SKRIPSI - eprints.umm.ac.ideprints.umm.ac.id/23662/1/jiptummpp-gdl-annitafatm... · ANNITA FATMA...

23
SKRIPSI ANNITA FATMA LESTARI PROGRAM STUDI FARMASI FAKULTAS ILMU KESEHATAN UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH MALANG 2015 PERBANDINGAN AKTIVITAS ANTIOKSIDAN EKSTRAK ETANOL BUAH Jatropha gossypifolia L. DARI BERBAGAI METODE EKSTRAKSI REMASERASI

Transcript of SKRIPSI - eprints.umm.ac.ideprints.umm.ac.id/23662/1/jiptummpp-gdl-annitafatm... · ANNITA FATMA...

Page 1: SKRIPSI - eprints.umm.ac.ideprints.umm.ac.id/23662/1/jiptummpp-gdl-annitafatm... · ANNITA FATMA LESTARI PROGRAM STUDI FARMASI FAKULTAS ILMU KESEHATAN UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH MALANG

SKRIPSI

ANNITA FATMA LESTARI

PROGRAM STUDI FARMASI

FAKULTAS ILMU KESEHATAN

UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH MALANG

2015

PERBANDINGAN AKTIVITAS

ANTIOKSIDAN EKSTRAK ETANOL BUAH

Jatropha gossypifolia L. DARI BERBAGAI

METODE EKSTRAKSI REMASERASI

Page 2: SKRIPSI - eprints.umm.ac.ideprints.umm.ac.id/23662/1/jiptummpp-gdl-annitafatm... · ANNITA FATMA LESTARI PROGRAM STUDI FARMASI FAKULTAS ILMU KESEHATAN UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH MALANG

ii

Page 3: SKRIPSI - eprints.umm.ac.ideprints.umm.ac.id/23662/1/jiptummpp-gdl-annitafatm... · ANNITA FATMA LESTARI PROGRAM STUDI FARMASI FAKULTAS ILMU KESEHATAN UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH MALANG

iii

Page 4: SKRIPSI - eprints.umm.ac.ideprints.umm.ac.id/23662/1/jiptummpp-gdl-annitafatm... · ANNITA FATMA LESTARI PROGRAM STUDI FARMASI FAKULTAS ILMU KESEHATAN UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH MALANG

iv

KATA PENGANTAR

Assalamu’alaikum warohmatullahi wabarokatuh

Syukur Alhamdulillah senantiasa terpanjatkan kehadirat Allah SWT yang telah

melimpahkan rahmat dan hidyah-Nya serta telah memberikan nikmat berupa petunjuk,

kesehatan, serta kesabaran kepada penulis sehingga dapat menyelesaikan skripsi yang

berjudul PERBANDINGAN AKTIVITAS ANTIOKSIDAN EKSTRAK ETANOL

BUAH Jatropha gossypifolia L. DARI BERBAGAI METODE EKSTRAKSI

REMASERASI.

Pada kesempatan yang berharga ini, penulis mengucapkan terima kasih sebesar-besarnya kepada:

1. Allah SWT yang telah memberikan rahmat dan hidayah-Nya kepada umat-

Nya, Rasulullah SAW yang telah menuntun kita menuju jalan yang lurus.

2. Siti Rofida S.Si., M.Farm., Apt selaku dosen pembimbing I dan Sovia

Aprina Basuki, S.Farm., M.Si., Apt selaku dosen pembimbing II atas

saran, bimbingan, dan arahannya yang dengan sabar telah meluangkan

waktu untuk membimbing dan mengarahkan penulis.

3. Drs. H. Achmad Inoni, Apt selaku penguji I dan Ahmad Shobrun Jamil,

S.Si., MP selaku penguji II atas saran dan kritik yang diberikan sehingga

penyusunan skripsi ini menjadi lebih baik.

4. Yoyok Bekti Prasetyo, S.Kep, M.Kep., Sp.Kom selaku Dekan Fakultas

Ilmu Kesehatan Universitas Muhammadiyah Malang.

5. Nailis Syifa’, S.Farm. Apt. M.Sc selaku Ketua Program Studi Farmasi dan

Dosen Wali Farmasi B. Terima kasih atas arahan ibu baik tentang

akademik atau non akademik selama ini.

6. Laboratorium Sintesa dan Laboratorium Kimia Terpadu II Program Studi

Farmasi, Fakultas Ilmu Kesehatan, Universitas Muhammadiyah Malang.

Kepada Mas Ferdi yang telah bersedia meluangkan waktu untuk

mendampingi agar penulis dapat melaksanakan penelitiannya dengan baik.

7. Untuk semua Dosen Farmasi Universitas Muhammadiyah Malang yang

sudah memberikan waktunya untuk mengajarkan ilmu-ilmu yang sangat

bermanfaat. Terutama Ibu Arina Swastika Maulita, S.Farm., Apt., dan Ibu

Page 5: SKRIPSI - eprints.umm.ac.ideprints.umm.ac.id/23662/1/jiptummpp-gdl-annitafatm... · ANNITA FATMA LESTARI PROGRAM STUDI FARMASI FAKULTAS ILMU KESEHATAN UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH MALANG

v

Sendi Lia Yunita, S. Farm., Apt. yang telah susah payah membantu jalanya

ujian skripsi sehingga kami dapat melaksanakan ujian skripsi dengan baik.

8. Untuk kedua orang tuaku, Bapak (Suherman) dan Bunda (Linda Maryana

Dewi) dan Saudaraku Cahaya Adi Satria tercinta dan tersayang yang

selalu dan takkan berhenti memberi kasih sayang, dukungan, arahan serta

DO’a tiada hentinya memotivasi dalam segala hal, dengan sabar

mendoakan untuk kebaikan dan kesuksesan ananda. Terima kasih banyak

atas didikan dan kerja keras untuk membuat ananda bahagia serta

mendapatkan ilmu yang bemanfaat, sehingga ananda dapat mewujudkan

impian Bapak dan Bunda yaitu ananda mendapat gelar sarjana.

