ORGANIZACION PANAMERICANA DE LA SALUD

XXVI REUNION DEL COMITE ASESOR DEINVESTIGACIONES EN SALUD

Rio de Janeiro, Brasil3 - 7 de agosto de 1987

P-. ,

INVESTIGACION SOBRE LA TECNOLOGIA RELATIVA ALDNA RECOMBINANTE

NORMAS DE LA OPS/OMS

Este documento no constituye una publicación oficial. No debe ser objetode reseña, resumen ni cita sin la autorización de la Organización Paname-ricana de la Salud (OPS). Las declaraciones consignadas en artículosfirmados son la responsabilidad exclusiva de sus autores.

OPS/CAIS/26/87.7Original: Inglés

INVESTIGACION SOBRE LA TECNOLOGIA RELATIVA AL DNA RECOMBINANTE

NORMAS DE LA OPS

1. INTRODUCCION

La posibilidad de alterar diversas formas de vida por medio de laingenieria genética ha suscitado planteamientos de orden ético yfuncional. En la década de los setenta existió gran inquietud por laposibilidad de crear riesgos que no pudieran controlarse. Algunas de lasprimeras pautas de los Institutos Nacionales de Salud reflejan el sentir

~~ ~ de entonces: (1) las directrices representan un compromiso entre dostemores (i) engendro peligroso de nuevos organismos biológicos y (ii)exceso de reglamentación en la búsqueda de nuevos conocimientos. En

,? ~ fecha reciente varios países han intentado acabar con esas inquietudesestableciendo normas y procedimientos que regulan los diversos usos de lanueva biotecnologia. (2,3)

La nueva biotecnologia demuestra grandes avances en la industriafarmacéutica, aunque su desarrollo recibe el estímulo de interesescomerciales, especialmente en la agricultura y en la industria alimen-ticia. Las organizaciones de salud examinan con mayor la parte de esabiotecnología que se refiere al DNA recombinante (DNAr). Hay diferentes

' _ definiciones para describir la investigación sobe éste, pero lasrecomendadas en las pautas de la Comunidad Europea son tan apropiadascomo cualesquiera de las mejores. (4)

Se define así:

La formación de nuevas combinaciones de material genético por la-. inserción de moléculas de ácido nucleico, producido por cualquier medio

fuera de la célula, en virus, plásmido bacterino u otro sistema vector, afin de permitir su incorporación en un organismo receptor en el que noexiste en forma natural y en el cual puede continuar propagándose.

' ~ ~2. FUNCION DE LA ORGANIZACION PANAMERICANA DE LA SALUD

La Organización Panamericana de la Salud (OPS) estima que tiene dosfunciones respecto de la regulación del uso de biotecnología:

1. Establecer procedimientos que deberán observarse cuandoparticipe directa o indirectamente en investigación u otrasactividades que comprendan DNAr.

2. Asesorar a los paises en lo relativo a fuentes de información oa pautas para experimentos que incluyan DNAr y ayudarles aestablecer sus propias normas o a modificar las existentes.

-e

- 2 - @-2-

Habrá participación directa cuando el personal de la OPS realiceinvestigación con material de DNAr, aunque en el futuro previsible estetrabajo siempre se efectuará con la colaboración de personal científicono perteneciente a la Organización. La OPS puede participar tambiénmediante concesión de donaciones a individuos o instituciones con elpropósito de efectuar investigaciones que incluyan DNAr. Por último, laOPS puede, en calidad de organismo ejecutor de un proyecto en que elpersonal nacional lleve a cabo investigaciones con DNAr.

Ninguna de estas investigaciones podrá iniciarse sin el consenti-miento expreso del Director de la OPS. El Director será asesorado por el -respectivo comité interno sobre la conveniencia de dicha investigación, yla solicitud para efectuarla debe presentarse a la Oficina de Coordina-ción de Investigaciones de la OPS, con un detallado protocolo del experi-mento. Este protocolo se someterá al análisis de un comité designado alefecto, que examinará la manera en que se pretende efectuar la investiga-ción y evaluará el riesgo potencial para el medio y las materias propues- -tas. De acuerdo con su evaluación, el Comité asesorará al Director sobrela conveniencia de aprobar tal investigación. Esta función compete en laactualidad al Comité de Etica de la OPS que en caso de ser necesario,puede consultar a expertos internos o externos.

