Decision Limit & Detection Capability

1

Decision Limit

&

Detection Capability

2

CC

&

CC

3

Non-Compliant <----> Compliant

Positive Negative

4

• Zero tolerance

• Not detectable

• Detection Limits ขึ้��นอยู่��กับวิ ธี�ทดสอบท��ใช้�

ซึ่��งแตกัต�างกันในแต�ละห้�องปฏิ บต กัาร

• จึ�งมี�กัารกั%าห้นดมีาตรฐานเป(นค่�า Minimum

Required Performance Limit = MRPL

• Zero tolerance

• Not detectable

• Detection Limits ขึ้��นอยู่��กับวิ ธี�ทดสอบท��ใช้�

ซึ่��งแตกัต�างกันในแต�ละห้�องปฏิ บต กัาร

• จึ�งมี�กัารกั%าห้นดมีาตรฐานเป(นค่�า Minimum

Required Performance Limit = MRPL

Banned substancesBanned substances

5


• วิ ธี�ทดสอบขึ้องห้�องปฏิ บต กัารจึะต�องสามีารถทดสอบท��ระดบ MRPL ได�

• ตดส นวิ�าผล ตภัณฑ์0 Non-compliant เมี1�อค่วิามีเขึ้�มีขึ้�นขึ้องสารในตวิอยู่�าง > CC

• ท��ระดบค่วิามีเช้1�อมี�น 99 % • ท��ระดบค่วิามีเช้1�อมี�น 99 %

6

New analytical limits:New analytical limits:

Limit of detection

Limit of quantification

CC - Decision Limit

CC - Detection Capability

XX

7

CC และ CCCC และ CC

• CC มีาจึากั critical concentration

• มีาจึากั alpha error

เป(นค่วิามีผ ดพลาดเน1�องจึากัตรวิจึพบ banned drug ในตวิอยู่�าง ท�งท��จึร งๆแล�วิไมี�มี� banned drug ในตวิอยู่�าง

False positive result

8


• มีาจึากั beta error

เป(นค่วิามีผ ดพลาดเน1�องจึากัตรวิจึไมี�พบ banned drug ในตวิอยู่�าง ท�งท��จึร งๆแล�วิมี� banned drug ในตวิอยู่�าง

False negative result

9


• น%ามีาใช้�ในกัารตดส นตวิอยู่�างวิ�าผ�านมีาตรฐานห้ร1อไมี� โดยู่

ประเมี นค่วิามีเขึ้�มีขึ้�นท��ตรวิจึพบในตวิอยู่�างเท�ยู่บกับ CC

และ CC

10

- and ß-errors for banned compounds- and ß-errors for banned compounds

-error = 1 %

-error = 5 %

-error = 1 %

-error = 5 %

11

CCCC

ค่วิามีเขึ้�มีขึ้�นท��ท%าให้�เกั ดค่วิามีผ ดพลาดเท�ากับ ในกัารตรวิจึพบสารในตวิอยู่�าง

ค่วิามีเขึ้�มีขึ้�นท��ท%าให้�เกั ดค่วิามีผ ดพลาดเท�ากับ ในกัารตรวิจึพบสารในตวิอยู่�าง

12

Fre

qu

en

cy

ทดสอบ blank ห้ลายู่ๆ ซึ่%�าได�ค่�า responses ต�างๆ

Signal

13

Fre

qu

en

cy

XB

ค่�าเฉล��ยู่ขึ้อง response Normal distribution

Signal

14

Fre

qu

en

cy

XB

ค่�าเฉล��ยู่ + 2.33 SD

Signal

= 1 %

CC

15

Fre

qu

en

cy

XB CC

blank samples จึ%านวิน1% ท��ให้�ผลทดสอบมี�ค่�า > CC

Signal

16

Fre

qu

en

cy

XB CC

ซึ่��งเป(น false positive results (> Zero)

