TAVAN 2014 - CER

PRUEBA DE EFICACIA DEL PRODUCTO BACTOFUS EN EL CONTROL DE Botryosphaeria sp., Pseudomona syringae pv. syringae Y Botrytis cinerea

EN ARÁNDANOS (Vaccinium corymbosum) cv O’NEAL.

20

13

-20

14

EN

SA

YO

TA

VA

N

BA

CT

OF

US

CER Departamento de Fitopatología

www.cerosario.cl 2 2

ÍNDICE

PRUEBA DE EFICACIA DEL PRODUCTO BACTOFUS EN EL CONTROL DE BOTRYOSPHAERIA SP.,

PSEUDOMONA SYRINGAE PV. SYRINGAE Y BOTRYTIS CINEREA EN ARÁNDANOS (VACCINIUM

CORYMBOSUM) CV O’NEAL. ........................................................................................................................ 3

RESUMEN ....................................................................................................................................................... 3

OBJETIVO ....................................................................................................................................................... 4

ANTECEDENTES GENERALES .......................................................................................................................... 5

Lugar ......................................................................................................................................................... 5

Datos del cultivo ....................................................................................................................................... 5

Datos meteorológicos .............................................................................................................................. 7

Datos meteorológicos .............................................................................................................................. 7

MATERIALES Y MÉTODOS .............................................................................................................................. 9

Evaluaciones ........................................................................................................................................... 11 Pinta ..................................................................................................................................................................... 11 Cosecha ................................................................................................................................................................ 11 Calidad de la fruta .............................................................................................................................................. 11

POSCOSECHA .................................................................................................................................................. 11

Diseño experimental y análisis estadístico .......................................................................................... 12

RESULTADOS ................................................................................................................................................ 13 Pinta ..................................................................................................................................................................... 13 Cosecha ................................................................................................................................................................ 14 Poscosecha .......................................................................................................................................................... 16

CONCLUSIONES ........................................................................................................................................ 19

BIBLIOGRAFÍA .......................................................................................................................................... 20

ANEXO ........................................................................................................................................................ 21



PRUEBA DE EFICACIA DEL PRODUCTO BACTOFUS EN EL CONTROL DE

Botryosphaeria sp., Pseudomona syringae pv. syringae y Botrytis cinerea EN ARÁNDANOS (Vaccinium corymbosum) cv O’NEAL.

RESUMEN

A fin de evaluar la eficacia del producto Bactofus sobre el control del hongo de la madera

Botrysphaeria sp. y cáncer bacterial causado por la bacteria Pseudomona syringae pv.

syringae, se emplazó un estudio en un huerto de arándanos con sintomatología de cáncer

bacterial ubicado en la comuna de Chimbarongo (71°0'46.61"O– 34°43'23.27"S), VI Región,

Chile.

Se utilizaron plantas de arándanos (Vaccinium corymbosum) cv. O’Neal, plantadas el año

2006 en un marco de plantación de 2,0 x 0,7 m y conducidos bajo el sistema arbustivo. Este

ensayo se llevó a cabo desde el día 07 de Noviembre de 2013 hasta el día 06 de Diciembre de

2013.

A fin de cumplir con el objetivo planteado, se establecieron 3 tratamientos, constituidos por

cuatro repeticiones: (T0) control sin aplicación; (T1) tres aplicaciones de Bactofus a razón de

416 cc/hl; y (T2) una aplicación DM-31, a razón de 500 cc/hl y dos aplicaciones de Teldor 50%

WP, a razón de 100 cc/hl. Las variables evaluadas por tratamiento fueron: (a) identificación

de la presencia de patógenos en el sector del ensayo previo al inicio de las aplicaciones de

precosecha contempladas en el ensayo, mediante análisis fitopatológico in vitro; (b)

identificación in vitro, de la presencia de fitopatógenos tales como Pseudomona syringae pv.

syringae y Botryophaeria sp., en plantas completas previo a la cosecha; (c) parámetros de

calidad de la fruta al momento de cosecha como firmeza, concentración de sólidos solubles y

calibre; y, (d) porcentaje de frutos dañados por los diferentes patógenos evaluados a los 15 y

30 días de almacenamiento en atmosfera regular (± 0 °C) y mantenido unos días a

temperatura ambiente.

