Transport, captage, métabolisme et mobilisation des acides gras dans le tissu adipeux de lhomme....
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Transport, captage, métabolisme et mobilisation des acides gras
dans le tissu adipeux de l’homme.
Max LAFONTANDirecteur de Recherches InsermInserm Unité 858IFR-31, Institut Louis Bugnard, I2MRBP 8422531432 TOULOUSE cedex 4, [email protected]
De l’adipocyte isolé…........ à la physiologieDe l’adipocyte isolé…........ à la physiologie
Etudes sur le métabolisme des acides gras dans l’adipocyte ont été effectuées in vitro sur:- des adipocytes murins issus des lignées cellulaires 3T3-L1, 3T3-F442A ou ob17,- des adipocytes matures isolés de rats, de souris et humains,- des précurseurs adipocytaires murins et humains issusde la fraction stroma-vasculaire du tissu adipeux oudes cellules souches (hMADS) et différenciés en adipocytesin vitro.
Apport majeurs des études de transgenèse et d’invalidation de gènes chez la souris.
Travaux de physiologie beaucoup plus rares chez l’homme(bilans des différences artério-veineuses, microdialyse, études cinétiques avec des isotopes stables….).
Foie
Corps cétoniques
et CO2 VLDL
Tissu adipeux
TG LPL
Intestin grêle
Muscle,myocarde,
cortex rénal, etc.CO2
AGNEChylomicrons(via voie lymphatique)
Nutriments (lipides, protéines,
glucides, micronutriments…)
ATGL/LHS
LPL
TAG
AG
AGNE
AGNE
AGNE
TGAGNE
Concentration des AGNE plasmatiques et veineux chez 14 sujetsnormaux avant et après la prise d’un repas mixte
Concentration des AGNE plasmatiques et veineux chez 14 sujetsnormaux avant et après la prise d’un repas mixte
4003002001000-1000
500
1000
1500A
GN
E p
lasm
at i
qu
es
, µm
ol /l
Repas mixte
Sang veineuxdu tissu adipeux
Sang artériel
Temps, min
à jeûn
d’après Coppack et al., Clin. Sci. 1996 90: 09-15
Insuline plasmatique et libération des AGNE par la tissu adipeux (sang veineux) chez des sujets normaux.
Insuline plasmatique et libération des AGNE par la tissu adipeux (sang veineux) chez des sujets normaux.
-40 0 60 120 180 240 300 360
Temps après le repas (min)
0
0.5
1.0
1.5
lib
érat
ion
des
AG
NE
par
le
TA
µm
ol.1
00 m
l-1.m
in-1
0
20
40
60
80
Insu
lin
e p
lasm
atiq
ue
, m
U/l
Repas (3.1 MJ, 93 g CHO, 31 g graisse)
jeûne
n=13INSULINE
Flux transcapillaire des acides gras dans le tissu adipeux humainFlux transcapillaire des acides gras dans le tissu adipeux humain
Efflux des acides gras(mobilisation des lipides)
Influx des acides gras
Changement rapide après le jeûne induit par la réalimentation
Repas
Mesure des différences artérioveineuses
Frayn KN, Diabetologia, 2002, 45:1201-1210
Acidesgras
Acidesgras TGTG
LIPASESLIPASES
Acides grasGlycérolAcides grasGlycérol
Glycérol
Acides gras libres (AGNE)
Albumine
Dépôt de lipides(stimulé par l’insuline)
Mobilisation des lipides(supprimée par l’insuline)
Chylomicrons,Particules VLDL
Lipoprotéinelipase
Voies de stockage et de mobilisation des lipides dans le tissu adipeux humain
Voies de stockage et de mobilisation des lipides dans le tissu adipeux humain
LPL: Lipoprotéine lipase; HSL, lipase hormono-sensible;TG, triacylglycerol (triglycerides)
TG
Glucose
estérification
TG
TG
Stimulée par catécholamineset les peptides natriurétiques
13 sujets normaux à jeûn depuis la veille.