9. Teman–teman seperjuangan bahan alam : Lyna, Novi, Etha, Dilla, Rahman

Farida, Mbak Lisna, Jeki dan Ayu terimakasih atas kebersamaan, bantuan,

motivasi dan semangat serta kerjasamanya sehingga skripsi ini dapat

terwujud.

10. Para teman-teman yang tersayang yang setia memberi support saya sampai

saat ini : Novi, Lyna, Santi, Nuzul, Bela, Erma, Irna, Nur, Phyt, dan

teman-teman Farmasi B terima kasih atas motivasi dan kebersamaannya

selama ini.

11. Untuk semua pihak yang belum disebutkan namanya, penulis mohon maaf

dan terima kasih yang sebesar-besarnya. Semua keberhasilan ini tak luput

dari bantuan, doa yang telah kalian semua berikan.

Semoga amal baik semua pihak mendapat imbalan dari Allah SWT. Penulis

menyadari bahwa skripsi ini jauh dari kesempurnaan, oleh karena itu penulis

mengharapkan saran dan kritik yang membangun dari pembaca demi kebaikan skripsi ini.

Semoga penulisan skripsi ini dapat berguna bagi penelitian berikutnya ataupun bagi

semua pihak yang membaca skripsi ini, amiin.

Wassalamu’alaikum warohmatullohi wabarokatuh

Malang, 11 Juni 2015

Penyusun

Annita Fatma Lestari

Page 6: SKRIPSI - eprints.umm.ac.ideprints.umm.ac.id/23662/1/jiptummpp-gdl-annitafatm... · ANNITA FATMA LESTARI PROGRAM STUDI FARMASI FAKULTAS ILMU KESEHATAN UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH MALANG

vi

DAFTAR ISI

Halaman

HALAMAN JUDUL .......................................................................................... i

LEMBAR PENGESAHAN ................................................................................ ii

LEMBAR PENGUJIAN .................................................................................... iii

KATA PENGANTAR........................................................................................ iv

DAFTAR ISI ..................................................................................................... vi

DAFTAR TABEL .............................................................................................. x

DAFTAR GAMBAR ......................................................................................... xi

DAFTAR LAMPIRAN ...................................................................................... xii

DAFTAR SINGKATAN .................................................................................... xiii

RINGKASAN .................................................................................................... xiv

ABSTRAK ........................................................................................................ xvi

BAB I PENDAHULUAN ............................................................................... 1

1.1 Latar Belakang Masalah ................................................................ 1

1.2 Rumusan Masalah ......................................................................... 4

1.3 Tujuan Penelitian ........................................................................... 4

1.4 Manfaat Penelitian ......................................................................... 5

1.5 Hipotesis ....................................................................................... 5

BAB II TINJAUAN PUSTAKA........................................................................ 6

2.1 Tinjauan Tentang Tanaman Jatropha gossypifolia ......................... 6

2.1.1 Klasifikasi Tanaman ............................................................ 6

2.1.2 Morfologi Tanaman ............................................................. 7

2.1.3 Daerah Asal dan Penyebaran Tanaman ................................ 8

2.1.4 Kandungan Tanaman ........................................................... 8

2.1.5 Kegunaan dan Khasiat Tanaman .......................................... 9

2.2 Ekstraksi........................................................................................ 10

2.2.1 Maserasi .............................................................................. 12

2.2.2 Pemilihan Solvent ............................................................... 15

2.3 Radikal Bebas................................................................................ 16

2.4 Antioksidan ................................................................................... 17

2.4.1 Sumber Antioksidan ............................................................ 17

2.4.2 Mekanisme Kerja Antioksidan............................................. 19

2.4.3 Vitamin C ........................................................................... 19

Page 7: SKRIPSI - eprints.umm.ac.ideprints.umm.ac.id/23662/1/jiptummpp-gdl-annitafatm... · ANNITA FATMA LESTARI PROGRAM STUDI FARMASI FAKULTAS ILMU KESEHATAN UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH MALANG

vii

2.5 Tinjauan KLT ................................................................................ 20

2.6 Uji Aktivitas Antioksidan .............................................................. 21

2.6.1 Metode DPPH ..................................................................... 21

2.6.2 Metode CUPRAC................................................................ 23

2.6.3 Metode FRAP ..................................................................... 23

2.7 Spektrofotometri ............................................................................ 24

BAB III KERANGKA KONSEPTUAL ............................................................. 25

3.1 Uraian Kerangka Konseptual ......................................................... 25

3.2 Skema Kerangka Konseptual ......................................................... 27

BAB IV METODE PENELITIAN ..................................................................... 28

4.1 Tempat Penelitian .......................................................................... 28

4.2 Alat Penelitian ............................................................................... 28

4.2.1 Pembuatan Serbuk Simplisia .................................................. 28

4.2.2 Proses Ekstraksi ............................................................ 28

4.2.3 Pengujian Antioksidan Dengan Metode DPPH .............. 29

4.2.4 Identifikasi Golongan Senyawa Dengan KLT ................ 29

4.3 Bahan Penelitian ................................................................... 29

4.3.1 Bahan Uji ...................................................................... 29

4.3.2 Proses ekstraksi ............................................................. 29

4.3.3 Pengujian Antioksidan .................................................. 30

4.3.4 Identifikasi Profil KLT .................................................. 30

4.4 Rancangan Penelitian..................................................................... 30

4.4.1 Desain Penelitian .................................................................. 30

4.4.2 Variabel Penelitian................................................................. 30

4.5 Prosedur Kerja ............................................................................... 31

4.5.1 Persiapan Ekstrak .................................................................. 31

4.5.1.1 Persiapan Simplisia ........................................................ 31

4.5.1.2 Pembuatan Ekstrak Buah Jarak Merah ........................... 31

4.5.2 Identifikasi Profil KLT........................................................... 32

4.5.3 Penapisan Fitokimia Golongan Alkaloid ................................ 33

4.5.4 Persiapan Pembuatan Larutan Uji........................................... 34

4.5.4.1 Pembuatan Larutan Pereaksi DPPH ................................ 34

4.5.4.2 Pembuatan Larutan Kontrol Pereaksi .............................. 34

4.5.4.3 Pembuatan Larutan Blanko ............................................ 34

4.5.4.4 Pembuatan Larutan Pengkoreksi..................................... 34

Page 8: SKRIPSI - eprints.umm.ac.ideprints.umm.ac.id/23662/1/jiptummpp-gdl-annitafatm... · ANNITA FATMA LESTARI PROGRAM STUDI FARMASI FAKULTAS ILMU KESEHATAN UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH MALANG

