SPEKTROFOTOMETER VISIBLE http://restipratita.blogspot.com/2012/05/spektrofotometer-visible.html (Resti Pratita )1.PENGERTIANSpektrofotometri visibedisebut jugaspektrofotometri siartampak. !agdimaksudsiar tampak adalah siar "ag dapat dilihat oleh mata mausia. #aha"a "ag dapat dilihat olehmatamausiaadalahcaha"a degapajaggelombag$00-%00mdamemiliki eergisebesar 2&&'1$& k(/mol. )ada spektrofotometer siar tampak* sumber caha"a biasa"a megguaka lamputugste "ag serig disebut lampu +olfram. ,olfram merupaka salah satu usur kimia* dalamtabel periodikusur +olframtermasukgologausur trasisi tepat"agologa-./ataugologa0degasimbol ,daomoratom1$. ,olframdiguakasebagai lampupadaspektrofotometri tidak terlepas dari sifat"a "ag memiliki titik didih "ag sagat tiggi "aki5&20 3#.4alam duia aalisis kimia dikeal suatu alat "ag berama5pektrofotometer visible. 6lat ii berdasar hukum L!mbert"beer #7(umlah radiasi yang diserap proporsional dengan ketebalan sel (b), konsentrasi analit (c), dan koefisien absorptivitas molekuler (a) dari suatu spesi (senyawa) pada suatu panjang gelombang8$. PRINSIP9ogika prisip dari alat spektro-vis adalah itesitas +ara dari suatu laruta sebadig degajumlah caha"a "ag serap. 5emaki pekat +ara* semaki ba"ak caha"a "ag di serap.A.PER%OBAAN SE&ER'ANA5ekarag ada ba"agkasebuah gelas. :elastersebut di isidegaairmieral"agjerih.;emudia ada le+atka seberkas siar melalui gelas tersebut* misal"a dega lampu seter.#aha"a siar lampu seter aka le+at dega mudah buka..< meembus melalui gelas.5ekaragcoba adagatiisi airmieral degaair sirup "agber+ara*katakalahcoklat(sirup rasa coklat).5ekarag coba ada le+atka caha"a lampu seter melalui gelas tersebut.6pa "ag terjadi..< 5iar sulit mele+ati air sirup ber+ara. =emag ada "ag le+at* tapi tidaksemua"a. 5ebagia siar ada "ag di serap oleh +ara coklat sirup.5emaki pekat +ara pada sirup* siar lampu seter aka semaki sedikit "ag meembus gelas.4ega kata lai semaki ba"ak caha"a "ag diserap. (umlah caha"a "ag di serap berbadiglurus dega itesitas +ara. >al iilah "ag medasari pegukura spektro-visibel.B. PENG(K(RAN K(ANTITATIF6pabilaadamempu"ai larutadegaderet +ara"agsemakipekat. ;emudiaadamegukur absorbasi"a (jumlah caha"a "ag diserap). =aka aka didapatka suatu kurva liier.(umlahcaha"a"agdiserapsemakiba"akseirigdegaitesitas+ara"agsemakipekat. 4eret +ara ii dalam duia aalisis kimia di sebut sebagai deret stadar. 4a jika suatularuta telah diketahui absorbasi"a* maka kosetrasi"a-pu dapat diketahui degamembadigka terhadap deret stadar. .ilah prisip dasar pegukura kosetrasimegguaka spektro-visibel.%.LIMITASI &ALAM SPERTRO"VISIBLE/eberapa hal "ag perlu diperhatika adalah pada kosetrasi "ag terlalu pekat* kurva deretstadar mejadi tidak liier. /iasa"a kosetrasi di atas 0.1 =. >al ii karea pada kosetrasi"ag tiggi* jarak atar partikel ?at mejadi sagat rapat. >al ii aka mempegaruhi distribusimuata* da megubah cara molekul melakuka serapa. @leh karea ituterkadagpadakosetrasi terlalutiggi kurvatidakliier. .tulahsebab"apadapembuataderet stadar*absorbasi diajurka tidak melebih 1. (adi absorbasi deret stadar ada di dalam rage 0-1.!ag )erlu di )erhatika Aa) )erbedaakuvet sagat berpegaruh. >arapselaluguakasatukuvet "ag sama utukmegukur absorbasi. 