VALIDASI METODE DAN PENETAPAN KADAR NATRIUM …repository.ump.ac.id/2835/1/COVER.pdf · B. RIWAYAT...

0

VALIDASI METODE DAN PENETAPAN KADAR NATRIUM

DIKLOFENAK DENGAN KCKT SERTA APLIKASINYA

PADA PENETAPAN NATRIUM DIKLOFENAK TABLET

SPESIALITE DALAM PLASMA DARAH TIKUS WISTAR

JANTAN SECARA IN VITRO

SKRIPSI

Untuk memenuhi sebagian persyaratan

Mencapai Derajat Sarjana S-1

Diajukan Oleh

HERLINDA AYUNINGSIH

0908010075

FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH PURWOKERTO

PURWOKERTO

2014

1

VALIDASI METODE DAN PENETAPAN KADAR NATRIUM

DIKLOFENAK DENGAN KCKT SERTA APLIKASINYA

PADA PENETAPAN NATRIUM DIKLOFENAK TABLET

SPESIALITE DALAM PLASMA DARAH TIKUS WISTAR

JANTAN SECARA IN VITRO

Skripsi

Sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar

Sarjana Farmasi padaProgram Studi Farmasi

HERLINDA AYUNINGSIH

0908010075

FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH PURWOKERTO

PURWOKERTO

2014

i

Validasi Metode Dan Penetapan…, Herlinda Ayuningsih, Fakultas Farmasi, UMP, 2014

2

ii


4

HALAMAN PERNYATAAN

Yang bertanda tangan di bawah ini :

Nama : Herlinda Ayuningsih

NIM : 0908010075

Program Studi : Farmasi

Fakultas : Farmasi

Universitas :Universitas Muhammadiyah Purwokerto

Menyatakan dengan sebenar-benarnya bahwa skripsi ini adalah hasil karya saya

dan bukan penjiplakan dari hasil karya orang lain.

Demikian pernyataan ini, dan apabila kelak dikemudian hari terbukti ada unsur

penjiplakan, maka saya bersedia mempertanggungjawabkan sesuai ketentuan

yang berlaku.

Purwokerto, 13 Febuari 2014

Yang menyatakan

Herlinda Ayuningsih

iv


5

DAFTAR RIWAYAT HIDUP

A. IDENTITAS

Nama : Herlinda Ayuningsih

Nim : 0908010075

Tempat Tanggal Lahir : Banjarnegara, 18 Juni 1990

Agama : Islam

Alamat : Karangsalam, RT 04/ II Kec. Susukan 53475

Kabupaten Banjarnegara, Jawa Tengah

B. RIWAYAT PENDIDIKAN

Pendidikan :

1. SDN 02 Karangsalam Tahun 1997-2002

2. SMPN 01 Susukan Tahun 2003-2006

3. SMAN 01 Purworejo Klampok Tahun 2006-2009

4. Program Sarjana S-1 Farmasi Tahun 2009-2014

C. RIWAYAT PEKERJAAN

-

D. RIWAYAT KELUARGA

Nama orangtua :

1. Ayah : Alm Paryoto sastro pranoto

2. Ibu : suparti

v


6

HALAMAN PERSEMBAHAN

Sebuah karya kecil ini penulis persembahkan untuk:

Allah SWT yang telah memberiku rahmat, anugrah, kemudahan dalam menyelesaikan karya ini. Almarhum ayah tercinta yang selalu memberiku kekuatan. Ibunda dan papa tercinta yang senantiasa memberi semangat, mendoakan kebahagian dan keberhasilanku, beribu rasa terimakasih dan rasa hormat tak mampu untuk membalas semua yang ibu dan papa berikan kepadaku. Kakakku Heris tersayang, yang telah memberikan semangat dan doa serta dukungan kepadaku. Adeku Deni cahyaningrum yang selalu ada untuk membuatku tersenyum karena keceriaanmu. Sahabat-sahabatku Arini (Nene), Sinta(0c0r), Anggun(aun), Lita, Maulia, Fuad, Mas Aan, yang selalu ada dan membantuku, memberikan semangat. Terimakasih sahabat. Seluruh keluarga besar Darmo Suwito yang selalu memberikan doa. Terimakasih atas segala dukungan dan kritikan yang membangun bagi kemajuan penulis.

