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    MICROBIOLOGA DEALIMENTOS

    MICROBIOLOGA GENERAL

    2007-2008

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    1. Los microorganismos como agentes de deterioro de alimentos.

    - Alimento deteriorado: aquel daado por agentes microbianos, qumicos ofsicos de forma que es inaceptable para el consumo humano.

    - Aproximadamente el 20% de las frutas y verduras recolectadas se pierdenpor deterioro microbiano producido por alguna de las 250 enfermedades demercado.

    - Los agentes causantes de deterioro pueden ser bacterias, mohos y levaduras;siendo bacterias y mohos lo ms importantes.

    - Las carnes son los alimentos ms fcilmente deteriorables. Durante el proceso

    de deterioro se va seleccionando una poblacin o tipo de micoorganismospredominante la variedad inicial indica poco deterioro y refleja las poblacionesiniciales.

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    Origen de los microorganismos patgenos presentes en los alimentos. Infecciones transmitidas a travs de alimentos. Intoxicaciones alimentarias agudas y crnicas.

    Virosis. Enfermedades causadas por priones. Enfermedades producidas por protozoos. Enfermedades producidas por helmintos.

    Tema 19.- Enfermedades transmitidas por los alimentos

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    CONCEPTOS Enfermedades transmitidas por alimentos

    Origen de los microorganismos patgenos presentes en los alimentos Infecciones e intoxicaciones Virosis

    Principios de anlisis de alimentos Funcin del anlisis de alimentos Microorganismos indicadores e ndices

    Valores de referencia Determinacin de valores de referencia Puntos crticos

    Mtodos generales de anlisis de alimentos Recuento de microorganismos totales

    Enterobacterias y coliformes (Escherichia coli) Estreptococos del grupo D Estreptococos mitis-salivarius Bacilos y clostridios

    Principios de deterioro de alimentos

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    Enfermedades transmitidas por

    alimentos

    Origen de los microorganismos patgenospresentes en los alimentos

    Infecciones e intoxicaciones Virosis

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    Vas de transmisin de microorganismos

    Agua o alimentoscontaminados SalmonelosisInfecciones por diferentes E. coliFiebre tifoidea por S. typhiClera causado por V. cholera

    Infecciones

    IntoxicacionesStaph. aureusBotulismo C. botulinum

    bacterianas

    vricas

    Virus de gastroenteritis viral agudaRotavirusHepatitis APolio

    toxiinfeccionesalimentarias

    Patgenos vehiculizados por:Comida

    Manos

    Heces

    Moscas

    Patgeno generalmentede tipo gastrointestinal

    MICCLIN2007

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    Enfermedades transmitidas por

    alimentos- Microorganismos de origen endgeno (zoonosis) o exgeno.- Para que se produzca la toxiinfeccin es necesario que el microorganismo haya

    producido:Suficiente nmero para colonizar el intestino.Suficiente nmero para intoxicar el intestino.Cantidades de toxina significativas.

    Las infecciones cumplen los postulados de Koch.

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    POSTULADOS DE KOCH

    El microorganismo debe encontrarse en todos los casos de la enfermedad Debe aislarse y obtenerse como cultivo puro a partir de las lesiones

    Debe reproducir la enfermedad cuando se inocula, a partir de un cultivo puro, enun animal de experimentacin susceptible (modelo animal) Debe aislarse el mismo microorganismo en cultivo puro a partir de las lesiones

    producidas en el animal. El microorganismo debe inducir una respuesta inmune con la aparicin de

    anticuerpos especficos en la sangre del hombre o animal infectado que puedandemostrarse por pruebas serolgicas.

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    Enfermedades transmitidas por

    alimentos- Microorganismos de origen endgeno (zoonosis) o exgeno.- Para que se produzca la toxiinfeccin es necesario que el microorganismo haya

    producido:Suficiente nmero para colonizar el intestino.Suficiente nmero para intoxicar el intestino.Cantidades de toxina significativas.Las infecciones cumplen los postulados de Koch.

    - En las intoxicaciones hay que demostrar la presencia de toxinas.

    - La funcin del microbilogo de alimentos ha de ser principalmente la deprevencin y para ello hay que considerar:

    Las fuentes de contaminacin.Las rutas de infeccin.La resistencia de los patgenos a condiciones adversas.Las necesidades de crecimiento de los patgenos.Minimizar la contaminacin y el crecimiento de los microorganismos.

    Tcnicas de deteccin y aislamiento.Mtodo de muestreo proporcional al riesgo.