-Error = 1%

Signal

17

Decision Limit - banned substancesDecision Limit - banned substances

CC มี�ค่�ามีากักัวิ�า 0 และน�อยู่กัวิ�า MRPL

18

Fre

qu

en

cy

XB CC

Signal

19

Fre

qu

en

cy

CC

ตวิอยู่�างท��มี�ค่วิามีเขึ้�มีขึ้�นเฉล��ยู่ = CC

Signal

20

Fre

qu

en

cy

CC

50 % ตรวิจึไมี�พบสาร50 % ตรวิจึไมี�พบสาร

Signal

21

Fre

qu

en

cy

CC

50 % ตรวิจึพบสาร50 % ตรวิจึพบสาร

Signal

22


ท��ค่วิามีเขึ้�มีขึ้�น CC

False negative rate = 50%

23

ท��ค่วิามีเขึ้�มีขึ้�นขึ้อง banned drug เท�าไรท��มี�นใจึได� 95% วิ�าผลทดสอบตวิอยู่�างไมี�ผ�านมีาตรฐาน

ท��ค่วิามีเขึ้�มีขึ้�นขึ้อง banned drug เท�าไรท��มี�นใจึได� 95% วิ�าผลทดสอบตวิอยู่�างไมี�ผ�านมีาตรฐาน

ถามี:ถามี:

ตอบ:ตอบ:

ท��ค่วิามีเขึ้�มีขึ้�น Detection Capability (CC)

ท��ค่วิามีเขึ้�มีขึ้�น Detection Capability (CC)

24

CC-banned substanceCC-banned substance

ค่วิามีเขึ้�มีขึ้�นท��วิ ธี�ทดสอบสามีารถตรวิจึพบ banned drug ได�อยู่�างแท�จึร ง โดยู่มี�ค่วิามีมี�นใจึ 95%

ค่วิามีเขึ้�มีขึ้�นท��วิ ธี�ทดสอบสามีารถตรวิจึพบ banned drug ได�อยู่�างแท�จึร ง โดยู่มี�ค่วิามีมี�นใจึ 95%

25

Fre

qu

en

cy

CC

Signal

26

Fre

qu

en

cy

CC

< 50 % ตรวิจึไมี�พบสาร< 50 % ตรวิจึไมี�พบสาร

Signal

27

Fre

qu

en

cy

CC

<< 50 % ตรวิจึไมี�พบสาร<< 50 % ตรวิจึไมี�พบสาร

Signal

28

Fre

qu

en

cy

CCCC

Signal

5 % ตรวิจึไมี�พบสาร = false negative results

5 % ตรวิจึไมี�พบสาร = false negative results

29


ท��ค่วิามีเขึ้�มีขึ้�น CC

False positive rate = น�อยู่มีากัๆ

False negative rate = 5%

(และ CC จึะต�อง < MRPL)

30

กัารห้าค่�า CCและ CC-banned drugกัารห้าค่�า CCและ CC-banned drug

• สามีารถท%าได� 2 วิ ธี�

1. ทดสอบ fortified sample blank 3

ค่วิามีเขึ้�มีขึ้�น ห้ร1อ

2. ทดสอบ sample blank

31

กัารห้าค่�า CC- วิ ธี�ท�� 1กัารห้าค่�า CC- วิ ธี�ท�� 1

• Fortify negative matrix ท��ค่วิามีเขึ้�มีขึ้�น

1.0, 1.5 และ 2 เท�าขึ้อง MRPL

• ทดสอบแต�ละค่วิามีเขึ้�มีขึ้�น 7 ซึ่%�า

• ทดสอบเช้�นน��อ�กั 2 ค่ร�ง ในวินท��แตกัต�างกัน

• เขึ้�ยู่นกัราฟระห้วิ�าง signal (แกัน Y) กับค่วิามี

เขึ้�มีขึ้�นท�� fortify (แกัน X)

32

Calibration line

1.0 x MRPL 2.0 x MRPL1.5 x MRPL

Sig

nal

S.D. of the within-laboratory

reproducibility

331.0 x MRPL

Calibration line

2.0 x MRPL1.5 x MRPL

ค่%านวิณ SE ขึ้อง intercept

Sig

nal

341.0 x MRPL

Calibration line


ค่�ณ SE ด�วิยู่ 2.33 (1%, one sided)