vi


7

MOTTO

“Jangan jadikan suatu masalah sebagai sebuah alasan untuk berhenti melakukan sesuatu. Manusia hanya bisa berusaha dan berdoa, namun hanya Allah yang menentukan segalanya”. “Berjalan dengan tenang, melangkah dengan pasti adalah jalan terbaik untuk meraih kesuksesan”. “Jangan pernah menyerah dengan keadaan, walaupun dihadapan kita begitu banyak kesulitan, yakinlah kalo kita bisa melewati semua dengan baik”. “Apapun kata yang keluar begitu menyakitkan. Dengarkanlah”

vii


9

ABSTRACT

HERLINDA AYUNINGSIH. Method Validation and Levels Determination of

Diclofenac Sodium by HPLC and Its Application to Determination Diclofenac

Sodium Tablets Spesialite in Blood Plasma Male Wistar Rats in Vitro.

Under guidance of SUSANTI and ASMIYENTI DJALIASRIN DJALIL

The Background: The use of diclofenac sodium in addressing various problems

for all kinds of pain, migraine and gout. Activities by way of inhibiting the

enzyme cyclo-oxygenase that inhibited prostaglandin formation (Tjay and

Rahardja, 2007). To ensure safety and minimize the side effects of a drug

necessary to test the drug analysis in biological fluids (Shargel and Yu, 2005).

The Aim of Research: This research conducted to prove that the high

performance liquid chromatography method is very valid to define levels of

diclofenac sodium in tablets Spesialite on Wistar rat plasma in vitro.

The Method of Research: Type of research method used is non-experimental,

instruments such as HPLC UV detector (273 nm), mobile phase of methanol:

acetate buffer pH 4.2 by comparison 70:30, the stationary phase chromatography-

octadecyl coloumliquid cylane and a flow rate of 0.7 mL / min. Standard materials

used are e merck diclofenac sodium, diclofenac sodium tablets Spesialite and

wistar rat blood plasma. Validation of analytical methods include liniearitas, limit

of detection, limit of quantitation, precision, accuracy, and conducted

determination method diklofenakspesialite sodium in Wistar rat plasma in vitro.

The Result: Linearity test results obtained with the correlation coefficient r count

or value = 0.998 (> r table 0.707), limit of detection = 0.2 mg / mL, the limit of

quantitation = 0.6 mg / mL, accuracy or precision concentration of 4 mg / mL =

0.57% coefficient of variation (≤ 2%), precision or accuracy for the addition of

diclofenac sodium. 7 mg / mL average recovery of 105.4762%, and determination

of diclofenac sodium tablets 50 mg Spesialite plasma concentrations obtained

with the 3 series range of levels of 51.002 mg / tablet 50.902 mg / tablet or

acquired 98.51% percent of - 102%.

Conclusion: Based on the above results it can be concluded that the high

performance liquid chromatography method is valid to analyze Spesialite

diclofenac sodium levels in the blood plasma of Wistar rats in vitro.

Key words: natrium diklofenak, validation method, high performance liquid

chromatography, plasma, in vitro.

ix


10

PRAKATA

Segala puji bagi Allah SWT atas rahmat, petunjuk dan kemudahan yang

telah diberikan dalam penyusunan skripsi yang berjudul ”Validasi Metode dan

Penetapan Kadar Natrium diklofenak dengan KCKT serta Aplikasinya Pada

Penetapan Natrium diklofenak Tablet Spesialite dalam Plasma Darah Tikus

Wistar Jantan secara In Vitro.Skripsi ini disusun sebagai salah satu syarat untuk

mencapai gelar Sarjana Farmasi di Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah

Purwokerto.

Penulis sepenuhnya menyadari bahwasannya terselesaikannya skripsi ini

tidak terlepas dari bantuan berbagai pihak. Oleh karena itu penulis ingin

mengucapkan rasa terimakasih kepada:

1. Bapak Dr. Syamsuhadi Irsyad, S.H.,M.H. selaku Rektor Universitas

Muhammadiyah Purwokerto.

2. Dr. Nunuk aries Nurulita, M.Si, Apt selaku Dekan Fakultas Farmasi

Universitas Muhammadiyah Purwokerto.

