Prezentace aplikace PowerPoint - is.muni.cz · Výborný embryologický model 1930 –nová...
Transcript of Prezentace aplikace PowerPoint - is.muni.cz · Výborný embryologický model 1930 –nová...
![Page 1: Prezentace aplikace PowerPoint - is.muni.cz · Výborný embryologický model 1930 –nová laboratorní hvězda . John Gurdon ŽÁBA(Xenopus laevis) Samotná oocytárnícytoplazma](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022040217/5d628c1088c99320178b5970/html5/thumbnails/1.jpg)
Klonování
(nejen) člověka
Petr Vaňhara, PhDÚstav histologie a embryologie
LF MU
Trnitá cesta
![Page 2: Prezentace aplikace PowerPoint - is.muni.cz · Výborný embryologický model 1930 –nová laboratorní hvězda . John Gurdon ŽÁBA(Xenopus laevis) Samotná oocytárnícytoplazma](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022040217/5d628c1088c99320178b5970/html5/thumbnails/2.jpg)
Klonování je podle běžné definice vytváření nového
jedince geneticky identického (shodného) s předlohou.
• Molekulární• Buněčné• Terapeutické• Reprodukční
![Page 3: Prezentace aplikace PowerPoint - is.muni.cz · Výborný embryologický model 1930 –nová laboratorní hvězda . John Gurdon ŽÁBA(Xenopus laevis) Samotná oocytárnícytoplazma](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022040217/5d628c1088c99320178b5970/html5/thumbnails/3.jpg)
G2/M zástavamitotické dělení
růst (měsíce až rok)
meiotické zrání(hodiny)
PGC & oogonie
MI MII
Znovuzahájení meiózy
Zastavení meiózy v diplotene 1. meiotického dělení
Vajíčko schopné oplození a podpory embryonálního vývoje
OocytObrovská, vysoce specializovaná , totipotentní buňka
S unikátní regulací buněčného cyklu
![Page 4: Prezentace aplikace PowerPoint - is.muni.cz · Výborný embryologický model 1930 –nová laboratorní hvězda . John Gurdon ŽÁBA(Xenopus laevis) Samotná oocytárnícytoplazma](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022040217/5d628c1088c99320178b5970/html5/thumbnails/4.jpg)
Vývoj oocytuD
iplo
ten
e I.
mei
oti
ckéh
od
ěle
ní
IOvarium
30 mm
20 mm
Výběr dominantního folikulu(nejcitlivější k FSH)
Preantrální folikul(časné stádium)
Rekrutovaný folikul
Antrální folikul(střední velikost)
Preovulační fol.(velký)
Primordiální folikul
~14 dní
FSH-independentní
Masivní produkcehormonů
AndrostendionTheca folliculi interna
EstradiolGranulózní buňky
![Page 5: Prezentace aplikace PowerPoint - is.muni.cz · Výborný embryologický model 1930 –nová laboratorní hvězda . John Gurdon ŽÁBA(Xenopus laevis) Samotná oocytárnícytoplazma](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022040217/5d628c1088c99320178b5970/html5/thumbnails/5.jpg)
Pomalý, u člověka několikaměsíční proces
100x zvětšení objemu – akumulace organel a molekul dávajících vajíčku schopnost podporovat vývoj embrya až do okamžiku získání autonomie(asi 105 mitochondrií oocytu podporuje vývoj embrya až do stádia blastocysty)
Intenzívní transkripce - akumulace mRNA v dormantním stavu
Plně vyrostlý oocyt – ~2,5 ng RNA
Intenzívní translace – mnoho proteinů (velmi omezené znalosti)
Příklad: ZP1, ZP2, ZP3 – proteiny zona pellucidaPlně vyrostlý oocyt – ~120 ng proteinu
Transkriptom a proteom – podmiňují unikátní vlastnosti oocytu
Růst oocytu
![Page 6: Prezentace aplikace PowerPoint - is.muni.cz · Výborný embryologický model 1930 –nová laboratorní hvězda . John Gurdon ŽÁBA(Xenopus laevis) Samotná oocytárnícytoplazma](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022040217/5d628c1088c99320178b5970/html5/thumbnails/6.jpg)