En la evaluación de la investigación propuesta, el Comité tendrá encuenta las diversas normas de investigación regionales o internacionalesque incluyen DNAr. Algunos ejemplos de éstas son las pautas de losInstitutos Nacionales de Salud de los E.E.U.U. (5) para investigacionescon moléculas de DNAr y las consideraciones relativas a la inocuidad delde DNA presentadas por la Organización de Cooperación y DesarrolloEconómico (OCDE). (4)

3. RESPONSABILIDAD DE LOS INVESTIGADORES ANTE EL PERSONAL

Es responsabilidad del investigador principal informar plenamente asu personal sobre la naturaleza general de la investigación. El personaltendrá acceso a los protocolos que describen la investigación y a losriesgos biológicos potenciales, las precauciones que deben adoptarse ydeberá recibir instrucción sobre las prácticas y técnicas necesarias deseguridad. También se le debe informar acerca de las razones y pro-visiones relativas a cualquier medida preventiva de carácter médicorecomendada o exigida, como vacunas o muestras de líquidos biológicos.

4. ANALISIS INSTITUCIONAL

Deben existir comités de análisis institucional que examinen yaprueben todos los experimentos efectuados con DNAr. La autorización detales comités es un requisito previo para la aprobación de la OPS, peroen ningún caso determina previamente la posición que adoptará laOrganización sobre cualquier propuesta de investigación. El comité de o

\ _ ~~~~~~~~~~- 3 -

análisis institucional está integrado por miembros internos y externos dela institución. Estos deben estar familiarizados con la tecnologiarelativa al DNAr y los procedimientos básicos de contención y biosegu-ridad. Ningún miembro de un comité de análisis institucional puedepronunciarse sobre una propuesta en que participe directamente comoinvestigador principal o adjunto.

-~'Z 5. APROBACION NACIONAL

*+~ ~ La persona o institución que presente a la consideración de la OPS~ ~ ~una propuesta de investigación sobre DNAr, deberá señalar por escrito:

a) Que la investigación ha sido autorizada por las respectivas'; ~' ~~autoridades del país o de los países respectivos;

b) La situación legal del material de DNAr en el país de origen.

, > E6. PROCEDIMIENTOS PARA PRESENTAR LA SOLICITUD

Cuando se desee obtener autorización de la OPS para una investi-

gación con DNAr, el investigador presentará un protocolo a la Oficina deCoordinación de Investigaciones de la Organización.

El proceso especial de análisis institucional es quizás una aplica-ción específica de un caso general. La OPS tiene un mecanismo general derevisión del contenido técnico y de las repercusiones éticas de losprotocolos. Estas pautas para la investigación con DNAr no sustituyen,

de manera alguna, las pautas para el examen de propuestas de investiga-~, ~ ción ni las pautas ni los procedimientos de análisis seguidos por la

w rOPS/OMS en las investigaciones con sujetos humanos. Estas últimas con-tienen requisitos precisos y espcíficos con los que es necesariocumplir. (Los interessados en obtener copias de estos documentos pueden

,~, dirigirse a la Oficina de Coordinación de Investigaciones de la OPS.)

~.~ ~ El contenido del protocolo se incluye en la Sección 7. Además~> ~ deben presentarse pruebas de análisis institucional y aprobación nacional.

~' ~' 7. REQUISITOS DEL PROTOCOLO*

El protocolo preparado para presentación debe tener el formaton? ~ recomendado y contener la siguiente información general (en algunos. ~> puntos el detalle puede no ser necesario):

* * Estos requisitos se tomaron de las recomendaciones del Comité Ase-sor en DNA Recombinante de los Institutos Nacionales de Salud,adoptadas en 1985.

- 4 .

I. Diseño experimental:

Debe incluirse una descripción completa del experimento.Además del protocolo completo, se adjuntará un resumen delexperimento propuesto, que incluya los objetivos, la impor-tancia y la justificación de la solicitud. _

II. Consideraciones genéticas del organismo modificado que se -utilizará:

A. Características del organismo matriz no modificado.

1. Información sobre identificación, taxonomía, origen ycepa.

2. Información sobre ciclo reproductivo del organismo y lacapacidad de transferencia genética. *

B. Biología molecular del organismo modificado.

1. Genes incorporados

a) Origen y función de la secuencia de DNA utilizadapara modificar el organismo que se ensayará en elmedio ambiente.

b) Identificación, taxonomía, origen y cepa delorganismo donante de DNA.

