GEOSTRATEGI Oleh Dr.H. Anwar Ma’ruf, M.Kes., drh Ratna Damayanti, M.Kes, drh
Prof. Drh. Anak Agung Ayu Mirah Adi,MSi.,PhD
Transcript of Prof. Drh. Anak Agung Ayu Mirah Adi,MSi.,PhD
![Page 1: Prof. Drh. Anak Agung Ayu Mirah Adi,MSi.,PhD](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022041121/625083fdb192e34d61128e53/html5/thumbnails/1.jpg)
Prof. Drh. Anak Agung Ayu Mirah Adi,MSi.,PhD
![Page 2: Prof. Drh. Anak Agung Ayu Mirah Adi,MSi.,PhD](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022041121/625083fdb192e34d61128e53/html5/thumbnails/2.jpg)
![Page 3: Prof. Drh. Anak Agung Ayu Mirah Adi,MSi.,PhD](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022041121/625083fdb192e34d61128e53/html5/thumbnails/3.jpg)
Potensi isolat NDV velogenik yang
diinaktivasi menginduksi respon antibodi
pada ayam
(The Potency of inactivated velogenic NDV
to induce antibody response in chickens)
oleh
Anak Agung Ayu Mirah Adi , Nyoman Mantik
Astawa I Gusti Agung Arta Putra
![Page 4: Prof. Drh. Anak Agung Ayu Mirah Adi,MSi.,PhD](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022041121/625083fdb192e34d61128e53/html5/thumbnails/4.jpg)
Pendahuluan.1
• Indonesia mentargetkan swasembada pangan
(dalam arti luas), termasuk untuk unggas dan daging
sapi.
• Ada kebijakan perlidungan terhadap unggas
(larangan impor secara de facto) dan daging sapi
(kuota impor)
![Page 5: Prof. Drh. Anak Agung Ayu Mirah Adi,MSi.,PhD](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022041121/625083fdb192e34d61128e53/html5/thumbnails/5.jpg)
Produksi daging broiler VS permintaan
Pendahuluan.2
Salah satu ancaman terhadap peningkatan
produksi adalah penyakit
![Page 6: Prof. Drh. Anak Agung Ayu Mirah Adi,MSi.,PhD](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022041121/625083fdb192e34d61128e53/html5/thumbnails/6.jpg)
Newcastle disease (ND)
Viscerotropic
Neurotropic
Respiratropic
![Page 7: Prof. Drh. Anak Agung Ayu Mirah Adi,MSi.,PhD](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022041121/625083fdb192e34d61128e53/html5/thumbnails/7.jpg)
APMV tipe 1
(http://www.isracast.com/pages/bigimage.aspx?id=56から引用)
F-fusion
HN -attchm
•Famili Paramyxoviridae
•RNA virus,Beruntai tunggal
•virus onkolitik
![Page 8: Prof. Drh. Anak Agung Ayu Mirah Adi,MSi.,PhD](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022041121/625083fdb192e34d61128e53/html5/thumbnails/8.jpg)
Satu-satunya upaya untuk mencegah penyakit ini adalah memvaksinasi ayam
dengan vaksin yang tinggi tingkat homologinya secara genetik dan antigenik
dengan virus yang beredar di lapangan saat ini.
APMV-1 merupakan virus yang sangat luas keragaman genetiknya serta sangat luas pula variasi patogenisitasnya (Czegl´edi et al., 2002).
![Page 9: Prof. Drh. Anak Agung Ayu Mirah Adi,MSi.,PhD](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022041121/625083fdb192e34d61128e53/html5/thumbnails/9.jpg)
Permasalahan
Keragaman genetik dan variasi patogenisitas luas
Kegagalan vaksinasi
Vaksin berasal dari virus lapangan
Karakteristik molekuler virus lapangan
![Page 10: Prof. Drh. Anak Agung Ayu Mirah Adi,MSi.,PhD](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022041121/625083fdb192e34d61128e53/html5/thumbnails/10.jpg)
![Page 11: Prof. Drh. Anak Agung Ayu Mirah Adi,MSi.,PhD](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022041121/625083fdb192e34d61128e53/html5/thumbnails/11.jpg)
Tujuan
.menguji pathotipe ketiga virus strain lapangan
yaitu: D5/ AK/2014, B1 AK/2014
dan G1/AK/2014
. Yang paling ganas di inaktivasi denga formaldehyde
dan BEI
diuji imunogenisitas pada ayam
.
Kenapa isolate itu??
(hasil hibah fundamental 2014-2015)
![Page 12: Prof. Drh. Anak Agung Ayu Mirah Adi,MSi.,PhD](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022041121/625083fdb192e34d61128e53/html5/thumbnails/12.jpg)
Un vaccinated village chicken
will seriously threaten the
sustainability of the
domestic poultry
production.