Reaktivace X chromozomu• somatické buňky – jeden X chromozom inaktivován hypermetylací cytozinů
v molekule DNA• rostoucí oocyt – oba X chromozomy aktivní (nutné pro vývoj oocytu – karyotyp
45, X0 má za následek abnormální vývoj ovária)
Genomický imprinting• epigenetická modifikace autozomálních chromozomů vedoucí
k monoalelické expresi genů - umožněna aktivitou enzymu DNA metyltransferázy
• PGC jsou globálně demetylovány• během růstu oocytu dochází k novému ustavení imprintingu (asi 40 genů)
&
Abnormality v imprintingu mohou být důvodem spontánních abortů při asistované reprodukci(in vitro manipulace s gametami a embryi může vést k abnormalitám v imprintingu)
Epigenetické změny odehrávající-se během růstu
![Page 7: Prezentace aplikace PowerPoint - is.muni.cz · Výborný embryologický model 1930 –nová laboratorní hvězda . John Gurdon ŽÁBA(Xenopus laevis) Samotná oocytárnícytoplazma](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022040217/5d628c1088c99320178b5970/html5/thumbnails/7.jpg)
![Page 8: Prezentace aplikace PowerPoint - is.muni.cz · Výborný embryologický model 1930 –nová laboratorní hvězda . John Gurdon ŽÁBA(Xenopus laevis) Samotná oocytárnícytoplazma](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022040217/5d628c1088c99320178b5970/html5/thumbnails/8.jpg)
![Page 9: Prezentace aplikace PowerPoint - is.muni.cz · Výborný embryologický model 1930 –nová laboratorní hvězda . John Gurdon ŽÁBA(Xenopus laevis) Samotná oocytárnícytoplazma](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022040217/5d628c1088c99320178b5970/html5/thumbnails/9.jpg)
Hormonální regulace ovariálního cyklu
Hypotalamus
Hypofýza
Gonadotropin-releasing hormon(pulzy)
Růst folikulů Meiotická maturace+ Ovulace
Corpus luteum
GonadotropinyFSH LH
Menstruační f. Proliferační fáze Sekreční (luteální) fáze Ischemická Menstruační f.
0 5 14 28 527
Estrogen Progesteron+ Estrogen
![Page 10: Prezentace aplikace PowerPoint - is.muni.cz · Výborný embryologický model 1930 –nová laboratorní hvězda . John Gurdon ŽÁBA(Xenopus laevis) Samotná oocytárnícytoplazma](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022040217/5d628c1088c99320178b5970/html5/thumbnails/10.jpg)
Implantace blastocysty
0 5 14 28
Menstruačnífáze
Proliferačnífáze
(estrogeny)
Sekrečnífáze
(progesteron)
Ovulacenásledovaná
Oplozením
Funkční zóna endometria
kompaktní+
spongiózní+
bazální
Stroma
Syncytiotrofoblast
Embryoblast
Epitel
Trofoblast
Molekulární hráčiSelektin na trofoblastu + glykoproteiny na epiteluIntegriny + Laminin, FibronektinIGF1, IGF2, VEGFMetaloproteinázy + jejich tkáňové inhibitory
ProgesteronhCHProstaglandiny
![Page 11: Prezentace aplikace PowerPoint - is.muni.cz · Výborný embryologický model 1930 –nová laboratorní hvězda . John Gurdon ŽÁBA(Xenopus laevis) Samotná oocytárnícytoplazma](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022040217/5d628c1088c99320178b5970/html5/thumbnails/11.jpg)
Časná embryogeneza – Druhý týden
Ukončení implantace + Další embryonální vývoj
• Pokračující invaze do endometria• Destrukce kapilár a žlázek• Pohlcování apoptotických buněk (Fas/Fas ligand)
Trofoblast
Cytotrofoblast
• Mitoticky se dělící buňky (jedna vrstva)• Zdroj buněk syncytiotrofoblastu
Syncytiotrofoblast
• Fůzované buňky (nědělící se, mnohojaderné)• Produkce hCG (stimuluje CL)Lakuny
trofoblastu
Syncytiotrofoblast
Děložní žlázka
Endometriálníkapilára
Cytotrofoblast
Amniová dutina
Hypoblast
Blastocoel
Embryonální pól
Abembryonální pól
Stav ve dni 8
Epiblast
