1-MIO Fundamento: La reaccin positiva a la ornitina esta dada por la fermentacin de la glucosa se reduce el pH produciendo una condicin cida y originando que el indicador de pH prpura de bromocresol vire al amarillo. La presencia de acidez, otorga condiciones ptimas para la actividad de la enzima ornitina decarboxilasa, la cual decarboxila la ornitina presente. Por decarboxilacin, se alcaliniza el medio, con el consecuente viraje del indicador hacia el color prpura.El indol, es producido a partir del triptofano por los microorganismos que contienen la enzima triptofanasa. Luego de agregar unas gotas de reactivo de Kovacs o de Erlich, indica un resultado positivoMedio usado para la identificacin de Enterobacteriaceae en base a su movilidad, actividad de ornitina decarboxilasa y produccin de indol.Procedimiento: se realiza a partir de un cultivo puro del microorganismo en estudio, IncubacinEn aerobiosis, durante 18-24 horas a 35-37 C. inocular por puncin profunda con ansa recta.Interpretacion-Movilidad:-Resultado positivo: presencia de turbidez o crecimiento mas all de la lnea de siembra.-Resultado negativo: crecimiento solamente en la lnea de siembra.Ornitina decarboxilasa:-Resultado positivo: color prpura.-Resultado negativo: color amarillo. A veces se puede desarrollar un color violceo en la superficie del medio.Prueba del indol: La prueba de indol se realiza una vez que se ha determinado la movilidad y la prueba de ornitina. -Resultado positivo: color rojo al agregar el reactivo revelador.-Resultado negativo: el color del reactivo revelador permanece incoloro-amarillento.

2 -SIM (SULFHDRICO INDOL MOVILIDAD)Fundamento: Es un medio semi-slido transparente que pone en evidencia la movilidad, la produccin de triptofanasa y de SH2. Contiene: Triptofano: la enzima triptofanasa, lo desdobla, produce indol, que se pone de manifiesto con el reactivo de Erlich o KovacCitrato de hierro y amonio: los microorganismos productores de SH2 ennegrecen el medio de cultivoSi los microorganismos son mviles, al ser ste un medio semi-slido se produce enturbiamiento del medio de cultivo, caso contrario solo crece en la puncin.Procedimiento: se inocula el microorganismo por puncin con ansa de punta. Se deja incubar a 35C durante 24hs. y luego de este tiempo se agregan unas gotas del reactivo de Erlich o Kovac dejndolo resbalar por las paredes del tubo. Interpretacin:Triptfano (+): observar la interfase, la aparicin de un color rojo fucsia brillante por la formacin de un complejo entre el indol y el p-dimetilaminobenzaldehido.M (+) / SH2 (-) enturbiamiento del medioM (+) / SH2 (+), se ennegrece todo el medioM (-) / SH2 (-) se observa crecimiento solamente en la estraM (-) / SH2 (+), se observa precipitado negro alrededor de la estra (pero no ennegreciendo de todo el medio).

3-(KIA) Agar Hierro de Kligler Fundamento: En presencia de tiosulfato en el medio o la degradacin de protenas liberando aminocidos azufrados, algunos microorganismos forman H2S gaseoso por medio de las enzimas tiosulfato reductasa y cistena desulfurilasa. El gas incoloro H2S se forma en condiciones cidas y reacciona con el citrato de amonio frrico para producir un precipitado negro insoluble desulfuro ferroso metlico.Procedimiento: indicadores Rojo de fenol y sales de Fe2+, Tcnica de sembrado por picadura con aza de punta, en medio agar de KliglerInterpretacion:No fermentadoras: Las bacterias incapaces de fermentar utilizan las peptonas y liberan aminas que alcalinizan todo el medio. A ROJO No fermentadoras de lactosa: Las bacterias que solo fermentan la glucosa, inicialmente tambin utilizan aerbicamente la glucosa. Debido a la baja concentracin de glucosa (0.1%), metabolizan las peptonas alcalinizando la superficie del medio. A AMARILLO Fermentadoras de Lactosa: Las bacterias fermentadoras de glucosa y lactosa, fermentan la glucosa 0.1% y al trmino de esta, fermentan la lactosa 1%, permitiendo la acidificacin completa del medio a amarillo

