LAPORAN PRAKTIKUM MIKROBIOLOGI FARMASI

PEWARNAAN NEGATIF DAN

PEWARNAAN KAPSUL

Kamis, 19 Maret 2015

Kelompok II

Kamis, Pukul 10.00 13.00 WIB

Nama NPM

R.A Siti Nur Azizah 260110130013

LABORATORIUM MIKROBIOLOGI FARMASI

FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS PADJADJARAN

2015

Nilai TTD

( Sani ) ( Casuarina )

PEWARNAAN NEGATIF DAN PEWARNAAN KAPSUL

I. Tujuan

1. Mengamati morfologi bakteri yang sukar diwarnai oleh pewarna-

pewarna sederhana, dengan menggunakan prosedur pewarnaan

negatif. Memahami setiap langkah dan reaksi-reaksi kimia yang

terjadi dalam prosedur tersebut.

2. Mengamati kapsul bakteri dengan menggunakan prosedur

pewarnaan kapsul (pewarnaan Burri-Gins). Memahami setiap

langkah dan reaksi-reaksi kimia yang terjadi dalam prosedur

tersebut.

II. Prinsip

1. Pewarnaan negative atau Pewarnaan tidak langsung merupakan

teknik pewarnaan yang hanya mewarnai latar belakang kaca objek,

dan tidak mewarnai sel bakteri.

2. Tolak menolak muatan

Pada keadaan pH mendekati netral, dinding bakteri cenderung

bermuatan negative, sehingga jika diberikan zat warna asam yang

sama-sama bermuatan negative, akan terjadi tolak menolak muatan

pada zat warna dan dinding sel bakteri.

3. Kapsul atau lapisan lendir merupakan Struktur tambahan penyusun

sel bakteri, yang merupakan lapisan yang berada di luar dinding sel

bakteri, yang jika lapisan ini tebal disebut kapsul, namun jika

lapisan ini tipis disebut lapisan lendir. Pada lapisan ini

mengandung polisakarida dan air.

III. Teori Dasar

Bakteri merupakan organisme prokariot. Umumnya ukuran bakteri

sangat kecil, bentuk tubuh bakteri baru dapat dilihat dengan

menggunakan mikroskop dengan pembesaran 1.000 X atau lebih.

Sel bakteri memiliki panjang yang beragam, sel beberapa spesies

dapat berukuran 100 kali lebih panjang daripada sel spesies yang lain.

Bakteri merupakan makhluk hidup dengan ukuran antara 0,1 sampai

0,3 m. Bentuk bakteri bermacam macam yaitu elips, bulat, batang

dan spiral. Bakteri lebih sering diamati dalam olesan terwarnai dengan

suatu zat pewarna kimia agar mudah diamati atau dilihat dengan jelas

dalam hal ukuran, bentuk, susunan dan keadaan struktur internal dan

butiran. Sel sel individu bakteri dapat berbentuk seperti bola/elips,

batang (silindris), atau spiral (heliks) (Kusnadi,2014).

Pewarnaan bakteri bertujuan untuk memudahkan melihat bakteri

dengan mikroskop, memperjelas ukuran dan bentuk bakteri, untuk

melihat struktur luar dan struktur dalam bakteri seperti dinding sel dan

vakuola, menghasilkan sifat-sifat fisik dan kimia yang khas daripada

bakteri dengan zat warna, serta meningkatkan kontras mikroorganisme

dengan sekitarnya (Kusnadi,2014).

Selain pewarnaan gram untuk melihat sel bakteri, terdapat pewarnaan

negative atau pewarnaan asam. Pewarnaan negatif atau pewarnaan

asam merupakan salah satu teknik pewarnaan bakteri. Akan tetapi

teknik ini bukan untuk mewarnai sel bakteri, hanya mewarnai latar

belakangnya menjadi hitam gelap. Zat warna yang digunakan tidak

akan mewarnai sel, tetapi mewarnai lingkungan sekitar sehingga sel

bakteri tampak transparan. Dalam kondisi pH mendekati netral,

dinding sel bakteri cenderung bermuatan negatif dan senyawa pewarna

juga bermuatan yang sama sehingga akan ditolak oleh dinding sel.