![Page 12: Prezentace aplikace PowerPoint - is.muni.cz · Výborný embryologický model 1930 –nová laboratorní hvězda . John Gurdon ŽÁBA(Xenopus laevis) Samotná oocytárnícytoplazma](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022040217/5d628c1088c99320178b5970/html5/thumbnails/12.jpg)
![Page 13: Prezentace aplikace PowerPoint - is.muni.cz · Výborný embryologický model 1930 –nová laboratorní hvězda . John Gurdon ŽÁBA(Xenopus laevis) Samotná oocytárnícytoplazma](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022040217/5d628c1088c99320178b5970/html5/thumbnails/13.jpg)
![Page 14: Prezentace aplikace PowerPoint - is.muni.cz · Výborný embryologický model 1930 –nová laboratorní hvězda . John Gurdon ŽÁBA(Xenopus laevis) Samotná oocytárnícytoplazma](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022040217/5d628c1088c99320178b5970/html5/thumbnails/14.jpg)
Organogeneze a vývoj tkání
![Page 15: Prezentace aplikace PowerPoint - is.muni.cz · Výborný embryologický model 1930 –nová laboratorní hvězda . John Gurdon ŽÁBA(Xenopus laevis) Samotná oocytárnícytoplazma](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022040217/5d628c1088c99320178b5970/html5/thumbnails/15.jpg)
BMP-4 NogginChordinFollistatin
BMP-4 v celém embryu, ventralizace endo- a mesodermu
• V budoucím notochordu, primitivní jamce, prechordálním mesodermu
• Inhibují BMP-4• Neuralizace ektodermu a vývoj předního a
středního mozku
NogginChordinFollistatin
FGFWnt3a
FGFWnt3a
• Kaudální neurální struktury – zadní mozek a mícha
Neurulace
![Page 16: Prezentace aplikace PowerPoint - is.muni.cz · Výborný embryologický model 1930 –nová laboratorní hvězda . John Gurdon ŽÁBA(Xenopus laevis) Samotná oocytárnícytoplazma](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022040217/5d628c1088c99320178b5970/html5/thumbnails/16.jpg)
KLONOVÁNÍ A EXPERIMENTÁLNÍ EMBRYOLOGIE
![Page 17: Prezentace aplikace PowerPoint - is.muni.cz · Výborný embryologický model 1930 –nová laboratorní hvězda . John Gurdon ŽÁBA(Xenopus laevis) Samotná oocytárnícytoplazma](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022040217/5d628c1088c99320178b5970/html5/thumbnails/17.jpg)
Epigeneze nebo preformace?
William Harveyex ovo omnia
Antonie van Leeuwenhoekspermatozoa
Nicolaas Hartsoekerhomunculus
Nicolas Malebranche
embryos ad infinitum
![Page 18: Prezentace aplikace PowerPoint - is.muni.cz · Výborný embryologický model 1930 –nová laboratorní hvězda . John Gurdon ŽÁBA(Xenopus laevis) Samotná oocytárnícytoplazma](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022040217/5d628c1088c99320178b5970/html5/thumbnails/18.jpg)
Hans Adolf Edward Dreisch
1885 – Každá z buněk raného embrya může dát vznik celému organismu
JEŽOVKA
Nenáročný organismus, velký oocyt i embrya
výborný model pro studium vývojové biologie
Hypotéza: vyvine se z disociovaných buněk raného,
dvoubuněčného embrya příslušná část těla ježovky?
Závěr: Každá z blastomer má kompletní instrukce pro
vytvoření celého organismu
![Page 19: Prezentace aplikace PowerPoint - is.muni.cz · Výborný embryologický model 1930 –nová laboratorní hvězda . John Gurdon ŽÁBA(Xenopus laevis) Samotná oocytárnícytoplazma](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022040217/5d628c1088c99320178b5970/html5/thumbnails/19.jpg)
MLOK
Embrya mloků „drží“ mnohem více pohromadě než embrya ježovek.
Experiment: Blastomery mechanicky rozděleného dvoubuněčného embrya umožnují
vývoj normální embryonální vývoj.
Hans Spemann
1902 – Funguje to i obratlovců!
Ale rozdělení pozdějšího embrya, není
zdaleka tak úspěšné.
