Agnes IvanovSA Tartu Ülikooli Kliinikum

Ühendlabor

Tootja esindaja

Labor

Valideerimise andmed? Meetodi jälgitavus? Referentspiirid? Interferents? Lineaarsus? Spetsiifilisus? Tundlikus?

Tootja on meetodi valideerinud

Labori personal on koolitatud

Analüsaatorid on hooldatud

Kontrollid on piirides Referentsväärtused

avaldatud

Labor

Raviarst

Erinev standard

Määramise põhimõte ja/või reagendi omadus on erinev

Referentväärtuste määramise metoodika on erinev

Meetod peab olema jälgitav

Referentsmaterjal (CRM, NIST, WHO) Referentsmeetod (ID-GC/MS, HPLC,

…) Referentsprotseduur ( kaalumine,

ABS)

analüüs Tootja 1 Tootja 2

S,P-LH

WHO 1st IRP 68/402nd IS 80/552

2nd NIBSC 80/552

S,P-FSH

WHO 2nd IRP 78/549 WHO 2nd IRP 78/549

S,P-Testo

internal standard ID-GC/MS

S,P-PSA

internal standard WHO 96/670 (Stanford ref.standard)

S,P-fPSA

WHO NIBSC 1st 96/668

WHO NIBSC 1st 96/668

S,P-E2

internal standard ID-GC/MS

Referentsindiviidid Referentspopulatsioon Uuritavate arv

n = (100/P) – 1 (nonparametric)n=120 (parametric)

Analüüside määramine Tulemuste hindamine (nonparam/param) Referentspiirid Referentsintervallid

Method Reference interval

Lower Limit CI

Upper Limit CI

Robust (n=40)

9-60 7-12 45-71

Robust (n=80)

10-58 8-11 51-64

Non-parametric (n=120)

10-55 9-11 51-69

Using reagents X, standards Y, and instrumentation Z, we measured Analyte A on 120 apparently healthy men, aged 20 to 30. No outliers were detected by the Tukey method (1977). Using the nonparametric techique, the two highest and the two lowest values were then eliminated. The resulting reference interval includes the remaining 95% of samples.*

* C28-A3c Defining, Establishing, and Verifying Reference Intervals in the Clinical Laboratory, CLSI 2010

analüüs Tootja 1 Tootja 2

S,P-LH

M 0,8 - 7,6 (135)N follikulaarfaas 1,1–11,6ovulatsioon 17–77luteaalfaas <14,7postmenopaus 11,3–40

M 1,7–8,6 (322)N foll 2,4–12,6 (316)ovulatsioon 14–95,6luteaalfaas 1,0–11,4postmenopaus 7,7–58,5

S,P-FSH

M 0,7 - 11,1 (135)N follikulaarfaas2,8-11,3ovulatsioon 5,8 - 21,0luteaalne faas 1,2 - 9,0 postmenopaus 21,7 - 153

≥ 18 a M 1,5–12,4 (319)N follikulaarfaas 3,5–12,5ovulatsioon 4,7–21,5luteaalfaas 1,7–7,7postmenopaus 25,8–134,8

S,P-Testo

M 20- 50 5,5-25,2N <2,5M >50 4,5-26,6postmenopaus <1,5

18 a – < 50 a M 8,64–29,0 N 0,29–1,67≥ 50 a M 6,68–25,7 N 0,10–1,42

analüüs Tootja 1 Tootja 2 S,P-PSA

50-59a < 2,83 (157)60-69a < 3,15 (137)≥70a < 3,58 (69)

< 40 a < 1,4 (45)40 a – < 50 a < 2,0 (42)50 a – < 60 a < 3,1 (107)60 a – < 70 a < 4,1 (41) ≥ 70 a < 4,4 (9)

S,P-fPSA

0,42µg/L (425)> 15 %

> 15 % (1143)

S,P-E2

M < 206 (50)N follikulaarfaas < 587ovulatsioon125 – 1468 luteaalfaas101 – 905postmenopaus < 110

M 28–156 (109)N follikulaarfaas 46–607 ovulatsioon 315–1828luteaalfaas 161–774postmenopaus < 201

Määrama uued (n=120) Verifitseerima olemas olevad

Referentsväärtuste uuringu andmete ülevaatus

Väiksema arvuga uuring, n=20Suurema arvuga uuring, n>20

Proovimaterjalide arv – 20 Teostatakse analüüsid 2 tulemust (10%) on piiridest väljas-

verifitseeritud. 3-4 tulemust piiridest väljas siis analüüsitakse

veel 20, 2 tulemust 20 – verifitseeritud. 5-6 tulemust esimesest rühmast või

rohkem kui 2 tulemust teisest rühmast – ei ole verifitseeritud

Haigete ja tervete populatsioonid on väga erinevad

Test parameter

“Terved”%

“Haiged”

Otsustuse piir

Troponiin T (kõrgtundlik)

EP-09 Method Comparison and Bias Estimation Using Patient Samples, second edition, CLSI, 2010

40 proovimaterjali 50% tulemustest referentsväärtuste

piirides 50% tulemustest referentsväärtuste

piiridest väljas

EP-15 User Verification of Perfomance for Precision and Trueness, CLSI second edition, 2005

20 proovimaterjali Võimalikult kogu määramispiirkond Määramised 4 tunniga, 5-7 proovi

päevas 3-4 päeva jooksul

Spreadsheet B for calculating bias from patient sample, Trueness and Precision Estimated from Patient Samples

Student`t-test(param) Wilcoxon sign rank test (nonparametric) Statistical significance Slope Intercept Three concentration intervals

Slope

erinevus hinnang

1,0 0% ideaalne

0,9-1,1 10% üldjuhul ei ole vaja ümber arvutada

0,8-1,2 20% on vaja ümber arvutada

0,7-1,3 30% on vaja ümber arvutada

analüüs vahemik Slope(non unit)

Intersept(unit)

p-value

Estradiol , pmol/L

≤210>210

0,991,19

-13,113,88

<0,05<0,01

LH, U/L 0,0-3,03,0-9,09,0-150

1,491,161,34

0,75-3,64

<0,01<0,01<0,05

FSH, U/L <3,503,50-12,50

>12,50

1,060,920,89

-0,14 NS<0,01<0,01

analüüs vahemik Slope(non unit)

Intersept(unit)

p-value

Testosteron nmol/L

<5,05,0-11,0

>11,0

0,951,371,16

0,16-1,380,47

NS<0,01<0,01

PSA, µg/L

<0,90,9-4,0>4,0

0,890,960,94

-0,02

0,53

<0,01<0,01

NS

Vaba PSA, µg/L

<0,7>0,7

1,110,90

-0,170,09

<0,01<0,05

Hormoonuuringud meestel Analüüs väärtus

te vahemik, meetod 1

ümberarvutuse valemy=bx+a

ümberarvutuse valem

väärtuste vahemik, meetod 2

FSH 1,5 – 5

1,06x1,5 - 0,14

0,92x5 1,45-4,6

LH 1,5 – 5

1,49x1,5 1,16x5 + 0,75

2,2 - 6,6

Testo-steroon

>15 1,16x15 + 0,47

>19

Östra-diool

< 100 0,99x100- 13,11

<86