Pewarna yang biasa digunakan antara lain nigrosin, eosin, dan asam

pikrat. Tetapi kini nigrosin sudah tidak digunakan dalam pewarnaan,

dan diganti dengan tinta cina (Anna Rahmawati,2013 ).

Pewarnaan negatif tidak hanya secara khusus menvisualisasikan

protein saja, tetapi dapat digunakan untuk lipoprotein, isolasi organela,

kompleks nukleoprotein. Pada teknik ini apusan bakteri mengalami

fiksasi dengan cepat(beberapa detik sampai menit). Pewarnaan negatif

adalah cara pengamatan mikrobiologi yang biasa dilakukan untuk

membedakan specimen kecil dengan cairan optiknya. Untuk

mikroskop medan terang, pewarnaan negative biasanya menggunakan

cairan hitam, misalnya nigrosin. Spesimen seperti bakteri dalam cairan

disebar dalam preparat kaca yang dicampur dengan pewarna negatif

dan dibiarkan kering. Ketika diamati dengan mikroskop, bakteri atau

sporanya terlihat bersinar dengan latar belakang yang gelap (Lay, B.

W, 1994).

Pewarnaan negatif atau pewarna asam dapat terjadi karena senyawa

pewarna bermuatan negatif. Contoh pewarna yang biasa digunakan

yaitu tinta cina, larutan nigrosin, asam pikrat, dan eosin. Bakteri yang

dapat digunakan dalam pewarnaan ini seperti Pseudomon

asaeruginosa,Lineola longa, dan Klebsiella sp. (Rahayu,2014).

Pada beberapa sel bakteri Ada dinding sel, banyak bakteri terdapat zat

dengan kadar air tinggi, beberapa lapisan-lapisan dengan berbagai

ketebalan merupakan selubung lendir dan kapsul. Bagi bakteri,

selubung lendir dan kapsul ini tidak begitu penting untuk hidup, akan

tetapi dengan memiliki selubung, banyak bakteri patogen menjadi

resisten terhadap fagositosis, sehingga meningkatkan virulensinya

untuk hewan percobaan, sel dapat berfungsi sebagai cadangan

makanan, erlindungan terhadap kekeringan karena dehirasi. Kapsul

tidak memiliki afinitas yang besar terhadap bahan-bahan zat warna

yang bersifat basa. Kapsul tampaknya tidak larut dalam air.Beberapa

kapsul tidak dirusak oleh gangguan mekanik atau larut bila dicuci

dengan air. Karena kapsul dari berbagai species bebeda dalam susunan

zat-zatnya, maka tidak semua kapsul dapat diperhatikan dalam proses

pewarnaan yang sama. Komposisi kimiawi kapsul berbeda-beada

menurut organismenya, ada yang berupa polimer glukosa contohnya:

dekstran pada Leucunostoc mesentroides, polmer gula-amino misalnya

pada Staphilococcus sp. Polipeptida misalnya: Bacillus

disentri, polimer asam D-glutamat, yaitu: Bacillus anthracis (Arnia dan

Efrida Warganegara,2013).

Klebsiella sp. merupakan kuman berbentuk batang pendek, tidak

memiliki spora, dan tidak memiliki flagela. Klebsiella sp. menguraikan

laktosa dan membentuk kapsul baik invivo atau invitro dan koloninya

berlendir (Wara pertiwi, Teguh R.Sartono,dkk,2013).

