1. Estudio comparativo del efecto de estradiol y
etinilestradiol sobre factores de la coagulacin en rata macho
2. Evaluacin del efecto de estrgenos de uso clnico sobre la
hemostasia, la fibrinlisis y la respuesta inflamatoria in vivo e in
vitro Laboratorio de Estrgenos y Hemostasia UNIVERSIDAD NACIONAL
AUTONOMA DE MEXICO
3. mportancia fisiolgica de los estrgenos
4. Antiinflamatorios Disminucin en la expresin de molculas de
adhesin y quimiocinas Incremento de PCR Modulacin del tono vascular
Prostaglandinas, eNOS Aumento de NO vasodilatacin Disminucin de
endotelina-1 Proinflamatorios Artritis reumatoide Lpus sitmico
Esclerosis mltiple Aumento de factores procoagulantes Efectos
antiproliferativos del MLV Estrgenos Disminucin de factores
fibrinolticos
5. Mecanismos de accin Genmico: receptores y . Citoplasmtico o
nuclear No genmico
6. Principales usos de los estrgenos Terapia hormonal de
reemplazo Anticonceptivos Amenorrea, endometriosis, disgenesia
gonadal (S.Turner 44X), atrofia urogenital. Cancer de mama,
osteoporosis Estrgenos
9. Sequential (10 days first set, 11 days second set or 5 to 10
days each for triphasic) Trade Name Estrogen (g/pill) Progestin
(mg/pill) Ortho- Novum 7/7/7 35, ethinyl estradiol 0.5, 0.75, 1.0
norethindone Ortho- Novum 10/11 35, ethinyl estradiol 0.5, 1.0
norethindone
11. Uso de estrgenos 100 millones de mujeres utilizan
anticonceptivos (93 millones por va oral) 1. Lemaitre et al.
Hormone replacement therapy and associated risk or stroke in
postmenopausal women. Arch Intern Med 2002; 162:1954-60. 2. Pradhan
et al. Inflammatory biomarkers, hormone replacement therapy, and
incident coronary heart disease: prospective analysis from the
Womens Health Initiative obervacional study. JAMA 2002; 288:980-7.
3. Million Women Study Collaborators. Patterns of use of hormone
replacement therapy in one million women in Britain, 1996-2000.
BJOG 2002; 109:1319-30. World Health Organization. Cardiovascular
Disease and Steroid Hormone Contraception. Report of a WHO
Scientific group. WHO Technical Report Series 877. Geneva: World
Health Organization, 1998. Estados Unidos 30-40% y Reino Unido 33%
reciben terapia hormonal de reemplazo
13. Efectos adversos. Anticonceptivos Embolismo pulmonar
(1961). Mestranol 100g + Noretinodrel 2.5 mg. Endometriosis1 .
Accidente cerebro-vascular (1962). Enavid2 Infarto al miocardio
(1963). Conovid 3 1.-Jordan WM. Pulmonary embolism. Lancet 1961;
ii:1146-7. 2.-Lorentz I. Parietal lesions and Enavid. BMJ 1962; ii
1191. 3.-Boyce et al. Coronary thrombosis and Conovid. Lancet 1963;
1:111.
14. Efectos adversos. THR Trombosis venosa Embolismo pulmonar
-Daly, et al. Risk of venous thromboembolism in users of hormone
replacement therapy. Lancet 1996; 348:977-80. -Jick et al. Risk of
hospital admission for idiopathic venous thromboembolism among
users of postmenopausal oestrogens. Lancet 1996; 348:981-3 -
Grodstein, et al. Prospective estudy of exogenous hormones and risk
of pulmonary embolism in women. Lancet 1996; 348:983-7.
15. Frmaco-vigilancia Observacional es Prospectivos
Retrospectivos Cohorte Casos y controles Casos clnicos
Meta-anlisis
16. Framingham Study. KEEPS. Kronos early estrogen prevention
study. Lipid Research Clinics Program. F Nurses Health Study. HERS.
Heart and estrogen/progestin replacement study. C MORE. Multiple
outcomes of raloxifene evaluation. RUTH. Raloxifene use for the
heart. PEPI trial. Postmenopausal estrogen/progestin interventions.
F WHI. Womens health initiative. C
17. Investigacin en diferentes especies animales y lneas
celulares
19. Mtodos coagulomtricos, ELISA, PCR tiempo real, ratn
knockout o . EE (1 g), ICI-182780 (100 g).
20. Biosntesis del Factor XII Transcripcin Elementos de
respuesta a estrgenos (ERE) AGG TCA NNN TGA ACC Fase de contacto:
Va intrnseca, activacin de plaquetas -Citarella F, Misiti S, Felici
A, Aiuti A, La Porta C, Fantoni A. The 5 sequence of human factor
XII gene contains transcription regulatory elements typical of
liver specific, estrogen-modulated genes. Biochim Biophys Acta.
