Haematocrit, vrsvrtest-szmols,

vrsvrtest-tmr, thrombocyta-szmols.

Vr tlagos trfogata: kb. 5 liter kt rszbl ll:

plazma a vr sejtes elemeken kvli rsze organikus sszetevk anorganikus sszetevk

sejtes (alakos) elemek haematocrit rtk (Htc) vrsvrtestek (vvt) 5 milli / l fehrvrsejtek (fvs) 4.000-10.000 / l thrombocytk (tct) 150.000-400.000 / l

vralvads (coagulatio) eredmnye: szrum (sav): fibrinogn-mentes vrplazma vrlepny (placenta sanguinis): a vr savn kvli rsze (ha a vr

megalvad, ez kpezi az alvadt rszt)

Haematocrit (Htc) meghatrozsa cl: alakos elemek trfogati arnynak meghatrozsa a vrben Htc fgg:

vvt-szm (EPO, vas, tengerszint feletti magassg, hypoxia...) fvs-szm tct-szm

mdszer: minta: ujjbegybl (ferttlents utn) heparinos kapillrisba szvjuk (nem baj, ha nem sikerl tele), vgt

gyurmval zrjuk centrifugls kiegyenslyozva (prban, egymssal szemben) gyurma kifel nzzen 10.000/min, 5 min

kapillris-vrvtel klinikai jelentsge: Htc gyors meghatrozsa kapillris Astrup (vrgzanalzis)

Haematocrit (Htc) meghatrozsa szmts:

lemrjk a pazma s a sejt-massza hosszt Htc = sejt-massza hossza / (sejt-massza + plazma) hossza nomogramrl kzvetlenl is leolvashatjuk

kifejezhet: arnyszmmal %-kal

rtkels: norml rtk:

42-52 % (frfi) 37-47 % (n)

kros rtkek: alacsony anaemia magas

vvt magas: polycythaemia, polyglobulia fvs extrm magas: leukaemia

Vrsvrtestek szmuk 4-5 milli / l bikonkv (korong, piskta) alakak

tmr: 7-7,5 m vastagsg: szln 2 m, kzpen 1 m

lettartam: 120 nap

felpts: nincs mag (DNS) membrn: deformlhat citoplazma semmilyen sejtorganellum nem tallhat az rett vvt-ben

nincs mitokondtium, Golgi-kszlk vagy riboszma haemoglobin (Hb) felels a vvt sznrt s a gzszlltsrt enzimek (glikolzis enzimei, sznsavanhidrz, pentz-foszft-t enzimei)

feladataik: gzszllts (O2, CO2) pH-szablyozs

Vrsvrtestek csontvelben termeldnek termels szablyozsa:

erythropoietin (EPO) szablyozza fleg vesben termeldik (hipoxia hatsra), de mjban is

tesztoszteron fokozza a vvt-kpzst

szksges szubsztrtok s vitaminok: vas haem fehrje globin flsav B12-vitamin intrinsic faktor (IF) is kell B1-, B2-, B6-vitaminok (haem szintzis) C-vitamin (Fe2+-felszvds)

fiatal alakjuk a reticulocyta (GER-t mg tartalmaz)

Vrsvrtest-szmols cl: vvt-k szmnak meghatrozsa 1 l (1 mm3) vrben mdszer:

keverpipettban (1:101-es, benne piros gyngy) Hayem-oldattal 100x-osra higtjuk

1-es jelig vrt szvunk bele (gumics segtsgvel) 101-es jelig Hayem-oldatot majd sszerzzuk (kevers) utols 1 ml-t ki kell engedni (nem keveredett oldszer)

Hayem-oldat: hypertonis oldat meggtolja a pnztekercs-kpzdst

Brker-kamrban szmoljuk (40-40 kis ngyzetben) r fedlemez majd feltlts (elg odatartani a keverpipetta vgt)

Brker-kamra

szerepe: vr alakos elemeinek szmolsa feltltse:

fedlemezt tesznk r, leszortjuk a csavarokkal pipetta vgt a ngyzetrcsnl a fedlemez szlhez tartjuk a kamra magtl fel fog tltdni ha a fedlemez tetejre is kerlne csepp, azt trljk le

ngyzetrcsos karcolat

fedlemez-leszort csavar

Brker-kamra mretei:

nagy beoszts: 1/5 mm kis beoszts: 1/20 mm magassg (folyadkrteg

vastagsga): 1/10 mm

sejtszmols: szktett blende sllyesztett kondenzor 40x-es objektv L-szably: az egymssal szemben lv

oldalakon lv sejtek kzl csak az egyik oldalon lvket szmoljuk

Vrsvrtest-szmols vvt-ket a kicsi, 1/20 x 1/20 mm-es ngyzetekben

szmoljuk (a kamra magassga: 1/10 mm) immerzis nagytssal is lehet szmts:

pl. 11 db vvt van egy kis ngyzetben (1/20 x 1/20 mm) tlagosan

szorozni 400-zal, 1 mm2-en (az 1/10 mm magas folyadkoszlopban) lv vvt-k szma

szorozni 10-zel 1 mm3 oldatban lv vvt-k szma szorozni 100-zal (mivel 100x-osra higtottuk) vvt-

szm 1 mm3 vrben eredmny: 11 x 20 x 20 x 10 x 100 = 4.400.000 vvt / l

1/20 mm

1/20 mm 1/10 mm

Vrsvrtest-szmols

eredmny rtkelse: norml rtk:

4,3-5,6 milli / l = 4,3-5,6 T/L (ffi) 3,9-5,3 milli / l = 3,9-5,3 T/L (n) alacsony anaemia magas polycytaemia, polyglobulia