Klebsiella pneumonia pertama kali diteliti dan diidentifikasi oleh

bakteriologis Jerman bernama Edwin Klebs (1834-1913). Klebsiella

pneumonia terdapat dalam feses dan saluran napas sebanyak 5% pada

orang normal. Klebsiella pneumonia merupakan salah satu bakteri

gram negative, bakteri yang non motil (tidak melakukan pergerakan

secara sel), merupakan bakteri fakultatif an aerob, bakteri ini dapat

memfermentasikan laktosa. Klebsiella pneumonia dapat menyebabkan

pneumonia (Dewi Elfidasari,Nita Noriko,dkk, 2013)

Hampir semua pneumonia disebabkan oleh bakteri ini. Klebsiella

pneumonia terdapat dalam saluran nafasdan feses sekitar 5 % orang

normal dan dapat menyebabkan pneumonia bacterial. Sampai saat ini

para ahli masih banyak melakukan penelitian mengenai obat apa yang

cocok untuk menghambat pertumbuhan bakteri Klebsiella pneumoniae

ini (Joko Susilo, dan Teguh R. Sartono, 2002).

Klebsiella pneumoniae merupakan suatu bakteri gram negative yang

tidak bergerak (non motil), tidak berselubung, melakukan fermentasi

laktosa, fakultatif anaerob, ditemukan sebagai flora normal di mulut,

kulit dan usus. Spesies Klebsiella menunjukkan pertumbuhan mukoid,

simpai polisakarida yang besar, tidak ada pergerakan dan biasanya

memberikan hasil positif untuk tes dekarboksilase lisin dan sitrat.

Morfologi khas dari Klebsiella dapat dilihat dalam pertumbuhan padat

in vitro tetapi morfologinya sangat bervariasi dalam bahan klinik.

Biasanya Klebsiella simpainya besar dan teratur. Selain itu Klebsiela

koloninya besar, sangat mukoid dan cenderung bersatu apabila

dieramkan. Anggota dari genus Klebsiella memiliki struktur antigen

yang kompleks. Lebih khususnya, amggota genus Klebsiella memiliki

2 tipe antigen pada permukaan sel. Yang pertama adalah antigen O

yang merupakan bagian terluar dari lipopolisakarida dinding sel dan

terdiri atas unit polisakarida yang berulang. Beberapa polisakarida O-

spesifik mengandung gula yang unik. Antigen O tahan terhadap panas

dan alcohol dan biasanya dideteksi dengan aglutinasi bakteri. Antibodi

terhadap antigen O terutama adalah IgM. Yang kedua adalah antigen

K. Antigen K ini berada di luar antigen O dan merupakan suatu

capsular polysacharida. Antigen K dapat mengganggu aglutinasi

melalui antiserum O dan berhubungan dengan virulensi. Klebsiella

mempunyai simpai besar yang terdiri atas polisakarida (antigen K)

yang menutupi antigen somatic (O atau H) dan dapat dikenali dengan

pembengkakan simpai melalui tes pembengkakan simpai dengan

antiserum khusus. Infeksi pada saluran nafas manusia disebabkan

terutama oleh jenis simpai 1 dan 2, pada saluran kemih terutama

disebabkan oleh jenis simpai 8,9,10,dan24(Djaenuri dan Iskanda

2006).

Pneumonia dapat terjadi akibat menghirup bakteri yang ada di udara.

Selain itu dapat juga disebarkan melalui darah yang berasal dari tempat

lain misalnya luka, dan perpindahan langsung bakteri dari infeksi di

dekat paru-paru. Jika melalui saluran nafas, bibit penyakit yang masuk

akan dilawan oleh berbagai macam sistem pertahanan yang dimiliki

oleh tubuh kita. Yang dimaksud dengan sistem pertahanan tubuh,

misalnya struktur kulit, proses batuk, hingga sel-sel pembunuh yang

berada dalam darah maupun cairan limfe kita (sistem antibodi)

(Dewi Elfidasari,Nita Noriko,dkk,2013).

IV. Alat dan Bahan

4.1. Bahan :

- Air Fuksin

- Alkohol 70 %

- Aquadest

- Tinta Cina

- Minyak Emersi

- Suspensi bakteri Klebsiela sp.

