Lapres Dna

8/19/2019 Lapres Dna

1/8

1. HASIL PENGAMATAN

Hasil pengamatan Isolasi DNA Bahan Hewani dapat dilihat pada Tabel 1.

Tabel 1. Isolasi DNA Bahan Hewani

Kel BahanGambar DNA

Warna Kekeruhan Keteranganebelum esudah

A1 Hati api

!erah!uda

"okelat!uda

Bening

Keruh

• Ada DNA• Bentuk bulat

ke#il$serabut

A% Hati api

!erah!uda

"okelat!uda

Bening

Keruh


ke#il$serabut

A& Hati api

!erah

!uda

"okelat!uda

Bening

Keruh


ke#il $serabut

A'

A(

Hati api

Hati api

!erah!uda

"okelat

!uda

!erah!uda

"okelat!uda

Bening

Keruh

Bening

Keruh


ke#il $serabut

• Ada DNA• Bentuk

bulat ke#il$ serabut

1


2/8

%

A) Hati api!erah!uda

"okelat!uda

Bening

Keruh


ke#il$serabut

*ada Tabel 1 dapat dilihat sampel +ang digunakan pada per#obaan ini adalah hati sapi.

*ada setiap kelompok menun,ukkan peubahan warna dari merah muda men,adi #oklat

muda ketika diberikan penambahan sen+awa tertentu. *ada tingkat kekeruhann+a

larutan +ang semula berwarna bening berubah men,ad keruh- serta terlihatn+a bentuk

DNA se#ara isual- +aitu berbentuk bulat ke#il dan berserabut.

2. PEMBAHASAN

&.

DNA merupakan asam nukleat +ang mengandung materi genetik dan ber/ungsi untuk

mengatur perkembangan biologis kehidupan se#ara seluler. DNA ada +ang berada di

nukleus +ang berbentuk linear dan berikatan dengan protein histon- ada +ang berada di

mitokondria dan di kloroplas dimana DNA tersebut tidak berikatan dengan protein

histon dan berbentuk sirkular 0 a en $ 2ohnson- %33%4. antai DNA berbentuk double

helix . DNA tersusun atas gula pentosa- basa nitrogen- dan gugus /os/at 05ewis- 16784.

elain itu DNA dapat dibagi men,adi DNA prokariot dan eukariot berdasarkan

organismen+a. *rotein dikatakan eukariot ,ika berbentuk linear dan mempun+ai protein

histon. edangkan dikatakan prokariot ,ika bila berbentuk sirkular dan tidak memiliki

protein histon 0Klug $ "ummings- 166'4. *ada per#obaan ini dilakukan pengu,ian

isolasi DNA dengan bahan Hwani +aitu hati sapi. !enurut "appu#ino $ herman

0167&4- isolasi adalah suatu #ara untuk memisahkan mikroba +ang satu dengan +ang lainuntuk mendapatkan spesies tunggal serta si/at9si/at +ang diinginkan seperti bentuk-

ukuran- warna- tekstur- permukaan serta beberapa si/at lain +ang nampak. edangkan

menurut Hadioetomo 0166&4- isolasi merupakan suatu proses pemisahan suatu spesies

tertentu dari spesies mikroorganisme lainn+a dalam habitat kemudian ditumbuhkan

men,adi suatu biakan murni dimana sel9seln+a berasal dari pembelahan satu sel tunggal.

'.


3/8

&

(. *ada praktikum ini- pertama9tama bahan ditimbang seban+ak ' gram- diiris ke#il

lalu kemudian dihan#urkan hingga halus . *enghan#uran bahan ini bertu,uan

untuk menghan#urkan ,aringan9,aringan pada sampel tersebut 0!uslim- %33&4.

Kemudian bahan ditambahkan dengan %3 ml larutan sukrosa 3-( ! dingin.

*enambahan larutan sukrosa bertu,uan untuk merusak lipid +ang terdapat pada

membran sel sehingga men+ebabkan sel men,adi han#ur. elain itu- larutan

sukrosa ,uga berperan sebagai larutan bu//er +ang ber/ungsi untuk men,aga

kestabilan hasil sentri/ugasi dari kerusakan 0!uslim- %33&4. Bahan diaduk

hingga ter#ampur rata- kemudian disaring- menurut Kimball 0166%4 pen+aringan

bertu,uan untuk memisahkan bagian sel dari debris sel +ang meliputi membran

sel- endapan protein dan potongan +ang tidak dapat dihan#urkan saat dihaluskan.

