Chapitre 6 : La traduction -...
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Année universitaire 2014/2015Université Joseph Fourier (UJF) Grenoble I - Tous droits réservés
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Chapitre 6 :La traduction
Dr.Julien Fauré
Biochimie – Biologie moléculaire
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Plan
I. Le code génétique
II. Les molécules informationnelles de la traduction
III. La traduction
Chapitre 6. La traduction
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La traduction---GTGCACCTGACTCCTGAG------CACGTGGACTGAGGACTC---
--- GUGCACCUGACUCCUGAG ---
--val-his-leu-thr-pro-glu---
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I. Le code génétique
1. Mise en évidence- 4 bases vs 20 acides aminés
lecture des bases 1 à 1 : 41 = 4 combinaisonslecture des bases 2 à 2 : 42 = 16 combinaisonslecture des bases 3 à 3 : 43 = 64 combinaisons
-mise en évidence expérimentale avec des polynucléotides desynthèse et des systèmes de traduction in vitro
motif élémentaire de lecture : le codon formé par 3 nucléotides
I. Le code génétique
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I. Le code génétiqueU C A G
U UU CU AU G
C UC CC AC G
A UA CA AA G
G UG CG AG G
2ème position
1ère position (5 ’) 3ème position (3 ’)
2. Propriétés
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PropriétésI. Le code génétiqueU C A G
U UU CU AU G
C UC CC AC G
A UA CA AA G
G UG CG AG G
2ème position
1ère position (5 ’) 3ème position (3 ’)
UCUUCCUCAUCG
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PropriétésU C A G
U UU CU AU G
C UC CC AC G
A UA CA AA G
G UG CG AG G
2ème position
1ère position (5 ’) 3ème position (3 ’)
UUUUUCUUAUUG
UAUUACUAAUAG
UCUUCCUCAUCG
UGUUGCUGAUGG
CUUCUCCUACUG
CAUCACCAACAG
CCUCCCCCACCG
CGUCGCCGACGG
AUUAUCAUAAUG
AAUAACAAAAAG
ACUACCACAACG
AGUAGCAGAAGG
GUUGUCGUAGUG
GAUGACGAAGAG
GCUGCCGCAGCG
GGUGGCGGAGGG
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PropriétésU C A G
U UU CU AU G
C UC CC AC G
A UA CA AA G
G UG CG AG G
2ème position
1ère position (5 ’) 3ème position (3 ’)
UUUUUCUUAUUG
UAUUACUAAUAG
UCUUCCUCAUCG
UGUUGCUGAUGG
CUUCUCCUACUG
CAUCACCAACAG
CCUCCCCCACCG
CGUCGCCGACGG
AUUAUCAUAAUG
AAUAACAAAAAG
ACUACCACAACG
AGUAGCAGAAGG
GUUGUCGUAGUG
GAUGACGAAGAG
GCUGCCGCAGCG
GGUGGCGGAGGG
phe cystyrser
leu
leu stopstop trp
asp
prohis
glnarg
arg
serasn
lysthrile
met
val alaglu
gly
code spécifique1 codon = 1 aa
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PropriétésU C A G
U UU CU AU G
C UC CC AC G
A UA CA AA G
G UG CG AG G
2ème position
1ère position (5 ’) 3ème position (3 ’)
UUUUUCUUAUUG
UAUUACUAAUAG
UCUUCCUCAUCG
UGUUGCUGAUGG
CUUCUCCUACUG
CAUCACCAACAG
CCUCCCCCACCG
CGUCGCCGACGG
AUUAUCAUAAUG
AAUAACAAAAAG
ACUACCACAACG
AGUAGCAGAAGG
GUUGUCGUAGUG
GAUGACGAAGAG
GCUGCCGCAGCG
GGUGGCGGAGGG
phe cystyrser
leu
leu stopstop trp
asp
prohis
glnarg
arg
serasn
lysthrile
met
val alaglu
gly
code spécifique1 codon = 1 aa
code dégénéré1 aa = 1 à 6 codons
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PropriétésU C A G
U UU CU AU G
C UC CC AC G
A UA CA AA G
G UG CG AG G
2ème position
1ère position (5 ’) 3ème position (3 ’)
UUUUUCUUAUUG
UAUUACUAAUAG
UCUUCCUCAUCG
UGUUGCUGAUGG
CUUCUCCUACUG
CAUCACCAACAG
CCUCCCCCACCG
CGUCGCCGACGG
AUUAUCAUAAUG
AAUAACAAAAAG
ACUACCACAACG
AGUAGCAGAAGG
GUUGUCGUAGUG
GAUGACGAAGAG
GCUGCCGCAGCG
GGUGGCGGAGGG
phe cystyrser
leu
leu stopstop trp
asp
prohis
glnarg
arg
serasn
lysthrile
met
val alaglu
gly
code spécifique1 codon = 1 aa
code dégénéré1 aa = 1 à 6 codons
