Tecnologías eficiencia reproductival

7/30/2019 Tecnologas eficiencia reproductival

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Tecnologas para incrementar la eficiencia

reproductiva en ovinos tropicales

Ivette Rubio G. et al.

CEIEGT FMVZ UNAM

19 Octubre 2012


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Contenido

I. Introduccin

II. Evaluacin de la Salud Reproductiva del Semental

III. Sincronizacin

IV. Congelacin de Semen

V. Inseminacin Artificial

VI. Transferencia de Embriones

Desarrollo de biotecnologas reproductivas


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Preparacin es la clave del xito!

Animales

Nutricin

Salud

Facilidades

Personal

Partos

Empadre

Controlado Monta dirigida


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Evaluacin de salud reproductiva

Examen fsico general

Examen aparato reproductor

Evaluacin de semen

Bagley C. 1997

Examen fsico y aparatoreproductor de sementales

Parmetro n PromedioDesviacinestndar

Condicin corporal(1-5)

Russel A. 1969

22 3.1 0.99

Circunferenciaescrotal (cm)

22 32.1 2.76


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Evaluacin del semen

Resumen evaluacin de semen

Parmetro n Promedio Desv. std

Color/Densidad 22 cremoso -------

Volumen (ml) 22 0.8 0.39

Motilidad masa 22 3.4 0.85

Motilidadindividual (%)

22 74.8 13.14


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Evaluacin de salud reproductiva

Examen fsico general

Examen aparato reproductor

Evaluacin de semen

Bagley C. 1997

Examen fsico y aparatoreproductor de sementales

Parmetro n PromedioDesviacinestndar

Condicin corporal(1-5)

Russel A. 1969

22 3.1 0.99

Circunferenciaescrotal (cm)

22 32.1 2.76


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Evaluacin del semen

Resumen evaluacin de semen

Parmetro n Promedio Desv. std

Color/Densidad 22 cremoso -------

Volumen (ml) 22 0.8 0.39

Motilidad masa 22 3.4 0.85

Motilidadindividual (%)

22 74.8 13.14


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Consistencia o apariencia del semenVALOR CONSISTENCIA Cantidad* Rango

5 Cremosa espesa 5.00 4.5-6.004 Cremosa 4.00 3.5-4.53 Cremosa tenue 3.00 2.5-3.52 Lechosa 2.00 1.5-2.5

1 Nebulosa 0.7 0.3-1.00 Clara (acuosa) Insignificante

*Nmero de espermatozoides (X109) por ml. Nota:El semen lechoso, nebuloso o acuoso no debe usarse para IA

Motilidad en masa


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Motilidad individual y conteo

espermtico

Tincin Eosina/nigrosina para detectar espermatozoides vivos y muertos

En microscopio de luzEspermatozoides muertos en tincin purpura (flechas),Espermatozoides vivos son azul grisceo.Manchas purpura oscuras son grnulos de tincin


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Microscopa con luz fuorescente

Nota.2 flechas blancas muestran los mismos espermatozoides muertos dela transparencia anterior

Espermatozoides vivos y muertos usandomicroscopa fluorescente

Las fluorescencias rojas y doradas indicanEspermatozoides muertos, mientras que los vivosmas fciles de detectar que en la tincin purpura


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102 espermatozoides muertos

172 espermatozoides vivos


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Manejo semen fresco

Congelacin de semen

Llenado de pajillas

Refrigeracin (2 h) 5oC 2oC/3min

Fase de equilibrio 45 60 min


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Caractersticas semen congelado

IDSemental

Volumeneyaculado

(ml)

Motilidadindividual

(%)

Concentracinespermtica

No. dedosis

Volumentotal(ml)

Volumendiluyenterequerido

(ml)

9 8 2 80 8,448 x 106 84.48 21.12 17.12

6 10 3 80 14,256 x 106 142.5 35.64 29.64

50 10 1.7 85 8,539.9 x 106

85.39 21.34 17.94

Ineminacin artificial


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Ventajas de la IA Mejora gentica ( uso de sementales probados,

introduccin de otro genotipo).