El sector del huerto seleccionado para el ensayo fue homogéneo y al analizar las muestras, in

vitro, no presentó desarrollo de Pseudomona syringae pv. syringae y Botryophaeria sp. En las

evaluaciones realizadas previo a cosecha se identificó a nivel in vitro la presencia de

Botryosphaeria sp. A cosecha, no se obtuvieron diferencias estadísticamente significativas

entre los tratamientos para los parámetros de calidad evaluados. Sin embargo, durante

poscosecha los programas fúngicos correspondientes al tratamiento 1 (Bactofus) y al

tratamiento 2 (campo: una aplicaciones de DM-31 y dos aplicaciones de Teldor 50% WP)



tuvieron un control efectivo sobre Botrytis cinerea, que les permitió diferenciarse

estadísticamente al tratamiento 0 correspondiente al testigo absoluto del ensayo.

OBJETIVO

Evaluar el efecto del productos Bactofus representados por la empresa Tavan® en el control de Botryosphaeria sp., Pseudomona syringae pv. syringae y Botrytis cinerea en arándanos (Vaccinium corymbosum) cv O’Neal.



ANTECEDENTES GENERALES

Lugar

El ensayo se realizó en un huerto ubicado en la comuna de Chimbarongo (71°0'46.61"O– 34°43'23.27"S), VI Región, Chile.

Datos del cultivo

Nombre científico Vaccinium corymbosum L.

Variedad utilizada O´Neal

Año de plantación 2006

Distancia de plantación 2,0 m x 0,7 m

Sistema de conducción Arbustivo

Duración del ensayo 07 de Noviembre 2013 – 06 de Diciembre 2013

Figura 1. Fotografía representativa del sector del ensayo en precosecha.



Figura 2. Fotografía representativa de plantas con muertas y sintomatología de Pseudomona syringae pv.

syringae en plantas de arándanos del ensayo.



Datos meteorológicos

Todos los datos climáticos fueron obtenidos de una estación meteorológica ubicada en el Liceo Agrícola El Carmen en la comuna de San Fernando, cercana al lugar donde el ensayo fue emplazado. El Cuadro 1 y las Figuras 3-4 muestran el registro de las temperaturas mínimas y máximas y las precipitaciones durante el periodo de duración del ensayo.

Cuadro 1. Media aritmética mensual de temperatura mínima, temperatura máxima y oscilación térmica y precipitación acumulada mensual durante el periodo de ensayo.

Mes

Temperatura Precipitación

Máxima Mínima Oscilación

--------------------------------------°C----------------------------------------------- mm

Septiembre 18,84 1,82 9,85 1,30

Octubre 24,09 7,13 14,96 1,90

Noviembre 28,72 7,94 17,80 0,50

Diciembre 31,60 8,32 19,51 0,20

Cuadro 2. Registro de eventos de helada previo al periodo de ensayo: fecha de ocurrencia; temperatura mínima, y; duración.

Fecha T° Duración

------------------------°C------------------- Horas

17-09-2013 -2,14 -

23-09-2013 -0,19 -

28-09-2013 -0,48 -

29-09-2013 -1,36 -

Cuadro 3. Registro de las temperaturas máximas, mínimas y la oscilación de éstas, durante los días en que se efectuaron las aplicaciones del ensayo.

Mes

Temperaturas en el día de las Aplicaciones

Máxima Mínima Oscilación

--------------------------------------°C-----------------------------------------------

08-11-2013 28,25 7,173 16,58

21-11-2013 34,75 9,38 21,77

11-12-2013 27,79 7,421 17,89



Figura 3. Media mensual de temperatura máxima, mínima y oscilación térmica para el periodo de estudio.

Figura 4. Precipitación acumulada mensual para el periodo de estudio.