2. Construcción del organismo modificado.

a) Descripción del método o de los métodos deconstrucción del vector con las moléculas inser-

-4

tadas. Inclúyanse los diagramas del caso.

b) Descripción del método de introducción del vector ,con las moléculas insertadas en el organismo que semodificará y el procedimiento de selección del -

·

organismo modificado.

c) Especificación de la cantidad y naturaleza del DNAde cualquier vector y/o donante restante en elorganismo modificado.

d) Indicación al laboratorio respecto de las condi-ciones de contención.

- 5 -,,

3. Estabilidad y expresión genética.

Presentacion de los resultados e interpretación de laspruebas preliminares destinadas a medir la estabilidad yexpresión genética del DNA introducido en el organismomodificado.

III. Consideraciones ambientales

Con la recolección de información ecológica se pretende evaluar los7> > efectos de la supervivencia, la reproducción y/o la dispersión del organismo

modificado en el medio ambiente. En este sentido, cuando corresponda y seaposible, debe proporcionarse información sobre: (i) las característicasecológicas importantes del organismo no modificado: (ii) las caracteristicascorrespondientes del organismo modificado y (iii) la función fisiológica yecológica de la secuencia genética en el donante y en el organismo o los

¥ Y- organismos modificados. Cuando corresponda y sea posible en los siguientespuntos se debe suministrar información sobre el organismo no modificado ytratar de predecir cualquier cambio que pueda causar la modificación.

A. Hábitat y distribución geográfica.

B. Factores fisicos y quimicos que pueden afectar la supervivencia, lareproducción y la dispersión.

C. Interacciones biológicas.

1. Campo de actividad del receptor.

2. Interacción con otros organismos y efectos en éstos en el medioambiente, incluidos los efectos sobre competidores, victimas,huéspedes, simbiontes, depredadores, parásitos y agentes patógenos.

3. Patogenicidad, transmisibilidad, infecciosidad, toxicidad,virulencia o estado de portador (vector) de agentes patógenos.

4. Participación en procesos biogeoquímicos o de ciclos biológicos(por ejemplo, ciclo mineral, degradación de la celulosa y lalignina, fijación de nitrógeno, degradación de plaguicidas).

: 5. Frecuencia con que las poblaciones experimentan cambios enF, características ecológicas importantes, como las enumeradas en

III-C, 1 al 4.

6. Posibilidad de intercambio de información genética entre el~*#~~ ~organismo modificado y otros organismos de la naturaleza.

-6-

IV. Experimentos en el terreno

A. Consideraciones previas

Conviene proporcionar información relativa a los efectos previstos '

del microorganismo sobre organismos receptores y no receptores de los micro-cosmos, de invernaderos y/o de ensayos en cámaras de crecimiento que simulancondiciones experimentales. Deben indicarse los métodos de detección y lasensibilidad de las técnicas de muestreo y su periodicidad. Cuandocorresponda, estos estudios deben incluir evaluación de:

1. La supervivencia del organismo modificado;

2. La duplicación del organismo modificado;

3. La propagación del organismo modificado por el viento, el agua, elsuelo, los organismos móviles y otros medios.

-4

B. Condiciones del experimento

Se necesita describir el experimento relativo a la liberación delorganismo modificado en el medio ambiente:

1. Numero de organismos y métodos de aplicación.

2. Habrá que proporcionar información, incluso diagramas, del lugar -

del experimento y su contorno inmediato y señalar las caracterís-ticas del lugar que podrían afectar la contención o la dispersión.

3. Si el organismo modificado posee un organismo receptor, indíqueselo siguiente:

a. identificación y taxonomía;

b. el mecanismo y el resultado previsto de la interacción delmicroorganismo liberado con el organismo receptor.

C. Contención

1. Convendrá indicar los procedimientos de contención en el caso deuna liberación tanto accidental como proyectada, y las medidaspara la terminación urgente del experimento.

2. Se deberán especificar las medidas de acceso y seguridad en lazona en que se realizará el experimento.

e, S

_ ~~~~~~~~~~~- 7 -1.7-~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~

D. Vigilancia

Habrá que describir los procedimientos de vigilancia y los límites de

detección relativos a supervivencia, propagación y otras interacciones del

microorganismo modificado e incluir la periodicidad del muestreo y la

justificación de los procesos de vigilancia.