Keverpipetta tiszttsa vzlgszivattyval (csap oldaln lv cs)

pipetta egyik vgt rdugjuk, msik vgvel beleszvunk: csapvz desztilllt vz KOH fehrjk oldsa acetonos (vagy teres) alkohol desztilllt vz leveg

Anaemik anaemia (vrszegnysg): ha egysgnyi vrben lecskken a vvt-k

szma vvt < 3,9 milli / l (ffi: < 4,5 milli) Htc < 37% (ffi: < 41%)

krlettani osztlyozs: cskkent kpzs

veseelgtelensg (EPO-hiny) csontvel-problmk Hb-szintzis zavara (vashiny, vitaminhiny, thalassaemia)

fokozott pusztuls vrveszts haemolysis (haemolyticus anaemia)

intrinsic, corpuscularis anaemia (a hiba a vvt-ben van) extracorpuscularis haemolysis (a hiba nem a vvt-ben

van) pl. immunhaemolysis

Anaemik

vvt-mret szerint: microcyter (kicsi vvt-tmr s trfogat (MCV))

vashiny thalassemia

normocyter vrzs (haemorrhagia) tumor chr. veseelgtelensg (renalis anaemia)

macrocyter (nagy vvt-tmr s trfogat (MCV)) alkoholizmus flsavhiny B12-vitamin-hiny myelodysplasis syndroma (MDS)

csontveli kp szerint: aregeneratv (aplasticus) kevs a reticulocyta normoregeneratv hyperregeneratv sok a reticulocyta

Vrsvtest-tmr meghatrozsa

cl: vvt-k tmrjnek meghatrozsa minta: ujjbegybl

trgylemezen fiz. sval higtjuk majd fedlemezt tesznk r

mdszer: okulrmikromterrel (lehetleg immerzis nagytssal)

kalibrci: kalibrcis trgylemezzel (0,01 mm-es oszts) vagy Brker-kamrval (kisebb beoszts: 1/20 mm)

mrs: okulrmikromterrel megoszlsi grbe (Price-Jones-grbe) is

felrajzolhat

pl. (a 40x-es nagyt objektvvel) a Brker-kamra kis beosztsa (1/20 mm) 20 kis egysgnek felel meg az okulrmikromteren:

0,05 mm / 20 = 2,5 m 1 egysg

a vvt pedig pl. 3 kis egysgnek: 3 x 2,5 = 7,5 m

immerzis nagytssal ennl pontosabban lehet mrni (a 100x-os objektvvel 1 kis egysg 1 m-nek felel meg)

Vrsvtest-tmr meghatrozsa

Vrsvtest-tmr meghatrozsa

Price-Jones-grbe:

Vrsvtest-tmr meghatrozsa

rtkels: norml rtk: 7-8 m (normocytosis) nagyobb: macrocytosis kisebb: microcytosis

jelentsge: anaemik elklntsben fontos

Thrombocytk (vrlemezkk) szmuk: 150.000-400.000 / l tmrjk: 1-4 m lettartam: 9-11 nap keletkezsk:

csontvel megakaryocytk tct-k thrombopoetin (TPO) szablyozza mjban s vesben

termeldik

feladataik: rfalhoz tapads (adhzi) egymshoz tapads (aggregci) prokoagulnsok termelse vazokonstriktor anyagok termelse

Thrombocytk (vrlemezkk) denz (stt) granulumok

nukleotidok (ADP) Ca2+ szerotonin vazokonstriktor

-granulumok vralvadsi faktorok (I, V, VIII) von Willebrand-faktor (vWF) thrombospondin nvekedsi faktorok pl. PDGF antiheparin (thrombocyta IV. faktor)

membrn adhzis glikoproteinek (GP)

GP-Ia-IIa kollagnhez tudnak kapcsoldni GP-Ib-IX vWF-hez tud ktdni tct-adhzi GP-IIb-IIIa tct-aggregci

foszfolpidek (PL, thrombocyta III. faktor) kontraktilis molekulk (aktin, miozin)

Thrombocyta-szmols

cl: tct-k szmnak meghatrozsa 1 l (1 mm3) vrben

mdszer: tct-ds plazmbl

Reer-Ecker-oldattal 10x-esre higtjuk (100 l vr + 900 l Reer-Ecker-oldat automata pipettval)

majd llni hagyjuk (1-2 rra) a felszni vilgos rteg a tct-ds plazma

Brker-kamrban szmoljuk r fedlemez, majd feltlts 10 tglalapban (1/5 x 1/20 mm) kamra magassga: 1/10 mm

a kicsi, vilgos pontok a thrombocytk (mint a csillagok az gen)

1/20 mm

1/5 mm 1/10 mm

Automata pipetta hasznlata megnzzk, hogy mekkora tartomnyban hasznlhat belltjuk egy tartomnyon belli rtkre

(mskpp tnkremenne) rtesszk a hegyet els tkzsig lenyomjuk, majd felszvjuk az anyagot kinyomskor teljesen lenyomjuk

Thrombocyta-szmols szmts:

pl. 21 db tct van egy tglalapban (1/5 x 1/20 mm) tlagosan szorozni 100-zal 1 mm2-en (az 1/10 mm magas

folyadkoszlopban) lv tct-k szma szorozni 10-zel 1 mm3-ben lv vvt-k szma

(mivel a kamra magassga 1/10 mm) szorozni 10-zel (mivel 10x-esre higtottuk) eredmny: 21 x 5 x 20 x 10 x 10 = 210.000 tct / l

rtkels: norml rtk: 150.000-400.000 tct / l = 150-400 G/L nagyobb thrombocytosis kisebb thrombocytopaenia