NPS 改性支架的制备与生物学表征

报告人：李茜单 位：天津大学

目的：控制基因纳米粒时序释放 方法：利用静电纺丝技术，制备纳米纤维静电

纺丝支架。

三种纺丝方法： 方法 1 ：靶向纳米粒吸附在纤维支架缝隙中；

方法 2 ：靶向纳米粒通过静电共纺包埋在 纳米纤维中；

方法 3 ：基因纳米粒同时包载于纤维缝隙和纤维中。

通过控制静电纺丝技术工艺，精密调控基因纳米粒与纤维直径和缝隙的匹配程度，以调控释放速度。 通过释放速率的调整使基因纳米粒的释放周期（速率）与血管内皮细胞的生长周期相匹配，最终达到内皮细胞的快速增殖，使人工血管快速内皮化。 精确控制负载量和纤维材料降解速度，以实现时序控制释放，达到与内皮细胞生长周期相匹配的目的

靶向性基因纳米粒和 REDV 多肽协同修饰血管材料示意图

生物学评价基因纳米粒血液相容性评价指标

测定凝血酶原时间（ PT） 活化部分凝血酶时间（APTT） 溶血率 血小板黏附

毒性及转染率测定 MTT: 评价基因纳米粒体外细胞毒性 RT-PCR ( 聚合酶链反应法 ): 检测 ZNF580 mRNA 表达情况 中性红摄取法 : 鉴定载体材料的生物相容性 流式细胞仪 : 分析基因纳米粒对 EA. hy926 的转染效率 Western blot

目的：定量分析纳米粒选择性吸附内皮细胞能力。重点研究基因进入内皮细胞的几率和转染效率，调控纳米粒构造、所带正电荷量、 REDV 活性肽的携带量和纳米粒粒径，以实现携带基因的靶向多功能纳米粒的高选择性和高转染效率。

考察这三种修饰方法的实验结果，分析它们对细胞关键蛋白和基因表达水平的影响，促进支架内皮化过程。

观察内皮细胞形貌：激光共聚焦扫描显微镜（ LSCM ）和原子力显微镜（ AFM ）

评价三种修饰方法对靶向性基因纳米粒时序性控制释放规律，重点精确调控基因纳米粒材料结构及其在人工血管材料中的分布，以及改变材料组成，实现基因释放速度与内皮细胞生长和增殖相匹配。

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