3. Susanti, M.Phil, Apt (pembimbing I) dan Dr. Asmiyenti D.D, S.Si,

M.Si(pembimbing II) yang telah senantiasa memberikan waktu, didikan,

arahan, saran dan masukan serta ilmu pengetahuannya dengan penuh

kesabaran dan perhatian, sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi ini

dengan sebaik-baiknya.

4. Drs. Sabikhis.,Apt dan Anjar Mahardian M,si.,Apt selaku sebagai ketua dan

sekretaris penguji pada sidang skripsi yang telah memberikan waktu, arahan,

serta saran masukan ilmu pengetahuannya.

5. Seluruh Dosen dan Staf Karyawan Fakultas Farmasi Universitas

Muhammadiyah Purwokerto.

6. Rochmadi Budi Setiyanto dan Dra. Titi Sumarti yang telah membantu dan

mendukung penulis sehingga penelitian ini berjalan lancar..

7. Kedua orang tua terima kasih atas kesabaran, doa, dan dukungannya sampai

selesainya skripsi ini.

8. Ayah (alm) yang telah memberikan tuntunan dan arahan dalam hidupku.

x


11

9. Kakakku yang selalu memberikan semangat dan motivasi kepadaku.

10. Teman seperjuanganku Maulia dan Fuad yang selalu berjuang bersama

sampai selesainya skripsi ini.

11. Sahabat-sahabatku, terima kasih atas dukungan, kebersamaan dan

canda tawa yang kalian berikan selama ini.

12. Kakak angkatan yang telah membantu dan memberikan arahan kepadaku.

13. Teman-teman Farmasi angkatan 2009 terimakasih atas kebersamaan dan

kekeluargaan yang kalian berikan selama ini.

14. Teman-teman cost yang selalu ada dalam suka dukaku dan terimakasih atas

kebersamaannya.

15. PT. Phapros yang memberikan bahan baku untuk digunakan dalam penelitian

ini.

16. Semua pihak yang telah membantu hingga selesainya skripsi ini.

Dalam penyusunan skripsi ini penulis menyadari masih terdapat banyak

kekurangan, untuk itu penulis mohon maaf. Saran dan kritik yang bersifat

membangun sangat penulis harapkan demi penyempurnaan skripsi ini. Sebagai

kata penutup, penulis berharap semoga penelitian ini dapat memberikan manfaat

bagi penulis pada khususnya dan bagi pembaca pada umumnya.

Purwokerto, 13 Februari 2014

Herlinda Ayuningsih

xi


12

DAFTAR ISI

Halaman

HALAMAN JUDUL ...................................................................................... i

HALAMAN PERSETUJUAN ...................................................................... ii

HALAMAN PENGESAHAN ........................................................................ iii

HALAMAN PERNYATAAN ........................................................................ iv

HALAMAN DAFTAR RIWAYAT HIDUP ................................................ v

HALAMAN PERSEMBAHAN .................................................................... vi

MOTTO .......................................................................................................... vii

INTISARI ....................................................................................................... viii

ABSTRACT ..................................................................................................... ix

KATA PENGANTAR .................................................................................... x

DAFTAR ISI ................................................................................................... xii

DAFTAR GAMBAR ...................................................................................... xv

DAFTAR TABEL .......................................................................................... xvi

DAFTAR LAMPIRAN .................................................................................. xvii

