BIODISPONIBILIDAD Y NIVELES DE ACS
• Las terapias con fármacos biológicos han supuesto una granalternativa en el tratamiento de enfermedades inflamatorias crónicas,como la artritis reumatoide, espondiloartritis, enfermedad inflamatoriaintestinal y psoriasis entre otras.
• Sin embargo, algunos pacientes no responden satisfactoriamente omuestran una falta de eficacia tras tratamientos prolongados.
• La pérdida de respuesta puede explicarse por la inmunogenicidad delfármaco, es decir, el paciente crea anticuerpos contra el fármaco queneutralizan su efecto.
BIODISPONIBILIDAD Y NIVELES DE ACS
• La respuesta al tratamiento se realiza en base a variables clínicasrelacionadas con el proceso de la enfermedad.
• En muchos casos se hace un uso ciego y no personalizado de fármacosmuy costosos.
• La administración de fármacos biológicos debe ir siempre acompañadade un estrecho control de la respuesta del paciente a la terapia, paravalorar su eficacia y si fuera necesario modificar la pauta.
ANTICUERPOS MONOCLONALES
INMUNOLOGÍA
Dr. Manuel Palacios
BIODISPONIBILIDAD Y NIVELES DE ACS
Definir y unificar los métodos de evaluación de respuesta.
• Es imprescindible la inclusión de variables biológicas como la
biodisponibilidad e inmunogenicidad de los medicamentos.
BIODISPONIBILIDADNiveles séricos de fármaco biológico
INMUNOGENICIDADNiveles séricos de anticuerpos antifármacos biológicos
BIODISPONIBILIDAD Y NIVELES DE ACS
Laboratorio Clínico:
Determinaciones de Niveles séricos de fármaco
Niveles de anticuerpos.
Permite una monitorización sensible y específica de los niveles
circulantes de cada fármaco y de su inmunogenicidad, de manera
que el médico pueda evaluar estas variables para llevar a cabo un
seguimiento más estrecho de la respuesta del paciente al
tratamiento y tomar las decisiones terapéuticas correspondientes.
BIODISPONIBILIDAD Y NIVELES DE ACS
• Los análisis están desarrollados en tecnología ELISA, lo que permite ofrecerresultados en un corto periodo de tiempo.
• Los ensayos y productos son validados siguiendo guías de validación demétodos bioanalíticos de FDA y guías CLSI correspondientes dirigidas a lavalidación de productos para diagnóstico.
PROGENIKA BIOPHARMA GRIFOLS
NIVELES DE ACS
➢Los pozos se suministran recubiertos con el medicamento.
➢El ensayo utiliza los dos brazos de las IgG de tipo 1, 2 y 3 para entrecruzar
el medicamento unido a la placa .
➢Se añaden los calibradores , controles y muestras de los pacientes
➢Los acs presentes se unan al medicamento pre-inmovilizado.
➢ La fracción de muestra no unida se lava.
➢ Se añade conjugado a HRP, a cada pocillo.
➢Una segunda incubación permite que el conjugado se una a los acs que
se han unido a los pozos.
➢Tras lavar el conjugado no unido, la actividad enzimática se mide mediante
un sustrato cromogénico .
➢El color obtenido es proporcional a la cantidad de acs presentes en la
muestra del paciente.
NIVELES DE FARMACO
Este ensayo utiliza anticuerpos monoclonales humanos que permiten la
detección específica del fármaco.
Mide la biodisponibilidad : la fracción de fármaco libre en la circulación .
Principio del Test
✓ Es un ELISA sandwich en formato de 96 pocillos .
✓ Las tiras ELISA se suministran pre-tapizadas con un anticuerpo monoclonal
humano anti- fármaco.
NIVELES DE FARMACO
PROCEDIMIENTO
➢ Se añaden calibradores , controles y las muestras a los pozos.
➢ El fármaco presente en las muestras se une a los acs anti –fármaco.
➢ La fracción de muestra no unida se lava, y se añade un segundo
anticuerpo monoclonal conjugado a HRP a cada pocillo.
➢ Una segunda incubación permite que el acs anti-fármaco conjugado a
HRP se una al fármaco pegado a los pocillos.
➢ Tras lavar el exceso de ac anti-fármaco conjugado a HRP, la actividad del
enzima se mide mediante un sustrato cromogénico .
➢ La señal obtenida es proporcional a la cantidad de fármaco presente en la
muestra del paciente.
BIODISPONIBILIDAD Y NIVELES DE ACS
Análisis Tipo muestra Volumen requerido
Concentración de infliximab circulante y anticuerpos anti-infliximab Suero 300 µl
Concentración de adalimumab circulante y anticuerpos anti-adalimumab Suero 300 µl
Concentración de etanercept circulante y anticuerpos anti-etanercept Suero 300 µl
Concentración de rituximab circulante y anticuerpos anti-rituximab Suero 300 µl
Concentración de golimumab circulante y anticuerpos anti-golimumab Suero 300 µl
Concentración de tocilizumab circulante y anticuerpos anti-tocilizumab Suero 300 µl
Concentración de ustekinumab circulante y anticuerpos anti-ustekinumab Suero 300 µl
INTERPRETACION DE RESULTADOS
• El cálculo e interpretación de resultados se realiza de manera
completamente automática mediante la aplicación online.
• El usuario tan sólo tiene que introducir los datos obtenidos del lector de
placas en la aplicación de cada kit para obtener de manera inmediata y
automática el resultado del paciente.
• No es necesario la instalación ni configuración de ningún software en el
equipo del usuario.
RECOMENDACIONES
✓ Extraer las muestras antes de la administración del fármaco (niveles valle).
✓ Los kits han sido validado con muestras de suero.
✓ Las muestras de suero utilizadas en este ensayo deben ser tomadas
siguiendo técnicas estándar de laboratorio.
✓ Los sueros hemolizados no afectan a los resultados del test. No se han
estudiado sueros con alto contenido lipídico.
✓ Para la obtención del suero se pueden emplear tubos con gel separador .
RECOMENDACIONES
Se han validado las siguientes condiciones de almacenamiento de
muestras de suero.
✓ Los sueros pueden ser almacenados o transportados a temperatura
ambiente (20-25ºC) hasta un máximo de 2 días.
✓ Los sueros pueden almacenarse a 2-8ºC hasta un máximo de 5 días.
En el caso de no procesar el suero antes de 5 días, congelarlo a -20ºC o
inferior.
✓ Si se emplea suero congelado, homogeneizarlo completamente antes del
análisis.
✓ Evitar ciclos de congelación y descongelación.
giftsanimados.org
PARA RECORDAR….
• Permite al especialista reconocer de una manera objetiva las pérdidasde respuesta y acelerar la toma de decisiones terapéuticas para cadapaciente, asegurando una correcta terapia, ahorrando tiempo y gastoinnecesario en terapias ineficaces.
• Todo ello redundará en una mejor calidad asistencial al paciente
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