4- (LIA) Lisina Hierro Agar Fundamento- La lisina puede ser descarboxilada por microorganismos LD positivasque la transforman en la amina cadaverina. Esto produce un viraje al violeta del indicador de pH prpura de bromocresol, puesto que la descarboxilacin slo tiene lugar en medio cido (pH inferior a6.0). Procedimiento-Es necesario que se produzca previamente la acidificacin del medio decultivo, por fermentacin de la glucosa. Este medio de cultivo solo puede utilizarse para la diferenciacin de bacterias que fermentan glucosa.Se utiliza a para la identificacin de enterobacterias, lisina decarboxilasa(LD) y de la formacin de hidrogeno sulfurado (H2S), mtodo de sembrado por picaduraInterpretacion: LD positivas - Esto produce un viraje al violeta LD negativos, pero fermentadores de la glucosa, producen un viraje al amarilloLa formacin de H2S produce una coloracin negra debido al sulfuro de hierro producido.

5- CITRATOFundamento: Sirve para poner de manifiesto aquellos microorganismos que utilizan el citrato como nica fuente de carbono, el indicador es azul de bromo timol. La citritasa acta sobre el citrato produciendo acido oxalacetico y acetato; productos que son convertidos enzimaticamente a piruvato y dixido de carbono. Durante esta reaccin el medio comienza a alcalinizarse por el CO2 que se genera, el cual se combina con el agua y el sodio para formar Carbonato un producto alcalino, este carbonato da la alcalinidad que produce el cambio de color del indicador de pH del medio de verde a azul Prusia oscuro (indicador: azul de bromotimol, amarillo a pH< de 6.0 y azul a pH > de 7.6). El medio incluye citrato como nica fuente de carbono y fosfato de amonio como nica fuente de nitrgeno.Procedimiento: El color original del medio es verde, y se encuentra fraccionado en pico de flauta, la siembra se hace por estra, se incuba 24-72hs a 35C. Interpretacin: Si el microorganismo utiliza citrato, se produce alcalinizacin del medio de cultivo pasando ste a color azul intenso, lo cual indica prueba positiva para el citrato.

6- MalonatoFundamento-El malonato de sodio, es una sal orgnica que es utilizada por las bacterias como nica fuente de carbono con formaron de productos alcalinos que se evidencia por un viraje de verde a azul del indicador del medio, azul de Bromotimol. Si un microorganismo es capaz de utilizar el malonato de sodio como nica fuente de carbono, al mismo tiempo que utilizar el sulfato de amonio como fuente de nitrgeno, se produce un aumento de la alcalinidad que se debe a la formacin de Hidrxido de sodio (NaOH).Procedimiento- inocular 1-2 asadas del microorganismo en el Caldo Malonato, incubar a 37 C por 24 horas.Interpretacin- El cambio de color de verde a azul indica una prueba positiva. Organismo manolato positiv 7- NitratosFundamento: En esta prueba se detecta una respiracin anaerobia: la que utiliza nitrato como aceptor final de electrones. Los nitratos se reducen a nitritos y algunas bacterias reducen los nitritos a productos gaseosos ( N2 y N2O). Las enzimas responsables de ambas reducciones se denominan nitrato y nitrito reductasa, respectivamente.Procedimiento: se lleva a cabo en un medio liquido (caldo de nitratos) y sembrado por picadura 1-2 asadas. Interpretacin:Nitrato reductasa- coloracin roja tras la adicin de reactivosNitrito reductasa- incolora tras la adicin de reactivos

8- FENIL-ALANINA-DESAMINASA:Fundamento: Sirve para poner de manifiesto aquellos microorganismo que poseen la enzima FENIL-ALANINA-DESAMINASA. El medio se prepara con un pico de flauta largo, pues la lectura se hace sobre la superficie del medio de cultivo.El aminocido fenilalanina sufre la desaminacin oxidativa catalizada por la enzima fenilalanina deaminasa (es una flavoprotena), para producir cido fenilpirvico y amonaco. La presencia del cido fenilpirvico se demuestra con el agregado de cloruro frrico en medio cido, con el cual se forma un quelato de color verdoso entre el cido fenil pirvico y los iones Fe3+. Procedimiento: Se siembra sobre la superficie del medio solamente, se incuba 24 hs a 35 C, se revela con cloruro frrico.Interpretacin: El color original es amarillo, si el microorganismo es productor de la enzima, al agregar sobre el medio cloruro frrico, sta se pone de manifiesto, dando a la superficie un color verde intenso.

Referencias Formato APA xDhttp://dianayjulian.galeon.com/bioquimicas.htmAh hay mas pruebas amor espero que te sirva Te Quiero :*