BAB I PENDAHULUAN ........................................................................ 1

A. Latar Belakang Masalah ......................................................... 1

B. Perumusan Masalah ............................................................... 2

C. Tujuan Penelitian ................................................................... 2

D. Manfaat Penelitian ................................................................. 2

BAB II TINJAUAN PUSTAKA .............................................................. 3

A. Obat Merk .............................................................................. 3

B. Natrium diklofenak ................................................................ 3

C. AnalisisCairan Biologis dalam Darah .................................... 5

D. Validasi Metode Analisis ....................................................... 6

1. Uji Presisi ........................................................................ 6

2. Uji Liniearitas ................................................................. 6

3. Uji Kecermatan ............................................................... 6

4. Batas Deteksi dan Batas Kuantitasi ................................ 7

E. Kromatografi Cair Kinerja Tinggi (KCKT) ........................... 8

xii


13

BAB III METODOLOGI PENELITIAN ................................................ 12

A. Jenis dan Rancangan Penelitian ............................................. 12

B. Variabel Penelitian ................................................................. 12

1. Variabel Bebas ................................................................ 12

2. Variabel Terikat .............................................................. 12

3. Variabel Terkendali ......................................................... 12

C. Waktu dan Tempat Penelitian ................................................ 12

D. Alat dan Bahan ....................................................................... 12

1. Alat .................................................................................. 13

2. Bahan .............................................................................. 13

E. Metode Kerja .......................................................................... 13

1. Penyiapan Bahan Uji ....................................................... 13

2. Pembuatan Bufer asetat pH 4,2 ....................................... 14

3. Pembuatan Fase Gerak .................................................... 14

4. Kondisi kromatografi cair kinerja tinggi ......................... 14

5. Prosedur Pengambilan Plasma ........................................ 14

6. Pembuatan Larutan stok dan seri konsentrasi ................

7. Validasi metode .............................................................. 15

a. Liniearitas ................................................................ 15

b. Presisi ...................................................................... 15

c. Perolehan kembali .................................................... 16

8. Aplikasi metode kadar na.diklofenak merk dalam

plasma ............................................................................. 16

a. Uji keseragamaan bobot ........................................... 16

b. Penetapan kadar tablet na.diklofenak merk ............. 17

9. Analisis hasil ................................................................... 17

BAB IV HASIL PENELITIAN DAN PEMBAHASAN ......................... 18

1. Hasil Validasi Penetapan Kadar Na.diklo pada KCKT ......... 18

a. Uji Linearitas................................................................... 20

b. Uji Presisi ........................................................................ 26

c. Batas Deteksi dan Batas Kuantitasi ................................ 30

d. Uji Kecermatan............................................................... 31

xiii


14

2. Hasil Uji Metode Penetapan Kadar Natrium

diklofenakMerk dalam sediaan Tablet ............................... 32

a. Hasil Uji Keseragamaan Bobot ....................................... 35

b. Penetapan Kadar Na.diklofenak merk dalam Sediaan

Tablet .............................................................................. 35

BAB V KESIMPULAN DAN SARAN ................................................... 42

A. Kesimpulan ............................................................................ 42

B. Saran ....................................................................................... 42

DAFTAR PUSTAKA ..................................................................................... 43

LAMPIRAN .................................................................................................... 44

xiv


15

DAFTAR TABEL

Tabel Judul halaman

1. kondisi sistem KCKT ............................................................................. 15

2. syarat penyimpanan bobot tablet ............................................................ 17

3. hasil perhitungan larutan baku ................................................................ 21

4. Hasil uji presisi 4 μg ............................................................................... 27

5. data LOD dan LOQ ................................................................................ 32

6. Perhitungan perolehan kembali .............................................................. 33

xv


16

DAFTAR GAMBAR

Gambar Judul halaman

Gambar 1. Struktur Natrium diklofenak .................................... 5

Gambar 2. Skema KCKT ........................................................... 9

Gambar 3. Kromatogram Kurva Baku ...................................... 23

Gambar 4. Grafik Persamaan Regresi Linear ............................ 24

Gambar 5. Kromatogram Uji Presisi ......................................... 28

Gambar 6. Kromatogram Perolehan Kembali ........................... 32

xvi


17

DAFTAR LAMPIRAN

halaman

Lampiran 1. Perhitungan Koefisien Sederhana ................................................ 44

Lampiran 2. Perhitungan LOD dan LOQ ......................................................... 45

Lampiran 3. Perhitungan Uji Presisi ................................................................ 46

Lampiran 4. Data Kromatogram uji Blanko .................................................... 47

Lampiran 5. Perhitungan Perolehan Kembali .................................................. 50

Lampiran 6. Data Aplikasi keseragaman Bobot .............................................. 52

Lampiran 7. Perhitungan Kadar Natrium diklofenak e merck ........................ 53

Lampiran 8. Perhitungan SD Penetapan Kadar Na. Diklo ............................... 57

xvii


VALIDASI METODE DAN PENETAPAN KADAR NATRIUM …repository.ump.ac.id/2835/1/COVER.pdf · B. RIWAYAT...

Documents

Transcript of VALIDASI METODE DAN PENETAPAN KADAR NATRIUM …repository.ump.ac.id/2835/1/COVER.pdf · B. RIWAYAT...