viii

4.5.4.5 Pembuatan Larutan Ekstrak Buah Jarak Merah ............... 35

4.5.4.6 Pembuatan Larutan Kontrol Positif ................................. 36

4.5.5 Pengukuran Aktivitas Antioksidan ......................................... 37

4.5.5.1 Pengukuran λmaks DPPH .............................................. 37

4.5.5.2 Optimasi Waktu Inkubasi ............................................... 37

4.5.5.3 Pengukuran Absorbansi ................................................. 37

4.6 Analisis Data ................................................................................. 38

4.6.1 Perhitungan Persen Penghambatan ......................................... 38

4.6.2 Perhitungan IC50 .................................................................... 38

4.6.3 Analisis Analitik .................................................................... 38

BAB V HASIL PENELITIAN ........................................................................... 39

5.1 Hasil Determinasi Buah Jarak Merah ............................................. 39

5.2 Hasil Serbuk Simplisia Buah Jarak Merah...................................... 39

5.3 Hasil Ekstrak Etanol 96% Buah Jarak Merah ................................ 40

5.4 Hasil Uji KLT Ekstrak Etanol 96% Buah Jarak Merah ................... 41

5.4.1 Identifikasi Senyawa Alkaloid dengan KLT ........................... 41

5.4.2 Identifikasi Alkaloid dengan Penapisan Fitokimia .................. 42

5.4.3 Identifikasi Senyawa Terpenoid dengan KLT ......................... 42

5.4.4 Identifikasi Senyawa Flavonoid dengan KLT ......................... 43

5.4.5 Hasil Uji KLT Golongan Polifenol dan Tanin ........................ 44

5.4.5 Identifikasi Senyawa Antrakinon dengan KLT ....................... 45

5.4.6 Hasil nilai Rf dari Kromatografi Lapis Tipis .......................... 46

5.5 Hasil Pengukuran Aktivitas Antioksidan ........................................ 47

5.5.1 Hasil Pengukuran Panjang Gelombang Kontrol Positif ........... 47

5.5.2 Hasil Pengukuran operating time Kontrol Positif ................... 48

5.5.3 Hasil Pengukuran Panjang Gelombang Ekstrak ..................... 48

5.5.4 Hasil Pengukuran Operating Time Ekstrak ............................. 49

5.6 Hasil Pengukuran Aktivitas Antioksidan ....................................... 50

5.6.1 Hasil Pengukuran Antioksidan Kontrol Positif ....................... 50

5.6.2 Hasil Pengukuran Aktivitas Antioksidan Ekstrak ................... 51

5.7 Analisis Data ................................................................................. 52

BAB VI PEMBAHASAN .................................................................................. 53

BAB VII KESIMPULAN dan SARAN .............................................................. 60

DAFTAR PUSTAKA ........................................................................................ 61

LAMPIRAN ...................................................................................................... 67

Page 9: SKRIPSI - eprints.umm.ac.ideprints.umm.ac.id/23662/1/jiptummpp-gdl-annitafatm... · ANNITA FATMA LESTARI PROGRAM STUDI FARMASI FAKULTAS ILMU KESEHATAN UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH MALANG

ix

DAFTAR TABEL

Tabel Halaman

II.I Kandungan Kimia Buah Jarak Merah (Jatropha gossypifolia L) .......................... 3

V.1 Rendemen Hasil Ekstraksi Buah Jarak Merah .................................................... 41

V.2 Hasil KLT dari Ekstrak Etanol Buah Jarak Merah .............................................. 47

V.3 Data Pengukuran Panjang Gelombang untuk Kontrol Positif ............................... 47

V.4 Data Pengukuran Operating Time Kontrol Positif ............................................... 48

V.5 Data Pengukuran Panjang Gelombang Larutan DPPH untuk Ekstrak .................. 49

V.6 Data Pengukuran Operating Time Ekstrak .......................................................... 49

V.7 Hasil Perhitungan % Inhibisi Vitamin C dengan DPPH ....................................... 50

V.8 Hasil Perhitungan % Inhibisi Ekstrak Etanol Remaserasi Non Kinetik ................ 51

V.9 Hasil Perhitungan % Inhibisi Ekstrak Etanol Remaserasi Kinetik ........................ 52

Page 10: SKRIPSI - eprints.umm.ac.ideprints.umm.ac.id/23662/1/jiptummpp-gdl-annitafatm... · ANNITA FATMA LESTARI PROGRAM STUDI FARMASI FAKULTAS ILMU KESEHATAN UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH MALANG

x

DAFTAR GAMBAR

Gambar Halaman

2.1 Buah Jarak Merah (Jatropha gossypifolia L) ....................................................... 7

2.2 Biji Buah Jarak Merah (Jatropha gossypifolia L) ................................................ 7

2.6.1 Struktur molekul DPPH .................................................................................... 22

5.1 Serbuk Simplisia Buah Jarak Merah (Jatropha gossypifolia L.) ........................... 39

5.2 Ekstrak Kental Buah Jarak Merah (Jatropha gossypifolia L.) ............................... 40

5.3 Hasil Identifikasi golongan Alkaloid dengan Kromatografi Lapis Tipis ................ 41

5.4 Hasil penampisan fitokimia Identifikasi golongan alkaloid .................................. 42

5.5 Hasil Identifikasi Golongan Terpenoid dengan Kromatografi Lapis Tipis ............ 43

5.6 Hasil Identifikasi golongan Flavonoid dengan Kromatografi Lapis Tipis.............. 44

5.7 Hasil Identifikasi golongan polifenol dengan Kromatografi Lapis Tipis ............... 45

5.8 Hasil Identifikasi golongan Antrakinon dengan Kromatografi Lapis Tipis ............ 46

Page 11: SKRIPSI - eprints.umm.ac.ideprints.umm.ac.id/23662/1/jiptummpp-gdl-annitafatm... · ANNITA FATMA LESTARI PROGRAM STUDI FARMASI FAKULTAS ILMU KESEHATAN UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH MALANG

xi

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran Halaman

1. Daftar Riwayat Hidup ........................................................................................... 67

2. Surat Pernyataan Anti Plagiasi ............................................................................... 68

3. Surat Determinasi Buah Jarak Merah ..................................................................... 69

4. Perhitungan ........................................................................................................... 70