![Page 13: Prof. Drh. Anak Agung Ayu Mirah Adi,MSi.,PhD](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022041121/625083fdb192e34d61128e53/html5/thumbnails/13.jpg)
![Page 14: Prof. Drh. Anak Agung Ayu Mirah Adi,MSi.,PhD](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022041121/625083fdb192e34d61128e53/html5/thumbnails/14.jpg)
![Page 15: Prof. Drh. Anak Agung Ayu Mirah Adi,MSi.,PhD](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022041121/625083fdb192e34d61128e53/html5/thumbnails/15.jpg)
uji tantang
pada tahun kedua.
untuk melihat kemampuannya
dalam menteralisir virus
lapangan.
Hasil akhir akan didapat seed
vaksin isolate lapang.
![Page 16: Prof. Drh. Anak Agung Ayu Mirah Adi,MSi.,PhD](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022041121/625083fdb192e34d61128e53/html5/thumbnails/16.jpg)
Metodologi tahun I
• 1.Keganasan isolate padapada telur ayamberembrio(TAB).
• 2. Persiapan hewan coba: ayam bebas maternal antibodi
• 3. Inaktivasi virus denganFormalin dan BEI
4.Aplikasi pada ayam
percobaaan
5. Pengambilan darah untuk
analisis titer ab pada serum
6. Komparasi
imunogenisitas
![Page 17: Prof. Drh. Anak Agung Ayu Mirah Adi,MSi.,PhD](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022041121/625083fdb192e34d61128e53/html5/thumbnails/17.jpg)
Keganasan isolate diuji pada Telur berembryo
a ba. Isolat
G1/AK/2014b. Phospate buffer
saline(PBS)
![Page 18: Prof. Drh. Anak Agung Ayu Mirah Adi,MSi.,PhD](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022041121/625083fdb192e34d61128e53/html5/thumbnails/18.jpg)
a b
Keganasan isolate diuji pada Telur
berembryo
![Page 19: Prof. Drh. Anak Agung Ayu Mirah Adi,MSi.,PhD](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022041121/625083fdb192e34d61128e53/html5/thumbnails/19.jpg)
Metodologi Uji seed vaksin
I. Penyiapan Ayam bebas Maternal Antibodi
• Satu box DOC yang berisi 100 ekor ayam
dipelihara dalam satu kandang
• umur 7 hari diambil darahnya untuk
mengetahui titer maternal MaAb terhadap
penyakit tetelo dengan menggunakan uji
hambatan hemagglutinasi (HI)
• Jika belum didapatkan ayam yang bebas
MaAb, maka dilanjutkan pemeriksaan dengan
cara yang sama minggu berikutnya.
![Page 20: Prof. Drh. Anak Agung Ayu Mirah Adi,MSi.,PhD](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022041121/625083fdb192e34d61128e53/html5/thumbnails/20.jpg)
100 ekor ayam Ishabrown usia sehari (DOC) dipelihara di Farm FapetSesetan
![Page 21: Prof. Drh. Anak Agung Ayu Mirah Adi,MSi.,PhD](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022041121/625083fdb192e34d61128e53/html5/thumbnails/21.jpg)
pengambilan darah saat ayam berumur duaminggu untuk mendeteksi titer maternal antibodi
![Page 22: Prof. Drh. Anak Agung Ayu Mirah Adi,MSi.,PhD](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022041121/625083fdb192e34d61128e53/html5/thumbnails/22.jpg)
Pengambilan darah 2 minggu post vaksinasi, pemisahan dan inaktivasi serum
![Page 23: Prof. Drh. Anak Agung Ayu Mirah Adi,MSi.,PhD](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022041121/625083fdb192e34d61128e53/html5/thumbnails/23.jpg)
Pengambilan Sampel Darah dan Koleksi Serum1. Darah diambil dari vena sayap (V. brachialis)..
Pengambilan pertama dilakukan pada umur 7 hari dan
kedua pada umur 14 hari.
2. Sampel darah dimasukkan kedalam tabung mikro.
3. Setelah didapatkan darah diletakkan pada suhu kamar
±1-2 jam. Kemudian serum dipisahkan dari bekuan
darah.
4. Serum ditampung pada tabung steril ,disimpan pada -
20oC
![Page 24: Prof. Drh. Anak Agung Ayu Mirah Adi,MSi.,PhD](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022041121/625083fdb192e34d61128e53/html5/thumbnails/24.jpg)
• Stok virus 10 mL ditambah 27 mL formaldehyde
(37%), untuk mencapai konsentrasi final 0,1%
• dicampur dengan cara pipetting serta dibolak balik.
• diinkubasi selama 16 jam pada suhu 37 °C.