6pabila ada terlibat dega sample "ag jumlah"a ba"ak* da adamegguaka kuvet disposable* guaka kuvet maksimal tiga kali pemakaia. 5etelah itu pakaikuvet baru.b)Berkadag se"a+a aalat megalami reaksi kimia "ag lambat da memerluka +aktu utukmecapai kesetimbaga. >al ii me"ebabka pe"impaga "ag sigifika bila pembacaaabsorbasi tidak dilakuka bersamaa.c) 9akukapegukuraabsorbasi padapajaggelombagmaksimal. (agasugkautukmecari terlebih dulu pada pajag gelombag berapa sample memberika absorbasi maksimal.>al ii utuk meigkatka sesitifitas aalisa.&.'(B(NGAN ABSORBANSI &AN KONSENTRASI )ajaggelombag"agdiguakautukmelakukaaalisis adalahpajaggelombagdimaa suatu ?at memberika pe"erapa palig tiggi "ag disebut Cmaks. >al ii disebabkajika pegukura dilakuka pada pajag gelombag "ag sama* maka data "ag diperoleh makiakurat atau kesalaha "ag mucul maki kecil. /erdasarka hukum /eer absorbasi aka berbadig lurus dega kosetrasi* karea b atau lharga"a 1 cm dapat diabaika da D merupaka suatu tetapa. 6rti"a kosetrasi maki tiggimaka absorbasi "ag dihasilka maki tiggi* begitupu sebalik"a kosetrasi maki redahabsorbasi "agdihasilkamakiredah. (>ukum9amber-/eer das"arat peralata"agdiguaka agar terpeuhi hukum 9ambert-/eer . >ubuga atara absorbasi terhadap kosetrasi aka liear (6E#) apabila ilai absorbasilaruta atara 0*2-0*% (0*2 F 6 G 0*%) atau serig disebut sebagai daerah berlaku hukum 9ambert-/eer. (ika absorbasi "ag diperoleh lebih besar maka hubuga absorbasi tidak liear lagi.;urva kalibarasi hubuga atara absorbasi versus kosetrasi dapat dilihat pada :ambar.:ambar ;urva hubuga absorbasi vs kosetrasi E. FAKTOR"FAKTORABSORBAN%E &AN KONSENTRASI MEN)A&I TI&AK LINIER1.6da"a serapa oleh pelarut. >al ii dapat diatasi dega pegguaa blagko* "aitu laruta"ag berisi selai kompoe "ag aka diaalisis termasuk ?at pembetuk +ara.2.5erapa oleh kuvet. ;uvet "ag ada biasa"a dari baha gelas atau kuarsa* amu kuvet darikuarsa memiliki kualitas "ag lebih baik.2.;esalahafotometrik ormal pada pegukura dega absorbasi sagat redah atau sagattiggi* hal ii dapat diatur dega pegatura kosetrasi* sesuai dega kisara sesitivitas darialat "ag diguaka (melalui pegecera atau pemekata). Hat "ag dapat diaalisis megguaka spektrofotometri siar tampak adalah ?at dalambetuk laruta da ?at tersebut harus tampak ber+ara* sehigga aalisis "ag didasarka padapembetuka laruta ber+ara disebut juga metode kolorimetri. (ika tidak ber+ara maka laruta tersebut harus dijadika ber+ara dega cara memberireage tertetu "ag spesifik. 4ikataka spesifik karea ha"a bereaksi dega spesi "ag akadiaalisis. Ieage ii disebut reagen pembentuk warna (chromogenik reagent). F. SIFAT"SIFAT REAGEN PEMBENT(K *ARNA1. ;estabila dalam laruta. )ereaksi-pereaksi "ag berubah sifat"a dalam +aktu beberapa jam*dapat me"ebabka timbul"a semacam ceda+a bila disimpa. @leh sebab itu harus dibuatbaru da kurva kalibarasi "ag baru harus dibuat saat setiap kali aalisis.2.)embetuka +ara "ag diaalisis harus cepat.2.Ieaksi dega kompoe "ag diaalisa harus berlagsug secara stoikiometrik.