Fcil transporte de material gentico.

Aumento de la eficiencia reproductiva (de un

eyaculado se pueden obtener 20-35 dosis con

semen fresco diluido y aprox 10 para semen

congelado)

VENTAJAS IA

Reduccin de sementalesen el rebao (bajancostos manutencin).

Prevencin deenfermedades.

Utilizacin ms adecuada

de registros. Utilizacin de programasreproductivos.

Facilidad de pruebas deprogenie


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Desventajas IA? Se necesita de personalcalificado y experto (esdesventaja?).

Dependiendo del mtodode sincronizacin laexperiencia delinseminador se puedenobtener resultados defertilidad bajos.

Es un mtodo costosocuando se realiza IAintrauterina

Se puede realizar la

tcnica con semen fresco,refrigerado y congelado

Factores a considerar

Anatoma (disposicin del cervix). Procesos de dilucin-conservacin del

semen. Va de aplicacin del semen.

Tipo de semen usado (fresco,refrigerado, congelado). Tipo de presentacin del semen (pellet

o pajilla).


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ANATOMIA DEL CERVIX No tiene una forma en especifico siendo la ms

usual la llamada forma de palomita de maz

Dimetro aproximado de 1 cm, una consistenciadura (tejido conjuntivo rico en fibras colgenas).

6 a 7 anillos que en realidad son pliegues

longitudinales y se inclinan caudalmenteadquiriendo una forma sinuosa.

Cuerpo del tero

Cuernos uterinos


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en hembras jvenes y no gestantes se localizaen el piso de la pelvis y en hembras gestantespor lo general se localiza por delante delborde de la pelvis .

El color del crvix es rosceo y solo adquiereuna ligera coloracin blanquecina cercano ala ovulacin

Cervix en forma depalomita de maz


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Cervix es una barrera inicial al ascenso de losspz.

Por la disposicin de los pliegues no pasa lapipeta de IA.


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Se realiza la IA a tiempo fijo y en el menortiempo ya que la viabilidad disminuye.

Volumen por dosis 0.05 a 0.1 ml con por lomenos 100 millones de spz vivos.

Tcnicas de IA

Inseminacin cervical.

Inseminacin transcervical.

Inseminacin intrauterina.


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IA cervical ytranscervical

Se coloca a lahembra en unpotro o una prensade contencin

Inseminacin artificial transcervical


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Fosa cervical

Entrada cervical


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INSEMINACIN ARTIFICIAL ENPEQUEOS RUMIANTES

Dpto de Reproduccin FMVZ UNAM

Tcnicas de IA

IA cervical

IA transcervical

IA intrauterina.


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INSEMINACIN INTRA UTERINA Inician en 1967 Salamon y Lighfoot depositaron

el semen descongelado en tero porlaparotomia.

En 1982 Killen y Caffery realizaron las primeraIA usando laparoscopia.

Se requieren 40 millones de spz en 0.1ml

Para realizar esta tcnica se realiza un programade sincronizacin de estros en la hembras.

Dietadas de agua y alimento pro lo menos 12 hrsantes de la tcnica.

Se requiere equipo y personal capacitado.

Se utiliza una anestesia disociativa (rompun-ketamina),0.01g/kg y 2.0mg/kgrespectivamente.


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CAMILLAS PARA REALIZAR LA IA INTRAUTERINA

Se rasura y desinfecta el rea anterior a la ubre


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Procedimiento quirrgico

Corte de piel

Introduccin aguja Veress

Colocacin trocar-cnula

Se introduce un gas a cavidad abdominal antesde introducir los trocar-cnula.

El gas puede ser CO2 o aire filtrado para crear

un pneumoperitoneo. se inclina a la oveja en un ngulo de 45 paraque con posicin y gas se Cree un espacio virtualy se desplacen las vsceras.