• dicampur dengan adjuvant aluminium hydroxide
(AlOH) dengan perbandingan 60%virus:40%
adjuvant. Pada saat diaplikasikan pada ayam
coba,
Stok virus diinaktivasi dengan formaldehyde
![Page 25: Prof. Drh. Anak Agung Ayu Mirah Adi,MSi.,PhD](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022041121/625083fdb192e34d61128e53/html5/thumbnails/25.jpg)
![Page 26: Prof. Drh. Anak Agung Ayu Mirah Adi,MSi.,PhD](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022041121/625083fdb192e34d61128e53/html5/thumbnails/26.jpg)
BEI dan diinaktivasi virus dengan BEI
• Sediaan 2-bromoethymaine hydrobromide dilarutkan dalam 0.5
NaOH dengan konsentrasi akhir 0.6 M dan diinkubasi selama 1 jam
pada suhu 37oC . untuk mengubah senyawa tersebut menjadi
binary ethyleimine (BEI),
• BEI ditambahkan pada stok virus ND dengan konsentrasi 0.03 M
dan diinkibasikan semalam pada suhu 37oC.
• Efek antivirus dari BEI dinetralisasi dengan penambahan sodium
thiosulfate (konsentrasi akhir 2%).
• Virus ND yang diinaktifkan dengan BEI kemudian dicampur dengan
adjuvant aluminium hydroxide (AlOH) dengan perbandingan
60%virus:40% adjuvant
![Page 27: Prof. Drh. Anak Agung Ayu Mirah Adi,MSi.,PhD](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022041121/625083fdb192e34d61128e53/html5/thumbnails/27.jpg)
Gambar 1. Profil titer Maternal antibodi dari ayam layer Strain IshaBrown pada saat berumur dua minggu(a) dan tiga minggu(b).
82 dari 100 ekor ayam
masih memiliki titer
maternal antibodi > 3 HI
log 2, titer yang diyakini
masih mampu melindungi
dari serangan virus ND.
umur tiga minggu 68 dari 100
ekor sudah memiliki titer < 2 HI
log 2
![Page 28: Prof. Drh. Anak Agung Ayu Mirah Adi,MSi.,PhD](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022041121/625083fdb192e34d61128e53/html5/thumbnails/28.jpg)
![Page 29: Prof. Drh. Anak Agung Ayu Mirah Adi,MSi.,PhD](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022041121/625083fdb192e34d61128e53/html5/thumbnails/29.jpg)
DOC (1 box)
Umur 14 hari Uji HI
Ayam dengan titer HI < 23 dibagi menjadi
4 kelompok
Virus yang
diinaktivasi
dengan BEI
Virus yang
diinaktivasi dengan
FDInjeksi PBS
Vaksin
LaSota
Titer ab diukur II,IV dan V post vaksinasi
![Page 30: Prof. Drh. Anak Agung Ayu Mirah Adi,MSi.,PhD](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022041121/625083fdb192e34d61128e53/html5/thumbnails/30.jpg)
Titer antibodi dua mingu pasca vaksinasi
![Page 31: Prof. Drh. Anak Agung Ayu Mirah Adi,MSi.,PhD](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022041121/625083fdb192e34d61128e53/html5/thumbnails/31.jpg)
Titer antibodi empat minggu pasca vaksinasi
![Page 32: Prof. Drh. Anak Agung Ayu Mirah Adi,MSi.,PhD](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022041121/625083fdb192e34d61128e53/html5/thumbnails/32.jpg)
Titer antibodi lima minggu pasca vaksinasi
![Page 33: Prof. Drh. Anak Agung Ayu Mirah Adi,MSi.,PhD](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022041121/625083fdb192e34d61128e53/html5/thumbnails/33.jpg)
Komparasi profil antibodi
Minggu pasca vaksinasi
Rera
tatite
r H
I(lo
g2
)
![Page 34: Prof. Drh. Anak Agung Ayu Mirah Adi,MSi.,PhD](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022041121/625083fdb192e34d61128e53/html5/thumbnails/34.jpg)
• Virus yang diinaktivasi dengan BEI, respon titer
antibodi lebih tinggi dibandingkan yg lain di
minggu kelima pasca vaksinasi.
• Virus yang diinaktivasi dengan BEI respon
antibodinya cenderung meningkat dan lebih
stabil jika dibandingkan dengan vaksin komersial
yang titer antibodinya sudah mulai menurun di
minggu kelima
• Virus yang diinaktivasi dengan BEI kemampuan
dalam menginduksi antibodi > yang diinaktivasi
dengan formaldehide .
KESIMPULAN
![Page 35: Prof. Drh. Anak Agung Ayu Mirah Adi,MSi.,PhD](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022041121/625083fdb192e34d61128e53/html5/thumbnails/35.jpg)
Terimakasih
![Page 36: Prof. Drh. Anak Agung Ayu Mirah Adi,MSi.,PhD](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022041121/625083fdb192e34d61128e53/html5/thumbnails/36.jpg)
uji tantang
pada tahun kedua.
untuk melihat kemampuannya
dalam menteralisir virus
lapangan.
Hasil akhir akan didapat seed
vaksin isolate lapang.