Cosecha



MATERIALES Y MÉTODOS

El ensayo estuvo constituido por tres tratamientos compuestos por cuatro repeticiones cada uno, estableciéndose todas las repeticiones dentro de dos hileras del huerto. Cada repetición constó de 25 plantas, las cuales fueron aplicadas en su totalidad, pero evaluadas solo las 5 centrales, dejando cinco plantas de borde (aplicadas) entre repeticiones. El detalle de cada uno de los tratamientos se presenta en el Cuadro 4. Cuadro 4. Descripción de los tratamientos realizados.

Las aplicaciones fueron realizadas mediante el empleo de una motobomba conectada a un pitón con boquilla que, a la presión utilizada, permitía un caudal de 1,6 litros por minuto. Las dosificaciones fueron llevadas a litros a aplicar por planta, en base al marco de plantación dado, y fueron realizadas buscando un mojamiento equivalente a 500 l/ha. El ensayo utilizó una superficie total de 420 m2 en los cuales se sortearon los tratamientos en un diseño completamente aleatorizado.

Tratamiento Producto

Dosis Dosis Mojamiento N° de

aplicaciones Momento de

aplicación Fecha de

aplicación

-cc o g/hl-

l o g /ha

----l/ha----

T0 - - - - -

T1 Bactofus 416

2,5 500 5

30 DAC

21 DAC

Poscosecha

Crecimiento

de Brotes

20 DDA crec. brotes

08 nov 20013

21 nov 2013

11 dic 2013

septiembre 2014

octubre 2014

T2

DM-31 Teldor 50% WP

A definir (Testigo campo)

500 100

-

0,5 0,5

- 500

1 + 2 + -

33 DAC

21 DAC Poscosecha

Crecimiento

de Brotes

20 DDA crec. brotes

08 nov 20013

21 nov 2013

11 dic 2013

septiembre 2014

octubre 2014



Cuadro 5. Descripción de unidades experimentales evaluadas.

Número de tratamientos 3

Repeticiones 4

Número de árboles por repetición 25

Figura 3. Arándanos con desarrollo miceliar de Botrytis cinerea, observados durante las evaluaciones realizadas

en poscosecha.



Evaluaciones

Pinta

Identificación e incidencia: 30 días previos a cosecha

PREVIO A LAS APLICACIONES

Previo a las aplicaciones correspondientes a precosecha, se tomaron muestras de 4 ramillas por repetición, cada ramilla tenía al menos 10 frutos. Estas ramillas con frutos fueron enviados a laboratorio para evaluar la incidencia in vitro de Botryosphaeria sp. y Pseudomona syringae pv. syringae.

Cosecha

Previo a comenzar la cosecha, se tomó una muestra correspondiente a una planta completa de

arándanos por tratamiento, con sintomatología de muerte parcial aérea, la cual fue llevada a

laboratorio para la identificación del patógeno o agente causal que estaba provocando la muerte

progresivas de las plantas.

La cosecha se realizó el día 06 de noviembre del 2013, oportunidad en la cual se cosecharon 2

cajas o clamshell (510 gramos) por repetición, eligiéndose frutos sanos y con criterio de cosecha

de mercado, que fueron embalados y almacenados en atmosfera regular a 0°C, embalándose 8

cajas por tratamiento.

Calidad de la fruta

En una muestra de 40 frutos de las plantas centrales de cada unidad experimental se medió: Peso de fruto, mediante una balanza digital, expresando el resultado en gramos; calibre, según el diámetro ecuatorial de cada fruto con un calibrador metálico, expresando el resultado en mm; firmeza expresado en unidades de firmtech y la concentración de sólidos solubles expresado como °Brix.

Poscosecha

Transcurrido 15 y 30 días de almacenamiento de la fruta del ensayo en atmosfera regular, se procedió a dejarla a temperatura ambiente. Inmediatamente después de retirar la fruta de la cámara de frío, se evaluó la condición en que se encontraba, determinando si presentaban o no algún grado de pudriciones causada por algún hongo. Los frutos que presentaron pudriciones, se clasificaron de acuerdo al agente causal (Botrytis cinerea, Botryosphaeria sp., Mucor sp. y Penicillium sp.) y fueron pesados de acuerdo a estas clasificaciones, sacando una relación entre el peso total de la caja y el peso de la fruta clasificada con pudriciones para obtener el porcentaje de infección en poscosecha.