Sig

nal

351.0 x MRPL

Calibration line


CC ค่1อค่วิามีเขึ้�มีขึ้�นท��ได�จึากั signal ท��มี�ค่�าเท�ากับ(Intercept) + (2.33 x SE of the within laboratory reproducibility of the intercept)

CC ค่1อค่วิามีเขึ้�มีขึ้�นท��ได�จึากั signal ท��มี�ค่�าเท�ากับ(Intercept) + (2.33 x SE of the within laboratory reproducibility of the intercept)

Intercept +(2.33 x SEInt)

CC

Sig

nal

CC = ( 2.33SEintercept ) / slope

CC = ( 2.33SEintercept ) / slope

36

กัารห้าค่�า CC – วิ ธี�ท�� 1กัารห้าค่�า CC – วิ ธี�ท�� 1

• Fortify negative matrix ท��ค่วิามีเขึ้�มีขึ้�นน�อยู่

กัวิ�าและเท�ากับ MRPL โดยู่แบ�งช้�วิงห้�างเท�าๆ กัน

• เขึ้�ยู่นกัราฟระห้วิ�าง signal (แกัน Y) กับค่วิามีเขึ้�มีขึ้�น

ท�� fortify (แกัน X)

• CC = ( 2.33SEintercept + 1.64SECC ) /

slope

370.33 x MRPL

Calibration line


CC ค่1อค่วิามีเขึ้�มีขึ้�นท��ได�จึากั Signal ท��มี�ค่�าเท�ากับ (signalขึ้อง CC) + (1.64 x SE ขึ้อง W/L reproducibility at CC)

CC ค่1อค่วิามีเขึ้�มีขึ้�นท��ได�จึากั Signal ท��มี�ค่�าเท�ากับ (signalขึ้อง CC) + (1.64 x SE ขึ้อง W/L reproducibility at CC)

CC

Signal at CC +1.64 x SE ขึ้อง W/L reproducibility at CC

CC

Sig

nal

38

• ทดสอบ sample blank 20 ซึ่%�า

• ค่%านวิณ S : N ratio

• CC เท�ากับ 3 เท�าขึ้อง S : N ratio


39

• ทดสอบ fortified sample blank ท��ค่วิามี

เขึ้�มีขึ้�นเท�ากับ CC 20 ซึ่%�า

• CC= CC + 1.64 S.D.


40

• ทดสอบ sample blank 20 ซึ่%�า ค่%านวิณค่�าเฉล��ยู่ขึ้อง response ( n) และ SDขึ้อง response (SDn)

• ทดสอบ fortified sample blank 21 ซึ่%�า

ค่%านวิณ RSD ขึ้อง response (RSDs)

• slope จึากั calibration curve = a

กัารห้าค่�า CC และ CC – วิ ธี�ท�� 3กัารห้าค่�า CC และ CC – วิ ธี�ท�� 3

41

• CC = 2.33 (SDn) / a

• CC = 2.33 (SDn) + 1.64 (n)

(RSDs)

a [ 1 – 1.64 (RSDs) ]

กัารห้าค่�า CC และ CC – วิ ธี�ท�� 3กัารห้าค่�า CC และ CC – วิ ธี�ท�� 3

42

ตรวิจึสอบวิ ธี�ทดสอบท��ใช้�วิ�าสามีารถทดสอบท��ระดบ MRPL (ห้ร1อต%�ากัวิ�า) ได�ห้ร1อไมี�ตรวิจึสอบวิ ธี�ทดสอบท��ใช้�วิ�าสามีารถทดสอบท��ระดบ MRPL (ห้ร1อต%�ากัวิ�า) ได�ห้ร1อไมี�

Chloramphenicol (MRPL = 0.3

µg/kg)

• ทดสอบ sample blank และ fortified sample blank ท��ค่วิามีเขึ้�มีขึ้�นต�างๆ ดงน�� 0.10, 0.20, 0.30,

