PRUEBAS DE COMPATIBILIDADPRUEBA DE LISS

PRUEBA DE LISSPara requerir una ptima transfusin actualmente serequiere de aceptaciones inmunolgicas receptor - donante, ya que la transfusin de sangre o la de sus componentes celulares de un donante a un receptor, es una forma de transplante.

PRUEBA DE LISSPruebas de CompatibilidadSeleccionar el componente con el mas mnimo riesgo.Buscamos anticuerpos libres en suero.

PRUEBA DE LISSPruebas cruzadas. Es una prueba inmunohematolgica cuyo principio es la hemaglutinacin y su objetivo es evitar la destruccin eritrocitaria en un receptor.

PRUEBA DE LISSSensibilizacin: Es el proceso mediante el cual el anticuerpo se une al antgeno en la superficie del hemate.

PRUEBA DE LISSAglutinacin: tiene lugar cuando el anticuerpo fijado se une a los hemates adyacentes formando grumos.

PRUEBA DE LISS

PRUEBA DE LISSLa prueba de LISS es utilizada para reducir la fuerza inica del medio de reaccin en los procedimientos de deteccin e identificacin de anticuerpos y en las pruebas de compatibilidad. La presencia de este reactivo refuerza la interaccin antgeno - anticuerpo durante la incubacin.

PRUEBA DE LISSCuando los hemates estn en suspensin en una suspensin salina de potencial inico bajo (Liss), la nube de cationes que rodea los hemates es menos densa que si estos estn en suspensin en suero salino isotnico normal. Solucin salina isotnica.

PRUEBA DE LISSLa concentracin reducida de cationes alrededor de los hemates, permite a las molculas de anticuerpo cargadas positivamente, tener mas fcil acceso a los lugares antignicos de la membrana eritrocitaria, aumentando as la tasa de sensibilizacin.Solucin de Liss.

PRUEBA DE LISSLa tasa de sensibilizacin aumenta cuando los hemates estn en suspensin con la solucin de Liss, la aglutinacin de estos hemates sensibilizados se ve desfavorecida por un aumento del potencial zeta.

PRUEBA DE LISSLa densidad de la nube inica alrededor del hemate disminuye con solucin Liss, por lo tanto el espesor de la nube aumenta por ser menor la concentracin de iones en el medio.

PRUEBA DE LISSLo anterior se traduce en un aumento del potencial zeta y por tanto la aglutinacin se hace mas difcil; para aumentarla es preciso separar la solucin Liss despus de la incubacin, lavando los hemates con solucin isotnica normal.Lavado con sol. isotnica.

PRUEBA DE LISSCuando la tcnica de la antiglobulina se efecta con los hemates del donante suspendidos en solucin salina normal es preciso un tiempo de incubacin de 30 a 60 min. para lograr un mximo de fijacin de los anticuerpos a los antgenos de los hemates.

PRUEBA DE LISSSi los hemates se suspenden en una solucin salina de bajo potencial inico (Liss), el periodo de incubacin puede reducirse de 5 a 10 minutos.

PRUEBA DE LISSMaterial y equipo:

PRUEBA DE LISSMaterial biolgico:

PRUEBA DE LISSReactivos:

PRUEBA DE LISSTcnica:1.- Lavar los eritrocitos: Separar el suero del paquete de glbulos rojos. Agregar cierta cantidad de eritrocitos a un tubo de ensayo y agregarle solucin salina. Centrifugar y decantar.Repetir este proceso 3 veces.

PRUEBA DE LISS2.- Realizar la Prueba de LISS: Enumerar los tubos. Poner dos gotas de LISS en cada tubo, agregar una gota de eritrocitos lavados y al 3 - 5%, segn el nmero de tubo correspondiente. Mezclar y centrifugar un minuto, decantar el sobrenadante y con la ayuda de una gasa limpiar el exceso del reactivo. Poner nuevamente 2 gota de LISS, resuspender por agitacin, agregar 2 gotas de suero problema, mezclar, incubar 15 minutos a 37 C. centrifugar 15-20 seg. A 3500 R.P.M. Anotar los resultados.

PRUEBA DE LISS3.- A las pruebas negativas realizar Coombs:Lavar 3 veces las clulas, agregar suero de Coombs,centrifugar 30 seg. Leer aglutinaciones y anotar resultados.

PRUEBA DE LISSINTERPRETACIN DE LOS RESULTADOSLa hemlisis o la aglutinacin representan un resultado positivo e indican lapresencia de una reaccin antgeno-anticuerpo. Los resultados negativos no severa aglutinacin o hemolisis.

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