Vezba 1 Organizacija laboratorije
-
Upload
zeljkopopovic -
Category
Documents
-
view
158 -
download
12
Transcript of Vezba 1 Organizacija laboratorije
![Page 1: Vezba 1 Organizacija laboratorije](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061416/5535f0e05503467c7a8b47d6/html5/thumbnails/1.jpg)
molekularna biologija eukariotaletnji semestar 2011/2012.
Vežba 1:
ORGANIZACIJA MOLEKULARNO-BIOLOŠKE LABORATORIJE
(i drugih sličnih laboratorija)
ms Željko D. Popović Univerzitet u Novom Sadu
Prirodno-matematički fakultet
Departman za biologiju i ekologiju
Laboratorija za biohemiju i molekularnu biologiju
![Page 2: Vezba 1 Organizacija laboratorije](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061416/5535f0e05503467c7a8b47d6/html5/thumbnails/2.jpg)
Naučno-istraživačka laboratorija
• Jedna ili više prostorija specijalno uređenih za izvođenje naučnog rada
(izvođenje eksperimenata, različitih analiza, obrade
biološkog/nebiološkog materijala itd.)
• Mogu biti opšte namene ili usko-specijalizovane
(npr. laboratorija za gasnu hromatografiju)
![Page 3: Vezba 1 Organizacija laboratorije](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061416/5535f0e05503467c7a8b47d6/html5/thumbnails/3.jpg)
Organizacija• Prvi preduslov – postojanje prostora
• U zavisnosti od tipa laboratorije, potreba i mogućnosti – prostorije mogu biti veće ili manje površine, a moguće je i naknadno pravljenje posebnih odeljaka u okviru prostorija
• Npr. odeljak za vage, PCR, izolaciju NK, mračna komora i sl.
![Page 4: Vezba 1 Organizacija laboratorije](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061416/5535f0e05503467c7a8b47d6/html5/thumbnails/4.jpg)
Laboratorija
• Cilj je da se u njoj radi efikasno i što bolje i stoga najvažnije je da je laboratorija FUNKCIONALNO ORGANIZOVANA !
• Da predstavlja niz prostorija sa utvrđenim namenama, u kojima postoje tačna pravila rada, uputstva za rukovanje uređajima, protokoli o bezbednosti na radu kao i uputstva u slučaju vanrednih situacija.
![Page 5: Vezba 1 Organizacija laboratorije](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061416/5535f0e05503467c7a8b47d6/html5/thumbnails/5.jpg)
• Ipak, taj prostor treba da je prijatan za rad, jer se u njemu provodi dosta vremena.
• Npr. osvetljenost je važna odlika ...
• Treba da je prilagođena potrebama ljudi koji rade u njoj, a ne podređena estetskim vrednostima... iako je lepo ako postoji preklapanje potreba a zadovolje se i estetski apsekti laboratorije ...
Laboratorija
![Page 6: Vezba 1 Organizacija laboratorije](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061416/5535f0e05503467c7a8b47d6/html5/thumbnails/6.jpg)
Molekularno-biološka laboratorija (MBL)
• Da se podsetimo šta je to predmet istraživanja molekularne biologije:
PROMET GENETIČKE INFORMACIJE KROZ ŽIVE SISTEME
DNK RNK proteini
![Page 7: Vezba 1 Organizacija laboratorije](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061416/5535f0e05503467c7a8b47d6/html5/thumbnails/7.jpg)
Organizacija MBL
• Prostor za čuvanje/gajenje biološkog materijala
• Odeljak/prostorija za držanje hemikalija i
laboratorijskog potrošnog materijala (engl. store
room)
• Odeljak/prostorija za precizna merenja (vage)
• Odeljak/prostorija za izolaciju nukleinskih
kiselina i proteina, i to ako je moguće, odvojeno
mesto za izolaciju RNK (RNase free zone)
![Page 8: Vezba 1 Organizacija laboratorije](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061416/5535f0e05503467c7a8b47d6/html5/thumbnails/8.jpg)
• Odeljak/prostorija za PCR i elektroforezu
• Prostorija za mikrobiološki rad (za gajenje
vektora, kloniranje, transformaciju i selekciju
vektora)
• Prostorija za sekvenator
• Prostorija za mikroerej
• Hladna soba
....i druge prostorije i odeljci
prema potrebama
![Page 9: Vezba 1 Organizacija laboratorije](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061416/5535f0e05503467c7a8b47d6/html5/thumbnails/9.jpg)
MBL• Stolovi (engl. lab bench) – prostori predviđeni za rad
• Treba da postoji više radnih mesta – prema broju istraživača koji rade u labu
• Svako radno mesto treba da ima zaseban set automatskih pipeta i po mogućnosti minifuge i slične korisne male aparate (ili bar da ih dva radna mesta dele) kako se ne bi stvarali zastoji i gužve pri istovremenom radu
• Svako radno mesto treba da poseduje ormarić (engl. cupboard) ili više njih za odlaganje raznoraznih stvari osobe koja koristi dato radno mesto, a po mogućnosti sa fijokama (engl. drawers)
![Page 10: Vezba 1 Organizacija laboratorije](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061416/5535f0e05503467c7a8b47d6/html5/thumbnails/10.jpg)
Dobro iskoristiti prostor
![Page 11: Vezba 1 Organizacija laboratorije](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061416/5535f0e05503467c7a8b47d6/html5/thumbnails/11.jpg)
Par exemplum
A divine laboratory!
