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3D Repräsentation von DNA Sequenzen Proseminar GDV SS2003
3D Repräsentation von DNA Sequenzen
Tomislav GrgatPatrick Gutbell
Proseminar:Visualisierung in der Bioinformatik
Sommersemester 2003
Johann Wolfgang Goethe Universität FrankfurtFachbereich: Graphische Datenverarbeitung
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Übersicht
● Einführung
● H Curve
● Z Curve
● ADN Viewer
● Zusammenfassung
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Einführung
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DNA (Desoxyribonukleinsäure):
• Trägerin der Erbsubstanz
• Bauplan der Baustoffe(Strukturproteine)
und Bauarbeiter (Enzyme) einer Zelle
•Information in der Basenabfolge
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Spezifische Sequenzbereiche:
• Introns
• Exons
• repetitive Sequenzbereiche
• Palindrome
• Sequenzbereiche mit hohem GC-Gehalt
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Repetitive Sequenzen:
•10-25% repetitive Sequenzen
• meist an Enden von Chromosomen; dienen zur Erhaltung der Chromosomenspitzen
• Transposons: transponierbare genetische Elemente: können Ort innerhalb des Genoms wechseln
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Palindrome:
Erkennungstelle für Enzyme
5` C C G C G G 3` 3` G G C G C C 5`
RADAR
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Was sagt der GC-Gehalt der DNA aus?
• Anteil von Guanin und Cytosin an den Basen der DNA
• grobe Aussage über den Verwandtschaftsgrad =>geringe Variation deutet auf enge Verwandtschaft
•Genkonzentration korreliert mit GC-Gehalt
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Warum eine 3D-Darstellung der DNA ?
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1 gatcattctt ccatgtaggg gcaccctgtg ctatgtgggg ggttgagcag catcctgggc 61 ctctacctcc agttgagatg gccacagatg cctccaggct gggcatctct gcttgagggg 121 agctgtcttg gcctagaaca caggctgggg gccgctggtc cagcaggagc cttcctgcct 181 cgattccctc ttggcctgcg gtgagtgttt gcagctctcc ccccgtctgt ctcctgactt 241 tccctgggct gggctggtct tgttgtgtca ccctgtttct gccagacctt gagattccag 301 tcaaaataaa acagcggtgg atagaggggc tgagtgtggc cccccgaggc cctgggacat 361 cttttaccat tcgctgtcac agccgagatc tcccctgtgt cagtgatcct atgcaacatc 421 cccagataac agtgcagggc agataagtga ggatgtggtg aagggaaatg ggggagtgga 481 cgaggggcgt ccccggggag gatggcgcct accacgggca gtaaggaggt ctgcgtgagg 541 gatgcaggga cacaggaggc cagggtggca tcctgcctcc tacttgcgca ggtccagcgg 601 ggatcagagt ggaggcctcg caccagctct gggacatgaa ggggcccgag gcagcccttg 661 tggccacacg ggccttgtca tggttcggcc tttccactct gtgttccgaa ctgtgcagtg 721 tgtatgtgta ggcacagatg tgtgcccgtg cccatgccta ggactttgcg tgtgtctgta 781 cgtgtgattt cgtgtgtgtg tgcatcttcg ttggcgacac acgtgtgcaa tagttcttcc 841 atttcatttt ctctggtttg ggttacattc acccaactat gatgttgaaa atattaaatg
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Welche Kriterien sollte die Darstellung erfüllen ?
• Analyse von Sequenzdaten
• Vergleich mit anderen Sequenzen
• Präsentation einer großen Datenmenge
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DNA 3D-Visualisierungen:
• H-Curve
• Z-Curve
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Prinzip der H-Curve Berechnung:
• jedem Nukleotid wird ein Vektor im 3D-Raum zugewiesen • Startpunkt (0,n,0)
• Vektoren werden entsprechend der Basenfolge aneinandergehängt
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Basisvektoren:
B: (x, y, z)
A: (1, -1, 1 )T: (1, -1, -1)C: (-1,-1,-1)G: (-1, -1, 1)
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Beispiel für Sequenzabfolge: ACT
Koordinaten:(x, y, z)
Startpunkt: ( 0, 3 , 0) A ( 1, -1, 1) + ( 1, 2, 1) C (-1, -1,-1) + ( 0, 1, 0) T (1, -1, -1) +Endpunkt: (1, 0, -1 )
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Welche Möglichkeiten bietet die H-Curve:
A)gibt relative Basenzusammensetzung innerhalb einer Sequenz an
B)Erkennung von spezifischen Sequenzabschnitten
D)Vergleich zwischen Sequenzen
E) Darstellung des Gesamten DNA-Stranges
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Teil des Genoms von Bacteriophage M13
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2D Projektionen der H-Curve
A B
A : Kurve zeigt relative Purin/Pyrimidin-Verteilung an
(Seq.:ACT)
B : Kurve zeigt relative CG/AT-Verteilung an
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Endpunkt-Indikator der H-Curve:C T
AG
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Erweiterbare Funktionen zur H-Curve:
• 2D-Projektion
• Smoothed H-Curve
• Distortion-Viewing-Tool
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„Smoothed“ H-Curve
• Errechnet sich aus Mittelwerten • Lokale Muster nicht wichtig
• Gesamtstruktur ist entscheidend
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Distortion-Viewing-Tool:
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Nachteile der H-Curve-Darstellung:
• Ungenauigkeit
• nicht frei erhältlich
• Wenige Zusatzfunktionen
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Vorteile der H-Curve- Darstellung:
• direkter visueller Check des Gesamt-DNA Strangs
• direkte Angabe der relativen Basenzusammensetzung
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Z Curve● Definition
● Visuelle Anwendungen
● Analytische Ableitungen
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DNA Sequenz aus 29 751 BasenpaarenQuelle: Z Curve Database
http://tubic.tju.edu.cn/zcurve/
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Z Curve
● Dreidimensionale vollständige Repräsentation einer DNA Sequenz
● Z Curve und DNA Sequenz lassen sich eindeutig aus der jeweils anderen konstruieren
● Zhang.C.T und Zhang.R (1994)
● Z Curve Database: http://tubic.tju.edu.cn/zcurve/
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Berechnung der Z Curve
● Folge von P0,P1,...,PN Punkten in 3D
● Die sequentielle Verbindung der Punkte durch Linien ergibt die 3-dimensionale Z Curve
● N ist die Anzahl der Basenpaare der DNA Seq.
