4.provera sterilnosti materijala

KATEDRA ZA HIGIJENU I TEHNOLOGIJU NAMIRNICAFAKULTET VETERINARSKE MEDICINE – UNIVERZITET U BEOGRADU

Provera sterilnosti materijala za rad u laboratoriju

Pripremio: Neđeljko Pripremio: Neđeljko KarabasilKarabasil

MIKROBIOLOGIJA NAMIRNICA

STERILIZACIJA



...je proces kojim potpuno uništavamo/eliminišemo sve organizme (u ili na objektu koji sterilišemo)

KAKO? (FIZIČKI ili ZRAČENJE ili HEMIJSKI ili FILTRACIJA)

- ne postoji/nema STEPEN/a sterilizacije

*** laboratorijsko posuđe/materijal

??? JESTE ili NIJE sterilno za rad ???

KVALITET OBAVLJENE STERILIZACIJE



• Mehanička/elektronska kontrola

• Hemijski indikatori/integratori

• Biološki indikatori (spore)

• Održavanje uređaja za sterilizaciju

• Vođenje zapisa

Mehanička/elektronska kontrola



1. Vreme (sat)

2. Temperatura (termometar)

3. Pritisak (manometar)

Prednost:

Jednostavan i pristupačan vid kontrole sterilizacije;

Tokom procesa sterilizacije dobijamo informaciju da li je proces pod kontrolom ili ne.

Nedostatak:

daju podatak o situaciji na mestu provere a ne unutar same komore za sterilizaciju

Mehanička/elektronska kontrola



Komora za sterilizaciju

TEMPERATURA

PRITISAK VREME

Hemijski indikatori



1. Hemijski indikatori menjaju boju nakon dejstva toplote ili EO i sl.

2. Promena boje ne garantuje da je proces sterilizacije adekvatan, nego služi kao vizuelna oznaka da je materijal prošao zahtevani /npr. termički/ tretman.

3. Ako indikator NE promeni boju znači da materijal nije podvrgnut tretmanu ili proces nije bio adekvatan. Sterilizaciju treba ponoviti.

4. Hemijski indikatori ne mogu zameniti BIOLOŠKU KONTROLU sterilizacije, ali su ODLIČNI kao vizuelna oznaka

Hemijski indikatori



Hemijski indikator - Samolepljiva traka (sterilizacija vlažnom toplotom)

Crne pruge – mateijal je termički tretiran

dispenzer Samo vizuelna oznaka – da ne pomešamo materijal koji je sterilisan sa onim koji tek treba da prođe tretmanSamo vizuelna oznaka – da ne pomešamo materijal koji je sterilisan sa onim koji tek treba da prođe tretman

Hemijski indikatori



Samo vizuelna oznaka – da ne pomešamo materijal koji je sterilisan sa onim koji tek treba da prođe tretmanSamo vizuelna oznaka – da ne pomešamo materijal koji je sterilisan sa onim koji tek treba da prođe tretman

- CRNA PRUGA – materjal je

termički tretiran

EpruveteEpruvete Drigalski špatulaDrigalski špatula

Materijal je upakovan u foliju za vlažnu sterilizaciju

(materijal sterilan 6 meseci)

Hemijski indikatori



Hemijski indikator – klasa 4, za sterilizaciju SUVOM TOPLOTOM

pri 160 oC i više - promena boje u crnu

Hemijski indikator – klasa 4, za sterilizaciju SUVOM TOPLOTOM

pri 160 oC i više - promena boje u crnu

Crna boja nakon tretmana Crna boja nakon tretmana

Hemijski - INTEGRATORI



HEMIJSKI INTEGRATOR – klasa 5 indikatoraHEMIJSKI INTEGRATOR – klasa 5 indikatora

Vizuelno se vidi (boja u prozoru UNSAFE ili SAFE) da li je bezbedno ili ne koristiti materijal nakon obavljenog tretmana.

Sterilizacija EOPodatak za više od jednog parametra sterilizacije (npr. temperatura, vreme i dr.)

Podatak za više od jednog parametra sterilizacije (npr. temperatura, vreme i dr.)