5arutan hasil saringan- dimasukkan kedalam tabung senti/us hingga tanda tera

kemudian disenti/ugasi dengan ke#epatan &333 rpm selama 13 menit.

enti/ugasi merupakan proses pemisahan substansi +ang berada di dalam suatu

#ampuran larutan untuk mendapatkan ekstrak kasar dan untuk memisahkan

#airan dari endapann+a berdasarkan berat ,enis molekul dengan #ara

memberikan ga+a sentri/ugal sehingga substansi +ang lebih berat akan berada di

dasar- sedangkan substansi +ang lebih ringan akan terletak di atas 0 u+itno-16764.

).8. :ndapan hasil sentri/ugasi diambil dan ditambahkan dengan ( ml larutan

sukrosa 3-( ! dingin- lalu disentri/ugasi kembali selama 13 menit dengan

ke#epatan &333 rpm. :ndapan hasil senti/ugasi kedua diambil ditambahkan

dengan 13 ml Na"l 1 ! dingin dan 3-( ml larutan sunlight 13;- lalu

dimasukkan kedalam tabung reaksi dan diaduk didalam beaker glass +ang berisi

es batu hingga mengental. !enurut


4/8

'

sabun pen#u#i piring merupakan larutan hipotonis +ang akan meme#ah lapisan

bila+er lipid dari membran sel dan nukleus. Didalam sunlight terkandung

sen+awa :DTA 0 ethylene diamine tetraacetic acid 4 +aitu sen+awa +ang

mengikat kation seperti !g %=- +ang kemudian akan bertindak sebagai ko/aktor

dalam membantu en>im nuklease menguraikan DNA. edangkan /ungsi dari

pengadukan adalah agar larutan men,adi homogen+. etiap reagen dingin dan es

batu +ang digunakan ber/ungsi untuk men,aga kestabilan suhu sehingga

kerusakan DNA dapat di#egah 0Kimball- 166%4.7.6. 5arutan +ang sudah mengental diatambahkan lagi dengan 3-% ml kloro/orm dan

disenti/us kembali selama 13 menit. *enambahan kloro/om bertu,uan untuk

mem isualisasikan DNA serta menetralkan karena kloro/orm tidak bermuatan

sedangkan DNA memiliki muatan negati/ 0Harle+- %33(4. elain itu- menurut


5/8

(

13.11. Didalam ,urnal 5angga- et al 0%31%4 +ang ber,udul @ ptimalisasi uhu dan

5ama Inkubasi Dalam :kstasi DNA Tanaman Bitti 0 Vitex cofassus Reinw 4 erta

Analisis Keragaman Genetik Dengan Teknik A*D9*" terdapat tiga langkahutama dalam ekstras DNA +aitu perusakan dinding sel 0lisis4- pemisahan DNA

dari bahan padat seperti slulosa dan protein- serta pemurnian DNA. DNA +ang

akan diisolasi didenti/ugasi agas komponen +ang besar mengendap- dalam prose

isioalsi DNA ,uga digunakan larutan buffer lysis +ang mengandung :DTA

0etilen diamin tetra asetat4 dan es batu +ang diletakkan dibawah #awan dengan

tu,uan agar DNA pada saat penggerusan tidak rusak. 5arutan buffer lysis

merusak dinding sel se#ara kimiawi dengan mengikat ion magnesium ber/ungsimempertahankan integritas sel maupun akti/itas en>im nuclease +ang merusak

asam nukleat. Cntuk memebersihkan protein dan polisakarida digunkan

kloro/orm.1%.1&. 2urnal Tenriulo 0%3314 +ang ber,udul @:kstrasi DNA umput 5aut Kappaphycus

alvarezii Dengan !etode enol Kloro/orm :kstrasi DNA dapat dilakukan

dengan metode kon esional /enol9kloro/orm +ang ditambhakan dengan sedikit

modi/ikasi- dengan penambahann kalium asetat dapat meningkatkan tingaktkemurnian DNA +ang menghasilkan rata9rata ,umlah DNA %%)-3 ngEF5 dengan

tingkat kemurniann+a 1-7%'. sedangkan tanpa penambahan kloro/orm

mendapatkan rata9rata &8%-3 ngEF5 dengan tingkat kemurniann+a 1-&). emakin

besar olume genom +ang di loading pada sumur gel- maka semakin tinggi

konsentrasi DNA +ang terkandung dalamlarutan sampel tersebut akan

membentuk pita+ang lebih tebal.Didalam ,urnal o+#howdhur+ 0%31%4 +ang

ber,udul @*" 9#ompatible genomi# DNA isolation /rom tissues o/ ri#e 0 Oryza sativa 4 /or /ingerprint dalam melakukan isolasi DNA dilakukan

penimbangan sampel +ang akan homogenkan- penambahan larutan buffer 0+ang

tersusun dari sukrosa- tris H"l- Na %9:DTA dan Na"l4. *enghomogenenan

dilakukan dengan suhu dingin agar DNA tidak rusak.1'.

