Replicazione delle estremità Replicone circolare Il replicone lineare può essere convertito in...
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Replicazione delle estremità
•Replicone circolare
•Il replicone lineare può essere convertito in circolare
•Strutture specifiche all’estremità
•Intervento di una proteina che si lega all’estremità
•Estremità di lunghezza variabile
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AATTAGTATGTTGTAACTAAAGTTTAATCATACAACATTGATTTCA
Termineforca 2
Termineforca 1
Confluenzaforche
GATCTNTTNTTTT TTATNCANA
245 bp
Forca direplicazione 2
Forca direplicazione 1
Origine
Il cromosoma di E.coli è costituito da un unico replicone bidirezionale
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Replicazione di DNA circolari: il circolo rotante
5'3'
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ORGANISMO ORIGINE del DNA UNITA' RIPETITIVA 5'-3'
Tetrahymena, Paramecium macronucleo CCCCAA (Ciliati olotrichi)
Stylonichia, Oxytricha macronuclero CCCCAAAA (Ciliati ipotrichi)
Trypanosoma, Leishmania minichromosomi CCCTA (Flagellati)
Physarum, Dictyostelium rDNA CCCTA (Mixamoebae)
Saccharomyces cromosomi CCcACAcaca
Arabidopsis cromosomi CCCTAAA
Homo sapiens cromosomi CCCTAA
Sequenze ripetute in tandem nei telomeri
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La telomerasi estende l’estremita’sporgente
Quando e’ stato sintetizzato sufficienteDNA, puo’ essere innescato un nuovoFrammento di Okazaki
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Arthur Kornberg, 1970
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5'5'3'
P
HO
P
OH
P P P
OH
3'
5'
5'
P
HO
P
OH
3'
5'
5'
3' + PP
L’attivita’ delle DNA polimerasi
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Le tre DNA Polimerasi di E.coli
Struttura Dalton Composizione Numero/cellula
Attività enzimatiche Allungamento 5'-3' Esonucleasi 3'-5' Esonucleasi 5'-3'
Mutanti Loci mutanti Fenotipi dei mut. Letalità
109,000monomero400
sisisi
polAriparazione difet.vitalità ridottasolo quando difetta5'-3' esonucleasi
>250,000eteromultimero10-20
sisino
pplC, dnaN, dnaZX, dnaQ, dbaTpreviene replicazioneletale condizionale
120,000monomero?
sisino
polBriparazione difet.senza effetto
DNA Polimerasi I DNA Polimerasi II DNA Polimerasi III
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Fedeltà della replicazione
•Controllo presintetico
•Correzione di bozze
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3’
5’
5’
3’
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