ProBioBalance CLR™ NPLactokine.pdfProBioBalance CLR™ NP объединяет...
Transcript of ProBioBalance CLR™ NPLactokine.pdfProBioBalance CLR™ NP объединяет...
ProBioBalance CLR™ NP
confidential information © CLR - Chemisches Laboratorium Dr. Kurt Richter GmbH
Здоровое питание кожи
Питательная косметика, растущий рынок
0
100
200
300
400
500
600
700
800
2000 2006 20130
20
40
60
80
100
120
2000 2006 2013
Продукты, выпущенные на протяжении года с заявленными
питательными свойствами(всего >13000)
Продукты по уходу за кожей, выпущенные в течение года название которых связано с
питанием (всего >1200)
(Source: Mintel GNPD, March 2014)
ProBioBalance CLR™ NP
Питание на клеточном уровне
• Каждая жизнеспособная клетка имеет внутриклеточную катаболическую систему, с помощью которой питательные компоненты и нефункциональны материалы (клеточный отходы) перерабатываются для:
• Продуцирования энергии• Создания новых полимеров (Напр. белки)Несколько существенных свойств: • Поддержание и улучшение клеточной функции и
укрепление иммунной системы• Утилизация отходов и повторное использование
ProBioBalance CLR™ NP
Здоровое питание для кожи
Здоровое питание обеспечивает клетки кожи• Питательными веществами поддерживающими оптимальный
клеточный баланс;• Способностью наиболее полно перерабатывать отходы
жизнедеятельности клетки.• Эффективным производством энергии и строительных элементов
для создания полимеров и укрепления иммунитета.
Два основных направления:• Переваривание питательных веществ лизосомами• Индуцирование внутриклеточной переработки отходов при помощи
аутофагии и увеличения митохондриальной активности
ProBioBalance CLR™ NP
Здоровое питание клетки
Эндоцитозпитательного вещества
Лизосома
Гидролаза
Переваривание в лизосоме
Продукты жизнедеятельности
Развитие аутофагосомы(LC3B)
Переваривание продуктов жизнедеятельности
Выделение переваренного материала для производства энергии и полимеров
Клеточная стенка
Питательное вещество
ProBioBalance CLR™ NP
Здоровое питание кожи
ProBioBalance CLR™ NP: • Биоактивный продукт на молочной основе, содержащий
гомогенизированную культуру пробиотическихбифидобактерий
• Революционный подход к кожному питанию: обеспечивает кожные клетки необходимыми питательными веществами и активирует системы переработки клеточных отходов (аутофагию), повышает митохондриальную активность
• Улучшает иммунную функцию кожи
• Защищает кожу от влияния внешней среды и стресса
ProBioBalance CLR™ NP
ProBioBalance CLR™ NP
Эффект питания ProBioBalance CLR™ NP
Результаты тестов in vitro
Снабжение питательными элементами
Лизосомы
• Являются центрами переработки веществ и присутствуют в каждой клетке тела
• Содержат большое количество ферментов для разрушения молекул на составные части для повторного использования в клетке
Питательные вещества
поступающие из молока
Лизосомы
ProBioBalance CLR™ NP
Активность лизосом при недостаточном питании
Активность лизосом, %(Окрашивание нейтральным красным)
Кератиноциты были выращены в среде, обеспечивающей оптимальное питание с добавлением и без ProBioBalanceCLR™ NP. Через 72ч концентрацию питательных веществ снизили чтобы вызвать гипотрофию клеток.
Клетки, обработанные ProBioBalance CLR™ NP показали большее количество лизосом.
Таким образом ProBioBalanceCLR™ NP противодействует признакам развития гипотрофии.
Контрольные клетки без обработки взяты за 0%
0
5
10
15
20
25
30
35
40
0.4% ProBioBalance CLR™ NP
0.8% ProBioBalance CLR™ NP
1.6% ProBioBalance CLR™ NP
ProBioBalance CLR™ NP
Индукция аутофагии
0
20
40
60
80
100
120
140
8 mg/ml ProBioBalance CLR™ NP
16 mg/ml ProBioBalance CLR™ NP
32 mg/ml ProBioBalance CLR™ NP
Влияние на LC3B (%)
HaCaT 2*104 клеток/ лунку; выращивались 24 часа вприсутствии 2µM хлорохиндифосфата.
За 48 ч до проведения измеренийбыл добавлен исследуемый агент.
LC3B (D11) XP® mAb (New Engla nd Bio la bs; 3868)
Контрольные клетки без обработки взяты за 0%
ProBioBalance CLR™ NP
Увеличение митохондриальной активности
Влияние на митохондриальнуюактивность (%)
HaCaT 2*104 клеток/лунку; выращивались 24 часа в присутствии 2µM хлорохиндифосфата.
За 48 ч до проведения измерений был добавлен исследуемый агент.