0.45, 0.60 µg/kg }

> MRPL

}< MRPL

43

ตรวิจึสอบวิ ธี�ทดสอบท��ใช้�วิ�าสามีารถทดสอบท��ระดบ MRPL (ห้ร1อต%�ากัวิ�า) ได�ห้ร1อไมี�ตรวิจึสอบวิ ธี�ทดสอบท��ใช้�วิ�าสามีารถทดสอบท��ระดบ MRPL (ห้ร1อต%�ากัวิ�า) ได�ห้ร1อไมี�



• ตรวิจึสอบ accuracy และ precision

44

ผลกัรณ�ท�� 1ผลกัรณ�ท�� 1

Content (µg/kg)

Number confirmed (out of 21)

0.10 210.20 210.30 210.45 210.60 21

Q. What is CCß?

A. < 0.1 µg/kg

45

Content (µg/kg)


0.10 210.20 210.30 210.45 210.60 21

Q. Is method fit-for-purpose?

A. Yes. CC is less than MRPL.


46

Q. What is CCß?

A. ~0.20 µg/kg

Content (µg/kg)


0.10 140.20 200.30 210.45 210.60 21


47

Content (µg/kg)


0.10 140.20 200.30 210.45 210.60 21


A. Yes. CC is less than MRPL.


48

Content (µg/kg)


0.10 80.20 120.30 170.45 210.60 21

Q. What is CCß?

A. 0.30 - 0.45 µg/kg


49

Content (µg/kg)


0.10 80.20 120.30 170.45 210.60 21


A. No. CC is greater than MRPL.


50

Licensed substancesLicensed substances

• กั%าห้นดมีาตรฐานเป(นปร มีาณตกัค่�างส�งส8ดใน

ผล ตภัณฑ์0 ( Maximum Residue Limit = MRL

)

• วิ ธี�ทดสอบขึ้องห้�องปฏิ บต กัารจึะต�องสามีารถทดสอบ

ท��ปร มีาณ MRL ได�• ตดส นวิ�าผล ตภัณฑ์0 Non-compliant เมี1�อค่วิามีเขึ้�มีขึ้�นขึ้องสารในตวิอยู่�าง > CC

• ท��ระดบค่วิามีเช้1�อมี�น 95 % • ท��ระดบค่วิามีเช้1�อมี�น 95 %

51

- and ß-errors for licensed compounds- and ß-errors for licensed compounds

-error = 5 %

-error = 5 %

-error = 5 %

-error = 5 %

52

Fre

qu

en

cy

XB

CC

Signal

XPL XS

SPL 1.64SS

CCPL

53

กัารห้าค่�า CCและ CC-licensed drugกัารห้าค่�า CCและ CC-licensed drug

• สามีารถท%าได� 2 วิ ธี�

1. ทดสอบ fortified sample blank 3

ค่วิามีเขึ้�มีขึ้�น ห้ร1อ

2. ทดสอบ fortified sample blank เพ�ยู่ง

ค่วิามีเขึ้�มีขึ้�นเด�ยู่วิ

54



ใกัล�เค่�ยู่งกับ PL โดยู่แบ�งช้�วิงห้�างเท�าๆ กัน





55


CC ค่1อค่วิามีเขึ้�มีขึ้�นท��ได�จึากั Signal ท��มี�ค่�าเท�ากับ

(signal ขึ้อง PL) + (1.64 x SE ขึ้อง W/L

reproducibility)


(signal ขึ้อง PL) + (1.64 x SE ขึ้อง W/L

reproducibility)

56



ใกัล�เค่�ยู่งกับ PL โดยู่แบ�งช้�วิงห้�างเท�าๆ กัน





57



(signalขึ้อง CC) + (1.64 x SE ขึ้อง W/L

reproducibility at CC)


(signalขึ้อง CC) + (1.64 x SE ขึ้อง W/L

reproducibility at CC)

58

• ทดสอบ fortified sample blank 20 ซึ่%�า

• CC = MRL + 1.64SD


59

• ทดสอบ fortified sample blank ท��ค่วิามี

เขึ้�มีขึ้�นเท�ากับ CC 20 ซึ่%�า

• CC= CC + 1.64 S.D.


Decision Limit & Detection Capability

Documents

Transcript of Decision Limit & Detection Capability