5. Bagan Alur ............................................................................................................ 77

6. Hasil Analisis Dengan SPSS.................................................................................. 89

7. Hasil Pengukuran Absorbansi Dengan Spektrofotometri ........................................ 90

8. Grafik Perbandingan Kadar Dan % Inhibisi ........................................................... 102

9. Alat Dan Bahan ..................................................................................................... 104

Page 12: SKRIPSI - eprints.umm.ac.ideprints.umm.ac.id/23662/1/jiptummpp-gdl-annitafatm... · ANNITA FATMA LESTARI PROGRAM STUDI FARMASI FAKULTAS ILMU KESEHATAN UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH MALANG

xii

DAFTAR SINGKATAN

ROS : Reactive Oxygen Spesies

BHA : Butylated Hidroxy Anisol

BHT : Butylated Hidroxy Toluen

FRAP method : Ferric Reducing / Antioxidant Power method

DPPH : 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl

SOD : Superoksida Dismutase

TE : Trolox Ekuivalen

nm : Nano Meter

LU : Larutan Uji

LKP : Larutan Kontrol Positif

LDH : Larutan DPPH

LBI : Larutan Baku Induk

K : Kinetik

NK : Non Kinetik

Page 13: SKRIPSI - eprints.umm.ac.ideprints.umm.ac.id/23662/1/jiptummpp-gdl-annitafatm... · ANNITA FATMA LESTARI PROGRAM STUDI FARMASI FAKULTAS ILMU KESEHATAN UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH MALANG

xiii

RINGKASAN

Radikal bebas merupakan suatu molekul yang memiliki satu atau lebih

pasangan elektron yang tidak saling berpasangan. Hal ini yang menyebabkan

molekul radikal bebas tersebut bersifat sangat reaktif. Kereaktifan radikal bebas

sangat berbahaya bagi tubuh. Di dalam tubuh radikal bebas ini juga dalam jumlah

yang berlebih dapat mengoksidasi sel-sel tubuh sehingga mengakibatkan berbagai

macam penyakit, antara lain yakni aterosklerosis, jantung koroner, diabetes

melitus hingga dapat menyebabkan kerusakan sel DNA dan mutasi sel (kanker).

Agar tubuh terhindar dari dampak radikal bebas, maka diperlukan suatu senyawa

yang dapat menghambat proses oksidasi dari radikal bebas tersebut.

Antioksidan merupakan suatu senyawa yang dapat menghambat proses

oksidasi dari molekul radikal bebas dengan cara mendonorkan salah satu

elektronnya ke molekul radikal bebas. sehingga menyebabkan radikal bebas

menjadi suatu molekul yang lebih stabil. salah satu contoh tanaman yang dapat

digunakan sebagai antioksidan alami adalah buah jarak merah (Jatropha

gossypifolia L). Tanaman ini memiliki berbagai macam kandungan senyawa

metabolit sekunder antara lain flavonoid, polifenol, antrakinon, tannin dan

alkaloida.

Penelitian ini dilakukan untuk mengetahui bagaimana perbandingan

aktivitas antioksidan pada ekstrak buah jarak merah (Jatropha gossypifolia L)

dengan menggunakan dua metode ekstraksi yang digunakan yaitu remaserasi

kinetik dan non kinetik. Tujuannya yaitu mengetahui metode ekstraksi yang lebih

tepat untuk mengekstraksi buah jarak merah agar memiliki aktivitas sebagai

antioksidan dengan menggunakan uji DPPH. Selain itu dilakukan uji kualitatif

terhadap ekstrak buah jarak merah meliputi uji KLT. Pada ekstrak etanol buah

jarak merah mempunyai aktivitas antioksidan dengan metode DPPH, yang diduga

memiliki senyawa flavonoid yang berperan sebagai antioksidan.

Pada pembuatan simplisia buah jarak merah, digunakan bagian buah yang

masih muda, kemudian dibersihkan dan dikeringkan dengan cara diangin-

anginkan. Kemudian dikeringkan di oven selama kurang lebih 4-5 hari. Setelah itu

digiling dengan mesin penggiling dan diayak utnuk menentukan derajat kehalusan

dari simplisia tersebut. Diperoleh simplisia sebanyak 350,85g. Simplisia

sebanyak 100g kemudian diekstraksi dengan metode remaserasi menggunakan

pelarut etanol 96% sebanyak 100ml. Untuk remaserasi non kinerik dilakukan

3x24 jam pelarut diganti dilakukan pengadukan 2-3 menit ketika pergantian

pelarut baru. Sedangkan untuk ekstraksi remaserasi kinetik dilakukan pengadukan

selama 4 jam dengan kecepatan konstan sebesar 350rpm. Kemudian hasil

ekstraksi kedua metode tersebut filtrat nya disaring dan dipekatkan dengan rotary

evaporator hingga kental dan didapatkan % rendemen sebanyak 7,40% untuk

ekstraksi kinetik dan 6,73% untuk ekstraksi non kinetik.

Pada uji pendahuluan aktivitas antioksidan ekstrak etanol buah jarak

merah sebagai penangkap radikal bebas dengan menggunakan metode DPPH

diawali dengan pengujian ekstrak secara kualitatif yaitu uji KLT. Fase diam yang

digunakan adalah silica gel F254 dengan luas 3 x 10 cm dengan jarak eluasi 8 cm.