Trust me I’ve been there!
UK, Cambridge, British Antarctic Survey ANGEL lab
(ANtarctic GEnomic Laboratory)
![Page 12: Vezba 1 Organizacija laboratorije](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061416/5535f0e05503467c7a8b47d6/html5/thumbnails/12.jpg)
![Page 13: Vezba 1 Organizacija laboratorije](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061416/5535f0e05503467c7a8b47d6/html5/thumbnails/13.jpg)
PCR, Sequencig &
![Page 14: Vezba 1 Organizacija laboratorije](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061416/5535f0e05503467c7a8b47d6/html5/thumbnails/14.jpg)
& Electrophoresis room
![Page 15: Vezba 1 Organizacija laboratorije](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061416/5535f0e05503467c7a8b47d6/html5/thumbnails/15.jpg)
Laboratoriju koristi više ljudi,
a gde je sto ljudi, sto je i ćudi...
i zato moraju postojati
STROGA PRAVILA PONAŠANJA
![Page 16: Vezba 1 Organizacija laboratorije](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061416/5535f0e05503467c7a8b47d6/html5/thumbnails/16.jpg)
• MORA BITI JASNO OBELEŽENO GDE SE ŠTA NALAZI,
PRIDRŽAVATI SE TOG REDA, AKO NASTANE PROMENA
– OBAVESTITI SVE KOLEGE !!! Najbolje pismeno!
• PRIDRŽAVANJE MERA PREDOSTROŽNOSTI I OPREZA PRI RADU
• PRAVILAN RAD, UPOTREBA UREĐAJA I NJIHOVO ODRŽAVANJE
• JEDNAK NAČIN ZA OBELEŽAVANJE PRAVLJENIH RASTVORA U
LABU
• PRAĆENJE KOLIČINE HEMIKALIJA, UPOZORITI NA ONE KOJE SU
PRI KRAJU, AKO PRIMETIMO DA NEKA SUPSTANCA NE POKAZUJE
ZADOVOLJAVAJUĆA SVOJSTVA OBAVESTITI KOLEGE
• VOĐENJE EVIDENCIJE PRI RADU – DOSLEDNOST!
![Page 17: Vezba 1 Organizacija laboratorije](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061416/5535f0e05503467c7a8b47d6/html5/thumbnails/17.jpg)
• PAŽLJIV RAD I REDOVNO ODRŽAVANJE HIGIJENE LAB-a
• JEDNAKA RASPODELA OBAVEZA (NPR. SVAKO JE ZADUŽEN ZA
ODRŽAVANJE JEDNOG/VIŠE UREĐAJA, SVAKO JE BAR JEDNOM U MESECU
ZADUŽEN ZA NEDELJNO MALO ČIŠĆENJE LABA I SL.)
• KOLEGIJALNOST I KOOPERATIVNOST PRI ISTOVREMENOM RADU
• STRPLJIVOST !
NE PODRAZUMEVATI NIŠTA !!!
BOLJE PITATI NEGO NAPRAVITI SEBI I DRUGIMA
PROBLEME!
![Page 18: Vezba 1 Organizacija laboratorije](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061416/5535f0e05503467c7a8b47d6/html5/thumbnails/18.jpg)
Mere zaštite i oprezaMANTIL
NAOČARE
RUKAVICE
PAŽLJIVA PRIPREMA PRE RADA
![Page 19: Vezba 1 Organizacija laboratorije](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061416/5535f0e05503467c7a8b47d6/html5/thumbnails/19.jpg)
DA LI SE MOŽE OVAKO OBLAČITI ?
![Page 20: Vezba 1 Organizacija laboratorije](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061416/5535f0e05503467c7a8b47d6/html5/thumbnails/20.jpg)
Tipovi rukavica
nitrilne vinyl glove liners
Powderedor
Powder-free
PCR RADITI ISKLJUČIVO SA POWDER FREE RUKAVICAMA
![Page 21: Vezba 1 Organizacija laboratorije](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061416/5535f0e05503467c7a8b47d6/html5/thumbnails/21.jpg)
PROSTOR U KOME RADIMO (LAMINAR, FUME HOOD)
HIGIJENA I PAŽNJA PRI RADU !!!