code ponctué- codon initiateur- 3 codons stop
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U C A G
U UU CU AU G
C UC CC AC G
A UA CA AA G
G UG CG AG G
2ème position
1ère position (5 ’) 3ème position (3 ’)
UUUUUCUUAUUG
UAUUACUAAUAG
UCUUCCUCAUCG
UGUUGCUGAUGG
CUUCUCCUACUG
CAUCACCAACAG
CCUCCCCCACCG
CGUCGCCGACGG
AUUAUCAUAAUG
AAUAACAAAAAG
ACUACCACAACG
AGUAGCAGAAGG
GUUGUCGUAGUG
GAUGACGAAGAG
GCUGCCGCAGCG
GGUGGCGGAGGG
phe cystyrser
leu
leu stopstop trp
asp
prohis
glnarg
arg
serasn
lysthrile
met
val alaglu
gly
code spécifique1 codon = 1 aa
code dégénéré1 aa = 1 à 6 codons
code ponctué- codon initiateur- 3 codons stop
code « universel » : codon UGA (stop) = trp dans la mitochondrie…= sélénocystéine « 21ème aa)
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PropriétésU C A G
U UU CU AU G
C UC CC AC G
A UA CA AA G
G UG CG AG G
2ème position
1ère position (5 ’) 3ème position (3 ’)
UUUUUCUUAUUG
UAUUACUAAUAG
UCUUCCUCAUCG
UGUUGCUGAUGG
CUUCUCCUACUG
CAUCACCAACAG
CCUCCCCCACCG
CGUCGCCGACGG
AUUAUCAUAAUG
AAUAACAAAAAG
ACUACCACAACG
AGUAGCAGAAGG
GUUGUCGUAGUG
GAUGACGAAGAG
GCUGCCGCAGCG
GGUGGCGGAGGG
phe cystyrser
leu
leu stopstop trp
asp
prohis
glnarg
arg
serasn
lysthrile
met
val alaglu
gly
la fréquence d’utilisation des codons dans les gènes est variable
CUG : 42,5 %
CUA : 6,2 %
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Code génétique et mutations*3. Code génétique et mutations
le cadre de lecture détermine la nature du message
5’ - CCUAUUAACGCC -
cadre de lecture 1: -CCUAUUAACGCC- = pro-ile-asn-ala
cadre de lecture 2: -CCUAUUAACGCC-= leu-leu-thr
cadre de lecture 3: -CCUAUUAACGCC- = tyr-stop
* Les variations affectant l’ADN sont retrouvées au niveau de l’ARN lorsque l’ADN modifié est transcrit. Une variation de type: AUG > ACG au niveau de l’ARN sera équivalente à la variation ATG > ACG au niveau de l’ADN génomique…
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Mutations ponctuelles de substitution mutations ponctuelles de substitution
--- UGG UGC UCC --- = -- trp-cys-ser--
C > U = --trp-cys-ser-- : mutation isosémantiqueC > G = --trp-trp-ser-- : mutation faux sensC > A = --trp-stop : mutation non sens
mutations par délétion ou insertion
--- UGG UGC UCC UUA GUU AGA trp cys ser phe val arg
--- UG-U GC U CC U UA G UU ---cys ala pro stop
--- UGG UGC AUC C UU A GU U AG -trp cys ile ile ser stop
-
+décalage du cadrede lecture
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Positionnement des mutations au niveau des acides aminés et des nucléotides
le codon AUG de début de traduction sert de référence pour lepositionnement des mutations au niveau des acides aminés et desnucléotides de la séquence codante
AACUGCUUACGUUUAAUGUACUAUAUUGCUGGGUUUAUUCAG…
début de la transcription
début de la traduction
le premier nucléotide du codon = nucléotide +1
met tyr tyr ile ala gly phe ile gln1 2 3 4 5 6 7 8 9
1 22
5’ AACUGCUUACGUUUAAUGUACUAUAUUGCUGGGUUUCUUCAG…
c.22 A>C
la base A en position +22 de l’ADN codant (c.) est substituéepar la base C
Exemple de nomenclature d’une variation :
p.ile8leu
leu
l’acide aminé ile en position 8 de la protéine (p.) est substituépar l’acide aminé leu
1
met1
-10
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II. Les molécules informationnelles de la traduction
II. Les molécules informationnelles de la traduction
1. Les ARNm- synthèse rapide par ARN pol II- présence de précurseurs nucléaires ( RNPhn )- nombre, taille et durée de vie des transcrits variable
2. Les ARNr
5’ 3’
ARNpol I18s 5,8s 28s 5s