Sterilizacija vlažnom toplotom

Biološki indikatori



• Visoko rezistentne bakterijske spore (APATOGENE)

• Bacillus stearothermophilus

• Za kontrolu vlažne toplote i hemijske sterilizacije

• Bacillus subtilis

• Za kontrolu suve toplote

• Bacillus pumilus

• Za kontrolu zračenja

• Bacillus atrophaeus

• Za kontrolu EO i suve toplote

• Ampule sa sporama se nakon tretmana inkubiraju da se proveri bakterijski rast

• Nema rasta – uspešna sterilizacija

• Ima rasta – neuspešna sterilizacija




Bacillus stearotermophilus Gram + bakterija NIJE PATOGENA BAKTERIJA Može se naći u zemlji, toplim izvorima, okeanskom sedimentu, pokvarenim

namirnicama i sl. Naziv roda promenjen u Geobacillus KORISTI SE za biološku validaciju AUTOKLAVA TERMOFILNA bakterija Temperatura inkubacije 55-60 oC

Bacillus subtilis Gram + bakterija NIJE PATOGENA BAKTERIJA Izvor: ubikvit, zemlja




• TEST se zasniva na sledećem:

• SPORE (npr. broj spora 5x107)

• Tečna podloga sa šećerom

• pH indikator

NA PRIMER

• Osnovna boja >>> CRVENA/PURPURNA

• U kiseloj sredini >>> ŽUTA




Netretiranu ampulu treba inkubirati kao kontrolu pre sterilizacije.

KOLIKO ČESTO treba vršiti kontrolu sterilizacije? Biološke indikatore treba koristiti najmanje jednom nedeljno.

Ukoliko se uređaj za sterilizaciju uključuje više puta dnevno onda bi bilo dobro na dnevnom nivou koristiti biološke indikatore.

Koliko ampula postaviti u autoklav za kontrolu sterilizacije?

U zavisnoti od litraže autoklava (detaljno proveriti uputstvo proizvodjača ampula)

NPR. Ako je autoklav 250 l zapremine, onda treba staviti najmanje dve ampule kao kontrolu sterilizacije (na dno i u sredinu autoklava), a ako autoklav preko 250 l onda najmanje šest ampula.




Ampule sa sporama B.stearotermophilusAmpule sa sporama B.stearotermophilus

Sterilizacija

Inkubacija

60 oC 24-48 h

121 oC, 15 min.

Žuta boja

Purpurna/crvena boja

Primer: ampule za biološku kontrolu sterilizacije vlažnom toplotom




Ampule sa sporama B.stearotermophilusAmpule sa sporama B.stearotermophilus

Sterilizacija

Inkubacija

3 h u automatskom čitaču

(fluorescencija)

121 oC, 1 bar, 15 min.

Crveno svetlo na čitaču

- STERILIZACIJA NIJE USPEŠNO IZVEDENA-

Primer: ampule za biološku kontrolu sterilizacije vlažnom toplotom

Održavanje uređaja za sterilizaciju



• Rutinsko održavanje uređaja:

• koristiti destilovanu vodu, nikako česmensku

• provera nivoa vode u autoklavu pre početka rada

• i sl. u zavisnoti od modela uređaja

• Preventivno održavanje uređaja

• Redovan servis

• KALIBRACIJA (MANOMETAR, TERMOMETAR)

Vođenje zapisa



• ZAHTEV DOBRE LABORATORIJSKE PRAKSE

• svaka kontrola sterilizacije mora biti zabeležena

• svako odstupanje mora biti zabeleženo

• kao i primenjena korektivna mera

Da ponovimo...



1. Kako vršimo kotrolu sterilizacije? Nabrojte!

2. Nabrojte mehaničke/elektronske parametre kontrole sterilizacije. Navedite prednosti i mane ove kontrole..

3. Da li hemijski indikator ukazuje da je sterilizacija uspešno obavljena?

4. Za šta nam prevashodno služe hemijski indikatori?

5. Da li nove generacije hemijskih indikatora - INTEGRATORI mogu da ukažu da je sterilizacija uspešno obavljena?

6. Na čemu se zasnivaju biološki indikatori?

7. Navedite bar dve bakterije koje se koriste za biološku kontrolu sterilizacije...

8. Koliko često primenjujemo biološku kontrolu sterilizacije?

9. Održavanje opreme za sterilizaciju u smislu kontrole obavljene sterilizacije podrazumeva...

10. Vođenje zapisa, zašto, kako i koliko detaljno?

4.provera sterilnosti materijala

Documents

Transcript of 4.provera sterilnosti materijala