Frayn K. et al. 1995 Proc. Nutr. Soc. 54:177-189
Temps, min
300
-40 0 60 120 180 240 300 3600
50
100
150
200
250
300
350
400A
ctiv
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LH
S, n
mo
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céro
l.100
g-1.m
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50
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LP
L, n
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l.100
g-1 .. m
in-1LPL
Meal
Repas
LHS
INSULINE
Activités lipoproteine lipase (LPL) et lipase hormono-sensible (LHS) in vivo
Activités lipoproteine lipase (LPL) et lipase hormono-sensible (LHS) in vivo
AG
AGNE-Albumine
TGTG
TG
ATGLLHS/LMG
ADIPOCYTES
TG
TG
TG
TG
TG
TG
TG
LPL
LPL
LPL
LPL
-
Insuline +ASP (Acylation
stimulating protein) +
Insuline –Catécholamines +Peptides natriurétiques +(ANP et BNP)
Echanges lipides plasmatiques / tissu adipeuxEchanges lipides plasmatiques / tissu adipeux
Lipoprotéine lipase
TG lipase de l’adipocyteLipase hormono-sensibleLipase des monoglycérides
Chylomicrons
TG
TG
Proteoglycansheparan sulfate
(HSPG)
Endothelium capillaire
Lumière capillaire
Structure primaire du glycosylphosphatidylinositol-anchored high density lipoprotein binding protein 1 (GPIHBP1)
Structure primaire du glycosylphosphatidylinositol-anchored high density lipoprotein binding protein 1 (GPIHBP1)
Domaine chargénégativement
(17-25 résidus sontdes glutamates ou
aspartates chez la souris
Motif Ly6 UPAR contenant
de multiples cystéines
Motif hydrophobecarboxyterminal assurant
l’ancrage avecun glycosylphosphatidylinositol
UPAR:urokinase type plasminogen activator
Young SG et al, Curr. Opin. Lipidol., 2007, 18: 389-396
Young SG et al, Curr. Opin. Lipidol., 2007, 18: 389-396Beigneux AP et al. Cell Metabolism, 2007, 5: 279-291
Liaison de la lipoprotéine lipase et des particules de chylomicron parGPIHBP1- à la surface luminale de la cellule endothéliale capillaire
Liaison de la lipoprotéine lipase et des particules de chylomicron parGPIHBP1- à la surface luminale de la cellule endothéliale capillaire
Domaines structurauxde GPIHBP1
liant la LPL ou leschylomicrons ne sont
pas connus.
Proteoglycansheparan sulfate (HSPG)peuvent aussi lier LPL. contribution respectivedes deux structuresreste à définir.
-H
H
--
-
PLASMA
Membranes intracellulaires(mitochondrie, RE, peroxysomes, env.nucl..)
3) flip-flop(état non ionisé)
FABP
FABP
2) barrière de diffusion
-NEFAs
AlbumineLipoprotéines
Captage des acides gras par la celluleCaptage des acides gras par la cellule
Transportmédié par
des protéines
CYTOSOL6) liaison et métabolisme
1) association
4) transportmembranaire 5) dissociation-
-
Albumine VLDL Chylomicrons
FATP-1/4FAT/CD36
FABPpm
ALBPACBP
CoA Acyl-CoA
Acyl-CoA
AGACS
AG AG
CoA
AG2 3
1
4
Oxydation/esterification/acylation Transductiondu signal - Expression gènes
Membraneplasmique
D’après Koonen DPY et al. BBA, 2005, 1736:163
Stump, D. D. et al. J. Lipid Res. 2001;42:509-520
Proportions relatives de [3H]OA non-estérifié et esters tritiés (mono-, di-, triglycerides) dans des adipocytes de rat
Proportions relatives de [3H]OA non-estérifié et esters tritiés (mono-, di-, triglycerides) dans des adipocytes de rat
- Captage de l’acide oléique linéaire (20-30s) et estérification rapide- Le captage s’effectue par un mécanisme saturable et un flip-flop passif.
Pohl J. et al., Mol. Biol. Cell, 2005, 16: 24-31
Localisation des protéines impliquées dans le captage des acides gras à longue chaîne dans l’adipocyte.