1993 Feb 20;1172(1-2):197-9. -Farsetti A, Misiti S, Citarella F,
Felici A, Andreoli M, Fantoni A, Sacchi A, Pontecorvi A. Molecular
basis of estrogen regulation of Hageman factor XII gene expression.
Endocrinology. 1995 Nov;136(11):5076-83. -Citarella F, Misiti S,
Felici A, Farsetti A, Pontecorvi A, Fantoni A. Estrogen induction
and contact phase activation of human factor XII. Steroids. 1996
Apr;61(4):270-6. Review.
21. Movrare et al., Estrogen increases coagulation factor V
mRNA levels via both estrogen receptor- and in murine bone
marrow/bone. Eur J Endocrinol 2004; 151:259-263. Erdmann D and Heim
J. Orphan nuclear receptor HNF-4 binds to the human coagulation
factor VII promoter. JBC 1995; 270(39):22988-22996. Kapiotis et
al., Plasma levels of activated factor VII decrease during the
menstrual cycle. Thromb Haemost 1998; 80:588- 91. Bitondo R et al.,
Oestrogenic repression of human coagulation factor VII expression
mediated through an oestrogen response element sequence motif in
the promoter region. Hum Mol Gen 2002; 11(7):723-731. Fossum et al;
Contact factors in plasma from women on oral contraception
significance of factor XI for measured activity of factor XII.
Thromb Res; 1994.
22. Justificacin Existen escasos trabajos enfocados a la
comprensin de los mecanismos celulares y moleculares implicados en
la patognesis de la trombosis por administracin de frmacos con
actividad estrognica. La mayora de los trabajos se basan solamente
en un modelo animal o celular y evalan principalmente la actividad
del estradiol.
23. Hiptesis Los estrgenos de uso clnico aumentan la incidencia
de eventos tromboemblicos a travs de diversos mecanismos que estn
relacionados con cambios en la coagulacin, la fibrinlisis y la
respuesta inflamatoria.
24. Objetivo General Realizar un estudio integral y comparativo
de los efectos de estrgenos de uso clnico, sobre el sistema
hemosttico, el sistema fibrinoltico y la respuesta inflamatoria in
vivo e in vitro. Determinar la va de sealizacin de estos compuestos
y su interaccin con receptores especficos de estrgenos.
25. Objetivos especficos Determinar el efecto del estradiol,
etinilestradiol, mestranol, equilina, equilenina y tamoxifen sobre
marcadores especficos de: El sistema de la coagulacin In vivo
(ratas macho adultas) e in vitro (clulas de hepatoma humano
Hep-G2). El sistema fibrinoltico In vivo (ratas macho adultas) e in
vitro (clulas de hepatoma humano Hep-G2). La respuesta inflamatoria
In vitro (clulas de hepatoma humano Hep-G2 y clulas de endotelio
vascular HUVEC). Mecanismo de accin In vitro (clulas de hepatoma
humano Hep-G2 transfectadas con el receptor alfa o beta de
estrgenos).
26. Marcadores biolgicos Funcin Marcador Coagulacin TP, TTPa,
Fibringeno, fibrina soluble Von Willebrand, dmero D factores,
factor tisular Fibrinlisis Activador del plasmingeno tisular
Inhibidor del activador del plasmingeno tisular-1 Inflamacin
Protena C reactiva E-selectina, TNF- Fibringeno Interleucina-1, 6,
VCAMs, ICAMs Anticoagulantes Protena C, protena S, 2- antiplasmina
Antitrombina
27. Rata Wistar macho adulto de 250 g Bioterio de la Facultad
de Medicina Clulas humanas de hepatoma (Hep-G2). Dra. Erika Rendn
Clulas endoteliales vasculares de cordn umbilical (HUVEC)
28. Rata Wistar macho adulto de 250 g Bioterio de la Facultad
de Medicina Distribucin en lotes de acuerdo a su peso Tratamiento
por va subcutnea Durante tres das consecutivos Estradiol,
etinilestradiol, mestranol, equilina, equilenina, tamoxifen.
Disueltos en 0.3 ml de propilenglicol Dosis: 1, 3, 10 y 30 mg/Kg
Toma de muestras de arteria ilaca, bajo anestesia, avertin Obtencin
de plasmas y sueros Procesamiento
29. Determinacin del tiempo de protrombina (TP). Va extrnseca
Plasma 50 l Adicionar 100 l de tromboplastina de cerebro de conejo
con calcio a 37C Tiempo de formacin del cogulo (seg) Determinacin
del tiempo tromboplastina parcial activada (TTPA). Va intrnseca
Adicionar 50 l de fosfolpidos de soya Adicionar 50 l de CaCl2 a 37
C Incubar 50 l de Plasma a 37 C Incubar 120 seg a 37 C Tiempo de
formacin del cogulo (seg)