● Berechnung der Punkte erfolgt mittels der sog. „Z Transform“
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3D Repräsentation von DNA Sequenzen Proseminar GDV SS2003
Z Transform
An,G
n,C
n,T
n bezeichnen die Auftreten der Basen
A,G,C und T in der DNA Sequenz bis zur n-ten Stelle
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Inverse Z Transform
An + C
n + G
n + T
n = n
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Bedeutung der „Z Transform“
● Jede Komponente xn,yn,zn repräsentiert die Verteilung bestimmter Basentypen zueinander:
– xn repräsentiert die Verteilung von Purin/Pyrimidin (R,Y)
– yn repräsentiert die Verteilung von Amino/Keto (M,K)
– zn repräsentiert die Verteilung von Starken/Schwachenwasserstoffbindenden Basentypen (S/W)
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Bedeutung der „Z Transform“
● Ist xn > 0 dominieren Purin Basen (A oder G) über Pyrimidin Basen (C oder T)
● Ist yn > 0 dominieren Amino Basen (A oder C) über Keto Basen (G oder T)
● Ist zn > 0 dominieren schwache Wasserstoff-bindende Basen (A oder T) über stark Wasserstoffbindende Basen (G oder C)
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Symmetrie der Z Curve
Quelle: Z Curve Database http://tubic.tju.edu.cn/zcurve/image/ecolik12.JPG
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4.6 Millionen Basenpaare
5.5 MillionenBasenpaare
Vergleich von DNA Sequenzen unterschiedlicher Länge
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Visueller Vergleich von DNA Sequenzen
Quelle: Zhang R, Zhang C.T: The Z curve database: a graphic representation of genome sequences (2003)
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Analyse des GC Gehalts
● Neue 2D Kurve leitet sich aus der z-Komponente ab:
z'n = zn – k X n
● Steigt bzw. sinkt die z'n Kurve, so überwiegen A und T bzw. G und C Basen in dieser Region
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Vibrio Cholerae, Quelle: Zhang R, Zhang C.T: The Z curve database: a graphic representation of genome sequences (2003)
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AT- und GC-Disparitäten
● Chargaffs 2. Paritäts Regel besagt
– AN ~ TN
– GN ~ CN
● In den Koordinaten der Z Curve ausgedrückt:
– (xN + yN) ~ 0
– (xN – yN) ~ 0
(2 neue Kurven in 2D)
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Sybean chlorotic mottle virusQuelle: Zhang R, Zhang C.T: The Z curve database: a graphic representation of genome sequences (2003)
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Kennedya yellow mosaic virusQuelle: Zhang R, Zhang C.T: The Z curve database: a graphic representation of genome sequences (2003)
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3D Darstellung der räumlichen DNA Struktur
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Räumliche Struktur der DNA
● Diesmal: Darstellung der natürlichen 3-dimensionalen Struktur des DNA Moleküls
● Dies erlaubt z.B. die Visualisierung:
– Der lokalen Dichte des DNA Moleküls
– Der Kurvatur
– Der räumlichen Ausdehnung
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ADN Viewer
● Software zur Visualisierung der räumlichen DNA Struktur
– Eingabe: DNA Sequenz
– Berechnung der 3D Struktur anhand eines vom User wählbaren Verfahrens
– 3D Darstellung der DNA
– Bietet Möglichkeit der Detailansicht (Zoom)
– Hervorheben bestimmter DNA Merkmale (z.B. einzelner Gene, in Verbindung mit Datenbank)
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300 000 Basenpaare
Quelle: Joan Herisson and Rachid Gherbi: Model-based prediction of the 3D Trajectory of Huge DNA Sequences
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Ausschnitt dervorherigen Ansicht
Ausschnitt inkl. farbkodierter Darstellung der Nukleotide
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Visualisierung einzelner Gene (weiss) eines DNA Moleküls (S. cerevisiae chrI)
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Zusammenfassung
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Zusammefassung
● Statistische 3D Darstellung
– H Curve, Z Curve
– Visueller Vergleich
– Analytische Ableitungen ● 3D Struktur des DNA Moleküls
– ADN Viewer
– Studium der räumlichen DNA Struktur
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Vielen Dank für Eure Aufmerksamkeit
Fragen?
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