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    Enfermedades transmitidas por

    alimentos 1. Transmisin:

    Hay que diferenciar entre infecciones e intoxicaciones y entre infecciones conDMI (dosis mnima infectiva) o DI50 (dosis infectiva que produce la enfermedaden el 50 % de la poblacin) bajas o altas. En muchos casos no est totalmenteclaro si el proceso es intoxicativo o infectivo.

    La DMI vara entre las personas dependiendo de su estado general de salud y dela forma como se ingieren las bacterias (en ciertas condiciones las DMI puedenser muy baja por lo que es muy necesaria la higiene).

    En general las enfermedades tienen un tiempo de incubacin corto (2-10 h.) ysuelen cursar con sndromes gastrointestinales

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    Enfermedades transmitidas por

    alimentos 2. Morbilidad: Solo se declara un 10 % de las toxiinfecciones (aprox.) por lo que la

    incidencia real de estas enfermedades no est clara.

    3. Factores que contribuyen a la produccin de casos y brotes deenfermedades de etiologa microbiana transmitidas por los alimentos. En general hay un doble fallo: (1) Contaminacin del alimento seguido de (2)

    abuso de temperatura que permite que los microorganismos proliferen.

    Los alimentos afectados con ms frecuencia son los animales (90 %) y lasfuentes de contaminacin suelen estar en los establecimientos donde fueronservidos ms que en las plantas de procesado.

    4. Manifestaciones clnicas ms frecuentes y complicaciones de las

    enfermedades transmitidas por alimentos: En general son enfermedades breves y de buen pronstico. cursan tras 2 - 10h. de incubacin con sndrome gastroinestinal (dolor intestinal, diarrea,vmitos). En general no tienen complicaciones salvo en poblaciones de riesgo.

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    Enfermedades transmitidas por

    alimentos C. INFECCIONES ALIMENTARIAS TRANSMITIDAS POR

    BACTERIAS:

    1. Salmonelosis: Producidas por algunos serotipos. Su incidencia va en aumento asociada al incremento de animales portadores. Los diferentes serotipos requieren DMI diferentes, aunque hay un gran

    nmero de ellos que son patgenos. El origen de las salmonelas puede ser endgeno (animales portadores

    asintomticos) o exgeno; las prcticas ganaderas favorecen la infeccin atravs de los piensos que pueden generar portadores asintomticos y del

    manejo de los animales en el matadero (aves, cerdos, terneros). En cualquier caso, los nmeros inicales suele ser pequeos y la contaminacinaparece si el alimento no es tratado correctamente desde el punto de vistatrmico.

    Las medidas profilcticas se dirigen al control de animales portadores,procesamiento de alimentos (pasteurizacin) y reduccin de las posibilidades

    de contaminacin exgena. Puede ser invasiva o toxignica.

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    Enfermedades transmitidas por

    alimentos

    C. INFECCIONES ALIMENTARIAS TRANSMITIDAS PORBACTERIAS:

    2.- Gastroenteritis por Escherichia colienteropatgeno: La mayora de los serotipos de E. coli son incuos; pero hay algunos

    enteropatgenos (enterotoxignicos no invasivos productores de unaenterotoxina termolbil de alto peso molecular, TS; y enteroinvasivos quepenetran en la mucosa intestinal) productores de enfermedades en nios yadultos y en animales.

    Para los adultos las vas de contagio son alimentos y agua.

    No est clara la patogenicidad de las cepas enteropatgenas de animales parael hombre y se supone que la principal va de contaminacin es la exgena. Las medidas profilcticas se dirigen a la eliminacin de animales enfermos,

    control de la contaminacin por manipulacin humana y refrigeracinadecuada para evitar el crecimiento de las bacterias presentes.

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    Enfermedades transmitidas por

    alimentos C. INFECCIONES ALIMENTARIAS TRANSMITIDAS PORBACTERIAS:

    3.- Enteritis producidas por Bacillaceae Producidas por Clostridum perfringenso por Bacillus cereus. Se requieren

    altos nmeros de bacterias (105 bact gr-1) y pueden producirse en alimentostratados trmicamente e, incluso, protegidos frente a la recontaminacin.

    En C. perfringenslos alimentos vehculo son carnes fras o recalentadas y

    platos a base de carne; en B. cereusarroz y pastas. Patolgicamente ambas enteritis son diferentes: la de C. perfringens seproduce porque se ingieren muchas bacterias que al esporular reformadas (setrata de una intoxicacin), mientras que en B. cereusse trata de unaintoxicacin por una toxina preformada.

    Las esporas de C. perfringensson ubcuas y pueden producir problemas entodo tipo de alimentos, sobre todo carnes, piezas grandes y alimentosprecocinados.