Uji flavonoid fase gerak yang digunakan untuk mengeluasi yaitu N heksan dan

etil asetat dengan perbandingan 4 : 6 dan 7:3 dengan penampak noda Asam sulfat

10%. Sedangkan pada uji polifenol digunakan penampak noda FeCl3. Noda

diamati dengan sinar tampak, UV 254 dan 365 nm.

Page 14: SKRIPSI - eprints.umm.ac.ideprints.umm.ac.id/23662/1/jiptummpp-gdl-annitafatm... · ANNITA FATMA LESTARI PROGRAM STUDI FARMASI FAKULTAS ILMU KESEHATAN UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH MALANG

xiv

Pengujian aktivitas antioksidan ekstrak etanol buah jarak merah dilakukan

dengan metode DPPH. Untuk tahap awal yang dilakukan yaitu pengukuran

panjang gelombang maksimum (λ maks) larutan kontrol pereaksi (1,0 ml DPPH

0,4mM ada 10,0 ml metanol. Penentuan operating time ekstrak etanol buah jarak

merah dan vitamin C sebagai kontrol positif tiap 5 menit sejak penambahan

DPPH. Operating time ini digunakan sebagai waktu inkubasi. Selanjutnya

pengujian aktivitas antioksidan ekstrak etanol bauh jarak merah dengan

konsentrasi 25, 50, 100, 200 dan 400 µg/ml ditambahkan kedalam 1,0 ml DPPH

0,4 mM ad 10,0 ml methanol p.a dikocok sampai homogen kemudian di inkubasi

selama 35 menit untuk ekstrak kinetik dan 30 menit untuk ekstrak non kinetik

pada suhu ruangan ditempat gelap. Larutan ini selanjutnya diukur absorbansinya

pada panjang gelombang maksimum yang telah dilakukan pengukuran

sebelumnya, blanko yang digunakan untuk pengukuran larutan uji ini adalah

larutan pengkoreksi (larutan uji ad metanol 10,0 ml tanpa DPPH 0,4mM).

Perlakuan yang sama juga dilakukan untuk vitamin C sebagai kontrol positif

dengan konsentrasi 0,2; 0,4; 1,0; 1,6; 2,0; dan 3,0 µg/ml dan di inkubasi selama

20 menit. Data hasil pengukuran absorbansi dianalisa persentase aktivitas

antioksidannya menggunakan persamaan % inhibisi dari hasil nilai absorbansi

larutan kontrol pereaksi (serapan radikal DPPH 0,4 mM) dikurangi absorbansi

sampel (serapan sampel dalam radikal bebas DPPH 0,4 mM) kemudian dibagi

dengan absorbansi larutan kontrol pereaksi dan dikalikan 100% untuk

mendapatkan % inhibisi tiap konsentrasi. Selanjutnya data % inhibisi diolah

dengan analisis probit menggunakan SPSS 17.0 For Windows. Hasil analisis data

tersebut dihasilkan nilai IC50. Analisis secara SPSS juga digunakan untuk melihat

perbedaan hasil ekstraksi dengan metod ekinetik dan non kinetik menggunakan

rumus uji t independent t-test.

Hasil dari penelitian pada uji KLT menunjukkan positif mengandung

senyawa flavonoid dan polifenol yang berperan sebagai antioksidan, selain itu

ekstrak juga mengandung senyawa antrakinon, tannin dan alkaloid. Serta hasil

IC50 pada ekstrak etanol buah jarak merah 65,27µg/ml untuk metode remaserasi

kinetik dan 119,27µg/ml untuk ekstraksi dengan metode non kinetik, sedangkan

nilai IC50 pada vitamin C didapatkan sebesar 1,47 µg/ml. sehingga ekstrak etanol

buah jarak merah memiliki aktivitas antioksidan lebih kecil dibandingkan vitamin

C yang tergolong sebagai antioksidan sangat kuat karena nilai IC50 kurang dari 50

µg/ml. Untuk IC50 pada ekstrak kinetik tergolong masuk kriteria antioksidan kuat

sedangkan untuk ekstrak non kinetik tergolong kriteria antioksidan sedang. Agar

diperoleh data yang lebih lengkap, penelitian dapat dilanjutkan dengan percobaan

in-vivo yang berkenaan dengan aktivitas ekstrak etanol buah jarak merah sebagai

antiradikal bebas dalam pengembangannya sebagai obat fitofarmaka.

Page 15: SKRIPSI - eprints.umm.ac.ideprints.umm.ac.id/23662/1/jiptummpp-gdl-annitafatm... · ANNITA FATMA LESTARI PROGRAM STUDI FARMASI FAKULTAS ILMU KESEHATAN UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH MALANG

xv

DAFTAR PUSTAKA

Agoes, G., 2007. Teknologi Bahan Alam. Bandung: Institute Teknologi

Bandung.

Alam, M.N., Bristi, N.J., Rafiquzzaman, M., 2012. Review on in vivo and in vitro

methods evaluation of antioxidant activity. Saudi Pharmaceutical Journal.

Vol. 21. pp.143–152.

Ali, F., Ferawati., dan Arqomah, R., 2013. Ekstraksi zat warna dari kelopak bunga

rosella (study pengaruh konsentrasi asam asetat dan asam sitrat). Jurnal

Teknik Kimia. Vol. 19 No. 1, pp. 26-34.

Ambarsari, I., Qanytah., dan Sarjana., 2013. Perubahan aktivitas antioksidan pada

bawang putih selama proses pengolahan dan penyimpanan. Buletin

Tekhnologi PascaPanen Pertanian. Vol. 9 No.2, pp.64-73.

Apu, A.S., Hossain,F., Rizwan,F., Bhuyan,S.H., Matin, M., and Jamaluddin,

A.T.M., Study of pharmacological activities of methanol extract of Jatropha

gossypifolia fruits. Journal of Basic and Clinical Pharmacy. Vol. 4 No.