Buňky rozdělených embryí se mohou
vyvíjet pouze do určitého stádia
embryogeneze
![Page 20: Prezentace aplikace PowerPoint - is.muni.cz · Výborný embryologický model 1930 –nová laboratorní hvězda . John Gurdon ŽÁBA(Xenopus laevis) Samotná oocytárnícytoplazma](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022040217/5d628c1088c99320178b5970/html5/thumbnails/20.jpg)
Hans Spemann
1928 – Embryonální vývoj kontroluje buněčné jádro
MLOK
Ligací oocytu dochází k vývoji pouze v oblasti s buněčným jádrem
Návrat jádra do původní oocytární cytoplazmy a jeho odškrcení v 8-buněčném
stádiu indukuje vývoj samostatného embrya
Jádra buněk do 8-buněčného stádia
jsou vývojově totipotentní
1938 – první idea klonování: „fantastický experiment“ Hanse
Spemanna náhrada jádra oocytu jádrem jiné somatické buňky
a následný vývoj embrya
![Page 21: Prezentace aplikace PowerPoint - is.muni.cz · Výborný embryologický model 1930 –nová laboratorní hvězda . John Gurdon ŽÁBA(Xenopus laevis) Samotná oocytárnícytoplazma](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022040217/5d628c1088c99320178b5970/html5/thumbnails/21.jpg)
Mikromanipulace s oocytem
![Page 22: Prezentace aplikace PowerPoint - is.muni.cz · Výborný embryologický model 1930 –nová laboratorní hvězda . John Gurdon ŽÁBA(Xenopus laevis) Samotná oocytárnícytoplazma](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022040217/5d628c1088c99320178b5970/html5/thumbnails/22.jpg)
Robert Briggs a Thomas King
1952 – První úspěšný přenos jádra
ŽÁBA (Skokan leopardí, Rana pipiens)
Přenos jádra z žabího embrya do
enukleovaného oocytu
V případě raných donorů, byla
úspěšnost normálního vývoje pulců
vysoká. Jádra starších donorů zdaleka
tak úspěšná nebyla – přežívající pulci s
výraznými vývojovými abnormalitami
Endodermální jádro embrya ve stádiu embrya neumožnuje normální vývoj
![Page 23: Prezentace aplikace PowerPoint - is.muni.cz · Výborný embryologický model 1930 –nová laboratorní hvězda . John Gurdon ŽÁBA(Xenopus laevis) Samotná oocytárnícytoplazma](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022040217/5d628c1088c99320178b5970/html5/thumbnails/23.jpg)
Drápatka vodní (Xenopus laevis)
Vysoká citlivost na FSH a LH
Rezistence k chorobám
Snadný chov
Výborný embryologický model
1930 – nová laboratorní hvězda
![Page 24: Prezentace aplikace PowerPoint - is.muni.cz · Výborný embryologický model 1930 –nová laboratorní hvězda . John Gurdon ŽÁBA(Xenopus laevis) Samotná oocytárnícytoplazma](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022040217/5d628c1088c99320178b5970/html5/thumbnails/24.jpg)
John Gurdon
ŽÁBA (Xenopus laevis)
Samotná oocytární cytoplazma umožnuje přeprogramování jádra pouze do určitého stádia vývoje
1952 – První úspěšný přenos jádra somatické diferencované buňky
![Page 25: Prezentace aplikace PowerPoint - is.muni.cz · Výborný embryologický model 1930 –nová laboratorní hvězda . John Gurdon ŽÁBA(Xenopus laevis) Samotná oocytárnícytoplazma](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022040217/5d628c1088c99320178b5970/html5/thumbnails/25.jpg)
John Gurdon
ŽÁBA (Xenopus laevis)
Jádro somatické determinuje fenotyp vyvíjejícího se zárodku
1952 – První úspěšný přenos jádra somatické diferencované buňky
I diferencované, somatické buňky z plně vyvinutého organismu obsahují veškerou genetickou informaci nezbytnou k úspěšnému embryonálnímu vývoji
![Page 26: Prezentace aplikace PowerPoint - is.muni.cz · Výborný embryologický model 1930 –nová laboratorní hvězda . John Gurdon ŽÁBA(Xenopus laevis) Samotná oocytárnícytoplazma](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022040217/5d628c1088c99320178b5970/html5/thumbnails/26.jpg)
Pro správný embryonální vývoj jsou nezbytné geny exprimované pouze
během rané embryogeneze
Oocytární cytoplazma umožnuje přeprogramování jádra pouze do
určitého stádia vývoje
![Page 27: Prezentace aplikace PowerPoint - is.muni.cz · Výborný embryologický model 1930 –nová laboratorní hvězda . John Gurdon ŽÁBA(Xenopus laevis) Samotná oocytárnícytoplazma](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022040217/5d628c1088c99320178b5970/html5/thumbnails/27.jpg)
![Page 28: Prezentace aplikace PowerPoint - is.muni.cz · Výborný embryologický model 1930 –nová laboratorní hvězda . John Gurdon ŽÁBA(Xenopus laevis) Samotná oocytárnícytoplazma](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022040217/5d628c1088c99320178b5970/html5/thumbnails/28.jpg)
Kmenové buňky se liší ve schopnosti diferenciace
Totipotence
- Všechny buňky těla včetně extraembryonálních tkání
- Zygota a raná stádia
Pluripotence
- Všechny buňky těla s výjimkou trofoblastu
- Blastocysta – Inner cell mass - ICM (embryoblast)
Multipotence
- Různé buněčné typy v rámci tkáně
- Mesenchymální SC, hematopoietické SC
http://www.embryology.ch/anglais/evorimplantation/furchung01.html
Oligo- a unipotence
- Jeden nebo několik buněčných typů – hematopoietické buňky, tkáňové
prekurzory (obnova epitelů apod.)