V. Análisis de riesgo

Los resultados de experimentos en medios confinados artificialmente y

as' ~ una cuidadosa consideración de los aspectos genéticos, biológicos y

ecológicos de los organismos modificados y de otros permitirán hacer una

predicción razonable sobre la posibilidad de que haya o no un gran riesgo

riesgo de deterioro ambiental a consecuencia de la liberación del organismo

. ~ modificado en un terreno de experimentación en pequeña escala. Por lo

general, las vacunas y otros productos biológicos preparados con técnicas de

*> ' DNAr para utilización en seres humanos y animales tendrán limitada exposición

en el medio ambiente debido a la especificidad biológica del receptor, pero

siempre existe la posibilidad de liberación accidental. Aquí debe resumirse

la información solicitada en las Secciones II, III y IV para presentar un

análisis de los posibles riesgos del experimento tal como se ha propuesto.

Los temas pueden incluir, entre otros, los siguientes:

A. Naturaleza del organismo.

-*~~ ~1. La función del organismo no modificado en el medio ambiente del

experimento, incluso cualquier efecto negativo sobre otrosorganismos.

~+ ~~ 2. Evaluación de la posibilidad que la modificación genética

especifica (por ejemplo, eliminación, inserción, modificación de

secuencias especificas de DNA) alterare el potencial de efectos

adversos importantes.

3. Evaluación de los resultados de las pruebas realizadas en

.~ ~~ * ambientes confinados para predecir el comportamiento ecológico del

organismo modificado en relación con el organismo matriz no<~~~2~ ~modificado.

B. Naturaleza del experimento.

Es preciso analizar las siguientes características específicas de]

experimento, destinadas a minimizar los posibles efectos adversos delorganismo modificado:

1. Ubicación y área del sitio del experimento.

2. Protocolos de introducción.

-8-

3. Número de organismos y su capacidad reproductora prevista.

4. Procedimientos de emergencia para suspender el experimento.

5. Procedimientos al finalizar el experimento. -

Los detalles de las instalaciones de contención necesarias paraciertas investigaciones y el grado adecuado de seguridad biológica se hancubierto en recientes publicaciones de la OMS sobre bioseguridad en ellaboratorio.

-.

* 4 ..

-4

*'

,;

-4,

-9-

BIBLIOGRAFIA

1. Recombinant DNA Research: Beyond the NIH Guidelines, C. Grobstein.Science 194 1133-1135, 1976.

2. Report of Informal UNIDO/WHO/UNEP Working Group on BiotechnologySafety. Viena, enero de 1986.

3. International Health and Safety Regulation of Biotechnology. AMFox, J.S. Sciortino - D.C. Smith. Preparado por la Oficina de

,K~L~ ~ Evaluación Tecnológica del Congreso de los Estados Unidos.

4. Recombinant DNA Safety Considerations. Organización de Cooperación

LS.-~~ sy Desarrollo Económico, 1986.

5. Guidelines for Research involving Recombinant DNA molecules:National Institutes of Health, Department of Health and HumanServices, Federal Register, 7 de mayo de 1986.

6. Manual de Bioseguridad en el Laboratorio. OMS, 1984.

-e

DRC3527u

PAN AMERICAN HEALTH ORGANIZATION

XXVI MEETING OF THE ADVISORY COMMITTEEON HEALTH RESEARCH

Rio de Janeiro, Brazil3 - 7 August 1987

PAHO/ACHR/26/87 .,7Original: Spanish

b-. �,

RESEARCH INVOLVING RECOMBINANT DNA TECHNOLOGY

PAHO GUIDELINES

The issue of this document does not constitute formal publication. Itshould not be reviewed, abstracted or quoted without the agreement of thePan American Health Organization (PAHO). Authors alone are responsiblefor views expressed in signed articles.

