PERTUMBUHAN
MIKROORGANISME
Pertumbuhan
Pertumbuhan pada organisme yang makro merupakan proses bertambahnya ukuran atau subtansi atau massa zat suatu organisme,
Misal : bertambah tinggi, bertambah besar
Sedangkan pada mikroorganisme atau organisme bersel satu, pertumbuhan adalah : peningkatan unsur sel yang dapat menghasilkan peningkatan pada ukuran sel, jumlah sel atau keduanya.
Tetapi karena sulit mengobservasi pertumbuhan satu sel, maka ahli mikrobiologi biasanya mempelajari pertumbuhan populasi mikroba seperti pertumbuhan koloni atau pertambahan jumlah sel mikroba itu sendiri.
Pertumbuhan Populasi Mikroba
Image: Pearson Education Inc. (2004) publishing as Benjamin Cummings
Kurva pertumbuhan mikroba
Kurva pertumbuhan mikroba
Fase Lag
Pada fase tidak terjadi penambahan jumlah sel, tetapi
aktivitas metabolisme sedang berlangsung untuk
persiapan pembelahan sel. Disebut juga sebagai fase
adaptasi (penyesuaian) terhadap nutrisi.
Kurva pertumbuhan mikroba
Fase Log (Eksponensial)
Pola pertumbuhan yang seimbang dan cepat. Sel-sel
mikroba membelah secara teratur dengan laju yang
konstan, tergantung pada komposisi medium kultur
dan kondisi inkubasi sampai nutrisi habis.
pertumbuhan aktif
Kurva pertumbuhan mikroba
Fase Stasioner
Terjadi penumpukan racun akibat metabolisme sel dan
kandungan nutrisi mulai habis, akibatnya terjadi
kompetisi nutrisi sehingga beberapa sel mati sedangkan
yang lainnya tetap hidup. Pada fase ini mikroba masih
melakukan aktivitas memproduksi metabolit sekunder
seperti antibiotik. pertumbuhan sama dengan
kematian
Kurva pertumbuhan mikroba
Pada Fase Statisioner ini ada dua hal yang penting :
1. Populasi mikroba memasuki fase stasioner untuk
beberapa alasan termasuk keterbatasan nutrisi,
akumulasi buangan beracun, dan kemungkinan
kepadatan sel.
2. Respon kondisi kelaparan merupakan praktek penting
untuk mikrobiolgi medik dan industri; respon ini
termasuk perubahan morfologi dan perubahan pada
ekspresi gen dan fisiologi.
Kurva pertumbuhan mikroba
Fase Kematian
Grafik menunjukkan penurunan secara tajam karena
merupakan akhir dari suatu individu yang kembali ke
titik awal.
Sel-sel mati dengan kecepatan eksponensial.
Waktu generasi
Adalah : Selang waktu yang dibutuhkan sel untuk membelah diri
Tiap spesies mikroorganisme memiliki waktu generasi yang berbeda-beda,
Contoh: Escherichia coli,
bakteri umum yang dijumpai di saluran pencernaan dan di tempat lain, memiliki waktu generasi 15-20 menit.