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Se visualiza el tero sin revisar ovarios


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Se procede a revisar lavascularizacin y tonouterino


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Se introduce elaspic sedeposita la mitad dela dosisen cada cuerno

Se corrobora el libremovimientode la aguja, se compruebaque. no se forme una

protuberancia

Se retiran los instrumentos y se procede a sacar el airede cavidad y a suturar piel


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Implementacin de Tecnologas

Reproductivas en un Rebao deOvejas Pelibuey en el Trpico

Sincronizacin de estros

Objetivo General

Implementar la sincronizacin de estros y

la inseminacin artificial en un rebao de

ovejas Pelibuey en el trpico


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Objetivos Especficos

Evaluar estado reproductivo de las ovejas previo

a la sincronizacin.

Medir la respuesta a la sincronizacin.

Estimar la tasa de gestacin de la tcnica de I.A.

utilizando semen fresco y semen congelado.

Introduccin I.A. transcervical con semen congelado se obtienen bajos

porcentajes de gestacin debido al proceso de congelacindel semen

(Donovan A. et al2004)

Estructura del crvix

(OHara L. et al2010)

(Senger, 2003)


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Tratamientos para sincronizar

Uso de ProstaglandinaF2 o sus anlogos paralisar el CL ( estro 48Hrsdespus de la aplicacin)

PG a todos los animaleslos que no entran repetirla dosis 11 das despus.

Sincronizacin con progesterona y

progestagenos Pueden utilizarse en cualquier etapa del ciclo

estral Alta eficiencia Baja Fertilidad

Productos: Progesterona

Norgestomet

Acetato de Fluorogestona

Acetato de Medroxiprogesterona

Acetato de Melengestrol


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Productos

Introduccin

Sincronizacin de celos

I.A. a tiempo fijo


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Material y mtodos

n= 50 ovejas Pelibuey

multparas: 2 - 7 aos

Condicin corporal 2.5 - 3.5

Peso promedio 40.93 kg

Asignacin 2 grupos:

n=25 semen fresco

n=25 semen congelado

Material y mtodos

Sincronizacin de estro

Cronipres CO

160 mg de progesterona por

dispositivo intravaginal

eCG 100 UI (Folligon)


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Pipeta de IA

I.A. Sistema RAMGO

www.tecnologiagentica.comDr. Hidalgo M.A.


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Material y Mtodos

Muestras de sangre

Suero

Concentraciones de progesterona (P4)

Radioinmunoensayo (RIA)

COATACOUNT Progesterone, Siemens

Laboratorio Endocrinologa FMVZ, UNAM

Pulido A. et al. 1991

Protocolo de sincronizacin

muestrasangre

-21 -18 -15 -2 I.A. 7 9 13 17 21 25 35

InsercinCronipresCO

RetiroCronipresCOAplicacin100 UI eCG

55-58 h postretiro

12 Das

Diagnstico degestacin porUltrasonido

Das


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Resultados

Concentraciones progesterona 1.0 ng/mlen 2 mediciones consecutivas

Ciclicidad

Concentracin de P4 srica en ovejasPelibuey previo a la sincronizacin

0.00

1.00

2.00

3.00

4.00

5.00

6.00

-21 -18 -15 -2

ng/

ml

Das

Insercin dispositivoCronipresCO


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Respuesta a la sincronizacin