Localisation des protéines impliquées dans le captage des acides gras à longue chaîne dans l’adipocyte.
4-7 membranePlasmique
8-13: Golgi
14-18: reticulum endo.
Fractionnementcellulaire
Captage des acides gras à longue chaîne (LCFA) et expression de FATPdans les préadipocytes et adipocytes 3T3-L1
Captage des acides gras à longue chaîne (LCFA) et expression de FATPdans les préadipocytes et adipocytes 3T3-L1
Western blot FATP 1 et 4
Northern blot of Poly(A+) mRNA
Captage de l’acide cis-parinaric
adipocytes
préadipocytes
Stahl A. et al. Dev. Cell, 2002, 2:477-488
Western blots FATP-1 et FATP-4 dans des fractions membranaires d’adipocytes 3T3-L1- Effet d’une stimulation insulinique
Western blots FATP-1 et FATP-4 dans des fractions membranaires d’adipocytes 3T3-L1- Effet d’une stimulation insulinique
PM: membrane plasmiqueLDM: membranes faible densitéHDM: memebranes haute densitéPEL: culot
Membrane plasmique
3T3-L1
Adipocytesepididymaires
PM- adipocytesepididymaires
Effet de l’insuline sur le captage des acides graspar les adipocytes 3T3-L1
Effet de l’insuline sur le captage des acides graspar les adipocytes 3T3-L1
Stahl A. et al. Dev. Cell, 2002, 2:477-488
[14C]oleate
Topologie membranaire des FATP
activitéacyl-CoA synthase
Lewis et al. JBC, 2001, 276: 37042-50
Influx couplé à l’estérification« metabolic trapping »
AMP-bindingsite
Effets de l’insuline sur la régulation de GLUT4 et FATP-1/4
Pohl J. et al., Mol. Biol. Cell, 2005, 16: 24-31
- FAT/CD36 est localisée de façon exclusive dans les radeaux lipidiques (rad.lip.) (riches en sphingolipides et cholestérol).- Destruction des rad. Lip. (cyclodextrine) ou inhibition CD36 perturbent le captage de l’oléate marqué.- FAT-CD36 est impliqué dans le captage AGL médié par rad.lip.
Autres fractionsmembranairesintracellulaires
Membraneplasmique Membranes résistantes aux détergents
Membranes solubles par détergents
Translocase des acides gras FAT/CD36Translocase des acides gras FAT/CD36
Stahl et al, Trends in Endocrinol. Metab., 2001, 12:266
Acyl-CoA synthase(ligase)
Acyl-CoA binding protéine
Fatty acid binding protéine
Systèmes protéiquesimpliqués dans le transport
des AG à longue chaîne
Systèmes protéiquesimpliqués dans le transport
des AG à longue chaîneRadeauxlipidiques -cavéolines
FAT/CD36FATP-1/-4
QUELQUES REMARQUES:
Capacité lipogénique (néosynthèse d’AG) réduitedans le tissu adipeux humain – différence avec les rongeurs.
Devenir des acides gras captés par l’adipocyte Estérification rapide des acides gras selon les voiesbien identifiées.
Captage des AG dans l’adipocyte humain – Présence desmêmes transporteurs d’AG que ceux identifiés dans les adipocytes 3T3-L1
Letexier, D. et al. J. Lipid Res. 2003;44:2127-2134
Western blot du précurseur SREBP-1c (A) et mature SREBP-1c (B), (intensité relative / mg de tissu)
Western blot du précurseur SREBP-1c (A) et mature SREBP-1c (B), (intensité relative / mg de tissu)
humain
humain
Rat
Rat
Bas niveau d’expression de-fatty acid synthase (FAS), -acetyl-CoA carboxylase 1
- ChREBP: “carbohydrate response element binding protein”
Autres gènes:
Voies de biosynthèse des triacylglycerolVoies de biosynthèse des triacylglycerol
glycerol-3-phosphate acyltransferase
1-acylglycerol-3-phosphate acyltransferase (AGPAT)
phosphatidate phosphohydrolase
diacylglycerol acyltransferase
monoacylglycerol-acyltransferase
Monoacylglycerol
Monoacylglycerol pathway
Chen HC et al.,Trends Cardiovasc. Med., 2000, 10: 188
DGAT (acyl CoA:diacylglycerol acyltransferase ) est une enzyme-clé de la synthèse des TG, elle catalyse l’étape finale
de la synthèse de TG dans l’adipocyte.