Después de esta evaluación, la fruta se dejó a temperatura ambiente ± 20°C y se evaluó al 7°, y 9° día, con los mismos parámetros anteriormente descritos.

Diseño experimental y análisis estadístico

Se utilizó un diseño completamente aleatorizado con 3 tratamientos y 4 repeticiones de 25 plantas cada una, montado sobre dos hileras. Para comparar los tratamientos, los resultados de las evaluaciones tanto de aquellos obtenidos desde laboratorio como de terreno (evaluación in vitro, cosecha y poscosecha) fueron analizados mediante análisis de la varianza (ANOVA) a un nivel de significancia del 95%. Cuando los supuestos de homocedasticidad y normalidad de residuos estuvieron comprometidos para alguna variable, transformaciones estadísticas fueron realizadas sobre los datos, sin embargo, si estos aún no cumplían con los supuestos necesarios para el ANOVA, fue utilizado el análisis de la varianza no paramétrico de Kruskal-Wallis.



RESULTADOS

Pinta

Identificación e incidencia: 30 días previos a cosecha

En la carga inicial del predio antes de iniciar las aplicaciones correspondientes a precosecha, no se detectó la presencia in vitro de Botryosphaeria sp. (Anexo 1) ni de Pseudomona syringae pv. syringae (Cáncer bacterial; Anexo 2), en las muestras enviadas a laboratorio, para ninguno de los tratamientos, aunque en evaluaciones realizadas in situ en el huerto, se pudo observar sintomatología de cáncer bacterial (Guerrero y Lobos, 1989; Kałużna et al., 2013; Anexo 4 y 5) en hojas (Figura 2 y 3).

Figura 4. Hojas de arándanos con sintomatología de Pseudomona syringae pv. syringae previo al inicio del

ensayo.



Cosecha

En la muestra correspondiente a una planta completa de arándanos por tratamiento, se identificó

la presencia de Phytophthora sp. y Botryosphaeria sp. como patógeno causante de la muerte

progresiva de las plantas (Anexo 3), patógenos que anteriormente no pudieron ser identificados a

nivel in vitro.

La cosecha se realizó el día 06 de diciembre del 2013, momento en el cual se realizaron

evaluaciones de calidad de la fruta, con el fin de verificar si existía alguna diferencia en la fruta

entre los tratamientos, posterior a las aplicaciones.

Los parámetros de calidad, correspondiente a firmeza (Figura 5) y concentración de sólidos

solubles (Figura 6), no presentaron diferencias estadísticamente entre los tratamientos (p-

valor>0,05), tal como se observa en el Cuadro 6.

Cuadro 6. Medias, desviación estándar (D.E.) y p-valor asociado al ANOVA, realizado para las evaluaciones de los parámetros de calidad correspondientes a firmeza y concentración de sólidos solubles al momento de cosechar.

TRATAMIENTO

Firmeza Concentración de Sólidos Solubles

lbs/pulg2 ° Brix

MEDIA D.E MEDIA D.E

0 Testigo Absoluto 249,64 15,77 8,72 1,51

1 Programa Tavan 249,60 8,60 8,49 2,81

2 Programa Campo 274,96 20,91 8,93 0,86

p-valor 0,0804 0,9490

Figura 5. Gráfica que presenta la firmeza de la fruta al momento de cosecha, evaluada por

tratamiento. No se encontraron diferencias de significancia estadística entre tratamientos.



Figura 6. Gráfica que presenta la concentración de sólidos solubles de la fruta al momento de cosecha,

evaluada por tratamiento. No se encontraron diferencias de significancia estadística entre

tratamientos.

La fruta cosechada se agrupó principalmente entre calibres menores a 15 hasta 16 (mm), no

presentándose diferencias estadísticas entre los tratamientos (p-valor >0,05) como se observa en

el cuadro 7 y figura 7.

