Acinetobacter baumannii Bacilo Gram Negativo No fermentador de glucosa Principalmente nosocomial...
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Acinetobacter baumannii
Bacilo Gram Negativo No fermentador de glucosa Principalmente nosocomial Afecta pacientes hospitalizados
inmunosuprimidos
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Acinetobacter baumanini
Se detectó una cepa de A. Baumannii resistente a Imipenem (IPM) y a varios otros antibióticos B-lactámicos incluido el ceftazidime (CAZ)
El IPM es resistente a la hidrólisis por la mayoría de B-lactamasas excepto la “carbapenemasa”
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“Carbapenemasa”
Metalo-B-lactamasa, clase B. Hidroliza IPM y CAZ y la mayoría de A/B B-
lactámicos Confiere resistencia a estos A/B a la
bacteria patógena Codificada por el gen blaIMP identificado por
PCR en gérmenes Gram negativos como la P. Aeruginosa y la S. marcescens
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Materiales y Métodos
Cepas Bacterianas: A. Baumannii resistente a IPM y CAZ en el Hospital Universitario de Gunna entre 1994 y 1996.
Medios: agar sangre para aislamiento y purificación Antibióticos: amikacina (AMK), IPM, Aztreonan
(ATM), CAZ, cefotaxime(CTX), gentamicina (GEN), Norfloxacina (NOR), Rifampicina (RIF)
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Materiales y Métodos
Pruebas de Sensibilidad Antibiótica: MICs por pruebas de dilución en agar
Estudio de actividad de la B-lactamasa por espectofotometría.
Prueba de PCR para la detección del gene de la “carbapenemasa”, blaIMP
Experimento de conjugación: trasmisibilidad del gen blaIMP a una cepa no resistente TY44
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Materiales y Métodos
Electroforesis en gel de campo pulsado: Obtención del ADN en “plugs” de agarosa, tratados
con lisozima y proteinasa K (GenePath Reagent Kit-BIO-RAD)
DNA digerido con 12.5 U de endonucleasa de restricción Not I
Separación de los fragmentos obtenidos en agarosa al 1% en el equipo de PFGE a 6V/cm por 19.7h con tiempos de pulso entre 5.3 y 34.9 s.
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Resultados
Se aislaron 251 cepas en los tres años de las cuales 28 fueron inicialmente resistentes a CAZ e IPM.
Diecinueve perdieron sus características de resistencia después de 1 año.
Nueve cepas permanecieron resistentes tanto a CAZ como IPM.
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Resultados
Estas 9 cepas mostraron capacidad de hidrolizar el
IPM (Actividad de “cabapenemasa” positiva)
Las 9 fueron positivas para el gen blaIMP por PCR
La frecuencia de tranferencia del gen por
conjugación osciló entre 10-2 y 10-4
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Resultados
Todas las cepas transconjugadas presentaron MICs para IPM mayores que la cepa receptora.
En ellas también se detectó el gen blaIMP por PCR
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Resultados
Los MICs para IPM de las 9 cepas aisladas en la clínica oscilaron entre 8 y 16 mcg/mL
La resistencia al IPM se acompañó de resistencia a CAZ, CTX y PIP, pero no siempre de ATM
Siete fueron altamente resistentes (MICs>128mcg/mL) o medianamente resistentes (MICs>32 y 64) a AMK
Nueve fueron resistentes a GEN (MICs de 8 a 16 mcg/mL)
Cuatro fueron resistentes a NOR (MICs 4 a 16 mcg/mL)
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Resultados
Se observaron patrones de resistencia idénticos entre TY 11 y TY12 y entre TY 40 y 42
En todos los casos la resistencia a los antibióticos B-lactámicos, IPM, CAZ, CXT, AMP y PIP fue transferida en forma simultánea mientras que no fue transferida resistencia a ATM ni NOR.
Los transconjugados obtenidos de las cepas TY 11 y TY 12 y TY 40 y TY 42 presentaron patrones de resistencia casi idénticos
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Resultados PFGE
Se obtuvieron 5 patrones: Patrón 1: TY 11 y TY 12 Patrón 2: TY 40 y ty 42 Patrón 3: TY 8 y TY 9 Patrón 4: TY 7 y TY 10 Patrón 5: TY 15
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Resultados PFGE
Las cepas de los patrones 1 y 2 presentaron perfiles casi idénticos de resistencia a los medicamentos y transmisión de la misma.
Fueron aislados de los mismos servicios hospitalarios y por la misma época.
Las cepas del patón 3 (TY 8 y TY 9) fueron aislados en el mismo servicio y con 3 meses de diferencia, pero los niveles de resistencia a AMK y PIP fueron diferentes.
La resistencia de sus transconjugados fue casi idéntica
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Conclusiones
Se aislaron Cepas de A. Baumannii resistentes a múltiples A/B B-lactámicos, incluidos IPM y CAZ, en las cuales se demostró actividad de hidrólisis del IPM y presencia del gen blaIMP
La resistencia de estas cepas a los A/B B-lactámicos fue transmisible, excepto para ATM y fue producto de la trasmisión del gen blaIMP
Los hallazgos sugieren que blaIMP es un gen foráneo introducido desde otras especies de bacterias y retenido por la presencia del IPM en el medio ambiente.