1,pp. 1-5.

Aquarista, S., Astarina, E.N., dan Mardina, P., 2011. Pengaruh Kecepatan Putar

Pengaduk dan Waktu Operasi Pada Ekstraksi Tannin dari Mahkota Dewa.

Jurnal Kimia. Vol. 5 No.2, pp. 128-131.

Behrendorff., Vickers, C.E., Chrysanthopoulos, P., and Nielsen, L.K., 2013. 2,2-

Diphenyl-1-Picrylhydrazyl As A Screening Tool For Recombinant

Monoterpene Biosynthesis. Microbial Cells Factories. p: 1-12.

Berset,C., Cuvelier ME., and Williams, B.W., 1995. Use of a free radical method

to evaluate antioxidant activity. Food Sci Technol. Vol.28, pp. 25–30.

BPOM, 2010. Acuan Sediaan Obat Herbal, Edisi ke-1. Jakarta: Badan

Pengawas Obat Dan Makanan, hal 1-8.

Budiyati, E., Tridayana, A., 2013. Pengaruh Kecepatan Putaran Pengaduk

Terhadap Konsentrasi Polifenol, Kca, Dan De Pada Ekstraksi Polifenol Dari

Kulit Apel Malang. Surakarta: Simposium Nasional RAPI XII. Fakultas

Tekhnik UMS.

Page 16: SKRIPSI - eprints.umm.ac.ideprints.umm.ac.id/23662/1/jiptummpp-gdl-annitafatm... · ANNITA FATMA LESTARI PROGRAM STUDI FARMASI FAKULTAS ILMU KESEHATAN UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH MALANG

xvi

Departemen Kesehatan RI Direktorat Jendral Pengawasan Obat Dan Makanan

Direktorat Pengawasan Obat Tradisional.1995. Farmakope Indonesia,

Edisi ke-1V. Jakarta: Departemen Kesehatan, hal 39.

Departemen Kesehatan RI Direktorat Jendral Pengawasan Obat Dan Makanan

Direktorat Pengawasan Obat Tradisional. 2000. Parameter Standar Mutu

Ekstrak Tumbuhan Obat, Edisi ke-1. Jakarta: Departemen Kesehatan, hal

1-68.

Devasagayam, T.P.A., Tilak, J.C., Boloor, K.K., Sane, K.S., Ghaskadbi, S.S., and

Lele, R.D., 2004. Free radicals and antioxidants in human health: current

status and future prospects. JAPI.Vol. 52, pp.794-804.

Djojopranoto,R.R., 2013. Daya Peredaman Radikal Bebas Ekstrak Etanol Daun

Jambu Mente (Anacardium occidentale L.) Terhadap DPPH. Jurnal Ilmiah

Mahasiswa Universitas Surabaya. Vol.2 No.2, pp. 1-3.

Fadilah, Artati, E.K., 2007. Pengaruh Kecepatan Putar Pengadukan dan Suhu

Operasi Pada Ekstraksi Tannin dari Jambu Mete dengan Pelarut Aseton.

EKUILIBRIUM.Vol. 6 No. 1, pp. 2-6.

Fauzana, D.L., Pandji, C., dan Chaidir. 2010. Perbandingan metode maserasi,

remaserasi, perkolasi dan reperkolasi terhadap rendemen ekstrak temulawak

(Curcuma xanthorrhiza roxb.). Bogor: Naskah Publikasi.

Handa, S.S., 2008. An overview of extraction techniques for medicinal and

aromatic plants. In: S.S. Handa, S.P.S.Khanuja, G.Longo, and D.D. Rakesh

(Eds). Extraction Technologies for Medicinal And Aromatic Plants,

Trieste : International centre for science and high technology., pp.21-22.

Harmita., 2004. Petunjuk Pelaksanaan Validasi Metode Dan Cara Perhitungannya.

Majalah Ilmu Kefarmasian.Vol. I No.3, pp.5-8.

Hutapea, J.R., 2000. Inventaris Tanaman Obat Indonesia. Edisi-1, Jakarta:

departemen kesehatan Republik Indonesia.p.160.

Igbinosa, O.O., Igbinosa, I.H., Chigor, V.N., Uzunuigbe, O. E., Oyedemi, O. S.,

Odjadjare, E.E., Okoh, A.I., and Igbinosa, E.O. 2011. Polyphenolic

Contents and Antioxidant Potential of Stem Bark Extracts from Jatropha

curcas (Linn). Int. J. Mol. Sci. pp. 1-14.

Page 17: SKRIPSI - eprints.umm.ac.ideprints.umm.ac.id/23662/1/jiptummpp-gdl-annitafatm... · ANNITA FATMA LESTARI PROGRAM STUDI FARMASI FAKULTAS ILMU KESEHATAN UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH MALANG

xvii

Jain, S., Choudhary,G.P., and Jain,D.K., 2013. In vitro free radical scavenging

activity of Jatropha gossgypifolia Linn. containing phenolic compounds.

Journal of Medicinal Plants Research. Vol. 7 No. 20, pp. 1424-1428.

Jones, W.P., and Kinghorn, A.D., 2006. Extraction of plant secondary

metabolites. In: Sarker, S.D., Zahid Latif., and Alexender, I. Gray( Eds.).

Natural Products Isolation, Edisi ke-2, New Jersey: Humana Press Inc.

pp. 323- 351.

Karinda, M., Fatimawali., dan Citraningtyas, G., 2013. Perbandingan hasil

penetapan kadar vitamin c mangga dodol dengan menggunakan metode

spektrofotometri uv-vis dan iodometri. Pharmacon Jurnal Ilmiah Farmasi

– UNSRAT. Vol. 2 No. 01, p.1-4.

Kawsar, M.H., Raihana, R., Sultana, T., Sohel, M.D., and Sohaily, S.I., 2014. In-

vitro and in-vivo models for antioxidant activity evaluation: a review.

Journal of SUB. Vol. 5 No.1, pp. 21-31.