15. KESIMPULAN• DNA merupakan asam nukleat +ang mengandung materi genetik dan ber/ungsi untuk

mengatur perkembangan biologis kehidupan se#ara seluler.


6/8

)

• antai DNA berbentuk double helix dan tersusun atas gula pentosa- basa nitrogen-

dan gugus /os/at.

• DNA eukariot berbentuk linear dan mempun+ai protein histon.

• DNA prokariot berbentuk sirkular dan tidak memiliki protein histon.• Isolasi adalah suatu #ara untuk memisahkan mikroba +ang satu dengan +ang lain

untuk mendapatkan spesies tunggal serta si/at9si/at +ang diinginkan seperti bentuk-

ukuran- warna- tekstur- permukaan serta beberapa si/at lain +ang nampak.• *enggunaan reagen dingin dan es batu bertu,uan untuk men#egah kerusakan DNA.

ukrosa dingin digunakan sebagai larautan pelisis dan men,adikan bahan hemolisis.• *enambahan Na"l mengikat protein dalam larutan sehingga protein akan

mengendap.• unlight merupakan larutan hipotonis +ang akan meme#ah lapisan bila+er lipid dari

membran sel dan nukleus.• Kloro/orm digunakan untuk menghilangkan polisakarida- pemisahan DNA dengan

komponen lain 0lemak- protein- karbohidrat dan /enol4.• !olekul DNA memiliki si/at larut air akan tetapi tidak larut dalam alkohol.• DNA +ang ber#ampur dengan alohol akan terpresipitasi dan dapat terlihat se#ara

isual• DNA murni tidak berwarna- warna +ang nampak +ang ditandai dengan kekeruhan• DNA +ang tampak berbentuk bulat ke#ildan berserabut.

1).18.17.16. emarang- % ktober %31(%3. *raktikan Asisten Dosen%1.%%.%&.%'.%(.%). 2ulita Abigail haron ://end+27. 1'.I1.31)3%7.

29. DAFTAR PUSTAKA

30.&1. "appu#ino- 2. G. $ N. herman. 0167&4. !i#robiolog+ A 5aborator+ !anual.

Addison Wesle+ *ublishing "ompan+. !assa#husetts.&%.&&. "hai- 5."- et al . 0%3364. apid Isolation o/ Genomi# DNA /rom Asian green9

lipped mussel 0*erna iridis4 /or andom Ampli/ied !i#rosatellite*ol+morphism. International ood esear#h 2ournal 1) 11&9117.


7/8

8

&'.&(. Hadioetomo- . . 0166&4. !ikobiologi Dasar dalam *raktek- Teknik dan *rosedur

Dasar 5aboratorium. *T. Gramedia *ustaka Ctama. 2akarta.&).

&8. Harle+- 2.T. 0%33(4. egulator+ e er#ises in mi#robiolog+. )th ed. !#Graw9Hill"ompan+- Boston i = ')) hlm.

&7.&6. Kimball- 2.W. 0166%4. Biologi ,ilid 1 edisi (. :rlangga. 2akarta.'3.'1. Klug- W. . $ !. . "ummings. 0166'4. "on#epts o/ geneti#s. *reti#e9Hall In#.-

:nglewood "li//s.'%.'&. 5angga- .I. !uh estu dan Tutik Kuswinati. 0%31%4. ptimalisasi uhu dan

5ama Inkubasi Dalam :kstasi DNA Tanaman Bitti 0 Vitex cofassus Reinw 4 ertaAnalisis Keragaman Genetik Dengan Teknik A*D9*" . 2urnal ains danTeknologi ol.1% No.& Hal %)(9%8).

''.'(. 5ewis- . 0%33&4. Human geneti#s "on#epts and appli#ations. The !#Graw9

Hills "ompan+- In#.- Boston iii = '(' hlm.').'8. !uslim- ". 0%33&4. Biologi !olekuler el. 2urusan Biologi Cni ersitas

Bengkulu. Bengkulu.'7.'6. a en- *. H. $ G. B. 2ohnson. 0%33%4. Biolog+. )th ed. !#Graw9Hill

"ompanies- In#.- New ?ork.(3.

(1. o+#howdhur+- . 2o+dip Karmakar. Narottam Da+. 0%31%4. *" 9#ompatiblegenomi# DNA isolation /rom tissues o/ ri#e 0 Oryza sativa 4 /or /ingerprint.:urAsian 2ournal o/ Bio #ien#es ) *age 7(963.

(%.(&. a+ed !.


8/8

7

5.1. Lapora S!"! #ara

62.

(.%. A$%#ra& '(r a)

Lapres Dna

Documents

Transcript of Lapres Dna