Waktu generasi pd kondisi yg optimal (37oC)
Organisme Waktu Generasi (menit)
Contoh
Bacillus cereus 28
Escherichia coli 12.5
Staphylococcus aureus (causes many infections: toxic shock syndrome one example)
27-30
Mycobacterium tuberculosis (agent of Tuberculosis)
792 – 932
Treponema pallidum (agent of Syphilis)
1,980
Pembelahan biner sel bakteri
Tabel pembelahan biner bakteri setiap 15 menit
Hubungan antara pertambahan sel dengan waktu
adalah berbentuk geometrik eksponensial dengan
rumus 2n
0’ 15’ 30’ 45’ 60’ 75’ 90’ 105’ 120’ 135’
1 sel 2 sel 4 sel 8 sel 16 sel 32 sel 64 sel 128 sel 256 sel 512 sel
20 21 22 23 24 25 26 27 28 29
Cara menghitung pertumbuhan mikroba
Plate Count/Viable Cell Count
Filtrasi (very small numbers)
Most Probable Number (MPN)
Direct Microscopic Count
- Breed Count method : Petroff-Hausser counter
Metode secara tidak langsung:
- kekeruhan (turbidity)
- Aktifitas metabolik
- Berat kering
Menghitung sel hidup
Menghitung sel hidup meliputi plating sampel dicairkan
(menggunakan pour plate atau spread plate) ke dalam media
pertumbuhan yang cocok dan melihat formasi koloni;
Tipe metode hitung ini hanya untuk sel yang aktif
bereproduksi; karena tidak mungkin yakin bahwa setiap
koloni tumbuh dari satu sel, hasil biasanya diekspresikan
sebagai colony forming units (CFU);
Analisis sampel air sering dilakukan dengan menghitung
koloni yang tumbuh pada bakteri…………
Metode Plate Count/ Viable Cell Count
Memerlukan pengenceran(Dilution series) untuk memperoleh koloni.
Koloni dihitung setelah mikroba diinkubasi
Digunakan untuk mikroorganisme yang jumlahnya
sedikit
Metode Filtrasi
Metode Most Probable Number (MPN)
Adalah : metode yang digunakan untuk menghitung mikroorganisme
yang masih hidup yang hidup di dalam sampel yang diuji.
Berdasarkan aplikasi kemungkinan jumlah pertumbuhan
mikroorganisme positif terhadap pengenceran berseri (serial dilution)
Biasa digunakan untuk sampel heterogen, seperti:
1. tanah,
2. air,
3. produk pertanian,
4. jumlah sel individu mikroorganisme yang pasti tidak mungkin
ditentukan
Metode Most Probable Number (MPN)
Metode Most Probable Number (MPN)
Multiple tube MPN test
Count positive tubes
Compare with a statistical table
Metode Most Probable Number (MPN)
Menghitung langsung
Mengukur pertumbuhan mikroba secara
langsung
Direct Microscopic Count
Estimasi jumlah mikroba dengan metode
tidak langsung
Kekeruhan
Aktifitas metabolik
Berat kering
Metode kekeruhan
• Prinsip dasar metode turbidimeter adalah jika cahaya mengenai sel, maka
sebagian cahaya diserap dan sebagian cahaya diteruskan. Jumlah cahaya yang
diserap propisional (sebanding lurus dengan jumlah sel bakteri).
• Ataupun jumlah cahaya yang diteruskan berbanding terbalik dengan jumlah
sel bakteri.
• Semakin banyak jumlah sel, semakin sedikit cahaya yang diteruskan. Metode
ini memiliki kelemahan tidak dapat membedakan antara sel mati dan sel hidup
(Purwoko, 2007).
Metode Aktifitas Metabolik
Metode ini di dasarkan pada asumsi
bahwa produk metabolit tertentu,
misalnya asam atau CO2, menunjukkan
jumlah mikroorganisme yang terdapat
di dalam media.
Misalnya pengukuran produksi asam
untuk menentukan jumlah vitamin yang
di hasilkan mikroorganisme
Metode berat kering
Metode ini relatif mudah dilakukan, yaitu kultur disaring atau disentrifugasi, kemudian bagian yang disaring atau yang mengendap hasil sentrifugasi dikeringkan. Pada metode ini juga tidak dapat membedakan sel yang hidup dan mati.
Metode ini umum digunakan untuk mengukur pertumbuhan jamur ber-filamen. Miselium jamur dipisahkan dari media dan dihitung sebagai berat kotor. Miselium selanjutnya dicuci dan dikeringkan dengan alat pengering (desikator) dan ditimbang beberapa kali hingga mencapai berat yang konstan yang dihitung sebagai berat sel kering
Terima Kasih
Top Related