ARNpol III
gènes (> 200 copies / génome )
su 60ssu 40s
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Les ARNt3.1. Structure
- 70 à 95 nt avec de nombreuses bases modifiées- ≈ 50 % des bases « appariées »- Pi en 5 ’, boucles DHU, anticodon, TC, CCA en 3 ’,
sites de reconnaissance par l’amino-acyl ARNt synthétase
3 ’
5 ’
5 ’
3 ’
3. Les ARNt
amino-acyl ARNt synthétase
boucle DHU boucle TC
Site d ’attachement de l ’acide aminé
8 nm
acide aminé
anticodonboucle anticodon
’
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3.2. Fonctions a. appariement à l ’ARNm
3.2. Fonctions
b. fixation des acides aminés
phase d ’activation: la synthétasereconnaît et active 1 seul AA
ARNt --CCA-O-CO-CHR-NH2
phase de fixation: la synthétase reconnaît l ’ARNt correspondant à l ’AA
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3.3. Reconnaissance codon vs acide aminé
3.3. Reconnaissance codon vs acide aminé
position « wobble », ARNt iso-accepteurs
--UCG-- 5 ’ --CCG-- 5 ’
alanine alaninealanine
AGC GGC IGC
--UCG-- 5 ’ --CCG-- 5 ’
la reconnaissance de l’acide aminé est indépendante de l ’anticodon
GCA
cystéine
mutation de l’ARNtcys
GCA
alanine
anti-codon cystéine
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codon STOP
ARN suppresseur
ARNttyr
ARNt suppresseurs
une mutations d’un ARNt auniveau de la séquence anticodonpeut former un ARNt suppresseur capable de reconnaître un codon stopet de permettre ainsi la poursuite de la traduction
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Les mutations des ARNt
leucine
U*AA
--AUU-- 5 ’
U* : taurino-méthyluridine
+ La mutation 3243 A>G du gène mitochondrial codant l’ARNt leu (UUR) est responsable d’une encéphalopathie mitochondriale MELAS (Myoclonic epilepsy with lactic acidosis and strokes : épilepsie myoclonique avec acidose lactique et accidents vasculo-cérébraux)
La mutation a pour conséquence une absence de synthèse de taurino-méthyl uridineau niveau de la boucle anti-codon. Ceci entraine une altération de la reconnaissance des codons de l’ ARNm (effet « wobble ») et modifie la traduction des protéines codées par l’ADN mitochondrial (complexes de la chaîne respiratoire)
--GUU-- 5 ’
leucine
UAA
--AUU-- 5 ’ --GUU-- 5 ’
3243 A>G
situation normale MELAS
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III. La traductionIII. La traduction
- le complexe ribosome-ARNm : expérience de Brenner, Jacob et Meselson- synthèse protéique dans des systèmes acellulaires
1. Activation des a.a par les amino-acyl ARNt synthétases
2. Mécanisme de la synthèse protéique dans le ribosome
grande sous-unité : 60s
petite sous-unité : 40s
sites A, P, E
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Phase d’initiation2.1. Phase d’initiation
Chez les procaryotes: - les différents facteurs n’ont pas de préfixe e- (IF2, IF3…) - le codon initiateur AUG code pour une formyl-méthionine
eIF2
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2.1. Phase d’initiation
Procaryotes: le motif d’accrochage du ribosome est appelé séquence de Shine-Delgarno
Motif de Kozak
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2.1. Phase d’initiation
ATP
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2.1. Phase d’initiation
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Phase d ’élongation2.2. Phase d ’élongation eEF-1
eEF2
eEF-1
2
5’
eEF2
5’
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Phase de terminaison2.3. Phase de terminaison
eRF
RRF
GTP
GDP +
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3. Coût énergétique de la synthèse protéique