0

1

2

3

4

5

6

7

8

9

-21 -18 -15 -2 IA 7

ng/ml

Das

ID 30-7

ID 213-9

CronipresCO

Resultados por tipo de semen

Ciclando previoa sincronizacin

Respuesta a lasincronizacin

Retorno a estro Tasa degestacin

Semen Congelado

Semen Fresco

100%

76%68%

80%

68%

20%

32%

n=25n=25

n=19

n=17

n=20

n=17

n=5

n=8

Prueba X2 >0.333


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0.00

1.00

2.00

3.00

4.00

5.00

6.00

7.00

8.00

9.00

-21 -18 -15 -2 IA 7 9 13 17 21 25

ng/ml

Das

Gestantes

Vacas

Concentracin de P4 srica en ovejasdurante el programa reproductivo

CronipresCO

Resultados generales delprograma reproductivo

Ciclando previoa la

sincronizacin

Respuesta a lasincronizacin

Retorno a estro Tasa degestacin

100%

72% 74%

26%

n= 50

n= 36 n= 37

n= 13


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Discusin

Respuesta a la sincronizacin

Autor Producto RazaRespuesta

(%)

Cuevas EA. et al. Crestar Pelibuey 100

Hernndez OJ. Esponja MPA Pelibuey 100

Ozyurtlu N. et al. CIDR Rambouillet 90

Carballo E. et al. 2008 Cronipres Corriedale 100

CEIEGT Cronipres Pelibuey 72

Discusin

Porcentaje de gestacinTranscervical

semenfresco

Transcervicalsemen

congelado

Laparoscopasemen

congelado

Carballo E. et al. 2008(TF - 48H) 58 - -

Donovan A. et al. 2004

(TF - 57h)

70 44

Rivera R. 1997 (12h postcelo) 74.5 - -

Hiwasa M. et al. 2009(Celo) 5.5 0 72.2

Domnguez R.et al. 2007(TF 48h) 29.4 20 16.6

CEIEGT - 2012 (55-58h) 32 20 -


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Conclusiones

Implementacin de la tcnica de I.A. en

ElCenzontle.

Respuesta aceptable a la sincronizacin.

Tasa de gestacin baja con semen congelado.

Revisin del uso del dispositivoRamgo

TRANSFERENCIA DE EMBRIONES


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Objetivo de la transferencia de embriones

Aumentar la capacidad reproductora dehembras de gran valor gentico

Disminuye el intervalo generacional

Recuperacin de hembras de elevado valorgentico (edad, accidentes)

Conservacin de diversidad gentica.

Animales en peligro de extincin Intercambio de material Gentico

APARTE DE LAS HEMBRAS SELECCIONARMACHOS GENETICAMENTE SUPERIORES


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TCNICA DE TRANSFERENCIA SEREQUIERE: Tcnica compleja

Se requiere personal muy calificado

Buenas instalaciones (para los animales ylaboratorio etc)

Elevado costo ( hormonas, medicamentos,honorarios, equipo de trabajo etc)

Seleccin de animales DONADORA

Merito genticoPedigreeSin defectos genticosConformacin superiorHabilidad de transmitir

caractersticasComportamiento

productivo y reproductivoAlta produccinSin distociasSin problemas reproductivos

Otros60d pospartoVacunadaCondicin corporal 3.5

RECEPTORA Bajo mrito gentico

Frtiles

5-10 aos de edad (dependela especie)

Buena condicin corporal ytalla

Sanas

Vacunadas

Sin enfermedades abortivas


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DonadoraGenticamente superior

ReceptoraGentica estandar

Superovulacion y

sincronizacinDel estro

Sincronizacin del estroAplicacin eCG

Estros y servicio

Transferencia embrionesY revisin de CL

Colecta de embriones

Estro


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TCNICA DE TRANSFERENCIA DE EMBRIONES

SUPEROVULACININSEMINACIN ARTIFICIAL oMONTA NATURAL (DONADORA

Transferencia a la receptora

O congelamiento de los embriones

Laparoscopa en ovinos


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Diagnstico de gestacin porultrasonografa


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Tecnologas para incrementar la eficiencia

reproductiva en ovinos tropicales

Ivette Rubio Gutirrez

CEIEGT FMVZ UNAM

[email protected]

Tel oficina: 232 3243941 ext. 120
mailto:[email protected]:[email protected]


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