    Las prevencin pasa por enfriar rpidamente el alimento cocinado que no vayaa ser consumido para evitar el desarrollo de las formas vegetativas de labacteria.

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    Enfermedades transmitidas por

    alimentos D INTOXICACIONES ALIMENTARIAS AGUDAS:

    enfermedades producidas por la presencia en los alimentos de toxinas

    preformadas de origen bacteriano.

    1. Botulismo: intoxicacin por Clostridium botulinum.

    C. botulinum produce una intoxicacin mediante bajas dosis de unaneurotoxina muy potente que produce al esporular. Es una bacteria anaerobia que puede crecer en conservas de alimentos de pHrelativamente alto (>4.5) que no se han tratado trmicamente de formaadecuada.

    Se ha detectado un tipo de bofulismo infantil producido por la ingestin de

    esporas que germinan y vuelven a esporular en el intestino produciendo denuevo la toxina. Profilaxis: tratamiento trmico adecuado de las conservas usando

    tratamiento 12 D u otros agentes coadyuvantes (sal, nitratos) para alimentoscon pH > 4.5. La toxina botulnica es termolbil y se destruye si se calienta laconserva.

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    Enfermedades transmitidas por

    alimentos D INTOXICACIONES ALIMENTARIAS AGUDAS:

    enfermedades producidas por la presencia en los alimentos de toxinaspreformadas de origen bacteriano.

    2. Intoxicacin estafiloccica.

    Producida por la ingestin de alimentos en los que ha crecido una cepapatgena de Staphylococus aureusproductora de enterotoxinatermorresistente.

    La principal reserva de S. aureuses la piel, y cavidad buconasal de operariosque pueden contaminar los alimentos cuyo contenido en agua es bajo

    (productos de pastelera, jamn curado...) porque a mayor aw otra florasobrecrece a S. aureus. La enfermedad es muy rpida con vmitos y doloraguado, suele durar menos de 30 horas.

    Las medidas profilcticas van encaminadas a dismisnuir la contaminacin y eldesarrollo de las bacterias mediante tratamientos trmicos adecuados; ladestruccin de las toxinas es muy difcil dada su termorresistencia.

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    Enfermedades transmitidas por

    alimentos D INTOXICACIONES ALIMENTARIAS AGUDAS:

    enfermedades producidas por la presencia en los alimentos de toxinaspreformadas de origen bacteriano.

    3. Intoxicacin por Bacillus cereus. B. cereus como C. perfringeus, una bacteria ubcua y su ingestin en bajas

    cantidades es incua. Produce dos tipos de sndromes: intoxicacin diarrica (asociada a una toxina

    termosensible similar a la de C. perfingensque se produce durante elcrecimiento exponencial y que est asociada a alimentos como sopas de ave,carne, salsas, pudding...) y una forma emtica (asociada a una toxinatermorresisitente similar a la de S. aureusy asociada a arroz, y otrosalimentos ricos en almidn cocinados).

    Profilaxis: dada la termorresistencia de las esporas hay que procurar enfriarmuy rpidamente los alimentos cocinados ricos en almidn, y conservarlos abaja temperatura, para evitar el crecimiento de las formas vegetativas.

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    Enfermedades transmitidas por

    alimentos E. INTOXICACIONES ALIMENTARIAS CRONICAS: micotoxicosis provocadas por mohos productores de toxinas activas por va

    oral.

    Muchos mohos son productores de substancias proticas de bajo pesomolecular y accin txica conocidas como micotoxinas. Elevadas ingestionesde micotoxinas pueden producir cuadros agudos fcilmente detectables; peroestos casos son raros, es ms frecuente la intoxicacin por bajas dosis demicotoxinas que pueden producir intoxicaciones crnicas con efectosoncognicos o inhabilitantes en diferentes rganos (hgado, rin, cerebro). Las micotoxinas pueden ingerirse por contaminacin con mohos de alimentosde baja actividad de agua (queso, mermelada, alimentos curados, cereales) opor piensos, en el caso de animales con intoxicaciones crnicas puedentransmitir las toxinas a travs de sus productos (huevos, leche).

    Debido al bajo peso molecular las micotoxinas suelen ser muytermorresistentes y pueden difundir grandes distancias en los alimentos porlo que tratamientos trmicos suelen ser inefectivos y la simple eliminacindel moho no evita la micotoxina.

    Las profilaxis se centran en evitar la contaminacin por hongos de losalimentos y piensos (quesos, pan, harinas, cereales, frutas y mermeladas) no

    solo por razones estticas sino tambin sanitarias.