DGAT (acyl CoA:diacylglycerol acyltransferase ) est une enzyme-clé de la synthèse des TG, elle catalyse l’étape finale
de la synthèse de TG dans l’adipocyte.
DGAT
Bower, J. F. et al. Am J Physiol Endocrinol Metab 290: E87-E91 2006
Captage de l’ [3H]oleate par les adipocytes issus du tissu adipeux omental de femmes afro-méricaines et caucasiennes
Captage de l’ [3H]oleate par les adipocytes issus du tissu adipeux omental de femmes afro-méricaines et caucasiennes
Bower, J. F. et al. Am J Physiol Endocrinol Metab 290: E87-E91 2006
Western blots représentatifs des protéines transporteurs d’acides gras FAT/CD36 et FATP-4 dans le tissu adiepux omental de femmes Afro-Americaines
(AAW) et Caucasiennes (CAW)
Western blots représentatifs des protéines transporteurs d’acides gras FAT/CD36 et FATP-4 dans le tissu adiepux omental de femmes Afro-Americaines
(AAW) et Caucasiennes (CAW)
Bower, J. F. et al. Am J Physiol Endocrinol Metab 290: E87-E91 2006
Shadid S. et al. Diabetes 56:1369-1375, 2007
Différences dans le captage des AGNE dans le tissu adipeuxselon la nature du dépôt et le sexe chez des patients normaux
Différences dans le captage des AGNE dans le tissu adipeuxselon la nature du dépôt et le sexe chez des patients normaux
upper-body subcutaneous
lower-body fat
Captage desNEFAs différentselon le dépôt
- Captage desNEFAs plusimportant chez la femme- Pas de différencesselon le dépôt chezla femme
Shadid S. et al. Diabetes 56:1369-1375, 2007
Expression des gènes des transporteurs d’acides grasExpression des gènes des transporteurs d’acides gras
-Expression plus importante des trois transporteurs dans le tissu abdominal que dans le fémoral chez l’homme.
-Expression plus importante de FAT/CD36 et FATP-4 dans le tissu abdominal et fémoral de la femme par rapport à l’homme. Pas de différences inter-dépôt.
Régulation de la lipolyse etmobilisation des acides gras non estérifiés.
Régulation de la lipolyse etmobilisation des acides gras non estérifiés.
Les lipases du tissu adipeux (ATGL, LHS, LMG…)
Les protéines péri-gouttelette lipidique (périlipines,CGI-58)
L’insuline active la phosphodiestérase3B AMPc↓
Les systèmes lipolytiques (système nerveux orthosympathiqueet peptides natriurétiques) et antilipolytiques (insuline, adénosine,prostaglandines E1/E2, NPY/PYY, acide nicotinique…).
LA TG LIPASE DE L’ADIPOCYTE (ATGL) et LA LIPASE HORMONO-SENSIBLE (LHS)
LA TG LIPASE DE L’ADIPOCYTE (ATGL) et LA LIPASE HORMONO-SENSIBLE (LHS)
Triacylglycérol Diacylglycérol
monoacylglycérol
glycérolAGL
ou
(Acides gras non
estérifiés)
AGLAGL
LHS LHS LMG
ATGL : triglycéride lipase de l’adipocyte
LHS : Lipase hormono-sensible,
LMG : Lipase des mono-acylglycérides,
AGL : Acide gras libre (acide gras non estérifié)
Elle sont responsables de l'hydrolyse des triglycérides
dans l’adipocyte, l’ hydrolyse terminale est assurée par la LMG:
ATGL
La lipase des triglycérides (ATGL) récemment identifiée hydrolyse exclusivement les triglycérides de l’adipocyte
génère des diglycérides
La lipase des triglycérides (ATGL) récemment identifiée hydrolyse exclusivement les triglycérides de l’adipocyte
génère des diglycéridesT
rio
lein
hyd
roly
sis
(%)
0
40
80
120
LHSBasal BAYBasal BAY
ATGL
P<0.05
Cellules Cos7 transfectées
Structure chimique du BAY
Inhibiteur spécifiquede LHS
Langin et al., Diabetes, 2005, 54:3190
0
1
2
3
ANP Bay + ANP
Bay + Iso
Bay IsoBasal
P<0.05
P<0.05
P<0.05
Gly
cero
l rel
ea
se
0
2
4
6
Fa
tty
aci
d r
ele
ase
ANP Bay + ANP
Bay + Iso
Bay IsoBasal
P<0.05
P<0.05
Inhibition de la lipolyse dans l’adipocyte humain par le BAYInhibition de la lipolyse dans l’adipocyte humain par le BAY
Langin et al., Diabetes, 2005, 54:3190
Données en faveur d’un rôle majeur de la LHS dans le tissu adipeux humain.
