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OBSERVAO DE CLULAS HUMANAS EM ESFREGAO DE MUCOSA BUCAL
Azul de
Metilen
o
GUA
gua
Com um palito de fsforo raspar, levemente, a parte interna da bochecha.
Fazer um esfregao espalhando sobre uma lmina de vidro o material raspado da bochecha.
Fixar o material mergulhando a lmina com o esfregao em lcool 70%. Aguardar 2 minutos.
Retirar a lmina do alcool e escorrer o excesso de lquido em um pedao de papel ltro.
Colocar a lmina sobre a bancada e pingar, sobre a regio do esfregao, uma gota de azul de metileno. Aguardar 2 minutos.
Com o auxlio de uma pisseta, remover o excesso de azul de metileno, jogando sobre a lmina um jato de gua.
Com o auxlio do frasco conta-gotas pingar uma gota de gua sobre a regio do esfregao. Cobrir a preparao com uma lamnula.
Retirar as bolhas de ar pressionando levemente a lamnula com a pina.
Colocar a preparao dentro de um pedao de papel ltro dobrado. Pressionar levemente para retirar o excesso de lquido.
Aguardar 2 minutos
Aguardar 2 minutos
Observar ao microscpio o material, usando a objetiva de 10x e em seguida a de 40x. Girar vagarosamente o micromtrico para obter o melhor foco. Fazer um desenho das clulas observadas.
Organizao: Eliana Maria Beluzzo Dessen e Jorge Oyakawa Diagramao: Regina de Siqueira Bueno
Etapas prEparatrias:
Material suficiente para uma classe com 8 grupos de 5 estudantes.
8 frascos com lminas de vidro para microscopia 8 frascos para o descarte das lminas de vidro usadas 8 placas de Petri com lamnulas 8 placas de Petri com palitos de fsforo 8 recipientes para descarte dos palitos usados8 pinas de ponta fina 8 rolos de papel higinico fino e macio8 frascos conta-gotas com azul de metileno 0,5%*8 frascos conta-gotas com gua8 pissetas com gua 8 recipientes com lcool 70% (tamanho suficiente para a lmina mergulhada em p)8 pacotes de papel de filtro cortado em tiras de aproximadamente 7 cm x 25 cm.8 pedaos de papel ( 60 x 40 cm) para cobrir a bancada8 microscpios8 conjuntos de protocolos para os grupos de alunos.8 lpis e folhas de papel para desenho
*O azul de metileno um composto aromtico heterocclico solvel em gua, com a frmula molecular C16H18CIN3S. Usado como corante e indicador, um remdio de cor azul, vendido em farmcias comuns.
Observao: Qualquer tipo de frasco pode ser utilizado para conter as lminas e lamnulas, como copinhos de iogurte, vidros de gelia, etc. Existem frascos apropriados, padronizados e baratos a venda em lojas especializadas de materiais para cosmticos e para laboratrio (Praa da S)
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antes da aula:
Familiarizar os alunos com o uso do microscpio. Para tanto poder recorrer aula sobre microscopia, disponvel nesta pgina.
Providenciar a soluo de azul de metileno 0,5%*.
se voc professor e deseja aplicar esse protocolo em sala de aula siga as seguintes etapas preparatrias:
aNEXO 1
sugestes de atividades correlatas
Existem outros experimentos sobre observao de clulas humanas que podem ser encontrados 1.em: Temas de Biologia. Ed. Moderna. http://www.moderna.com.br/moderna/didaticos/em/biologia/temasbio/Observar um esquema de clula animal (em um livro didtico ou em outra fonte) e solicitar aos 2.alunos que localizem, no esquema, as estruturas visualizadas na preparao. Solicitar uma explicao para o fato de no terem visualizado as demais estruturas da clula eucaritica.Aplicar, em sala de aula, o jogo Cara a cara com a clula, disponvel em: 3. http://www.genoma.ib.usp.br/educacao/materiais_didaticos.phpSolicitar aos alunos uma comparao das estruturas internas de uma clula animal (eucaritica) 4.com as de uma bactria (procaritica). Pedir uma lista das estruturas comuns e no comuns aos dois tipos de clulas.
Utilizar esta aula de laboratrio para iniciar o estudo das funes das diferentes estruturas celulares. Aps este estudo, voltar ao jogo Cara a Cara com as clulas e solicitar que as perguntas sejam feitas apenas com relao s funes das estruturas celulares. Trata-se de um exerccio de motivao e de avaliao do aprendizado sobre o tema clula.
sugesto de questes para serem respondidas por grupos de estudantes aps a visualizao do esfregao de bochecha.
Ao raspar a parte interna da bochecha, que tipo de tecido foi coletado? 1.
Sugerir uma explicao para o tratamento do esfregao com lcool 70%.2.
Se possvel, faa uma nova preparao 3. sem colocar o azul de metileno, observe ao microscpio e compare o resultado com o do material corado. Este procedimento poder ajudar a responder pergunta: - Qual a funo do azul de metileno?
Que estruturas voc pode observar nas clulas da bochecha?4.
Por que as clulas da bochecha aparecem isoladas umas das outras e no unidas como em 5.outros tecidos?
Voc observou alguns pontos mais escuros na superfcie das clulas? provvel que 6.sejam algumas bactrias que existem normalmente na nossa boca e que ficam aderidas na mucosa. O tamanho destes microrganismos em torno de 1 m de dimetro de forma que, para observ-las temos que usar a objetiva de 100x (objetiva de imerso) usando o leo de imerso. Se no conhece esta prtica, pea ajuda ao professor.
respostas para as questes:
O epitlio de revestimento, ou seja, o tecido epitelial. 1.O lcool 70% um fixador de materiais biolgicos, isto , ele preserva os componentes estruturais 2.dos tecidos, preparando o material para a colorao.
O azul de metileno, sendo um corante bsico, auxilia na visualizao das clulas corando o 3.citoplasma em azul claro e o ncleo em azul escuro.
Apenas o citoplasma e o ncleo. No podemos observar nitidamente, mas sabemos que a 4.membrana citoplasmtica que est delimitando o citoplasma.
As clulas da bochecha aparecem isoladas, pois o processo de raspagem com o palito rompeu a 5.associao que existe entre elas.
Sim pontos mais escuros podem ser observados sobre o citoplasma e o ncleo das clulas e 6.tambm claro em regies da preparao que no apresentam clulas eucariticas. Ao utilizar o aumento de 1000x (objetiva de 100x e ocular de 10x), observa-se que algumas apresentam a forma esfrica (cocos), outras cilndricas (bacilos) e outras filamentosas que so as formas mais comuns das bactrias.
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