' . o

,. s

RESEARCH INVOLVING RECOMBINANT DNA TECHNOLOGY

-W~~~~~ ~~PAHO GUIDELINES

rZ ~ 1. INTRODUCTION

The possibility of altering life forms by means of geneticwV ~ ~ engineering has raised several ethical and practical operational

* issues. In the decade of the seventies, there was grave concernabout the possibility of creating hazards which would be

4 uncontrollable. Some comments on the first National Institutes of:- + Health guidelines reflect the mood of that time.1 "The guidelines

represent a compromise between two fears (i) that of conceivablydangerous new biological entities and (ii) that of excessiveregulation of the search for new knowledge".1 1 More recentlyhowever, many countries have attempted to counter this fear by

~,, establishing guidelines and regulatory procedures which govern the. *- many and varied uses of the new biotechnology.2 ,3

The new biotechnology is showing rapid advance in the,~> pharmaceutical industry but there are major commercial interests

spurring development, especially in the agriculture and the foodindustry. The part of the new biotechnology which comes underclosest scrutinity in health Organizations is that related to*_ recombinant DNA. There are many definitional differences in thedescription of recombinant DNA research, but that suggested in theEuropean community guidelines is as apt as any.4

It is defined as:

The formation of new combinations of genetic material by theinsertion of nucleic acid molecules produced by whatever meansoutside the cell into any virus, bacterial plasmid or other vectorsystem so as to allow their incorporation into a host organism inwhich they do not naturally occur, but in which they are capable ofcontinued propagation.

" ~> ~ 2. ROLE OF THE PAN AMERICAN HEALTH ORGANIZATION

The Pan American Health Organization sees itself as having tworoles as far as the regulation of the use of biotechnology.

1. To establish procedures to be followed when it is directly orindirectly involved in research or other activities involvingparticularly recombinant DNA (rDNA).

-2-

2. To advise countries on the sources of information or 'guidelines for experiments involving rDNA and to assistcountries in establishing their own guidelines or modifyingsuch guidelines as exist.

PAHO is likely to be involved in rDNA research directly whenresearch is carried out by PAHO staff with rDNA material, althoughit is likely that in the foreseable future this work will always beperformed in collaboration with non-PAHO scientists. PAHO may alsobe involved by making grants to individuals or institutions for thepurpose of carrying out research involving rDNA. Finally, PAHOinvolvement may occur when the Organization is the executing agencyfor a project in which the national investigators carry out researchwhich involves rDNA.

No such research shall be initiated without the specificpermission of the Director of PAHO. The Director will be advised by -the appropriate internal PAHO committee on the propriety of suchresearch and application for permission to carry out such research 'shall be through submission of a detailed protocol of the experimentto be carried out to the PAHO Office of Research Coordination. Sucha protocol will be reviewed by the designated PAHO Committee whichwill examine the manner in which the proposed research is to becarried out and evaluate the potential risk to the environment orproposed subjects. On the basis of its evaluation the Committeewill advise the Director in writing as to whether the proposedresearch should be approved. The PAHO Ethical Committee is the bodycurrently charged with this advisory function: it may seek advicefrom experts within or outside of PAHO when it sees fit.

In assessing the proposed research the Committee will takecognizance of the various guidelines for research involving rDNAwhich have been developed in the Region or internationally.Examples of these are the guidelines for Research involvingrecombinant DNA molecules of the National Institutes of Health ofthe USA5 and the Recombinant DNA safety considerations developedfor the Organization for Economic Cooperation and Development.4 , '

Although these guidelines refer more specifically to rDNAexperiments they have to be seen in the context of PAHO's generalpolicy as regards research. The Orientation and Program Prioritiesfor PAHO during the Quadrennium 1987-1990 make special reference tothe role of PAHO in "stimulating the cycle of production,collection, critical analysis and application of acknowledge". Muchof this can only be done through research.

.1

-3-

The Managerial Strategy for the optimal use of PAHO/WHOresources refers specifically to the role of research and points outthat PAHO "will work with the countries in emphasizing theirparticular research needs" ... "The basic function of theOrganization will be one of promotion and coordination".

ve ~ Thus PAHO is committed to work with Member Countries infostering all research which will lead to solutions of problemsrelated to health, when PAHO is involved in rDNA research it willalways be in fields that are related to the basic areas of work ofthe Organization and related to the basic program goals agreed uponby the Governing Bodies.

3. RESPONSIBILITIES OF INVESTIGATORS TO STAFF

It is the responsibility of the principal investigator to inform,~ the involved staff, i.e., other research workers fully on the

general nature of the research. Staff must be shown and givenaccess to the protocols describing the research, the potentialbiohazards and the precautions to be taken; they must be fullyinstructed in the practices and techniques required to insuresafety. Staff must also be informed fully of the reasons andprovisions for any precautionary medical practices advised orrequested, such as vaccinations or collection of biological fluids.

