BIOQUÍMICA DE LA SALIVA
Cátedra de Bioquímica General y Bucal- Facultad de Odontología- UBA
� MAYORES Y MENORES
� Flujo reposo: 0.02-0.05 a 1.8 ml/min
� Flujo estimulado: 2.5- 5ml/min
� Cavidad oral: 1 ml de saliva – Forma una película de 100 µm de espesor
– Facilita el intercambio iónico entre saliva y esmalte
– Recambio 700-800 veces/día, elimina exceso de bacterias y restos alimenticios
GLANDULAS SALIVALES
SALIVA
Saliva Parcial
Suma de secreciones de las GS mayores y menores + Líquido gingival (transudado seroso)
Saliva total
Saliva parotídea o mezcla de saliva submaxilar y sublingual sin contaminación con el medio bucal
Líquido límpido y estéril
Líquido turbio, posee partículas en suspensión (bacterias, leucocitos, células descamadas del
epitelio bucal, restos alimenticios)
FUNCIONES DE LA SALIVA
ALIMENTACIÓN Y COMUNICACIÓN
� Humedecer ���� Degustación– secreción parotídea
� Lubricar ���� Bolo alimenticio, fonación, – mucinas submaxilares, sublinguales y gl. menores
– glicoproteínas rica en prolina (parotídea)
� Digerir ���� Amilasa salival – células serosas parotídeas y seromucosas submaxilares
– rol secundario sobre restos alimentarios entre dientes
� Digerir ���� Lipasa lingual
– glándulas linguales de Von Ebner
– imp. en recién nacido
INMUNOLÓGICAS Y ANTI-CARIOGÉNICAS
� Limpieza físico-mecánica: por dilución y/o barrido.
� Lubricar y mantener mucosa bucal���� mucinas
– Glucoproteínas muy hidratadas, poco solubles, viscosas,
elásticas y adhesivas
– Sobre mucosas proveen barrera contra desecación y
agentes irritantes de alimentos o toxinas (limita
permeabilidad)
– Atemperante de alimentos muy fríos o calientes
– Aglutinación de bacterias evitando su adhesión
INMUNOLÓGICAS Y ANTI-CARIOGÉNICAS
� Reducir el tiempo de Hemorragia ���� lisozima y Ca
– Activadores de coagulación
� Cicatrización de heridas bucales ���� factores de crecimiento
– Nervioso (FCN) y epidérmico (FCE)
� Acción antimicrobiana ���� Inmumoglobulinas, enzimas y péptidos.
– IgAs, IgG, IgM: aglutinan, opsonizan, facilitan fagocitosis
– Lisozima: hidroliza unión αααα 1-4 del ácido N-acetilmurámico y
N-acetilglucosamina en pared bacteriana
– Peroxidasa: 2H2O2 2H2O + O2
– Lactoferrina: bacteriostático quela Fe
– Histatinas: antifúngicos
REGULATORIAS –HOMEOSTASIS-
� pH bucal ���� 6,8 -7,2 mediante buffers– Bicarbonato/ácido carbónico– Péptidos ricos en histidina– Fosfatos
� Integridad dentaria ���� Ca2+, PO43-,F-, Mg2+
– capacidad buffer – maduración post-eruptiva del esmalte – limpieza mecánica y aglutinación (mucinas de bajo PM)– favorecer el ambiente iónico para una potencial remineralización
sin precipitación espontánea– Interviene en la formación de la película adquirida del esmalte
� Equilibrio hídrico ���� sensación de “boca seca”
Saliva final (secundaria): hipotónica. Se modifica su composición durante el
pasaje por los conductos
Saliva primaria: isotónica respecto al
plasma
MODELO DE SECRECIÓN SALIVAL
SIALONA: unidad fisiológica mínima
Acinos y ConductosIntercalares
Conductos estriados
Conductos excretores
Na+
K +
Cl -
HCO3-HCO3