Kepmenkes., 2009. Farmakope Herbal Indonesia, Edisi ke-1. Jakarta: Menteri

Kesehatan Republik Indonesia.

Khyade,M.S., and Vaikos,N.P., 2010. Pharmacognostical and phytochemical

evaluation of leaf of jatropha gossypifolia L. International Journal Of

Research In Ayurveda And Pharmacy. Vol. 2 No. 1, p. 177-180.

Limbono, S., 2013. Daya Antioksidan Ekstrak Etanol Biji Kenari (Canarium

indicum L.) Dengan Metode DPPH (2,2-difenil-1-pikrilhidrazil). Jurnal

Ilmiah Mahasiswa Universita Surabaya. Vol. 2 No. 2, pp. 3-5.

Mardina, P., Astarina, E.N., Aquarista, S., 2011. Pengaruh Kecepatan Putar

Pengaduk Dan Waktu Operasi Pada Ekstraksi Tannin Dari Mahkota Dewa.

Jurnal Kimia. Vol. 5 No. 2, pp. 129-131.

Misra, M., and Misra, A.N., 2010. Jatropha: the biodiesel plant biology, tissue

culture and genetic transformation – a review. Int. J. Pure Appl. Sci.

Technol. Vol.1 No.01, pp. 11-25.

Molyneux, P., 2003. The use Of The Stable Free Radical Diphenylpicrylhydrazyl

(DPPH) For Estimating Antioxidant Activity. Songklanakarin J. Sci.

Technol. Vol. 26 No. 2, pp. 3-7.

Page 18: SKRIPSI - eprints.umm.ac.ideprints.umm.ac.id/23662/1/jiptummpp-gdl-annitafatm... · ANNITA FATMA LESTARI PROGRAM STUDI FARMASI FAKULTAS ILMU KESEHATAN UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH MALANG

xviii

Mukhriani., 2014. Ekstraksi, pemisahan senyawa, dan identifikasi senyawa aktif.

Jurnal Kesehatan. Vol.7 No. 02, pp. 361-367.

Nurdiansyah., dan Redha.A., 2011. Efek lama maserasi bubuk kopra terhadap

rendemen, densitas, dan bilangan asam biodiesel yang dihasilkan dengan

metode transesterifikasi in situ. Jurnal Belian. Vol. 10 No. 02, p. 218 –

224.

Nurmuhaimina, S.A., Maulia, R., Yuniarti, I., dan Umaningrum, D., 2009. Uji

Aktivitas Antioksidan Dari Ekstrak Campuran Tumbuhan Alang-Alang

(Imperata cylindrica) Dan Lidah Ular (Hedyotis corymbosa) Sebagai

Peredam Radikal Bebas Asam Linoleat. Sains dan Terapan Kimia. Vol. 2

No. 1, pp: 1-9.

Nurwidayati, A., Nyoman., Eridiana, V., Octaviani, dan Udith, Y.L., 2014.

Efektivitas ekstrak biji jarak merah (Jatropha gossypiifolia L.), jarak pagar

(J. curcas) dan jarak kastor (Riccinus communis) famili euphorbiaceae

terhadap hospes perantaraschistosomiasis, keong oncomelania hupensis

lindoensis. BALABA. Vol. 10 No. 01, p.9-14.8

Nwokocha., Blessing, A., Agbagwa, I.O., and Okoli, B.E., 2011. Comparative

phytochemical screening of jatropha L. Species in the niger delta. Research

journal of phytochemistry. pp. 1-8.

Palupi, I.A., dan Martosupono, M., 2009. Buah merah: potensi dan manfaatnya

sebagai antioksidan. Jurnal Tumbuhan Obat Indonesia. Vol.2 No.1, p.1-

7.

Panjaitan, M.P., Alimuddin,A.H., dan Adhitiyawarman., 2014. Skrining fitokimia

dan uji aktivitas antioksidan ekstrak metanol kulit batang ceria (baccaurea

hookeri). JKK. Vol. 3 (1), p.17- 21.

Parwata, I.M.O.A., Ratnayani, K., Listya, A., 2010. Aktivitas Antiradikal Bebas

Serta Kadar Beta Karoten Pada Madu Randu (Ceiba Pentandra) Dan Madu

Kelengkeng (Nephelium Longata L.). Jurnal Kimia. Vol.4 No. 01. p. 1-9.

Prakash, A., Rigelhof, F., and Miller, E., 2001. Antioxidant activity. Med Lab

Anal Prog. Vol. 19 No.2, pp. 1–6.

Page 19: SKRIPSI - eprints.umm.ac.ideprints.umm.ac.id/23662/1/jiptummpp-gdl-annitafatm... · ANNITA FATMA LESTARI PROGRAM STUDI FARMASI FAKULTAS ILMU KESEHATAN UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH MALANG

xix

Prior RL., Schaich K., and Wu X., 2005. Standardized methods for the

determination of antioxidant capacity and phenolics in foods and dietary

supplements. J Agri Food Chem. Vol.53, pp. 4290–4302.

Randall, A., Campbell,S., Vogler,W., Bebawi,F., and Madigan, B., 2009.

Bellyache bush (Jatropha gossypiifolia) management manual (Control

options and management case studies from across Australia). Australia

Department of Employment, Economic Development and Innovation., pp.

1-116.

Rienoviar., dan Nashrianto, H., 2010. Penggunaan asam askorbat (vitamin c)

untuk meningkatkan daya simpan sirup rosela (hibiscus sabdariffa linn.).

jurnal hasil penelitian industri. Vol.23 No.1, pp.8-18.

Rohmatussolihat., 2009. Antioksidan, Penyelamat Sel-Sel Tubuh Manusia. Bio

Trends. Vol.4 No.1, pp:1-6.

Sabandar, C.W., Ahmat, N., Jaafar, F.M., and Sahidin, I., 2013. Medicinal

property, phytochemistry and pharmacology of several jatropha species

(euphorbiaceae): a review. Phytochemistry. Vol.85, pp.7–2.

Sagar.B., Kedare, and Singh,R.P., 2011. Genesis and development of DPPH

method of antioxidant assay. J Food Sci Technol., pp. 48(4):412–422.

