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Citometra de flujo:Principios b

Lic.TM. Jeniffer A

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Qu es Citometra de flujo?

Es una tcnica que mide las caractersticas fsicaqumicas de una clula en una corriente de flujo

CITOMETRA DE FLUJOClula Medida Movimiento

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Citmetro de Flujo: Componentes bsicos

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Sistema de fluidos

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Sistema de fluidos

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Enfoque hidrodinmico

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Sistema ptico

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Fuente de luz

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Detectores

FOTODIODO FOTOMULTIP

(SSC y fluores

SEAL LUM

SEAL EL

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Lser

Lser

Lser

Voltaje

Voltaje

Voltaje

Time

Time

Time

Creacin de un pulso de voltaje

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Sistema informtico

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Resumen

Sistema de fluidos :

Circulacin celular por reas de registro y eliminacin.

Sistema ptico :

Crea seal ptica (lser), deteccin y amplificacin.

Sistema elctrico :

Transformacin de seal ptica en elctrica, cuantificac

Sistema informtico:

Programasde adquisicin y anlisis, almacn de inform

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Qu puede decirnos de las clulas?

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FSC

Dispersin frontal

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SSCDispersin latera

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Cmo interpreto la informacin?

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Cmo se emite la fluorescencia?

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Cmo interpreto la informacin?

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Espectro de excitacin de Fluorescen

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Tincin con dos colores

Ti i t l

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Tincin con tres colores

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Tincin con cuatro colores

Ti i t l

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Tincin con cuatro colores

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Evolucin en el tiempo

Equipos

Software

Reactivos

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1969

1973

1953

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Aplicaciones

http://www.institutoroche.es/web/images/nanoproteomica_figura2.jpghttp://www.institutoroche.es/web/images/nanoproteomica_figura2.jpg

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Aplicaciones

Inmunofenotipo:- Leucemias/linfomas (linaje y maduracin, Agasociados, linaje ambiguo, EMR)

- Subpoblaciones linfocitos T (HIV+, otros )- Cel. Progenitoras: CD34+ (TAMO)- Hemoglobinuria paroxstica nocturna (CD56, CD59- Espondilitis anquilosante (HLA-B27)

DNA anlisis: Ciclo celular, ploida, apoptosis,viabilidad.

Iones y enzimas intracelulares: Flujo de Calcio RNA anlisis: Recuento de reticulocitos

Inmunidad: Citoquinas

Hibridizacin in situ: Deteccin de DNA viral

Fagocitosis: Neutrfilos y actividad fagoctica

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jazana@cytometricb

Gracia