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    Enfermedades transmitidas por

    alimentos

    F. VIROSIS TRANSMITIDAS POR LOS ALIMENTOS.

    El nmero de unidades infectivas que puede producir la enfermedad es muybajo. Normalmente no suelen aislarse en los laboratorios de microbiologa dealimentos porque su manipulacin es tcnicamente compleja.

    1.- Hepatitis tipo A Este virus se transmite a travs del agua contaminada con materia fecal y de

    alimentos muy manipulados en condiciones de higiene deficientes (ensaladasde patatas, frutas contaminadas, zumos contaminados) y productos marinospresentes en zonas costeras contaminadas.

    El virus es termorresistente por lo que la proflaxis ha de centrarse en lahigiene del operario, agua y productos.

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    Principios de anlisis de alimentos

    Funcin del anlisis de alimentos Microorganismos indicadores e ndices

    Valores de referencia Determinacin de valores de referencia

    Puntos crticos

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    Funcin del anlisis microbiolgico de alimentos. Microorganismos indicadores e ndices. Toma de muestras y anlisis microbiolgico. Fundamentos de los procedimientos analticos. Valores de referencia. Determinacin de valores de referencia. Anlisis de puntos crticos. Fundamentos ecolgicos de la eleccin de criteriosmicrobiolgicos y de la fijacin de valores de referencia.

    Tema 20.- Principios generales de anlisismicrobiolgico de los alimentos.

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    1. Variaciones en la carga microbiana si no

    hay BPE2. Anlisis de puntos crticos

    3. Sucesiones microbianas y deterioro dealimentos

    4. Deterioro por grupos de alimentos

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    Principios de anlisis de alimentos

    El anlisis microbiolgico de los alimentos tiene dos finalidades:

    (1) Comprobar la calidad de las prcticas de elaboracin delalimento

    (2) Comprobar la aceptabilidad de los alimentos en el mercadointernacional.

    La finalidad principal del anlisis microbiolgico de alimentos NO

    es detectar microorganismos patgenos sino comprobar si elalimento ha sido preparado correctamente de forma que laprobabilidad de la presencia de patgenos en l seaaceptablemente baja

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    Microorganismos indicadores e ndices

    Indicador

    Estado general dehigiene del alimento

    Abundantes y sensibles

    Enterobacterias

    Medios consales biliares

    Contaminacinreciente

    Estreptococostipo D

    Resistentes

    Contaminacin fecal

    Azidasales biliares

    esculinaEstreptococosmitis salivarius Contaminacin con materia oral o nasal

    Medios con telutiro

    Bacillus Contaminacin con termorresistentes

    Supervivientes a 80C 1 min

    Mesfilos aerobios totales

    Carga microbiana general del alimento

    Medio rico inespecfico a 37C

    d d d

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    Microorganismos indicadores e ndices

    Indicador Estado general dehigiene del alimento

    ndice Presencia de patgenos

    Mi i i di d di

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    Microorganismos indicadores e ndices

    ndice

    Presencia de patgenos

    Nicho ecolgico comn

    Escherichia coli

    Salmonella

    Fermentacinde lactosa

    MacConkey 44C

    Estreptococostipo DHepatitis A

    Bacillus

    Clostridios

    La presencia del microorganismo ndice no implica la del patgeno,

    SLO seala que el alimento est contaminado con material en elque se encuentra frecuentemente el patgeno

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    Principios de anlisis de alimentos

    Los valores de referencia indican los lmites mximosde microorganismos presentes en los alimentos

    elaborados de acuerdo a las buenas prcticas deelaboracin (BPE).

    s

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    Determinacin devalores de referencia

    ValorarPE

    Seleccionar msde 10 industrias

    aceptarcorregir

    Tomar alrededorde 10 muestras

    < 100muestras

    Confeccionan curvasde distribucin

    Log Carga microbiana

    N

    demuestras

    Determinar el percentil 95%

    Log Carga microbiana

    Ndemuestras

    95%Comparar con DMI o NMA DMI o NMA

    DMI o NMA

    Valor

    Valor de referencia mm >

    D t i i d l s d f i

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    Log carga microbiana

    Ndemuestras

    95% m DMI

    Determinacin de valores de referencia

    Se establece un valor M, nunca esperado si se cumplen las BPE. La diferencia entre M - m esla llamada Zona de alerta cuya amplitud se establece atendiendo a la variabilidad delmtodo de recuento, tipo de alimento, modo de preparacin y poblacin de riesgo. Este valorM ha de establecerse tericamente y la relacin M/m vera entre 3 y 103 dependiendo del

    tipo de alimento.