Cuadro 7. Medias, desviación estándar (D.E.) y p-valor asociado al ANOVA, realizado para las evaluaciones de calibre al momento de cosechar.

Tratamiento

Distribución de calibre

< 15 15 16 17 17,5 18 19 20

Media D.E. Media D.E. Media D.E. Media D.E. Media D.E. Media D.E. Media D.E. Media D.E.

Testigo Absoluto 30,0 27,0 22,0 12,0 20,0 9,8 8,0 5,7 7,0 8,3 5,0 7,6 5,0 10,0 3,0 6,0

Programa Tavan 43,0 22,2 22,0 5,2 21,0 8,3 8,0 7,3 4,0 8,0 1,0 2,0 0,0 0,0 1,0 2,0

Programa Campo 37,0 21,0 18,0 4,0 32,0 16,3 10,0 5,2 2,0 4,0 0,0 0,0 1,0 2,0 0,0 0,0

p-valor 0,7446 0,7455* 0,3357 0,8688 0,6149 0,4909 0,4758 0,5217

*Prueba realizada mediante el análisis no paramétrico de Kruskal-Wallis.



Figura 7. Gráfica que presenta la concentración de sólidos solubles de la fruta al momento de cosecha,

evaluada por tratamiento. No se encontraron diferencias de significancia estadística entre

tratamientos.

Poscosecha

La fruta fue cosechada según los parámetros de calidad requeridos, y se mantuvo por 15 y 30 días

a 0 oC, con la finalidad de simular venta en un mercado exterior de destino y así poder evaluar el

desarrollo de los diferentes hongos.

Primera apertura: 15 días a 0 °C + días a Ta ambiente

Al realizar una evaluación del daño por pudriciones acumulativas clasificadas por patógeno y a la

vez por tratamiento, se identificó la presencia solo de Botrytis cinerea, con una mayor incidencia

en el tratamiento testigo absoluto (13,35 ± 6%) y un menor porcentaje de incidencia en los

tratamientos 1 (4,72 ± 3%) y 2 (1,85 ± 1%) correspondientes al programa Tavan y al programa del

campo, respectivamente, diferenciándose éstos tratamientos del tratamiento testigo absoluto

(Cuadro 8).



Cuadro 8. Medias, desviación estándar (D.E.) y p-valor asociado al ANOVA, realizado para las evaluaciones de pudriciones presentes en poscosecha, luego de mantener la fruta por un periodo de 15 días a 0°C.

TRATAMIENTO

Poscosecha (15 días en atmosfera regular)

Botrytis cinerea (%)

MEDIA D.E

0 Testigo Absoluto 13,35 b1 6,19

1 Programa Tavan 4,72 a 3,03

2 Programa Campo 1,85 a 1,37

p-valor 0,0079 1 Letras distintas indican que existen diferencias con significancias estadística.

Figura 8. Gráfica que presenta la incidencia (%) de Botrytis cinerea, luego de haber mantenido la fruta

por 15 días en atmosfera regular (± 0°C), evaluada por tratamiento. Se encontraron diferencias de

significancia estadística entre tratamientos.

Segunda apertura: 30 días a 0 °C + días a Ta ambiente

En las pudriciones acumulativas clasificadas por patógeno y a la vez por tratamiento, se identificó

la presencia de Botrytis cinerea, Botryosphaeria sp., Penicillium sp. y Mucor sp.

El principal patógeno que se desarrolló durante esta evaluación fue Penicillium sp., no

obteniéndose diferencias estadísticamente significativas entre los tratamientos, semejante a lo

ocurrido con Botrytis cinerea en que los tratamientos correspondientes al programa Tavan (3,6 ±

4%) y al programa del campo (2,7 ±4%) tuvieron una menor incidencia de este patógeno con

respecto al tratamiento testigo absoluto (9,7 ±5%), sin embargo estas diferencias numéricas no

fueron estadísticamente significativas entre los tratamientos (Cuadro 9, Figura 9).

b a a



Cuadro 9. Medias, desviación estándar (D.E.) y p-valor asociado al ANOVA, realizado para las evaluaciones de pudriciones presentes en poscosecha, luego de mantener la fruta por un periodo de 30 días a 0°C.

