VIRUS 2012 2da Parte
Transcript of VIRUS 2012 2da Parte
Figure 9.12
RNA
ssDNA
dsDNA
MS2ss ds φφφφ6
φψφψφψφψ174fd, M13
T3, T7
MuLambda T2, T4
© 2012 Pearson Education, Inc.
VIRUS 2da. parte : BACTERIÓFAGOS
VIRUS MODELOS:
Fagos de la serie TFagos de la serie TFagos de la serie TFagos de la serie T
y fago lambday fago lambday fago lambday fago lambday fago lambday fago lambday fago lambday fago lambda
Bacteriófago T4
-Simetría: compleja -Hospedador: Escherichia coli-Es virulento: desencadena ciclos líticos
DNA:- bicatenario- bicatenario-codifica algunos de sus propios tRNA-Tiene repeticiones terminales y presenta permutación circular -Tiene la base 5-hidroximetilcitosina (en lugar de citosina)que se glicosila y permite resistir ataque por ENDONUCLEASAS DE RESTRICCION del hospedador.
Pared de
Figura 9.10 Adhesión del bacteriófago T4 a la pared de Escherichia coli e inyección de DNA. (Brock. Cap. 9. XIII Ed. 2012).
deE. coli
Figure 9.13
Nearly replicatedcopies of T4genome
Endonucleasecuts
One “headful”of T4
DNA tiene repeticiones terminales y presenta permutación circular
RecombinationT4 genomesgenerated
of T4DNA
Concatemer cutby endonuclease
© 2012 Pearson Education, Inc.
Evolución de la infección por bacteriófago T4
BACTERIÓFAGO LAMBDA
Bacteriófago LAMBDA
-Simetría: compleja -Hospedador: Escherichia coli
DNA:
-Predomina la expresión de un represor de lisis (cI)-Predomina la expresión de un represor de lisis (cI)-Por eso se llama FAGO ATEMPERADO o PROFAGO: se integra al DNA de la bacteria que infecta y produce ciclos lisogénicos.
-Las bacterias lisogenizadas presentan nuevas propiedades, por ej. pueden producir toxinas.
CARACTERÍSTICAS DEL FAGO LAMBDA
-Las bacterias infectadas por fago lambda son inmunes al ataque por partículas similares
-Puede revertir a fago virulento: la inactivación del represor de lisis (cI) induce el CICLO LÍTICO debido al aumento de la expresión de la proteína Cro.
-El DNA es lineal bicatenario con extremos 5’ cohesivos formados por 12 nucleótidos complementarios: sitio cos. Al entrar al hospedador se aparean y el DNA pasa a ser circular.
-Se integra al cromosoma de Escherichia coli por el sitio att .
CICLO LÍTICO O LISOGÉNICO ?
GENOMADE LAMBDA
cI > Cro => LISOGENIA Cro > cI => LISIS
LISOGENIAIntegración de ADN de lambda en el hospedador
Bacteria hospedadora expresa nuevaspropiedades
Ej: toxinas
Replicación de lambda
por el círculo rodante
CICLO LÍTICO
3’
primers
FAGO LAMBDA: CICLO LISOGÉNICO o LÍTICO ?
Ciclo lisogénico:-Síntesis activa de cI (represor de ciclo lítico)-Genoma de fago lambda está integrado en el DNA del hospedador-No hay producción de proteínas tardías
Ciclo lítico:-Síntesis de grandes cantidades de Cro-Cro reprime proteínas cII y cIII que inducen síntesis de cI-Proteasa FtsH del hospedador degrada cII. Esto afecta a cI.
http://www.blackwellpublishing.com/trun/artwork/Animations/Lambda/lambda.html
CURIOSIDADES CURIOSIDADES CURIOSIDADES CURIOSIDADES
DE DE DE DE
OTROS BACTERIÓFAGOSOTROS BACTERIÓFAGOSOTROS BACTERIÓFAGOSOTROS BACTERIÓFAGOSOTROS BACTERIÓFAGOSOTROS BACTERIÓFAGOSOTROS BACTERIÓFAGOSOTROS BACTERIÓFAGOS
Fago MS2
-SOLAPAMIENTO DE GENES
-HOSPEDADOR: E. coli F+ (con plásmido conjugativo), tiene pilisexuales donde el fago se une.
Fagos M13, fd, f1
-No produce lisis de la bacteria, se libera por GEMACION
Pared de la bacteria
M13 se usa como vector de clonación en Ingeniería Genética.
GEMACIÓN
Región intergénica de M13:-promotor lacP-gen lacZ’ de beta-galactosidasa- un sitio de clonado múltiple
DNA foráneo(inserto)M13
Fago M13
- un sitio de clonado múltiple
Placas de lisis por M13 sin inserto: azules
Placas de lisis por M13 con inserto: incoloras
bacteria sensible
M13
Sustrato: X-gal
Bacteriófago Mu (mutador)
-Acetilación de residuos de adeninapara eludir los sistemas de restricción del hospedador
-FAGO ATEMPERADO: Se integra dentro de genes del hospedador e induce MUTACIONES en el genoma del induce MUTACIONES en el genoma del hospedador
-Puede revertir A CICLO LÍTICO
-Se replica POR TRANSPOSICIÓN
Fago Mu se usa en Ingeniería Genética para generar fenotipos bacterianos mutantes.
Mu y la región invertible G: determina especificidad de hospedador
Especificidad de hospedador según fibras de cola: G+ (lee SU): E. coli K12
G- (lee S’U’): otros hospedadores
METODOS COMUNES PARA INACTIVAR VIRUS
A. ESTERILIZACIÓN - vapor a presión, calor seco, óxido de etileno, rayos
gamma
B. DESINFECCIÓN DE SUPERFICIES- hipoclorito de sodio, glutaraldheido, formaldheido, ácido
peracético
C. DESINFECCIÓN DE LA PIEL- clorhexidina, etanol al 70%
D. PRODUCCIÓN DE VACUNAS- formaldheido, beta-propiolactona, psoraleno + UV