SEMINARIO N° 10 · Objetivos: Conocer los principales agentes etiológicos causantes de micosis...
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UNIVERSIDAD DE BUENOS AIRES FACULTAD DE MEDICINA
DEPARTAMENTO DE MICROBIOLOGÍA, PARASITOLOGÍA E INMUNOLOGÍA
SEMINARIO N° 10
MICROBIOLOGIA I
PATÓGENOS FÚNGICOS CAUSANTES DE MICOSIS OPORTUNISTAS I
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Objetivos:
Conocer los principales agentes etiológicos causantes de micosis oportunistas- Hongos levaduriformeS y P. jirovecii
Reconocer la morfología de la célula fúngica en las micosis oportunistas
Conocer los factores del hospedero que llevan al desarrollo de las micosis oportunistas, los factores de patogenicidad de los hongos y la patogenia de las micosis oportunistas
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Micosis oportunista
Fuente de infección exógena o endógena
HUÉSPED
HONGO
HÁBITAT
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HOSPEDERO: factores de riesgo
ALTERACIÓN FACTOR PREDISPONENTE
BARRERA CUTÁNEO MUCOSA Catéteres, sondas, quemados, traumas.
METABÓLICAS DBT, acidosis, nutrición parenteral, quelantes de hierro.
BIOTA Uso de antibióticos de amplio espectro
INMUNIDAD CELULAR HIV/SIDA, quimioterapia, trasplantes
NEUTRÓFILOS Quimioterapia, corticoides, enfermedad granulomatosa crónica, enfermedades oncohematológicas.
ANATÓMICAS EPOC, TBC, FQ, prótesis.
HIPERSENSIBILIDAD I Y III Atopía
OTROS Edad, alcoholismo, indumentaria
DBT: diabetes; SIDA: Sme Inmunodeficiencia adquiridad; EPOC: enfermedad obstructiva
crónica; TBC: tuberculosis; FQ: fibrosis quística.
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CANDIDIASIS INVASORA
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• 4ta causa de infección nosocomial
• Mortalidad del 25 al 60%
0
5
10
15
20
25
30
35
40
Candidaalbicans
Candidaparapsilosis
Candidatropicalis
Candidaglabrata
Candidadubliniensis
Candidakrusei
Candidalusitaniae
Candidahaemulonii
Candidemias 2015-2016
Red
WHONET
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Mas frecuente
Tracto gastrointestinal y genital
Infección endógena
Disminución de incidencia últimos años
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GRUPO II
C. orthopsilosis
Candida parapsilosis
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Complejo-Candida parapsilosis
Piel y superficies mucosas INFECCIÓN ENDÓGENA
INFECCIÓN EXÓGENA
Infecciones de catéteres o dispositivos implantables
Manos del personal de salud
Prevalencia alta en Latinoamérica
Producción de biofilm
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Complejo-Candida glabrata
Patógeno emergente en EEUU 2do lugar (20-24%) Baja prevalencia en Latinoamérica (4-7%)
Factores de riesgo
o Edad avanzada > 65 años o Antibióticos de amplio espectro o Pacientes oncológicos o Colonización faríngea o Uso de previo de fluconazol o Catéter venoso central y alimentación
parenteral
Tracto genitourinario y respiratorio
C. glabrata
C. nivariensis
C. bracariensis
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Candida tropicalis
Alta incidencia en Latinoamérica
Factores de riesgo o Enfermedades oncohematológicas o Mucositis o Neutropenia (60-80% colonización)
Prevalencia de 2-4%
Factores de riesgo o Pacientes oncohematológicos o Trasplante de HSCT* o Uso de fluconazol y antibióticos
HSCT* trasplante de células progenitoras hematopoyéticas
Candida krusei
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En abril del 2019
Chile informó el
primer caso de
colonización
Clinical Microbiology Reviews. 2018; 31(1)
C. auris • Primer caso descripto en Japón 2009
• Distribución global (>30 países en 6 continentes) con lugares endémicos Ej. Kenya
• Factores de Riesgo similares a otras candidemias
• Difícil identificación con métodos tradicionales
• Multirresistente
• Mortalidad hasta el 60%.