4. INSTITUTIONAL REVIEW

There must be appropriate institutional review committees whichmust screen and give prior approval to all experiments involvingrDNA. The approval of such a committee is a prerequisite for PAHOapproval but does not in any way predetermine the position to betaken by PAHO on any single research proposal. The institutionalreview committee shall comprise members from within and outside ofthe institution. The members shall be conversant with rDNAtechnology and the basics of containment and bio safety procedures.No member of an institutional review committee may pronounce on a

'' * research proposal with which he or she is directly involved as aprincipal or coinvestigator.

5. NATIONAL APPROVAL

The individual or institution which submits an rDNA research'? ~ proposal for PAHO review must provide written evidence:

a) that the research has been approved by the appropriategovernmental authorities of the country or countries involved

b) of the legal status of the rDNA material in the country oforigin.

-4-

6. PROCEDURE FOR SUBMITTING A RESEARCH PROPOSAL

The investigator will submit a protocol to the PAHO Office of '-Research Coordination when he or she wishes to obtain PAHO approvalfor research involving rDNA. The special process of institutionalreview is perhaps a specific application of a general case. PAHOhas a general mechanism for review of protocols both for theirtechnical content and their ethical implications. These guidelinesfor rDNA research do not in any way supersede the guidelines forreview of research proposals or the PAHO/WHO guidelines and reviewprocedures for research involving human subjects. These latercontain precise and specific requirements to be met. (Copies ofthese procedural documents may be obtained from the PAHO Office ofResearch Coordination).

The protocol content is given in section 7. In addition to thisprotocol as stated above, there must be evidence of: institutionalreview and national approval as described above.

7. PROTOCOL REQUIREMENTS*

The protocol to be submittted must follow the recommended formatand must contain the following general information: detailed dataon all the points listed may not be necessary in all cases.

NB

I. Experimental design

There must be a full description of the experiment. In additionto the full protocol there must be a summary of the proposedexperiment including objectives, significance, and justification forthe request.

II. Genetic considerations of modified organism to be used

A. Characteristics of the nonmodified parental organism ':.

1. Information on identification, taxonomy, source and strain.

2. Information on organism's reproductive cycle and capacityfor genetic transfer.

* These protocol requirements are drawn essentially from therecommendations of the NIH Recombinant DNA Advising Committeeadopted in 1985.

- 5-

^ - ~ ~ B. Molecular biology of the modified organism

1. Introduced genes

a. Source and function of the DNA sequence used to modifythe organism to be tested in the environment.

,~ç~ ~ b. Identification, taxonomy, source, and strain oforganism donating the DNA.

4.

2. Construction of the modified organism

a. Describe the method(s) by which the vector withinsert(s) has been constructed. Include diagrams asappropriate.