Метод измерения: тест MTT
Контрольные клетки без обработки взяты за 0%
0
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
8 mg/ml ProBioBalance CLR™ NP
16 mg/ml ProBioBalance CLR™ NP
32 mg/ml ProBioBalance CLR™ NP
ProBioBalance CLR™ NP
ProBioBalance CLR™ NP
Стабилизация иммунной системы и защита от влияния окружающей
средыin vitro Test Results
Стабилизация иммунной системы
Отрицательное влияние УФ света на иммунную систему
Защитный щит ProBioBalance CLR™
NP
Интерлейкин 10 (IL-10)
Лучи УФ A/ УФ B
Несбалансированная защита
Сбалансированная защита
Кожа
Иммунносупрессия Иммунная защита
ProBioBalance CLR™ NP
Стабилизация иммунной системы
80
85
90
95
100
Контроль 0.5% ProBioBalance
CLR™ NP
1.0% ProBioBalance
CLR™ NP
1.5% ProBioBalance
CLR™ NP
IL-10 (%) в кератиноцитах после УФ-облучения
Поглощение:490 / 630 нм2 Дж/см2 УФА + 0.2 Дж/см2 УФВ
УФ-индуцированная иммунносупрессиянесбалансированной иммунной защиты кожи.Кератиноциты и иммунно-компетентные клетки выделяют Интерлейкин-10 (IL-10), медиатор, ответственный за иммуносупрессию.
Кератиноциты, предварительно обработанные ProBioBalance CLR™ показали снижение выделения IL-10 после УФ-облучения. Таким образом происходит компенсация несбалансированности иммунной системы.
Контроль взят за 100%
ProBioBalance CLR™ NP
Защита внеклеточного матрикса(англ. extracellular matrix,ECM)
Катепсин B является протеазой, которая
• В норме обнаруживается в лизосомах
• Участвует в круговороте белков
• Выполняет разнообразные функции в поддержании нормального метаболизма клетки
• служит маркером повреждения клетки после УФ-облучения
Катепсин B
Лизосома Лизосома
Катепсин B
Клетка
Каскадактивации
Увеличение эластазной активностиРазрушение белков ECM
Защитный щит ProBioBalance CLR™ NP
ProBioBalance CLR™ NP
Защита внеклеточного матрикса
Выделение Катепсина B (%) Кератиноцитами после УФ-облучения2 Дж/см2 УФА + 0.2 Дж/см2 УФВ
Катепсины – это внутриклеточные протеолитические ферменты, участвующие в конечном катаболизме предварительно обработанных белков (например, матриксными металлопротеиназами, MMP). Катепсин В также служит маркером поражения клетки УФ-облучением.
Облученные УФ кератиноциты, которые предварительно были обработаны ProBioBalance CLR™ NP, показали снижение активности катепсина В.
ProBioBalance CLR™ NP предотвращает УФ-разрушение коллагена и эластина, тем самым поддерживая гомеостаз внеклеточного матрикса.
Контроль взят за 100%
70
75
80
85
90
95
100
Контроль 0.5% ProBioBalance
CLR™ NP
1.0% ProBioBalance
CLR™ NP
1.5% ProBioBalance
CLR™ NP
ProBioBalance CLR™ NP
ProBioBalance CLR™ NP
Результаты тестов in vivo
Снижение кожного раздражения и защита кожи от повреждений
100
110
120
130
140
150
160
170
180
190
SDS 3 день 5 день 7 день 9 день (SDS)
10 день
без обработки Плацебо 5% ProBioBalance CLR™ NP
Покраснение кожи(%)
ProBioBalance CLR™ NP приводит к более сбалансированному состоянию кожи, что было продемонстрированоin vivo на 20 добровольцах (возраст: 20 - 61): Выделенные участки кожи были обработаны SDS, что вызвало покраснение (раздражение).
На тех участках кожи, которые дважды в день обрабатывали 5% ProBioBalance CLR™ NP было отмечено уменьшение покраснения в сравнении с контролем и плацебо.
На 9 день была проведена повторная обработка SDS, которая привела к повторному покраснению.
При этом участки, получившие 5% ProBioBalance CLR™ NP, показали снижение визуальных признаков раздражения кожи, что говорит о укрепляющем защитном эффекте в сравнении с контролем и плацебо.
ProBioBalance CLR™ NP
Выводы
Номенклатура INCI : Вода, лактоза, молочный белок, ферментативный лизат бифидобактерийДозировка: 2.0 – 5.0 %Диапазон pH: 5.8 – 7.0Консерванты: Не содержит консервантов согласно Регламенту (EC) No 1223/2009, Annex V,
стабилизирован фенетиловым спиртом
ProBioBalance CLR™ NP объединяет преимущества питательных ингредиентов молока с защитными компонентами клеточных стенок бифидобактерий, что позволяет получить здоровую пробиотическую основу для питания кожи. • Даёт клеткам кожи необходимые питательные элементы и
стимулирует выведение отходов жизнедеятельности (аутофагию)
• Стабилизирует иммунную систему• Защищает кожу от негативного влияния окружающей среды• Обеспечивает кожу питательными элементами
ProBioBalance CLR™ NP
Lactokine™ Fluid PF
The vitalizing Skin Balancer
confidential information © CLR - Chemisches Laboratorium Dr. Kurt Richter GmbH
Lactokine™ Fluid PF
Development of Inflammatory Reactions
Irritant
Alteration of Tissue
Cellular Response
Release of Mediators
Inflammation
in vitro Results
Lactokine™ Fluid PF
Lactokine™ Fluid PF
Protection against Release of PGE2
PGE2 content after damage (%)Concentration of PGE2 after cell damage related to untreated cells (= 100%).