    M

    T l r nci n v l r s d c r micr bi n

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    Tolerancia en valores de carga microbiana

    Valor de referencia m = 10S

    8 muestras con carga c < 10s2 muestras con carga 10S < c < 10S+1

    Anlisis de 10 muestras

    9 muestras con carga c < 10s1 muestra con carga c > 10S+2

    ACEPTAR

    RECHAZAR

    Principios para decidir el nmero y los criterios que se usen como

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    Principios para decidir el nmero y los criterios que se usen comovalores de referencia

    1. Limitar el nmero de criterios para incrementar el nmero de anlisis

    2. Criterios escogidos atendiendo a consideraciones ecolgicas1. Microorganismos que interfieren con la salubridad del alimento (ndices)2. Microorganismos que indiquen falta de seguridad o perjudiquen su inocuidad(indicadores)

    3. Criterios formulados con cuidado en trminos cuantitativos (considerando loserrores de la medida y la distribucin de los microorganismos en el alimento)

    4. Microorganismos denominados de forma correcta (nombre o grupo taxonmico)

    5. Mtodos ensayados y descritos con todo detalle para que puedan repetirse ycompararse

    6. Valores de referencia numricos deducidos de muestras obtenidas despus detratamiento siguiendo las BPE

    Principios de deterioro de alimentos

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    - Cada tipo de alimento se deteriora por accin de un tipo de microorganismoconcreto cada asociacin es especifica.

    - De todos los microorganismos presentes en un alimento solo algunos soncapaces de multiplicarse activamente sobre el alimento resultandoseleccionados. Existe una serie de factores que dirigen esta seleccin.

    Factores intrnsecos (aw, pH , redox, nutrientes, estructuras, agentesantimicrobianos), composicin del alimento.

    Tratamientos tecnolgicos: modifican flora inicial. Factores extrnsecos: condiciones fsicas del ambiente. Factores implcitos: relaciones entre los micoorganismos establecidascomo consecuencia de los factores a, b y c.

    - Estos cuatro factores determinan lo que se denomina resistencia a lacolonizacin de un alimento.

    Principios de deterioro de alimentos

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    Grupos de

    alimentoscongelados.Semiconservas

    pH cido

    Frutas, zumos yrefrescos

    Encurtidos y vinagretas Mantequilla

    Margarina

    emulsionados

    Productos de pasteleraEmpanadas decarne

    Pan

    perecederos pasterizadosno envasados

    con actividadde agua reducida

    humedad intermedia:(aw= 0,7-0,85)(salazones, leche condensada, mermeladas.completamente estabilizados: (aw

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    Principios de deterioro de alimentos

    Grupos de

    alimentoscongelados.Semiconservas

    pH cido

    emulsionados

    perecederos pasterizados

    no envasadoscon actividad

    de agua reducida

    tratados trmicamente yenvasados en recipientes hermticos.

    pH neutro

    B

    acte

    rias

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    Principios de deterioro de alimentos

    Grupos de

    alimentoscongelados.Semiconservas

    pH cido

    emulsionados

    perecederos pasterizados

    no envasadoscon actividad

    de agua reducida

    tratados trmicamente yenvasados en recipientes hermticos.

    pH neutro Ba

    cter

    ias

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    Principios de deterioro de alimentos

    Grupos de

    alimentoscongelados.Semiconservas

    pH cido

    emulsionados

    perecederos pasterizados

    no envasadoscon actividad

    de agua reducida

    tratados trmicamente yenvasados en recipientes hermticos.

    pH neutro Ba

    cter

    ias

    Bact

    erias

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    Principios de deterioro de alimentos

    Grupos de

    alimentoscongelados.Semiconservas

    pH cido

    emulsionados

    perecederos pasterizados

    no envasadoscon actividadde agua reducida

    tratados trmicamente yenvasados en recipientes hermticos.

    pH neutro

    HongosBa

    cterias

    Hongos

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    Principios de deterioro de alimentos

    Grupos de

    alimentoscongelados.Semiconservas

    pH cido

    emulsionados

    perecederos pasterizados

    no envasadoscon actividadde agua reducida

    tratados trmicamente yenvasados en recipientes hermticos.

    pH neutro

    HongosBa

    cterias

    Hongos

    Bacter

    iasB

    acte

    rias

    Frut s zum sLeche, crema, queso y

    h l

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    Grupos de

    alimentoscongelados.Semiconservas

    pH cido

    Frutas, zumos yrefrescos

    Encurtidos yvinagretas Mantequilla:

    Margarina:

    emulsionados

    Productos de pasteleraEmpanadas decarnePan

    perecederos pasterizadosno envasados

    con actividadde agua reducida

    humedad intermedia:(aw= 0,7-0,85)(salazones, leche condensada, mermeladas.completamente estabilizados: (aw

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