Données en faveur d’un rôle majeur de la LHS dans le tissu adipeux humain.
Purification d ’une seule lipase de triglycérides active à pH neutre: la LHS
Test d ’activité enzymatique en présence d ’anticorps anti LHS Inhibition à 95 %
Forte corrélation entre la densité en LHS, l ’activité enzymatique et la lipolyse maximale
Non phosphorylée par la protéine-kinase A (PKA): Nécessaire à la rétention des lipides stockés dans la gouttelette lipidique du tissu adipeux.
Phosphorylée par la PKA et la PKG:Nécessaire pour mobiliser les réserves lipidiques lors d’une stimulation hormonale de la lipolyse:-Permet l’accessibilité de la gouttelette lipidique à la LHS-Libère la protéine CGI-58 activatrice de l’ATGL.
Périlipine : Rôle critique dans le métabolisme du tissu adipeux et la lipolyse
Périlipine : Rôle critique dans le métabolisme du tissu adipeux et la lipolyse
Non phosphorylée, elle assure la rétention de la protéine CGI-58, régulatrice de l’activité de l’ATGL.
Effet d’une stimulation des bêta-récepteurs d’adipocytes 3T3-L1Effet d’une stimulation des bêta-récepteurs d’adipocytes 3T3-L1
Périlipine LHS
Etat basal(non stimulé)
60 minutes après la stimulation
Stimulationpar isoproterenol
Translocation de la LHS
1, 2 2
cAMP
ATP
5'AMP
LHS
Triacylglycerol
LMG
AC
Noradrénaline et adrénaline
Gs
LHSP FFA FFA
glycerol
Membrane plasmique
P
Insuline
PDE3B PDE3B
IRS-1PI3KregPI3Kcat
PKBPKB
PKA
PeptidesNatriurétiques
(ANP & BNP)
GC
cGMP
ATGL
Diacylglycerol Monoacylglycerol
Les signaux lipolytiques et antilipolytiques dans l’adipocyte humainLes signaux lipolytiques et antilipolytiques dans l’adipocyte humain
Gi Gi
Autres systèmes inhibiteurs: adénosineNPY/PYY, PGI2
P
PKG
P
NPR-ARéc-Insrécepteurs
PKA
LHS
AGNE +glycérol
Triglycérides
LHS
ACGs
ATPAMPc
Trig
lycé
ride
s
PERILIP
INE
PP
PP
PERILIPINE
Gi
PKG
GMPc
GTP
NPR-A1/2-RA2-RA
P
PP
GC
GC
Gouttelette lipidique
ADIPOCYTEHUMAIN
ADIPOCYTEHUMAIN
CGI-58 ATGL
CGI-58
Peptidesnatriurétiques
catécholamines
PDE-3B
?