All fibroblast cells were grown in the presence Calc ium Ionophore (A 23187).Method: ELISA
Назва діаграми
0
20
40
60
80
100
Control 4 µM Aspirin 1 mg/ml 2 mg/ml 4 mg/ml
Lactokine™ Fluid PF
Lactokine™ Fluid PF
Protection against Decrease in Cell Viability
Cell Viability (%)Cell viability before and after damage with Ca Ionophore (A23187).
Method: MTT-assay (absorption: 570 nm)
0
20
40
60
80
100
120
140
Control 4 µM Aspirin 8 mg/ml Lactokine™ Fluid PF
before damage after damage
Lactokine™ Fluid PF
Increase in Cell Viability
100
130
160
190
220
250
4 mg/ml 8 mg/ml 16 mg/ml
Cell Viability (%)Method: MTT-assay (absorption: 570 nm)
Lactokine™ Fluid PF
Lactokine™ Fluid PF
ATP (%)Values are related to ATP levels in control cells (= 100%).
Method: luciferase/luceferin assay
Increase of ATP Levels
Назва діаграми
100120140160180200220240
0.4% 0.8% 1.6% 0.4% 0.8% 1.6%
Lactokine™ Fluid PF
Keratinocytes Fibroblasts
Lactokine™ Fluid PF
Stimulation of Collagen Synthesis
Collagen Synthesis (%) Values are related to the number of cells and to collagen amounts produced by control fibroblasts (= 100%).Method: ELISA (absorption: 490 nm)
Назва діаграми
100
110
120
130
140
150
0.4% 0.8% 1.6%
Lactokine™ Fluid PF
ex vivo Results
Lactokine™ Fluid PF
Lactokine™ Fluid PF
The Isolated Perfused Bovine Udder
from: Kietzmann et al. 1993. J. Pharmacol. Toxicol. Methods. 30: 75-84
An alternative method for efficacy tests of cosmetic actives, highly predictive with respect to human skin
Water bath
Peristalticpump
Tyrode solution (reservoir)
Fraction collector
Lactokine™ Fluid PF
Protection against α-Hydroxy Acid induced Inflammations
80
100
120
140
160
180
200
220
% a-hydroxy acid0 5 15 30
AHA AHA + 5% Lactokine™ Fluid PF
Prostaglandin E2 (%) after 1 hConcentration of Prostaglandin E2 (ng/µg DNA) related to placebo treated skin (=100%).
Lactokine™ Fluid PF
Protection against α-Hydroxy Acid induced Decrease in Cell Viability
Cell viability (%)Concentration of formazan (µg/µg DNA) related to placebo treated skin (=100%).
Method: MTT-assay
60
70
80
90
100
110
hours0 1 3 5
5% AHA5% AHA + 5% Lactokine™ Fluid PF
60
70
80
90
100
110
hours
0 1 3 5
15% AHA15% AHA + 5% Lactokine™ Fluid PF
60
70
80
90
100
110
hours0 1 3 5
30% AHA30% AHA + 5% Lactokine™ Fluid PF
Lactokine™ Fluid PF
Protection against UV-induced Decrease in Cell Viability
60
70
80
90
100
15 30 60 180 240
Untreated controlPlaceboFormulation containing 5% Lactokine™ Fluid PF
time (min)
Cell viability (%)Concentration of formazan (µg/µg DNA) related to non-irradiated skin (=100%)
Irradiation time: 5 minMethod: MTT-assay
in vivo Results
Lactokine™ Fluid PF
Lactokine™ Fluid PF
Anti-Inflammatory Activity
-5
21,25
47,5
73,75
100
1 2 3 4 5
untreated Placebo5% Lactokine™ Fluid PF
days
Skin Redness (%)The MED (Minimal Erythemal Dose) of 5 volunteers, aged 21-49, was determined at the beginning of the study.On day 0 skin inflammation was induced by UV irradiation (1.5 MED). During the following days, a formulation containing 5% Lactokine™ Fluid PF and the placebo formulation were applied by the volunteers twice daily on the inner forearm.The skin color was measured 4 h after the last daily application via chromameter.
Lactokine™ Fluid PF
Increase in Skin Smoothness
Skin Smoothness (%)Formulations were appliedby 20 volunteers (age range: (age range: 29 - 52 years)twice daily.
After 2 and 4 weeks, skin roughness was determined.Values are related to initial conditions.
0
5
10
15
20
25
week 2 week 4
untreated Placebo 2% Lactokine™ Fluid PF 5% Lactokine™ Fluid PF
Lactokine™ Fluid PF
Summary
• Strong anti-inflammatory effect• Increase in cell vitality• Stimulation of Collagen synthesis• Increase in skin smoothness
INCI Name: Milk Protein Dosage: 2.0 - 5.0%pH-range: 5.8 – 7.0
Preservation:preserved with phenoxyethanol and dehydracetic acid (Na salt)