-
MOVIMIENTOS IONICOS ACTIVOS Y PASIVOS
Pasivo
Activo
Tomada de Fisiología oral, Jenkins GN, 4ta. Edición, 1978
Secreción primaria:K, Na, Ca, HCO3
Cond. Estriados:Reabsorción: NaLiberación: K, HCO3
Ingreso a células acinares:Na, Ca, H2O, CO2
Cond. Estriados: Cl, Na, K y excretores: Na, H2O, K, Cl, HCO3
COMPOSICION QUÍIMICA
saliva mixta humana
Agua 99% puede llegar a 94-95 %
Sólidos < 1% 0,5 % (estimulada) - 6,0 % (no estimulad a)
Peso específico 1,002 - 1,008
pH (rango) 6,8 – 7,2
Saliva completaComponenteNo estimulada Estimulada
Suero, plasma o
sangreFlujo (ml/min) 0.011 1.0 --pH 6.7 6.8-7.5 7.35-7.45Bicarbonato (mM) 5 15-50 23-32Sodio (mM) 4-6 26 135-145Potasio (mM) 22 20 3.5-5.5Calcio (mM) 1.5-4 1.5-3 2-2.5Magnesio (mM) 0.2 0.15-0.2 1-1.5Cloruro(mM) 15 30-100 95-105Fósforo inorg.(mM) 6 4 1-1.5Fluoruro(µg%) 8-25 2-20 10-20Glucosa(mg%) 0.5-1.0 1.0 70-100Amoníaco (mg%) 12 4-8 0.08-0.11Urea (mg%) 20 13-22 14-40Proteínas (mg%) 225 -350 280-300 6.5-8.2 g%Osmolaridad(mOsm/kg)
87.7 132.0 296.0
COMPOSICIÓN SALIVA COMPLETA VERSUS SANGRE
Magnesio (mM) 0.2 0.15-0.2 1-1.5Cloruro(mM) 15 30-100 95-105Fósforo inorg.(mM) 6 4 1-1.5Fluoruro(µg%) 8-25 2-20 10-20Glucosa(mg%) 0.5-1.0 1.0 70-100Amoníaco (mg%) 12 4-8 0.08-0.11Urea (mg%) 20 13-22 14-40
COMPOSICIÓN DE LA SALIVA EN FUNCIÓN DE LA VELOCIDAD DE FLUJO SALIVAL VERSUS PLASMA
� CALCIO 50% IÓNICO 50% unido a proteínas.
� FOSFATOS w 80 % IÓNICO w PO43-, PO4H2-, PO4H- (pH salival)
ÉSTERES ORGÁNICOS
� Saliva parotídea calcio iónico y fosfatos: "no estimulada", superan el producto de solubilidad de la hidroxiapatita. “ estimulada” superan también la del fosfato octacálcico y la del fosfato dicálcico (brucita).
� El calcio y el fosfato CALCIFICAR PLACA BACTERIANAsarro, tártaro o cálculos dentales.
Saliva Submaxilar→ + [calcio ] pH - fuerza iónica → sarro cara lingual de incisivos inferiores
CALCIO Y FOSFATOS SALIVALES
COMPONENTES ORGÁNICOS SALIVA VERSUS PLASMA
PAROTIDA SUBMAXILAR PLASMA
UREA 15 mg% 7 mg % 25 mg%
AMONIACO 0.3 mg% 0.2mg %
PROTEINAS 250 mg % 150 mg% 6000mg %
pH 6.8-7.2 6.8-7.2 7.35
COMPONENTES PROTEICOS DE LA SALIVA
acinaresAmilasa, lipasa, mucinas, GP ricas en
prolina, GP básicas, P acídicas, P ricas
en tirosina (estaterina), P ricas en
histidina, peroxidasa, lactoferrina
Lisozima, IgAs, factores de crecimiento,
péptidos regulatoriosno acinares
Tomado de Ellison S.A.,1979
ORIGEN = LUGAR DE SÍNTESIS
GP = GLICOPROTEÍNAS P = PROTEÍNAS
PROTEÍNAS ACINARES EN RELACIÓN AL AUMENTO DEL FLUJO SALIVAL
VARÍAN EN FORMA DIRECTAMENTE PROPORCIONAL
VARÍAN EN FORMA INVERSAMENTE PROPORCIONAL
PROTEÍNAS NO ACINARES EN RELACIÓN AL AUMENTO DE FLUJO SALIVAL
Glicoproteínas:
• Proteínas más abundantes
• Confieren propiedades de viscosidad y lubricación
• Cadenas laterales de heterosacáridos unidos covalentemente a la proteína y ramificados
• Grupo carboxilo de ác. siálico (pK 2,6) ionizado a valores fisiológicos de pH , gran carga negativa
Estaterina: fosfopéptido de 47 aa. Junto con trazas de PPi evita la formación de cristales fosfocálcicos en glándulas y conductos salivales.