![Page 29: Prezentace aplikace PowerPoint - is.muni.cz · Výborný embryologický model 1930 –nová laboratorní hvězda . John Gurdon ŽÁBA(Xenopus laevis) Samotná oocytárnícytoplazma](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022040217/5d628c1088c99320178b5970/html5/thumbnails/29.jpg)
Indukované pluripotentní kmenové buňky mají
vlastnosti embryonálních kmenových buněk
hESCs
hiPSCs
![Page 30: Prezentace aplikace PowerPoint - is.muni.cz · Výborný embryologický model 1930 –nová laboratorní hvězda . John Gurdon ŽÁBA(Xenopus laevis) Samotná oocytárnícytoplazma](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022040217/5d628c1088c99320178b5970/html5/thumbnails/30.jpg)
![Page 31: Prezentace aplikace PowerPoint - is.muni.cz · Výborný embryologický model 1930 –nová laboratorní hvězda . John Gurdon ŽÁBA(Xenopus laevis) Samotná oocytárnícytoplazma](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022040217/5d628c1088c99320178b5970/html5/thumbnails/31.jpg)
J. Derek Bromhall
KRÁLÍK
přenos jádra a embryonální vývoj do stádia moruly
Bromhall v experimentu nepokračoval
1975 – První savčí embryo vytvořené přenosem embryonálního jádra
Steen Willadsen
1984 – První narozený savec vytvořený přenosem embryonálního jádra
OVCE
separace buněk z 8-buněčného embrya
fúze s enukleovaným oocytem
embryotransfer a narození tří jehňat
![Page 32: Prezentace aplikace PowerPoint - is.muni.cz · Výborný embryologický model 1930 –nová laboratorní hvězda . John Gurdon ŽÁBA(Xenopus laevis) Samotná oocytárnícytoplazma](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022040217/5d628c1088c99320178b5970/html5/thumbnails/32.jpg)
KRÁVA
Wilandsenova technika přenosu embryonálních jader
telata „Fusion“ a „Copy“
použití somatických jader v savčím klonování považován stále za nemožné
Neal First, Randal Prather, Willard Eyestone
1987 – Další úspěšné experimenty s přenosem embryonálních jader
![Page 33: Prezentace aplikace PowerPoint - is.muni.cz · Výborný embryologický model 1930 –nová laboratorní hvězda . John Gurdon ŽÁBA(Xenopus laevis) Samotná oocytárnícytoplazma](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022040217/5d628c1088c99320178b5970/html5/thumbnails/33.jpg)
OVCE
zdroj jader - ovčí buňky kultivované in vitro 6-12 pasáží
indukce klidové G0 fáze absencí růstových faktorů v médiu
hypotéza: klidový stav buněk umožnuje
efektivní reprogramování a vývoj
závěr: nejen totipotentní ale i diferencované nebo modifikované buňky mohou sloužit
jako donory jader pro vznik zvířat se specifickým genotypem nebo dokonce jeho
modifikací (produkce insulinu v mléku)
Ian Wilmut a Keith Campbell
1996 – Přenos jader embryonálních buněk kultivovaných in vitro a vznik
živatoschopných zvířat
Megan a Morag
![Page 34: Prezentace aplikace PowerPoint - is.muni.cz · Výborný embryologický model 1930 –nová laboratorní hvězda . John Gurdon ŽÁBA(Xenopus laevis) Samotná oocytárnícytoplazma](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022040217/5d628c1088c99320178b5970/html5/thumbnails/34.jpg)
OVCE
přenos jádra vysoce diferencované
somatické buňky, mammárního fibroblastu
nutné reprogramování epigeneticky vysoce
modifikovaného chromatinu
433 oocytů
277 úspěšných fůzí
29 životaschopných embryí
1 Dolly
Ian Wilmut a Keith Campbell
Dolly
1996 – Průlomový experiment – úspěšný přenos jader somatických buněk
HELLO DOLLY!
