MIKROTEKNIK HEWAN 1
Mikroteknik hewan
FIKSASI
MIKROTEKNIK HEWAN 2
USAHA UNTUK MEMPERTAHANKAN ELEMEN ELEMEN SEL / JARINGAN AGAR TETAP PADA TEMPATNYA & TIDAK MENGALAMI PERUBAHAN STRUKTUR
MIKROTEKNIK HEWAN 3
TUJUAN
“AGAR DAPAT DIPEROLEH GAMBARAN STRUKTUR SEL / JARINGAN SEPERTI PADA GAMBARAN SEBELUM MATI / ASLINYA”
MIKROTEKNIK HEWAN 4
CARA FIKSASI
DIPILIH FIKSATIF MENURUT TUJUAN; FIKSATIF YG DIPILIH HARUS SESUAI / DIKETAHUI SIFAT-SIFATNYA, A.L. : “DAYA PENETRASINYA”
MIKROTEKNIK HEWAN 5
MACAM-MACAM FIKSATIF
SEDERHANA / FIKSATIF TUNGGAL
ALKOHOL, FORMALIN, dsb
MAJEMUK / FIKSATIF CAMPURAN
BOUIN, ZENKER dsb
MIKROTEKNIK HEWAN 6
KONSENTRASI : JENUH s/d HAMPIR JENUH BENTUK KRISTAL, KUNING, MUDAH MENYALA,
MELEDAK MRPK ASAM KUAT, LARUT DALAM ALKOHOL,
XYLOL/BENSIN GUNA : MENGENDAPKAN PROTEIN; MEMBENTUK
CAMPURAN PIKRAT + ALKOHOL U/ FIKSASI KARBOHIDRAT (LRT.BOUIN) U/ FIKSASI PROTEIN PENETRASI LAMBAT; SANGAT MENGKERUTKAN &
MENGERASKAN JARINGAN MENINGGALKAN EFEK KUNING PD JARINGAN
PERLU WASHING YG CUKUP LAMA DALAM ALKOHOL 70%
PICRIC ACID (C6H2(NO2)3OH
MIKROTEKNIK HEWAN 7
KONSENTRASI : 0,5% - 1% LARUTAN AQUOSAMENGENDAPKAN NUKLEOPROTEIN
TIDAK BOLEH + ALKOHOL / FORMALIN DENATURASI PROTEIN JARINGAN SEDIKIT MENGERASKAN JARINGAN U/ FIKSASI : LEMAK, BAIK SEKALI U/ FIKSASI
MITOKHONDRIA, GOLGI & GLIKOGEN DAYA PENETRASI : LAMBAT, TDK KERUTKAN JAR. TERJADI ENDAPANWASHING PD AIR MENGALIR 12
JAM BILA WASHING TDK SEMPURNA SANGAT PEKA THD
PEWARNA BASA KEBAIKAN : JARINGAN AKAN TERPULAS DG BAIK
SETELAH MGNK FIKSATIF INI
CHROMIC ACID (H2Cr2O4)Hannover (1940)
MIKROTEKNIK HEWAN 8
KONSENTRASI : 1% -3% (LART.BAKU 3 – 5%) BENTUK PADAT, KRISTAL BESAR, MERAH
JINGGA, BERACUN GARAM YG LARUT DALAM AIR
CAMPUR FORMALIN JARINGAN (MYELIN & PHOSPHOLIPID) +
FIKSATIF FORMALIN MASUK KE Potassium dichromat 2-3% (3-7 HARI)TERFIKSASI BAIK
POTASSIUM DICHROMAT (K2Cr2O7)Henrich Muller (1859)
MIKROTEKNIK HEWAN 9
KONSENTRASI JENUH – HAMPIR JENUHLARUTAN STOK / BAKU DLM BENTUKL JENUH
BUBUK PUTIH, RACUN KERAS SANGAT BAHAYAASPEK KOROSI PD MEMBRAN MUKOSA
MENGENDAPKAN SEMUA MACAM PROTEINENDAPAN KRISTAL BENTUK JARUM
SEMUA ZAT WARNA BERASPEK BAIK MEMBENGKAKKAN JARINGAN DAYA PENETRASI : SEDANG Hg = Sublimat pada Larutan ZENKER, HARUS 2 KALI
WASHING AIR MENGALIR (24 JAM) SEBELUM DEHIDRASI JUGA SEBELUM STAINING
MERCURIC CHLORID (Hg Cl2)
CORTI (1851)
MIKROTEKNIK HEWAN 10
KONSENTRASI : 0,5%-2% LART. STOK 2% KRISTAL KUNING PUCAT / LARUTAN 2% DALAM