Membraneplasmique
LH
S Gouttelettelipidique
FABP4
ATGL
FABP4
FABP4
captage lipolyse
Esterificationmétabolismesignalisation
Insulino-résistance
Appelations:FABP-4ALBPaP2P422p15
Transport intracellulaire des acides gras par FABP-4Transport intracellulaire des acides gras par FABP-4
D’après Vogel Hertzel A and Bernlohr DA, TEM, 2000, 11:175
Relations entre la longueur de la chaîneet le niveau d’insaturation des acides gras
Les acides gras sont mobilisés en fonction de la longueur de la chaîne carbonéeet du niveau d’insaturation dans l’adipocyte humain
Les acides gras sont mobilisés en fonction de la longueur de la chaîne carbonéeet du niveau d’insaturation dans l’adipocyte humain
Relations entre le niveau d’insaturation des acides gras et la longueur de la chaîne.
Mobilisation des acides gras dans l’adipocyte humain
Raclot et al., Biochem J., 1997, 324:911-915
Raclot et al., Biochem J., 1997, 324:911-915
Mittendorfer B. at al., 2004, AJP, 286:E354-E362
Taux d’apparition du palmitate (Ra) induite par 90 min d’exerciceen fonction de la masse grasse.
(comparé au repos) chez des sujets maigres et obèses
Taux d’apparition du palmitate (Ra) induite par 90 min d’exerciceen fonction de la masse grasse.
(comparé au repos) chez des sujets maigres et obèses
Nielsen S. et al., JCI, 2004, 113: 1582-1588
Provenance [%] des AGNE systémiques chez l’homme et la femme. (TA jambe, TA splanchnique et TA abdominal non splanchnique)
Provenance [%] des AGNE systémiques chez l’homme et la femme. (TA jambe, TA splanchnique et TA abdominal non splanchnique)
* P<0.05 vs. maigres
TAV n’est pas la source de la majorité des NEFA
systémiques
0
20
40
60
80
100%
de la lib
éra
tion
des A
GN
E
jambe splanchnique dépôts adipeux scnon-splanchnique
* *
* *
* *
Femmes maigresHommes maigresFemmes obèsesHommes obèses
TRIGLYCERIDESAG
Synthèse?
Synthèseglycérolipides
Albumine
AG
DG
MG
AG
AG
AG
AG
Glycérol
MGAT
DGAT
ATGL
LHS
LHS
LMG
Glycérol + AG
périlipine
CGI-58
Adipocyte humainAdipocyte humain
Enzymesestérification Lipases
FABPpmFAT/CD36FATP-1/-4
AGAQP7
FABP-4
Bactéries, LPSAcides gras dérivés des
bactéries (acide laurique)
Alimentation etAcides gras saturés dérivés
(acide palmitique)
TLR4
Les acides gras seraient susceptibles de promouvoir l’insulino-résistance via l’activation de récepteurs « Toll-like » tels que TLR4 (importants dans la médiation de
la réponse immunitaire innée aux pathogènes bactériens).
Les acides gras seraient susceptibles de promouvoir l’insulino-résistance via l’activation de récepteurs « Toll-like » tels que TLR4 (importants dans la médiation de
la réponse immunitaire innée aux pathogènes bactériens).
Cytokines pro-inflammatoires
Adipokines & cytokines pro-inflammatoires
Cytokines pro-inflammatoires
Insulino-résistance Muscle-tissu adipeux-foie
D’après Shi H et al. J. Clin. Invest. 2006, 116: 3015-25
MACROPHAGES
TLR4
Bactéries
-Insaturés et ac.oléique moins d’effets-Polyinsaturés 3 sanseffet
Effets spécifiques des acides gras saturés sur la réponse lipolytique induite par les catécholamines dans le tissu adipeux humain.
Effets spécifiques des acides gras saturés sur la réponse lipolytique induite par les catécholamines dans le tissu adipeux humain.
PROTOCOLE :
-Adipocytes isolés incubés pendant deux heures avec des AG saturés(AGS) ou polyinsaturés réponse lipolytique avant-après.
- Patients non-obèses ingérant ration hyperlipidique enrichie en AGS -Test de mobilisation des lipides induite par l’exercice - Analyse deseffets alpha2-adrénergiques inhibiteurs avant/après.
- Patients obèses ingérant ration hyperlipidique enrichie en AGS - Test de mobilisation des lipides induite par l’exercice - Analyse deseffets alpha2-adrénergiques inhibiteurs avant/après.
