c23ea8bb61ebd06e8b47f3/html5/thumbnails/25.jpg)
Deteksjonsgrense ved signal til støy
Støy
Signal
DL= 3 x støy-
signalet
![Page 26: Validering av kjemiske analysemetoder](https://reader034.fdocument.pub/reader034/viewer/2022042615/55c23ea8bb61ebd06e8b47f3/html5/thumbnails/26.jpg)
Deteksjonsgrense ved blankmåling
~0,13 % av blanke vil gi et resultat >3s
(Dette er ikke helt sant)
![Page 27: Validering av kjemiske analysemetoder](https://reader034.fdocument.pub/reader034/viewer/2022042615/55c23ea8bb61ebd06e8b47f3/html5/thumbnails/27.jpg)
Deteksjonsgrense ved blankmåling
Mulig feil
50% av resultatene vil bli satt lik 0
![Page 28: Validering av kjemiske analysemetoder](https://reader034.fdocument.pub/reader034/viewer/2022042615/55c23ea8bb61ebd06e8b47f3/html5/thumbnails/28.jpg)
Deteksjonsgrense ved fortynningsrekke
Usikkerhet (σ) i skjæringspunktet
Usikkerhet (σ) i stigningstallet
DL=3,3 σStigningstall
![Page 29: Validering av kjemiske analysemetoder](https://reader034.fdocument.pub/reader034/viewer/2022042615/55c23ea8bb61ebd06e8b47f3/html5/thumbnails/29.jpg)
Deteksjonsgrense: Måling av blank 1
Korrigerer ikke for snittmåling
av blank
DL = X + 3SD
Korriger for snitt ≠ 0
DL = 4,02
Nr. Resp1 3,172 2,633 3,444 2,595 3,286 3,297 2,748 3,189 2,73
10 3,4111 2,7212 2,5013 2,7514 3,1415 3,46SD 0, 34DL 1,02 (3xSD)
![Page 30: Validering av kjemiske analysemetoder](https://reader034.fdocument.pub/reader034/viewer/2022042615/55c23ea8bb61ebd06e8b47f3/html5/thumbnails/30.jpg)
Deteksjonsgrense: Måling av blank 2
Estimert deteksjonsgrense
ligger lavere enn eneste måling
≠ 0.
For lite oppløsning i avlesning
til å gi et godt mål på variasjon
i blank.
Nr. Resp1 0,02 0,03 0,04 0,05 0,06 0,07 0,18 0,09 0,0
10 0,011 0,012 0,013 0,014 0,015 0,0
Snitt 0,0SD 0,03DL 0,09 (3xSD)
![Page 31: Validering av kjemiske analysemetoder](https://reader034.fdocument.pub/reader034/viewer/2022042615/55c23ea8bb61ebd06e8b47f3/html5/thumbnails/31.jpg)
Kvantifiseringsgrensen til en
analytisk prosedyre er den minste
mengden av analytt i en prøve som
kan kvantifiseres med en gitt
nøyaktighet.
![Page 32: Validering av kjemiske analysemetoder](https://reader034.fdocument.pub/reader034/viewer/2022042615/55c23ea8bb61ebd06e8b47f3/html5/thumbnails/32.jpg)
Kvantifiseringsgrense
Måling av blank
Fortynningsrekke
Måling av usikkerhet
![Page 33: Validering av kjemiske analysemetoder](https://reader034.fdocument.pub/reader034/viewer/2022042615/55c23ea8bb61ebd06e8b47f3/html5/thumbnails/33.jpg)
Kvantifiseringsgrense ved blankmåling
50% av prøvene vil bli angitt som blank
![Page 34: Validering av kjemiske analysemetoder](https://reader034.fdocument.pub/reader034/viewer/2022042615/55c23ea8bb61ebd06e8b47f3/html5/thumbnails/34.jpg)
Kvantifiseringsgrense ved blankmåling
0,13% av prøvene vil bli angitt som blank
![Page 35: Validering av kjemiske analysemetoder](https://reader034.fdocument.pub/reader034/viewer/2022042615/55c23ea8bb61ebd06e8b47f3/html5/thumbnails/35.jpg)
Kvantifiseringsgrense ved blankmåling
![Page 36: Validering av kjemiske analysemetoder](https://reader034.fdocument.pub/reader034/viewer/2022042615/55c23ea8bb61ebd06e8b47f3/html5/thumbnails/36.jpg)
Kvantifiseringsgrense ved usikkerhet
Krav til spredning (CV)
Kravet må være relatert til metodens bruk
Minst seks replikater nær
kvantifiseringsgrense
![Page 37: Validering av kjemiske analysemetoder](https://reader034.fdocument.pub/reader034/viewer/2022042615/55c23ea8bb61ebd06e8b47f3/html5/thumbnails/37.jpg)
Deteksjonsgrense og kvantifiseringsgrense
Deteksjonsgrense viser at prøven ikke er
blank
Kvantifiseringsgrense er et resultat med
usikkerhet
Kvantifiseringsgrense kan presse ned mot
deteksjonsgrensen, om økt usikkerhet er
akseptabelt