![Page 22: Vezba 1 Organizacija laboratorije](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061416/5535f0e05503467c7a8b47d6/html5/thumbnails/22.jpg)
![Page 23: Vezba 1 Organizacija laboratorije](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061416/5535f0e05503467c7a8b47d6/html5/thumbnails/23.jpg)
ODLAGANJE OTPADA(WASTE DISPOSAL)
HEMIJSKI OTPAD (engl. chemical waste)
BIOLOŠKI ODTPAD (engl.biological waste, biohazard)
![Page 24: Vezba 1 Organizacija laboratorije](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061416/5535f0e05503467c7a8b47d6/html5/thumbnails/24.jpg)
MBL• Biološki materijal
– Bezopasan ???– Opasan (zarazan)
• Hemikalije– Bezopasne ??? (manje opasne)– Opasne (toksične, iritirajuće, zapaljive, isparljive)
• Posuđe– Stakleno– Plastično– Višekratno– Jednokratno (disposable)
• Uređaji različitih namena
![Page 25: Vezba 1 Organizacija laboratorije](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061416/5535f0e05503467c7a8b47d6/html5/thumbnails/25.jpg)
POSUĐE
Stakleno posuđe (glassware)
aluminijum-silikatno stakloborsilikatno staklaflint staklo (PbO !!!) i dr
PRANJE
STERILIZACIJA
![Page 26: Vezba 1 Organizacija laboratorije](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061416/5535f0e05503467c7a8b47d6/html5/thumbnails/26.jpg)
ERLENMEYER SIDE ARM ERLENMEYER
MORTAR & PESTLE
FUNNEL
GRADUATED CYLINDERVOLUMETRIC
FLASK
FORCEPS
DESICCATOR
![Page 27: Vezba 1 Organizacija laboratorije](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061416/5535f0e05503467c7a8b47d6/html5/thumbnails/27.jpg)
Plastično posuđe(plasticware)
Po sastavu razlikujemo plastično posuđe od:
polivinila polietilena polikarbonata poliolefina teflona
PRANJE ????
NE TRETIRATI hrom-sumpornom kiselinom NITI BILO KOJIM oksidirajućim sredstvima
![Page 28: Vezba 1 Organizacija laboratorije](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061416/5535f0e05503467c7a8b47d6/html5/thumbnails/28.jpg)
VARIOUS VOLUMES MINITUBES
TUBE RACKS
![Page 29: Vezba 1 Organizacija laboratorije](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061416/5535f0e05503467c7a8b47d6/html5/thumbnails/29.jpg)
PLATE RACKS
COOLING PLATE RACKS
![Page 30: Vezba 1 Organizacija laboratorije](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061416/5535f0e05503467c7a8b47d6/html5/thumbnails/30.jpg)
PIPETE (PIPETTES) automatske pipete
Single channel & Multi-channel
Adjustable & fixed volumes
Basic & digital displey pipettes
![Page 31: Vezba 1 Organizacija laboratorije](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061416/5535f0e05503467c7a8b47d6/html5/thumbnails/31.jpg)
Nastavci za automatske pipete (tips)
Filter tipsLoading tips
EXCLUSIVELY DISPOSABLE PLASTICWARE – DO NOT RE-USE OR WASH IT !!!
![Page 32: Vezba 1 Organizacija laboratorije](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061416/5535f0e05503467c7a8b47d6/html5/thumbnails/32.jpg)
Nikad ne vraćati sadržaj iz pipete u bocu iz koje je uzet rastvor
Pipette holders
![Page 33: Vezba 1 Organizacija laboratorije](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061416/5535f0e05503467c7a8b47d6/html5/thumbnails/33.jpg)
PRIPREMANJE REAGENASA (REAGENTS)
Voda - destilovana voda (distilled w) - dejonizavana voda
Puferi (Buffer) Prilikom odabira pufera treba voditi računa o sledećim njegovim karakteristikama:
pKa vrednost promena pKa u zavisnosti od
promene temperature promena pKa sa razblaženjem rastvorljivost interakcija sa drugim
komponentama (metalnim jonima i enzimima)
UV apsorbanca permeabilnost kroz biološke
membrane cena
Rastvori (solutions)
- štok (koncentrovani) rastvori
- razlivati u manje zapremine (to aliquot)
![Page 34: Vezba 1 Organizacija laboratorije](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061416/5535f0e05503467c7a8b47d6/html5/thumbnails/34.jpg)
CHEMICALS & KITS
![Page 35: Vezba 1 Organizacija laboratorije](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061416/5535f0e05503467c7a8b47d6/html5/thumbnails/35.jpg)
engl. KIT = KOMPLET
Izbegavajte konstrukcije:
....RNK smo izolovali pomoću kita (?!) za RNK....