![Page 35: Prezentace aplikace PowerPoint - is.muni.cz · Výborný embryologický model 1930 –nová laboratorní hvězda . John Gurdon ŽÁBA(Xenopus laevis) Samotná oocytárnícytoplazma](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022040217/5d628c1088c99320178b5970/html5/thumbnails/35.jpg)
6LL3 „Dolly“
![Page 36: Prezentace aplikace PowerPoint - is.muni.cz · Výborný embryologický model 1930 –nová laboratorní hvězda . John Gurdon ŽÁBA(Xenopus laevis) Samotná oocytárnícytoplazma](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022040217/5d628c1088c99320178b5970/html5/thumbnails/36.jpg)
Dolly a Bonny
![Page 37: Prezentace aplikace PowerPoint - is.muni.cz · Výborný embryologický model 1930 –nová laboratorní hvězda . John Gurdon ŽÁBA(Xenopus laevis) Samotná oocytárnícytoplazma](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022040217/5d628c1088c99320178b5970/html5/thumbnails/37.jpg)
OVCE
lidský Faktor IX
PDFF
poll dorset fetal fibroblasts
lipofekce DNA faktor IX
82 embryií
5 embryotransferů
3 životaschopná jehňata
Polly
Angelika Schnieke, Keith Campbell, Ian Wilmut
1997 – jaderný přenos geneticky modifikovaných buněk
![Page 38: Prezentace aplikace PowerPoint - is.muni.cz · Výborný embryologický model 1930 –nová laboratorní hvězda . John Gurdon ŽÁBA(Xenopus laevis) Samotná oocytárnícytoplazma](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022040217/5d628c1088c99320178b5970/html5/thumbnails/38.jpg)
1998-99 – klonování různých savců
Myši, kozy, mufloni, gaur
plány na klonování ohrožených i
vyhynulých zvířat
![Page 39: Prezentace aplikace PowerPoint - is.muni.cz · Výborný embryologický model 1930 –nová laboratorní hvězda . John Gurdon ŽÁBA(Xenopus laevis) Samotná oocytárnícytoplazma](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022040217/5d628c1088c99320178b5970/html5/thumbnails/39.jpg)
MAKAK RHESUS
subhumánní experimentální model
29 klonů, 2 životaschopní makakové
dosud jediní klonovaní primáti
neobyčejná obtížnost úspěšného
přenosu jader a embryonálního vývoje
Li Meng, John Ely, Richard Stouffer, Don Wolf
1997 – první primát po přenosu jader embryonálních buněk
Neti a Ditto
![Page 40: Prezentace aplikace PowerPoint - is.muni.cz · Výborný embryologický model 1930 –nová laboratorní hvězda . John Gurdon ŽÁBA(Xenopus laevis) Samotná oocytárnícytoplazma](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022040217/5d628c1088c99320178b5970/html5/thumbnails/40.jpg)
Hwang Woo-Suk
2005 – první klonovaný pes
Snuppy
Toppy
![Page 41: Prezentace aplikace PowerPoint - is.muni.cz · Výborný embryologický model 1930 –nová laboratorní hvězda . John Gurdon ŽÁBA(Xenopus laevis) Samotná oocytárnícytoplazma](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022040217/5d628c1088c99320178b5970/html5/thumbnails/41.jpg)
Hwang Woo-Suk
2005 – první klonovaná lidská embrya
?
![Page 42: Prezentace aplikace PowerPoint - is.muni.cz · Výborný embryologický model 1930 –nová laboratorní hvězda . John Gurdon ŽÁBA(Xenopus laevis) Samotná oocytárnícytoplazma](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022040217/5d628c1088c99320178b5970/html5/thumbnails/42.jpg)
Hwang Woo-Suk
2004-2005 – podvod století
Únor 2004 Tým Dr. Hwang Woo-suk's zvěřejnil úspěšné vytvoření 30 klonovaných lidských embryí a hESCsKvěten 2005buněčné linie kmenových buněk z kožních buněk 11 lidíListopad 2005 Hwang přiznáva a omlouvá se za nedobrovolné odběry oocytů15 prosince 2005jeden z členů týmu udává, že výzkum z roku 2005 je manipulovaný23 prosince 2005Nezávislý akademický panel zjišťuje zásadní manipulaci s výsledky z května 200510 ledna 2006 Panel zjišťuje že i práce z roku 2004 je zfalšovaná
!