Sandhiutami, D., Rahayu, L., Oktaviani, T., Sari, L.Y. r Uji Aktivitas

Antioksidan Rebusan Daun Sambang Getih (Hemigraphis bicoolar

Boerl.) dan Sambang Solok (Aerva sanguinolenta (L.) Blume) Secara In

Vitro. Fakultas Farmasi, Universitas Pancasila.

Sarma, A.D., Mallick, A.R., and Ghosh, A.K., 2010. Free radicals and their role in

different clinical conditions: an overview. International Journal of

Pharma Sciences and Research. Vol.1(3), pp.185-192.

Satria, M. D., 2013. Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak N-Heksan Buah Lakum

(Cayratia trifolia) Dengan Metode DPPH (2,2-difenil-1-pikrilhidrazil).

Pontianak. Naskah Publikasi.

Selawa, W., Runtuwene, M.R.J., dan Citraningtyas, G., 2013. Kandungan

flavonoid dan kapasitas antioksidan total ekstrak etanol daun binahong

[anredera cordifolia(ten.)steenis.]. Pharmacon Jurnal Ilmiah Farmasi –

UNSRAT. Vol. 2 No. 01, p.1-6.

Page 20: SKRIPSI - eprints.umm.ac.ideprints.umm.ac.id/23662/1/jiptummpp-gdl-annitafatm... · ANNITA FATMA LESTARI PROGRAM STUDI FARMASI FAKULTAS ILMU KESEHATAN UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH MALANG

xx

Senja, R.Y., Issusilaningtyas, E., Nugroho, A.K., dan Setyowati, E.P., 2014.

Perbandingan Metode Ekstraksi Dan Variasi Pelarut Terhadap Rendemen

Dan Aktivitas Antioksidan Ekstrak Kubis Ungu (Brassica oleracea L. var.

capitata f. rubra). Trad. Med. J., January 2014. Vol. 19 No.1, p 43-48.

Sie, J.O., 2013. Daya Antioksidan Ekstrak Etanol Kulit Buah Manggis (Garcinia

mangostana Linn) Hasil Pengadukan dan Reflux. Jurnal Ilmiah Mahasiswa

Universitas Surabaya. Vol. 2 No. 1, pp. 8-9.

Silva, J.F., Giordani, R.B., Silva-Jr, A.A.D., Zucolotto, S.M., and Pedrosa,

M.D.F.F., 2014. Jatropha gossypiifolial. (euphorbiaceae): a review of

traditional uses, phytochemistry, pharmacology, and toxicology of this

medicinal plant. Evidence-Based Complementary and Alternative

Medicine.

Sitorus, E., Momuat, L. I., and Katja, D. G., 2013. Antioxidant activity of

peperomia pellucida [l.] kunth. Jurnal Ilmiah Sains. Vol. 13 No. 2, p.1-6.

Solihat,R., 2009. Antioksidan penyelamat sel-sel tubuh manusia. BioTrends,

Vol.4 No.1.pp.

Swastika, A., Mufrod., dan Purwanto., 2013. Aktivitas antioksidan krim ekstrak

sari tomat (solanum lycopersicum l.). Traditional Medicine Journal. Vol.

18(3), p. 132-140.

Syaripuddin, M.S., 2011. Optimasi Proses Ekstraksi Minyak Biji Alpukat dengan

Variasi Temperatur dan Kecepatan Pengadukan. Jurnal Tekhnologi Media

Perspektif. Vol.11 No. 2, pp. 107-111.

Syukur, R., Alam, G., Rahim, A., dan Tayeb, R., 2011. Aktivitas Antiradikal

Bebas Beberapa Ekstrak Tanaman Familia Fabaceae. JST Kesehatan.

Vol.1 No.1 p: 61 – 67.

Tridayana, A., Budiyati, E., 2013. Pengaruh Kecepatan Putaran Pengaduk

Terhadap Konsentrasi Polifenol, Kca, dan De Pada Ekstraksi Polifenol dari

Kulit Apel Malang. Surakarta: Simposium Nasional RAPI XII FT UMS.

Triyati, E., 1985. Spektrofotometer ultra-violet dan sinar tampak serta aplikasinya

dalam oseanologi. Oseana. Vol. X No.1, pp.39 – 47.

Vasisht, K., 2008. Quality control of medicinal and aromatic plants and their

extracted products by HPLC and High Performance Thin Layer

Page 21: SKRIPSI - eprints.umm.ac.ideprints.umm.ac.id/23662/1/jiptummpp-gdl-annitafatm... · ANNITA FATMA LESTARI PROGRAM STUDI FARMASI FAKULTAS ILMU KESEHATAN UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH MALANG

xxi

cromatography. In: S.S. Handa, S.P.S.Khanuja, G.Longo, and D.D. Rakesh

(Eds). Extraction Technologies for Medicinal And Aromatic Plants,

Trieste : International centre for science and high technology., p.247.

Wagner, H., and Bladt, S., 1996. Plant Drug Analysis: A Thin layer

Cromatography Atlas. Edisi ke-2, New York: Springer-Verlag.

Yashin, A., Yashin, Y., Wang, J.Y., and Nemzer, B., 2013. Antioxidant and

antiradical activity of coffee. Antioxidants. Vol.2, pp. 230-245.

Young, I.S., and Woodside, J. V., 2014. Antioxidants In Health And Disease. J

Clin Pathol. pp: 1-12.

Page 22: SKRIPSI - eprints.umm.ac.ideprints.umm.ac.id/23662/1/jiptummpp-gdl-annitafatm... · ANNITA FATMA LESTARI PROGRAM STUDI FARMASI FAKULTAS ILMU KESEHATAN UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH MALANG
Page 23: SKRIPSI - eprints.umm.ac.ideprints.umm.ac.id/23662/1/jiptummpp-gdl-annitafatm... · ANNITA FATMA LESTARI PROGRAM STUDI FARMASI FAKULTAS ILMU KESEHATAN UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH MALANG