Bolje je ...RNK je izolovana pomoću kompleta za izolaciju ukupne RNK...i sl.
![Page 36: Vezba 1 Organizacija laboratorije](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061416/5535f0e05503467c7a8b47d6/html5/thumbnails/36.jpg)
LABORATORIJSKI UREĐAJI 1. autoklav
2. laminar
3. digestor
4. frižider (5oC)
5. zamrzivači (-20oC, -80oC)
6. vodeno kupatilo
7. termoblokovi
8. vorteks i šejkeri
9. vakuum pumpe
10. aparati za dobijanje čiste vode
11. pH metar
12. različite vrste mešalica
13. različite vrste vaga
14. termostati
15. centrifuge
16. mikroplate centrifuge
17. vakuum centrifuge
18. minifuge
19. spektrofotometri
20. PCR mašine
21. sekvenatori
22. mikroerej štampači
23. CO2 inkubatori
24. elektroforeze
25. transluminator
26. fotoaparat i/ili fotokomora
27. mikrotalasna pećnica
i mnogi drugi...
![Page 37: Vezba 1 Organizacija laboratorije](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061416/5535f0e05503467c7a8b47d6/html5/thumbnails/37.jpg)
DIGESTORI (engl. FUME HOODS)
WALK-IN FH
![Page 38: Vezba 1 Organizacija laboratorije](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061416/5535f0e05503467c7a8b47d6/html5/thumbnails/38.jpg)
VAGE (engl. BALANCES)
![Page 39: Vezba 1 Organizacija laboratorije](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061416/5535f0e05503467c7a8b47d6/html5/thumbnails/39.jpg)
Centrifuge
VacufugeMicroplate centrifuge
![Page 40: Vezba 1 Organizacija laboratorije](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061416/5535f0e05503467c7a8b47d6/html5/thumbnails/40.jpg)
minifuge
![Page 41: Vezba 1 Organizacija laboratorije](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061416/5535f0e05503467c7a8b47d6/html5/thumbnails/41.jpg)
TRESILICE I VORTEKSI
ROCKER
PLATE SHAKER
![Page 42: Vezba 1 Organizacija laboratorije](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061416/5535f0e05503467c7a8b47d6/html5/thumbnails/42.jpg)
HEATING BLOCKS & BATH
BATHS
![Page 43: Vezba 1 Organizacija laboratorije](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061416/5535f0e05503467c7a8b47d6/html5/thumbnails/43.jpg)
incubators
oven
![Page 44: Vezba 1 Organizacija laboratorije](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061416/5535f0e05503467c7a8b47d6/html5/thumbnails/44.jpg)
pH meter
![Page 45: Vezba 1 Organizacija laboratorije](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061416/5535f0e05503467c7a8b47d6/html5/thumbnails/45.jpg)
Nanodrop
![Page 46: Vezba 1 Organizacija laboratorije](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061416/5535f0e05503467c7a8b47d6/html5/thumbnails/46.jpg)
Thermocycler
![Page 47: Vezba 1 Organizacija laboratorije](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061416/5535f0e05503467c7a8b47d6/html5/thumbnails/47.jpg)
A PCR corner in the LAB !
![Page 48: Vezba 1 Organizacija laboratorije](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061416/5535f0e05503467c7a8b47d6/html5/thumbnails/48.jpg)
Electrophoresis
tank
gel traycomb
![Page 49: Vezba 1 Organizacija laboratorije](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061416/5535f0e05503467c7a8b47d6/html5/thumbnails/49.jpg)
flask
wells
lanes
![Page 50: Vezba 1 Organizacija laboratorije](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061416/5535f0e05503467c7a8b47d6/html5/thumbnails/50.jpg)
TRANSLUMINATOR
![Page 51: Vezba 1 Organizacija laboratorije](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061416/5535f0e05503467c7a8b47d6/html5/thumbnails/51.jpg)
GELIMIGERS
![Page 52: Vezba 1 Organizacija laboratorije](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061416/5535f0e05503467c7a8b47d6/html5/thumbnails/52.jpg)
Sequencer
![Page 53: Vezba 1 Organizacija laboratorije](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061416/5535f0e05503467c7a8b47d6/html5/thumbnails/53.jpg)
ULTRA PURE WATER
![Page 54: Vezba 1 Organizacija laboratorije](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061416/5535f0e05503467c7a8b47d6/html5/thumbnails/54.jpg)
LAB NOTEBOOKS
![Page 55: Vezba 1 Organizacija laboratorije](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061416/5535f0e05503467c7a8b47d6/html5/thumbnails/55.jpg)
....yeah, sure!