TRATAMIENTO

Poscosecha (30 días en atmosfera regular)

Porcentaje acumulado de patógenos

Botryosphaeria sp. Penicillium sp. Botrytis cinerea Mucor sp.

MEDIA D.E MEDIA D.E MEDIA D.E MEDIA D.E

0 Testigo Absoluto 0,62 0,86 8,84 5,73 9,67 5,41 0,08 0,15

1 Programa Tavan 1,30 1,89 9,32 2,89 3,64 3,57 0,11 0,23

2 Programa Campo 0,63 0,48 7,58 6,70 2,69 3,72 0,00 0,00

p-valor 0,6806 0,8946 0,0957 0,6011

*Prueba realizada mediante el análisis no paramétrico de Kruskal-Wallis.

Figura 9. Gráfica que presenta la incidencia (%) de Botrytis cinerea, Penicillium sp., Botryosphaeria sp.,

y Mucor sp. luego de haber mantenido la fruta por 30 días en atmosfera regular (± 0°C), evaluada por

tratamiento. No se encontraron diferencias de significancia estadística entre tratamientos.



CONCLUSIONES

Según los resultados obtenidos en las condiciones del presente ensayo se puede concluir que:

El huerto seleccionado presentaba una condición homogénea al inicio del ensayo, analizándose

de forma in vitro, la presencia de bacterias u hongos fitopatógenos, no detectándose la

presencia de Pseudomona syringae pv. syringae ni de Botryosphaeria sp.

Previo a cosecha, en plantas evaluadas in vitro no se detectó la presencia de la bacteria Pseudomona syringae pv. Syringae, pero sí de los hongos Botryosphaeria sp. y Phytophthora sp.

Los parámetros de calidad evaluados a cosecha, tales como firmeza y concentración de sólidos solubles, junto con la evaluación de la distribución de los calibres de la fruta cosechada, no presentaron diferencias estadísticamente significativas entre los tratamientos.

Durante la poscosecha, se pudo observar un efecto de control, estadísticamente significativos,

de los tratamientos 1, correspondiente al programa Tavan (Bactofus) y el tratamiento 2, correspondiente programa del campo, en la disminución de la incidencia de Botrytis cinerea en frutos de arándanos luego de mantener la fruta por 15 días en atmosfera regular (±0°C).



BIBLIOGRAFÍA

Guerrero, J. y W. Lobos. 1989. Pseudomona syringae en arándanos alto en el sur de Chile.

Agricultura técnica. 49(3): 224-227.

Kałużna M., J. Puławska, B. Meszka. 2013. A new bacterial disease on bluberry (Vaccinium

corymbosum) caused by Pseudomonas spp. Journal of plant protection research. 53(1): 32-36.



ANEXO

Anexo 1. Informe fitopatológico emitido por un Laboratorio, de muestras de hojas y frutos

obtenidas de las plantas del ensayo antes de comenzar las aplicaciones de precosecha, con el

objetivo de evaluar Botryosphaeria sp.



Anexo 2. Informe fitopatológico emitido por un Laboratorio, de muestras de hojas y frutos

obtenidas de las plantas del ensayo antes de comenzar las aplicaciones de precosecha, con el

objetivo de evaluar Pseudomona syringae pv. syringae.



Anexo 3. Informe fitopatológico para identificación de patógenos asociados, emitido por un

Laboratorio, de muestras de una planta completa obtenidas desde el ensayo al momento de

cosecha.



Anexo 4. Imagen obtenida desde el artículo escrito por Guerrero y Lobos (1989) en la revista “Agricultura técnica” (para más información ver bibliografía).



Anexo 5. Imagen obtenida desde el artículo escrito por Kałużna et al. (1989) en la revista “Journal

of plant protection research” (para más información ver bibliografía).

TAVAN 2014 - CER

Documents

Transcript of TAVAN 2014 - CER