terminaison : eRF , 2 GTP
Synthèse de l’ARNt-acide aminé : 1 ATP
3. Coût énergétique de la synthèse protéique
exemple d’une protéine de 100 acides-aminés :
[1 ATP x 100] + [ (2 GTP + 1 ATP) x 1] + [ 2 GTP x 99] + [ 2 GTP x 1]
acylation des ARNt initiation élongation terminaison
initiation: eIF , ARNti , site P, 2 GTP, 1 ATP
élongation : eEF , site A, 2 GTP
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4. Synthèse protéique: polyribosomes et amplification
ARNm
ribosomes
4. Synthèse protéique: polyribosomes et amplification
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5. Synthèse des protéines dans la mitochondrie
5. Synthèse des protéines dans la mitochondrie
Le mécanisme général est très proche de celui gouvernant la synthèse des protéinesdans le cytosol, certains éléments sont cependant différents :
ribosomes mitochondriaux : grande sous-unité (40s) contenant un ARNr 16spetite sous-unité (30s) contenant un ARNr 12s
l’ARNt initiateur est associé à une formyl-méthionine : fMet-ARNti
le code génétique est légèrement différent
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6. Synthèse des protéines par insertion co-traductionnelle
6. Synthèse des protéines par insertion co-traductionnelle
cytosolperoxysomes
mitochondries
noyau
réticulum endoplasmique
golgi
lysosomes
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Le mécanisme d’insertionco-traductionnelleréticulum endoplasmique
golgi
lysosomes
membraneplasmique
secrétion
mécanisme d’insertion co-traductionnelle
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Le mécanisme d’insertionco-traductionnelle
6. Synthèse des protéines par insertion co-traductionnelle
Su 60s
Su 40s
Met-ARNtmet
ARNm
Peptide signal
particule dereconnaissancedu peptide signal(SRP)
membrane du RE
récepteur de SRP
ribophorine
protéinenaissante
peptidase du signal
cytosolréticulumendoplasmique
1
2
3
4
5
6
7
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Le mécanisme d’insertionco-traductionnelle
6. Synthèse des protéines par insertion co-traductionnelle
Su 60s
Su 40s
Met-ARNtmet
ARNm
Peptide signal
particule dereconnaissancedu peptide signal(SRP)
membrane du RE
récepteur de SRP
ribophorine
protéinenaissante
peptidase du signal
cytosol
1
2
3
4
5
6
7
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Le mécanisme d’insertionco-traductionnelle
6. Synthèse des protéines par insertion co-traductionnelle
Su 60s
Su 40s
Met-ARNtmet
ARNm
Peptide signal
particule dereconnaissancedu peptide signal(SRP)
membrane du RE
récepteur de SRP
ribophorine
protéinenaissante
peptidase du signal
cytosol
1
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3
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Le mécanisme d’insertionco-traductionnelle
6. Synthèse des protéines par insertion co-traductionnelle
Su 60s
Su 40s
Met-ARNtmet
ARNm
Peptide signal
particule dereconnaissancedu peptide signal(SRP)
membrane du RE
récepteur de SRP
ribophorine
protéinenaissante
peptidase du signal
cytosolréticulumendoplasmique
1
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Le mécanisme d’insertionco-traductionnelle
6. Synthèse des protéines par insertion co-traductionnelle
Su 60s
Su 40s
Met-ARNtmet
ARNm
Peptide signal
particule dereconnaissancedu peptide signal(SRP)
membrane du RE
récepteur de SRP
ribophorine
protéinenaissante
peptidase du signal
cytosolréticulumendoplasmique
1
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Le mécanisme d’insertionco-traductionnelle