CONCLUSION: Perte de la réponse alpha2-adrénergique in vitro et in vivo. Mécanismes restent à décrypter.
FF
A (
µm
ol/
100
mg
lip
id/9
0 m
in)
Gly
cero
l (µ
mo
l/10
0 m
g l
ipid
/90
min
)
log[epinephrine](M)
-0.1
0.1
0.3
0.5
0.7
-0.1
0.1
0.2
0.3
0.4
0
0.5
1.0
-7 -6 -5
log[Epinephrine](M)
Basal0
0.5
1.0
1.5
2.0
-7 -6 -5
Unsaturated FFA
Basal
Saturated FFA
Unsaturated FFA
**
** *
*
0
0.4
0.8
1.2
1.6
2.0
-7 -6 -5
log[epinephrine](M)
Basal
0
0.5
1.0
0
1.0
2.0
-7 -6 -5
log[epinephrine](M)
Basal
Saturated FFA
0
0.5
1.0
FF
A c
han
ge
FF
A c
han
ge
Gly
cero
l ch
ang
eG
lyce
rol
chan
ge
Effect of incubation of human fat cells for 2hours with 200µM saturated and unsaturated LCFA on lipolysis
Effect of incubation of human fat cells for 2hours with 200µM saturated and unsaturated LCFA on lipolysis
NSEpinephrine
Epinephrine + RX821002
0
0.5
1.0
1.5
2.0
0
0.5
1
0
0.5
1.0
1.5
2.0
2.5
0
0.4
0.8
Gly
cero
l ch
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eF
FA
ch
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Gly
cero
l (µ
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l/10
0 m
g l
ipid
/90
min
)F
FA
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l/10
0 m
g l
ipid
/90
min
)
-7 -6 -5log[Epinephrine](M)
Basal
-7 -6 -5log[epinephrine](M)
Basal
NS
NS
0
0.5
1.0
1.5
2.0
2.5
3.0
basal Iso ANP
0
0.5
1.0
1.5
2.0
2.5
3.0
FF
A
(µm
ol/
100
mg
lip
id/9
0 m
in)
Gly
cero
l (µ
mo
l/10
0 m
g l
ipid
/90
min
)A
A
B
B
basal Iso ANP
* *
**
Epinephrine + RX821002
Epinephrine
Effect 2 hours incubation of human fat cells without LCFA on in vitro lipolysis. Effect 2 hours incubation of human fat cells without LCFA on in vitro lipolysis.
Ringer + Phentolamine
0
40
80
120
160
200
0 15 30 45 60 75 90
Time (min)
DG
C (
µm
ol/
l)
Exercise
*
0
20
40
60
80
100P=0.04
Ringer
Phentolamine
DG
C i
nc
rea
se
B
Fast
A
0 15 30 45 60 75 90Time (min)
DG
C (
µm
ol/
l)
Exercise
0
40
80
120
160
200
0
20
40
60
80
100 NS
DG
C i
nc
rea
se
B
High Fat Meal
A
Dialysate glycerol concentration (DGC) in subcutaneous adipose tissueof lean subjects at rest, during exercise and recovery before A and after HFM
Dialysate glycerol concentration (DGC) in subcutaneous adipose tissueof lean subjects at rest, during exercise and recovery before A and after HFM
Ringer + Phentolamine
DG
C (
µm
ol/
l)
Fast
A
High Fat Meal
A
0
40
80
120
160
200
0 15 30 45 60 75 90
Time (min)
0
40
80
120
160
200
0 15 30 45 60 75 90
Time (min)
DG
C (
µm
ol/
l)
Exercise
Exercise
01020304050607080 p=0.005
DG
C i
nc
rea
se
RingerPhentolamine
01020304050607080
DG
C i
nc
rea
se
B
B NS
**
*
Dialysate glycerol concentration (DGC) in subcutaneous adipose tissueof obese subjects at rest, during exercise and recovery before and after HFM
Dialysate glycerol concentration (DGC) in subcutaneous adipose tissueof obese subjects at rest, during exercise and recovery before and after HFM