AMPUL SATU-2NYA FIKSATIF TERBAIK U/ LEMAK HITAM
U/ KARBOHIDRAT, OKSIDATOR, MUDAH MENGUAP IRITASI MATA
DAYA PENETRASI : SANGAT LAMBAN BUAT IRISAN TIPIS / KECIL DIFIKSASI WASH PD AIR MENGALIR
JANGAN DI + ALKOHOL / FORMALIN KEBAIKAN : GOLGI, MITOKHONDRIA TERWARNA BAIK;
TIDAK MENGKERUTKAN JARINGAN KEJELEKAN : ZAT WARNA YG DIBERIKAN SUKAR
MASUK KE DALAM JARINGAN
OSMIUM TETROXIDE (OsO4) Max Schultze (1865)
MIKROTEKNIK HEWAN 11
U/APARATUS GOLGI DALAM SEL JARANG DGNK SEKARANG
CADMIUM CHLORIDE (Cd Cl2) Aoyama (1929
MIKROTEKNIK HEWAN 12
BISA DGNK U/ DEHIDRASI JUGA DGNK DALAM MACAM-MACAM
KONSENTRASI ACETONE ABSOLUT (-50 C/ DINGIN)
DAPAT MEMPERTAHANKAN ENZIM-ENZIM TERTENTULYPASE, ACID PHOSPHATASE dsb
ACETONE (CH3CO)
MIKROTEKNIK HEWAN 13
PICRIC ACID 5% AQUOSA (JENUH)…..75 ml
FORMALIN 40%……………………..25 ml ACETIC ACID GLACIAL ……………5 ml
LARUTAN BOUIN
MIKROTEKNIK HEWAN 14
KEBAIKAN BOUIN PENETRASI CEPAT INTI TERPULAS BAIK SEKALI + JAR.
IKAT
MIKROTEKNIK HEWAN 15
KEJELEKAN BOUIN BILA LAMAJARINGAN RAPUH SULIT
DIIRIS SEMUA JARINGAN TERFIKSASI DG BAIK LAMA : 2 – 10 JAM, TGT TEBAL TIPIS
JARINGAN WASHING DG ALKOHOL 70%, JANGAN
DG AIRSWELLING
MIKROTEKNIK HEWAN 16
MERCURIC CHLORIDE ……………………5 gr POTASSIUM DICHROMATE…………… 2,5 gr AQUADEST………………………………..100 ml DITAMBAH SODIUM SULPHATE 1 gr BILA DGNK TINGGAL DITAMBAH 5 ml ACIDUM
ACETICUM GLACIAL TEPAT SEBELUM DIGNK ATAU LARUTAN ZENKER STOCK………………………100 ml A A G……………………………………………………5 ml DIBUAT pH nya s/d 3,2
LARUTAN ZENKER
MIKROTEKNIK HEWAN 17
KEBAIKAN : INTI + JAR. IKAT TERPULAS BAIK U/
JAR. TUMOR LEBIH-LEBIH, SEMUA ZAT WARNA BEKERJA BAIK
KEJELEKAN : JARINGAN TERLALU TEBAL LAMA JAR. RAPUH PATAH
MIKROTEKNIK HEWAN 18
CHLOROFORM………………………30 ml ALKOHOL ABSOLUT ……………… 30 ml A . A. G………………………………..10 ml
LARUTAN HELLY
MIKROTEKNIK HEWAN 19
KEBAIKAN : FIKSASI + DEHIDRASI DAPAT BERJALAN
SEKALIGUS AWETKAN GLIKOGEN DALAM JARINGAN
KEJELEKAN : SANGAT KERAS BILA TERLALU LAMASULIT
DIIRIS LANGSUNG DAPAT DIPINDAH KE ALKOHOL
ABSOLUT SETELAH DIFIKSASI
MIKROTEKNIK HEWAN 20
POTASSIUM DICHROMAT………………2,5 gr
SODIUM SULPHAT……………… 1,0 gr AQUADEST ……………………… 100 ml
LARUTAN DI ATAS BILA DGNK DITAMBAH 10 ml FERMALIN TEPAT
LARUTAN ORTH
MIKROTEKNIK HEWAN 21
KEBAIKAN : U/ MELIHAT MITHOSIS, SEL ERYTHROCYT,
JAR. IKAT
KEJELEKAN : TIDAK DAPAT DGNK U/ JARINGAN BESAR PENETRASI SANGAT LAMBAT WASH ½ s/d 1 JAM PADA AIR MENGALIR
Top Related