Dpto. de Histología y Embriología Facultad de Medicina ... 2009.pdf · • viscosidad y filancia...
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Dpto. de Histología y Embriología
Facultad de Medicina - UDELAR
Fecundación:“Es el proceso por el cual se produce la unión de dos gametos o células haploides. Formando una nueva célula o cigoto, con características genéticas provenientes de ambos padres, lo que
constituye el punto de partida de un nuevo organismo”.
Resultados:
• Restauración de la diploidía
• Variabilidad genética
• Ventaja evolutiva
• Determinación del sexo cromosómico del embrión
• Activación metabólica del ovocito
• Inicio de la primera mitosis de segmentación
Gameto masculino
Gameto femenino (en metafase de la segunda división meiótica)
MADURACIÓN ESPERMÁTICAMaduración Epididimaria
• Adquisición de motilidad
• Cambios maduracionales a nivel de la membrana plasmática / aumenta el colesterol
• Cambios maduracionales a nivel del núcleo / puentes disulfuro - protaminas
• Factores estabilizantes
• Plasma seminal
• Próstata – aportes prostáticos
• Prostasomas = vesículas recubiertas por membrana, enriquecidas en colesterol, que se encargan del almacenamiento de calcio
• Aumentan la disponibilidad de calcio IC y EC
• FPP (fertilization promoting peptide) molécula reguladora de la capacitación espermática
ovocito
Capacitación: serie de cambios estructurales y funcionales que sufre el espermatozoide durante su transcurso
por el TRF, que lo hacen “capaz” o competente para fertilizar al ovocito.
•Remoción de factores estabilizantes
•TRF
•Se completa con la RA
Medio Vaginal
pH ácido (4,5 – 6)
Cuello uterino / Mococervical
• Cambios a nivel de la mb pl
(albúmina – colesterol / glicerofosfolípidos /remoción)
• Expresión de receptores
• Capacidad fusogénica
• FENÓMENOS MECÁNICOS y ENZIMÁTICOS
Disminución de Vitamina E
Medio Uterino
Transporte facilitado / efecto propulsor
Remoción de colesterol – aumenta la fluidez de mb – capacitación / RA / fusión de membranas
progesterona
SABP une calcio y estimula la remoción de sialoglicoconjugados = hiperpolarización de la mb = capacitación
Medio Tubario
Complejo ovulatorio
ANP – guanylyl ciclase - motilidad – hiperactivación
Factor quimiotáctico
Progesterona - entrada de calcio y RA
PENETRACIÓN DE LAS
CUBIERTAS OVULARES
• Penetración en el cúmulus oóforo
• Penetración en la zona pelúcida
REACCIÓN ACROSÓMICA
HIPERACTIVACIÓNESPERMÁTICA
Galactosyltranferasa I
ENZIMAS ACROSÓMICAS:
Hialuronidasa
Corona penetrante
Acrosina
Neuraminidasa
PH - 20
Otras enzimas lisosómicas:
esterasas, fosfatasas, sulfatasas, amilasas, glucosaminidasas
ACCIÓN SOBRE:
Corona radiada
Corona radiada
Zona pelúcida
Zona pelúcida
FUSIÓNGAMÉTICA
• Formación del pronúcleo femenino
• Fusión del material genético = ANFIMIXIA
EVENTOS DE LAPOST – FUSIÓN
• Bloqueo de la polispermia
• Reanudación y finalización de la meiosis
ACTIVACIÓN DELOVOCITO
Bloqueo de la polispermia:
BLOQUEO RÁPIDO Cambios en el potencial de membrana
Liberación de gránulos corticales (reacción cortical)
BLOQUEO LENTO
FORMACIÓN DE PRONÚCLEOS FEMENINO Y MASCULINO:
REPLICACIÓN DEL ADN
Reanudación de la meiosis por el ovocito. Liberación del segundo cuerpo polar
INICIO DE LA PRIMERA MITOSIS DE SEGMENTACIÓN
FUSIÓN DE LOS PRONÚCLEOS
Activación del metabolismodel huevo
• Maduración Epididimaria
• Capacitación espermática
• Reacción acrosómica
• Hiperactivación espermática
• Penetración de las cubiertas ovulares
•Fusión gamética
•Activación del metabolismo del ovocito
•Eventos de la post-fusión
TÉCNICAS DE REPRODUCCIÓN ASISTIDA
FIV
ICSI
…“El objetivo o los objetivos finales de toda intriga o relación de amor sean ellos cómicos o trágicos, felices o infelices, son realmente de mayor importancia que
cualquier otro fin en la vida humana. Cuyo fundamento no es nada más ni nada menos que la creación de una nueva vida, de una nueva generación que nos perpetúa”…
Schopenhauer (1971)
¿Qué sucede si algunode éstos mecanismos
fallan?
¿Qué es necesario paraque la fecundación sede con normalidad?
•Número: recuento espermático normal (20 – 200 mill./ml o 40 – 600 mill./eyaculado)
PRODUCCIÓN adecuada de GAMETOS. OVOGÉNESIS. ESPERMATOGÉNESIS
•Motilidad: A, B, C, D (A+B)
•Morfología:
al MO (Kruger) (cabeza, cola, acrosoma)
al MET
•Estado de la cromatina
ESPERMOGRAMA:• Datos personales.
• Condiciones de obtención de la muestra.
• Estudio físico – químico.
• Estudio cito-morfo-dinámico.
• Estudio bioquímico.
• Estudio inmunológico.
• Conclusiones.
• Interpretación.
SEMEN:
• recién eyaculado coagula espontáneamente y se licúa en los primeros 10 – 30 minutos.
• volumen entre 2.0 y 6.0 ml. (dependiendo del nivel androgénico y frecuencia sexual).
• turbio, opalescente.
• color entre blanco – amarillento y grisáceo.
• olor característico comparable al del hipoclorito y LA.
• viscosidad y filancia de 2cm.
• pH entre 7.2 y 8.0 (resultante de la combinación del aporte prostático ácido y del aporte alcalino de las vesículas seminales)
Evaluación del Estado de la cromatina
Test de Naranja de Acridina
•Morfología: al MO (Kruger) (cabeza, cola, acrosoma)
Alteraciones en la organización de la CROMATINACromatina compacta y maduraCromatina granular inmadura Cromatina vacuolada
Alteraciones en el ACROSOMAPresente y normalAusenteMiniacrosomaForma alteradaFestoneado y alejado del núcleo (topografía anormal)Reaccionado
Alteraciones en la morfología de la COLA:- AXONEMA- ORGANIZACIÓN MITOCONDRIAL- VAINA FIBROSA
- Presente y normal
- Microtúbulos ausentes
- Ausencia de PC
- Hemiaxonema
- Microtúbulos supernumerarios
- Desorganización total
- Desplazamiento axonemal