7>~ ~ b. Describe the method of introduction of the vector

carrying the insert into the organism to be modified*>~~ ~and the procedure for selection of the modified

~~~~~, ~organism.

c. Specify the amount and nature of any vector and/ordonor DNA remaining in the modified organism.

d. Give the laboratory containment conditions.

3. Genetic stability and expression

Present results and interpretation of preliminary testsdesigned to measure genetic stability and expression of

~~> ~~ ~the introduced DNA in the modified organism.

III. Environmental considerations

The intent of gathering ecological information is to assess theeffects of survival, reproduction, and/or dispersal of the modifiedorganism in the environment. For this purpose, information shouldbe provided where possible and appropriate on: (i) relevantecological characteristics of the nonmodified organism; (ii) thecorresponding characteristics of the modified organism; and (iii)the physiological and ecological role of donated genetic sequencesin the donor and in the modified organism(s). For the following

t~ ^points, provide information where possible and appropriate on the

nonmodified organism and a prediction of any change that may beelicited by the modification.

-6-

A. Habitat and geographic distribution

B. Physical and chemical factors which can affect survival,reproduction, and dispersal

C. Biological interactions

1. Host range.

2. Interaction with and effects on other organisms in the 4

environment including effects on competitors, prey, hosts,symbionts, predators, parasites, and pathogens.

3. Pathogenicity, transmissibility, infectivity, toxicity,virulence or as a carrier (vector) of pathogens.

4. Involvement in biogeochemical or in biological cyclingprocesses (e.g., mineral cycling, cellulose and lignindegradation, nitrogen fixation, pesticide degradation).

5. Frequency with which populations undergo shifts inimportant ecological characteristics such as those listedin III-C points 1 through 4 above.

6. Likelihood of exchange of genetic information between the *modified organism and other organisms in nature.

IV. Field trials

A. Pre-field trial considerations.

Provide data related to any anticipated effects of themodified microorganism on target and nontarget organisms frommicrocosm, greenhouse, and/or growth chamber experiments thatsimulate trial conditions. The methods of detection andsensitivity of sampling techniques and periodicity of <:sampling should be indicated. These studies should include,where relevant, assessment of the following items:

1. Survival of the modified organism.

2. Replication of the modified organism.

3. Dissemination of the modified organism by -wind, water,soil, mobile organisms, and other means.

ej

2 ~~~~~~~~~~~~~~~- 7 ---7-

B. Conditions of the trial

~-'~~ ~ Describe the trial involving release of the modified organisminto the environment:

y

1. Numbers of organisms and methods of application.

2. Provide information including diagrams of the experimental*+~~ ~ location and the immediate surroundings. Describe

characteristics of the site that would influence-~~~ ~ containment or dispersal.

3. If the modified organism has a target organism, providethe following:

a. Identification and taxonomy.

b. The anticipated mechanism and result of the interaction·o~ ~ ~~between the released microorganism the target organism.

C. Containment

1. Indicate containment procedures in the event of accidentalrelease as well as intentional release and procedures foremergency termination of the experiment.

2. Specify access and security measures for the area(s) inwhich the tests will be performed.

D. Monitoring

Describe monitoring procedures and their limits of detection-*~ ~for survival, dissemination, and nontarget interactions of

the modified microorganism. Include periodicity of samplingand rationale for monitoring procedures.

* . V. Risk Analysis

Results of testing in artificial contained environments togetherwith careful consideration of the genetics, biology, and ecology ofthe nonmodified and the modified organisms will enable a reasonableprediction of whether or not significant risk of environmentaldamage will result from the release of the modified organism in thesmall-scale field test. Vaccines and other biologicals made by rDNA

~' ~ techniques for use in animals and humans will usually have verylittle environmental exposure because of biological specificity tothe host, but there is always the possibility of incidental release

-A_

8 -

to the environment. In this section, the information requested inSections II, III, and IV should be summarized to present an analysisof possible risks in the test as it is proposed. The issues -addressed might include but not be limited to the following items:

A. The nature of the organism.

1. The role of the nonmodified organism in the environment ofthe test site, including any adverse effects on otherorganisms. +

2. Evaluation of whether or not the specific geneticmodification (e.g., deletion, insertion, modification ofspecific DNA sequences) would alter the potential forsignificant adverse effects.

3. Evaluation of results of tests conducted in containedenvironments to predict the ecological behavior of themodified organism relative to that of its nonmodifiedparent.

B. The nature of the test.

Discuss the following specific features of the experimentthat are designed to minimize potential adverse effects ofthe modified organism:

1. Test site location and area.

2. Introduction protocols.

3. Numbers of organisms and their expected reproductivecapacity.

4. Emergency procedures for aborting the experiment.

5. Procedures conducted at the termination of the experiment.

Details of containment facilities necessary for specific typesof research as well as the necessary and appropriate biosafetylevels have been well discussed in a recent WHO Publication onbiosafety in the laboratory.

A

-9-

LITERATURE CONSULTED

1. Recombinant DNA research: beyond the NIH Guidelines, C.Grobstein. Science 194 1133 -1135, 1976.

2. Report of Informal UNIDO/WHO/UNEP Working Group onbiotechnology Safety - Vienna, January, 1986.

3. International Health and Safety Regulation of Biotechnology.A. M. Fox, J.S. Sciortino, D.C. Smith. Prepared for the U.S.Congress, Office of Technology Assessment.

4. Recombinant DNA Safety considerations - Organization forEconomic Cooperation and Development, 1986.

?

5. Guidelines for Research involving Recombinant DNA molecules:National Institutes of Health, Department of Health and HumanServices, Federal Register, May 7, 1986.

6. Manual de Bioseguridad en el laboratorio OMS, 1984.

p

R .1

-4~~~~~~~~~

*24.