IgAs:
• Sintetizada por células plasmáticas como dímeros con cadena proteica J
• Componente secretor aportado por células acinares es parte de una proteína trans-membrana receptora de IgA
IONIZACIÓN DE LAS PROTEÍNAS DEPENDIENTE DEL PH
medio ácido
Carga neta +
polo negativo (cátodo)
medio básico
Carga neta –
polo positivo (ánodo)
H + H+
– OH – OH
pI
Carga neta 0
NH3+
NH3+
NH3+ NH3
+
NH2NH2
COOHCOOH COO -
COO - COO -
COO -
ELECTROFORESIS
SALIVA PAROTÍDEA ESTIMULADA
Proteínas aniónicas (pI bajo)
Glucoproteína parotídea
Peroxidasa
Lisozima
Protamina
3 Histonas
2 prot. Básicas (bajo PM) ven.serpiente
CÁTODO
ÁNODO
AMILASA
Ig As
PRP película adquirida
Seroalbúmina
Pieza sec libre
Proteínas catiónicas
(pI alto)
+Gel de poliacrilamida en columna
2 polipéptidos Ricos en His
SALIVA SUBMANDIBULAR
� Secreción a predominio seroso
� Concentración 5 veces menor que el de saliva parotídea.
� Composición más compleja aportada por células mucosas:– Glucoproteína responsable
del grupo sanguíneo (A;B;Oy de Lewis).
– Mucinas (alto PM)
VISCOELASTICIDAD
SALIVA SUBLINGUAL
� Secreción a predominio mucoso
� Mayor cantidad de aporte mucoso:– GP grupo sanguíneo– Mucinas
� Glucoproteína (alto PM):– pI < 3– Glúcidos 50% de su peso– Composición azúcares:
neutrosfucosaglucosaminaác. siálico
BUFFER SALIVALES
Aquellas solucionesque resisten cambios bruscos de pH-agregar un ácido o una base-
CO3H2 / CO3H-
HPO42- / H2PO4
-
SISTEMAS AMORTIGUADORES EN SALIVApH= -log (H+)
= log 1/(H+)Kd = [CO3H-] [H+]
[CO3H2 ]
Ka= (sal) . [H+]
(ácido)
[H+] = (ácido). Ka(sal)
pH= log 1/(H+) = log ( sal) + log 1 (ácido) Ka
pH = pKa + log (sal)(ácido)
pKa
Ecuación de Henderson-Hasselbach
pH = pKa + log [SAL]
[ACIDO]
pH = pKa + log [CO 3H- ]
[CO3H2 ]
Ka= (CO3H- ) (H+) / (CO3H2)
pKa es el log negativo de la cte de disociación del ácido con el signo cambiado (es el pH en el cual el 50% está disociado)
BUFFER SALIVAL
CO3H2 / CO3H-
NO ESTIMULADA ácido carbónico y bicarbonato
(> reabsorción de bicarbonato)
2-3 mM pH (pK de 6,1 )
ESTIMULADA 1ml/min o más
(+bicarbonato) 30 - 60 mM.
pH de 7,5 - 7,8
EFECTO DEL FLUJO SALIVAL SOBRE EL PH PRODUCCIÓN DE BICARBONATO
POR LA GLÁNDULA SALIVAL
Luego de la recolección, en la saliva en contacto con el aire el pH puede aumentar hasta 8,5-9,0 por la acción de la anhidrasa carbónica (AC).
pK 6,1
AC
AC
� H2PO4- H+ + HPO4
2-
pK 6,8
NO ESTIMULADA pH 6,1 ( 5mM)
ESTIMULADA 2 mM y el pH
H2PO4- / HPO4
2- (cte) ( Henderson-Hasselbach),
Este HPO42- es ahora el predominante, aunque su
concentración es semejante en la saliva no estimulada.
Producto iónico (Ca+2).(HPO42-) pH crítico
HPO42- / H2PO4
-pH Crítico
pH por debajo del cual el fluído en la superficie de los dientes se hace NO SATURADO respecto a la HA y permite la remoción
de calcio y fosfato del esmalte.
Si pH < pH crítico: disolución Si pH > pH crítico: precipitación
Producto iónico (Ca+2).(HPO42-) pH crítico
Por lo cual el producto iónico debe estar por encima del producto de solubilidad de la sal para proteger el esmalte
TITULACIÓN DE SALIVA MIXTA CON ÁCIDO
Regiones “buffers” : A, principalmente bicarbonato y fosfato; B, debido a proteínas salivales
Producción de amoníaco en saliva
FACTORES QUE AFECTAN LA COMPOSICIÓN SALIVAL
� Contribución relativa de varias glándulas:Según la glándula que secrete varía la proporción de sus componentes
� Velocidad de flujo :Regulado fisiológicamente (ritmo circadiano)Nausea: incrementa salivaciónMiedo y anestesia: disminuye � boca seca
� La naturaleza del estímulo:Comida seca y arena: salivación profusa y acuosaCarne: secreción espesa y mucosaDietas ricas en hidratos de carbono: aumenta amilasa
Gracias!