6. Synthèse des protéines par insertion co-traductionnelle
Su 60s
Su 40s
Met-ARNtmet
ARNm
Peptide signal
particule dereconnaissancedu peptide signal(SRP)
membrane du RE
récepteur de SRP
ribophorine
protéinenaissante
peptidase du signal
cytosolréticulumendoplasmique
1
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Le mécanisme d’insertionco-traductionnelle
6. Synthèse des protéines par insertion co-traductionnelle
Su 60s
Su 40s
Met-ARNtmet
ARNm
Peptide signal
particule dereconnaissancedu peptide signal(SRP)
membrane du RE
récepteur de SRP
ribophorine
protéinenaissante
peptidase du signal
cytosolréticulumendoplasmique
1
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![Page 41: Chapitre 6 : La traduction - cyan1.grenet.frcyan1.grenet.fr/podcastmedia/PACES-2014-2015/UE1-BCH06-6-traduction.pdfAnnée universitaire 2014/2015 Université Joseph Fourier (UJF) Grenoble](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022040701/5d5aa3fc88c99373678b5429/html5/thumbnails/41.jpg)
7. Inhibiteurs de la traduction7. Inhibiteurs de la traduction
P A
5’ Phe 5’
Met Phe
Ala
streptomycine initiation
cycloheximide*chloramphénicol peptidyl transférase
tétracyclinegentamycinenéomycine
site A
toxine diphtérique (eEF2)*hygromycine Bkirromycine
érythromycineacide fusidique
translocation, élongation, sortie du peptide, sortie des facteurs EF…
ricine*
* Antibiotiques actifs sur la traduction des cellules eucaryotes
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Que faut il retenir a :- savoir de que recouvre les termes codon, cadre de lecture
- connaître les propriétés du code génétique (il est inutile d’apprendre la correspondance entre codons et acides aminés si ce n’est que comme exercice de mémorisation…)
- connaître les différents types de mutations et leurs conséquences éventuelles, connaîtrela nomenclature affectant la position +1 au premier nucléotide de la séquence traduite etau premier acide aminé
- connaître les caractéristiques des ARNt, les éléments qui définissent la reconnaissance del’ARNm et des acides aminés, le mécanisme d’activation des acides aminés
- connaître les différentes phases de la traduction, la nature et l’intervention des différentesmolécules énergétiques. Il n’est pas demandé de savoir les noms de tous les facteursimpliqués mais il est utile de savoir à quel étape du mécanisme interviendra un facteur d’initiation, d’élongation ou de relâchement. Savoir ce qu’est un polyribosome.
- connaître les principales étapes du mécanisme d’insertion co-traductionnelle et le rôle deséléments spécifiques de ce mécanisme (SRP, particule de reconnaissance de SRP, ribophorines, peptidase du signal)
- savoir pourquoi la traduction est une cible potentielle pour les antibiotiques et certaines toxines (il n’est pas demandé de mémoriser le nom des différentes molécules)
a : les exemples numériques et de pathologies sont destinés à illustrer le cours et à permettre unemeilleure intégration des connaissances, de même les détails des séquences ou des protéines ainsi que les noms des médicaments cités à titre d’exemples ne sont pas à apprendre
systématiquement
![Page 43: Chapitre 6 : La traduction - cyan1.grenet.frcyan1.grenet.fr/podcastmedia/PACES-2014-2015/UE1-BCH06-6-traduction.pdfAnnée universitaire 2014/2015 Université Joseph Fourier (UJF) Grenoble](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022040701/5d5aa3fc88c99373678b5429/html5/thumbnails/43.jpg)
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