$.)ereaksi tidak boleh me"erap caha"a dalam spektrum dimaa dilakuka pegukura.5.)ereaksi harus selektif da spesifik (khas) utuk kompoe "ag diaalisa* sehigga +ara "agterjadi bear-bear merupaka ukura bagi kompoe tersebut saja.0. Bidak boleh ada gaggua-gaggua dari kompoe-kompoe lai dalam laruta "ag dapatmegubah?at pereaksi ataukompoekompoe"agdiaalisamejadi suatubetukataukompleks "ag tidak ber+ara* sehigga pembetuka +ara "ag dikehadaki tidak sempura.1.)ereaksi "ag dipakai harus dapat meimbulka hasil reaksi ber+ara "ag dikehedaki degakompoe "ag diaalisa* dalam pelarut "ag dipakai.G.LAR(TAN +ANG &ITAMBA' REAGEN 'AR(S MEMILIKI LIMA SIFAT1.;estabila +ara "ag cukup lama gua memugkika pegukura absorbasi dega teliti.;etidakstabila* "agmegakibatkame"usut"a +ara laruta(fadig)* disebabkaolehoksidasi oleh udara* peguraia secara fotokimia* pegaruh keasama* suhu da jeis pelarut.Jamu kadag-kadag dega megubah kodisi laruta dapat diperoleh kestabila "ag lebihbaik.2.,ara laruta "ag aka diukur harus mempu"ai itesitas "ag cukup tiggi (+ara haruscukup tua) "ag berarti bah+a absortivitas molar"a (D) besar. >al ii dapat dikotrol degamegubahpelarut"a. 4alamhal ii degamemilihpereaksi "agmemilikikepekaa"agcukup tiggi.2.,ara laruta "ag diukur sebaik"a bebas daripada pegaruh variasi-variasi kecil kecil dalamilai p>* suhu maupu kodisis-kodisi "ag lai.$. >asil reaksi "ag ber+ara ii harus larut dalam pelarut "ag dipakai.5. 5istem "ag ber+ara ii harus memeuhi >ukum 9ambert-/eer. '.MENENT(KAN KONSENTRASI SAMPEL &ENGAN %ARA K(RVA KALIBRASI ;osetrasi sampel dalam suatu laruta dapat ditetuka dega rumus "ag dituruka darihukum lambert beer (6K a . b . c atau 6 K D . b . c).Jamu ada cara lai "ag dapat diguaka utuk meetuka kosetrasi suatu spesi "ag adadalamsuatularuta"aki degacarakurvakalibarasi. #ara ii sebear"a masihtetapbertumpu pada hukum 9ambert-/eer "aki absorbasi berbadig lurus dega kosetrasi. 9agkah-lagkah "ag perlu dilakuka dalam peetua kosetrasi ?at dega kurva kalibarasi:1. =achigkuvet : mecari duabuahkuvet "agmemiliki absorbasi atautrasmitasisama atau hampir sama. 4ua buah kuvet iilah "ag aka diguaka utuk aalisis* satuutuk blako* satu utuk sampel. 4alammelakuka aalisis =achig kuvet harusdilakuka agar kesalaha"a maki kecil.2. =embuat laruta stadar pada berbagai kosetrasi. 9aruta stadar "aitu laruta "agkosetrasi"a telah diketahui secara pasti. ;osetrasi laruta stadar dibuat dari "aglebih kecil sampai lebih besar dari kosetrasi aalit "ag diperkiraka. 2. 6mbilah salah satu laruta stadar* kemudia ukur pada berbagai pajag gelombag.>al ii dilakuka utuk megetahui pada pajag gelombag berapa* absorbasi "agdihasilka palig besar. )ajag gelombag "ag meghasilka absorbasi palig besaratau palig tiggi disebut pajag gelombag maksimum (lmaks).$. Lkurlahabsorbasi semualarutastadar"agtelahdibuat padapajaggelombagmaksimum.5. #atat absorbasi "agdihasilkadari semualarutastadar* kemudiaalurkapadagrafikabsorbasi vs kosetrasi sehiggadiperolehsuatukurva"agdisebutkurvakalibarasi. 4ari hukum9ambart-/eerjikaabsorbasi "agdihasilkaberkisaratara0*2-0*% maka grafik aka berbetuk garis lurus* amu hal ii tidak dapat dipastika.