• Tendencia a producir brotes intrahospitalarios
• Forma agregados difíciles de separar (persistencia ambiente hospitalario)
• Formación de biofilm? (algunas cepas si)
COLONIZA PIEL Y
SUPERFICIES
INORGANICAS
FUENTE DE
INFECCIÓN
EXÓGENA
Clinical Microbiology Reviews. 2018; 31(1)
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Candidiasis invasora
FOCAL
o Tracto urinario o Peritonitis / Infección
intraabdominal o Endoftalmitis o Neumonía / Empiema /
Mediastinitis o Infección osteoarticular o Meningitis o Endocarditis
DISEMINADA
o Candidemia o Candidiasis diseminada
aguda o Candidiasis diseminada
crónica (Hepatoesplénica)
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Endoftalmitis
Candidemia en paciente crítico
Lesiones cutáneas por
diseminación hematógena
Endocarditis
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Candidiasis diseminada crónica (Hepato
esplénica)
Abscesos cerebrales
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Factores de riesgo
o Neutropenia
o Trasplante
o Alteración de la integridad cutáneomucosa
o Tratamiento con corticoides
o Quimioterapia
o Cáteteres y dispositivos protésicos
o Nutrición parenteral total
o Estancia prolongada en UCI (>3 días)
o Antibióticos de amplio espectro
o Hemodiálisis
o Perforación gastrointestinal o cirugía
o Pancreatitis
o Colonización por Candida spp.
o Diabetes
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Agresión
Lesión
Translocación
Infección
Antibacterianos
Selección
Microbiota
Catéter
Candida
Aparato digestivo
Ingreso de Candida al torrente circulatorio
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Factores de virulencia
o Morfogénesis: transición entre levaduras, hifas y pseudohifas
o Adhesinas
o Enzimas: Aspartil proteinasas (SAPs)
o SAP2 en levaduras
o SAP4,5,6 se expresan en seudohifas.
o Fosfolipasas y lipasas
o Formación de biopelículas
o Switching fenotípico
o Mananos y mananoproteínas que deprimen la respuesta inmune.
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Biopelícula de Candida
• Bicapa
• Microcolonias
• Matriz extracelular
– Agua (97%)
– Exopolisacáridos:
glucosa, manosa y galactosa
– Proteínas, ac. nucleicos
• Canales de agua
[Douglas LJ. Trends Microbiol 2003]
Microscopia Confocal de una biopelícula de Candida
Vista superior
Vista lateral
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Respuesta inmune
o Integridad de piel y mucosas
o Células dendríticas
o Neutrófilos y monocitos
• Sistema dependiente de Hierro-ioduro y peróxido de hidrógeno
• Proteínas como quimiotripsina o Plaquetas
o Macrófagos tisulares
o Factores del suero • Anticuerpos • Proteínas fijadoras de Fe
o Complemento
o Inmunidad adaptativa
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Mecanismos de evasión de la respuesta innata
• Canalización de PAMPs a través de respuestas poco efectivas. Levaduras de Candida: TLR4
Hifas o pseudohifas : TLR2
Louis Y. A et al Medical Mycology May 2009, 47, 227-236
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Complemento: evasión en Candida
o Activa las tres vías.
o Puede ser opsonizada
o No es afectada por el complejo ataque de membrana.
o Mecanismo de evasión:
o Estimula la activación y el promueve el consumo del complemento.
o Producción de Proteasas
o Adq proteínas reguladoras.
Louis Y. A et al Medical Mycology May 2009, 47, 227-236
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CRIPTOCOCOSIS
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Cryptococcus neoformans
La forma asexuada es la vista en tejidos y recuperada en cultivos primarios
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Clasificación taxonómica del género Cryptococcus
División Basidiomycota
Teleomorfo Anamorfo Serotipos
Filobasidiella neoformans
C. neoformans var. grubii
A
Filobasidiella neoformans
C. neoformans var. neoformans
D
Filobasidiella bacillispora
C. gattii B y C
Filobasidiella uniguttulatum
C. uniguttulatus
C. laurentii
C. albidus
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Epidemiología
C. neoformans es ubicuo
Produce infecciones humanas en todo el planeta
La mayoría de las criptococosis se observan en
pacientes con HIV/SIDA o en receptores de trasplantes
(déficit de inmunidad celular adaptativa)
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Epidemiología
C. neoformans var. neoformans Europa. Norteamérica
C. neoformans var. grubii Distribución universal (hemisferio
Norte y cono sur América)
C. gattii Áreas tropicales y subtropicales
Huecos de árboles Pacientes inmunocompetentes
Cryptococcus neoformans •Guano de pájaros (palomas) madera en descomposición .Deyecciones en aleros de edificios, áticos. pH alcalino y rico en nitrógeno •Pacientes inmunocomprometidos
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Grupos de riesgo
o Infección por VIH++++ o Corticosteroides ++++ o Trasplante órgano sólido (TOS)+++
o Diabetes o EPOC/ cáncer pulmonar o Linfoma o Leucemias crónicas o Sarcoidosis o Cirrosis o Enfermedades del tejido conectivo o Embarazo
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Factores de virulencia
o Producción de manitol
o Fosfolipasa B Integridad pared Invasión y diseminación
o Ureasa
o Adaptación hipoxia
o Captación hierro
Invasión SNC
o Tamaño Esporos 1-2 m
o Melanina
o Crecimiento a 37ºC
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GXM
o de la linfoproliferación
o de la fagocitosis
o de la migración leucocitaria
o de la producción de citoquinas pro-inflamatorias (TNFα)
Cápsula: Principal factor de patogenicidad de C neoformans
88% glucuronoxilomanano (GXM)
Efecto inmunomodulador
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Patogenia
o Vía inhalatoria
o Fagocitosis por los macrófagos alveolares.