![Page 43: Prezentace aplikace PowerPoint - is.muni.cz · Výborný embryologický model 1930 –nová laboratorní hvězda . John Gurdon ŽÁBA(Xenopus laevis) Samotná oocytárnícytoplazma](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022040217/5d628c1088c99320178b5970/html5/thumbnails/43.jpg)
MAKAK RHESUS
experimentální medicína
Shoukhrat Mitalipov
2007 – jaderný přenos somatických buněk primátů
![Page 44: Prezentace aplikace PowerPoint - is.muni.cz · Výborný embryologický model 1930 –nová laboratorní hvězda . John Gurdon ŽÁBA(Xenopus laevis) Samotná oocytárnícytoplazma](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022040217/5d628c1088c99320178b5970/html5/thumbnails/44.jpg)
Indukované pluripotentní kmenové buňky (IPSc)
- dospělá diferencovaná buňka (fibroblast) je dediferencovaná do pluripotentního stavu (reprogramována)
- Diferenciace do žádaného buněčného typu
- regenerativní medicína, buněčná a genová terapie
Nobel prize 2012
Shinya Yamanaka
2006 – senzace století
![Page 45: Prezentace aplikace PowerPoint - is.muni.cz · Výborný embryologický model 1930 –nová laboratorní hvězda . John Gurdon ŽÁBA(Xenopus laevis) Samotná oocytárnícytoplazma](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022040217/5d628c1088c99320178b5970/html5/thumbnails/45.jpg)
![Page 46: Prezentace aplikace PowerPoint - is.muni.cz · Výborný embryologický model 1930 –nová laboratorní hvězda . John Gurdon ŽÁBA(Xenopus laevis) Samotná oocytárnícytoplazma](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022040217/5d628c1088c99320178b5970/html5/thumbnails/46.jpg)
Shoukhrat Mitalipov
2013 – vytvoření lidských embryonálních kmenových buněk somatickým
jaderným přenosem
ČLOVĚK
přenos jader somatických (kožních) buněk
do enukleovaného oocytu
vznik linií hESCs
experimentální medicína, léčba
mitochondriálních poruch
![Page 47: Prezentace aplikace PowerPoint - is.muni.cz · Výborný embryologický model 1930 –nová laboratorní hvězda . John Gurdon ŽÁBA(Xenopus laevis) Samotná oocytárnícytoplazma](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022040217/5d628c1088c99320178b5970/html5/thumbnails/47.jpg)
Stresem Indukované pluripotentní kmenové buňky (STAP)
- indukce pluripotence v somatických buňkách je zajištěna vystavením buněk stresovému prostředí
Haruko Obokata
2014 – nová senzace století
![Page 48: Prezentace aplikace PowerPoint - is.muni.cz · Výborný embryologický model 1930 –nová laboratorní hvězda . John Gurdon ŽÁBA(Xenopus laevis) Samotná oocytárnícytoplazma](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022040217/5d628c1088c99320178b5970/html5/thumbnails/48.jpg)
![Page 49: Prezentace aplikace PowerPoint - is.muni.cz · Výborný embryologický model 1930 –nová laboratorní hvězda . John Gurdon ŽÁBA(Xenopus laevis) Samotná oocytárnícytoplazma](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022040217/5d628c1088c99320178b5970/html5/thumbnails/49.jpg)
DALŠÍ INFORMACE
http://www.isscr.org/http://learn.genetics.utah.edu/content/cloning/clonezone/www.osel.cz a zejména prof. Jaroslav Petr
The History of Cloning
![Page 50: Prezentace aplikace PowerPoint - is.muni.cz · Výborný embryologický model 1930 –nová laboratorní hvězda . John Gurdon ŽÁBA(Xenopus laevis) Samotná oocytárnícytoplazma](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022040217/5d628c1088c99320178b5970/html5/thumbnails/50.jpg)
DĚKUJI ZA POZORNOST
Petr Vaňhara, PhD.
Ústav histologie a embryologie
LF MU
http://www.med.muni.cz/histology