o La respuesta depende de la inmunidad mediada por células
o La afección se observa en pacientes con alteraciones de inmunidad celular (SIDA)
o Grave y frecuente: compromiso del SNC. MENINGITIS
Basidiosporos
levaduras
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Compromiso de SNC
Macrófago
Célula endotelial
SNC
Patógeno
a. transcelular b. paracelular c. intramacrófago
Célula endotelial
c. intramacrófago
Macrófago
c. intramacrófago
Patógeno
Macrófago
c. intramacrófago
SNC
Patógeno
Macrófago
c. intramacrófago a. transcelular
SNC
Patógeno
Macrófago
c. intramacrófago b. paracelular a. transcelular
SNC
Patógeno
Macrófago
Célula endotelial
c. intramacrófago
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Formación levaduras gigantes
o Evadir respuesta inmune o Aumentar sobrevida extracelular o Evade fagocitosis
Fusión de mitocondrias (patrón tubular)
Mecanismo de evasión
Potente activador de la vía alterna del complemento.
o Libera polisacárido capsular
o Enmascara los PAMPs, la opsonización es fundamental para la fagocitosis.
Cápsula
Morfología
Sobrevive dentro de los macrófagos alveolares
o Potente activador de la vía alterna del complemento.
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Manifestaciones clínicas
Criptococomas 3-5% casos
Compromiso pulmonar (mayoría de los casos)
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NEUMOCISTOSIS
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Epidemiología
o Causada por Pneumocystis jiroveci
o Reservorio: Humano (Portadores asintomáticos)
o Contagio Interhumano por vía respiratoria
o No cultivable
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Tinción de GIEMSA
Tinción de GROCCOT
calcoflúor
Azul de Toluidina
Formas tróficas y quísticas de P. jiroveci
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Factores de riesgo
Desnutrición
Déficit de linfocitos TCD4+
TOS-TCPH
Uso de corticoides
Quimioterapia con biológicos (Rituximab y anti TNF-α)
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Vía de contagio
o Vía inhalatoria
o Colonización antes de los 4 años de vida
o Tasa de colonización en pacientes HIV del 69%
o Reactivación vs reinfección
o Transmisión nosocomial..? Brote en pacientes trasplantados
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19 casos PJP 15 controles
Carga fúngica disminuye con la distancia
Distribución y cuantificación de P. jirovecii en el aire
de pacientes con neumocistosis
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Composición de la Pared de P. jiroveci
Primer molécula identificada
Diferente entre tipos huésped
Ataque célula huésped
Quitina
Melanina
Carece de ergosterol
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Adherencia al neumocito tipo 1
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Patogenia de la neumocistosis
Macrófago
surfactante
Neumonocito tipo I Membrana basal
Pneumocystis Neumonocito
tipo II
Adhesión a través fibronectina
A Modula interacción con macrófagos
D Forma conglomerados de Pneumocystis NO FAGOCITOSIS
Aire
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Actividad de los macrófagos
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Déficit de linfocitos TCD4 Alteración función y número de macrófagos Disminución TNF e INF
Mas formas tróficas adheridas a pneumonocito I Mayor agregación de Pneumocystis (inhibe fagocitosis) Modulación de rta de macrófagos (unión a surfactante A)
Alteracion inflamatoria del epitelio alveolar y del surfactante
DAÑO TISULAR (aumento de LDH) ALTERACION V/Q
INSUFICIENCIA RESPIRATORIA
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Neutrófilos Macrófagos Linfocitos CD4+
especies reactivas O2 proteasas proteínas catiónicas
DAÑO ENDOTELIAL Y EPITELIAL ALVEOLAR
TNFα
reclutamiento IL8 e IFN γ
Inmunidad
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Mecanismos de evasión de la respuesta innata
• Liberación de los componentes: Señuelos.
• Ej: Pneumocystis glicoproteína A.
Louis Y. A et al Medical Mycology May 2009, 47, 227-236
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Neumonía por P. jirovecii
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AUMENTO pCO2 DISMINUYE pO2 AUMENTO LDH
Infiltrados intersticiales bilaterales
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MUCHAS GRACIAS !