4.2. Alat :

No. Nama Alat Gambar Alat

1. Bak pewarna

2. Botol semprot

3. Kaca preparat

4. Kapas

5. Kertas saring

6. Mikroskop

7. Pembakar spiritus

8. Pipet tetes

9. Ose

10. Rak tabung

11. Tabung reaksi

V. Prosedur

1. Pewarnaan negative

Disediakan 2 kaca obyek yang bersih. Dilelakkan satu ose suspensi

bakteri dan satu tetes cina (1:1) di dekat ujung kanan kaca obyek

pertama.Dicampurkan keduanya dengan menggunakan kaca

(obvek kedua, sanpai homogen. Diletakkan kaca obyek kedua

pada kaca obyek pertama dengan membentuk sudut 450, Ditarik

kaca obyek kedua sepanjano kaca obyek pertama dengan

Diseretnya ke arah kiri. Dibiarkan preparat tersebut mengering

dengan sendirinya. Diteteskan sedikit minyak imersi pada preparat

lalu diperiksa di bawah mikroskop dan dimulai dengan obyektif

berkekuatan terendah 10X, lalu diganti dengan lensa obyek

kekuatan 100X. Diamati dan digambarkan-hasilnya. Sel bakteri

akan tampak sebagai bagian yang kosong dengan latar belakang

yang gelap.

2. Pewarnaan Kapsul

Disediakan 2 kaca obyek yang bersih. Diletakkan satu ose suspensi

bakteri dan stu tetes Tinta Cina (1:1) pada dekat ujung kanan kaca

obyek pertama. Dicampurkan keduanya dengan menggunakan

sudut kaca obyek kedua, sampai hornogen. Diletakkan kaca obyek

kedua pada kaca obyek pertama dcngan membentuk sudut450.

Ditarik kaca obyek kedua sepanjang kaca Obyek pertama dongan

menyeretnya ke arah kiri. Difikssi preparat tersebut dengan

melalukannya sebanyak 3 kali di atas api. Digenangi dengan

pewarna air fuksin selama 5 menit, dibuang zat warna yang

berlebih, lalu dikeringkan dengan kertas saring. Diteteskan sedikit

minyak imersi pada preparat, lalu diperiksa di bawah

mikroskop.dimulai dengan obyektif berkekuatan rendah 10X, lalu

diganti dengan lensa obyektif berkekuatan. 100X. Diamati dan

digambarkan hasilnya. Sel bakteri akan berwarna merah dan kapsul

tampak sebagai bagian yang kosong di Sekitar tubuh bakteri.

VI. Data Pengamatan

NO. Perlakuan Hasil

1.

Pewarnaan negative :

Diambil satu ose

suspense bakteri,

kemudian diletakan

pada bagian ujung

kanan kaca objek,

ditambah satu tetes tinta

cina, dicampurkan

kemudian diseret kea

rah kiri sampai kaca

preparat berwarna hitam

rata,

2.

Pewarnaan Kapsul :

Ditetesi minyak emersi.

Diambil satu ose

suspense bakteri,

kemudian diletakan

pada bagian ujung

kanan kaca objek,

ditambah satu tetes tinta

cina, dicampurkan

kemudian diseret kea

rah kiri sampai kaca

preparat berwarna hitam

rata, difiksasi sebanyak

3 kali,ditambahkan air

fuksin diamkan selama

5 menit, keringkan

,ditetesi minyak emersi.

VII. Pembahasan

Pada praktikum ini dilakukan teknis aseptis, hal ini bertujuan untuk

mencegah atau meminimaliskan adanya kontaminasi mikroorganisme

baik pada sampel atau praktikan sendiri. Teknik aseptik merupakan

metode pertama yang dipelajari oleh orang-orang yang berkecimpung

dalam bidang Mikrobiologi. Pada prinsipnya teknik aseptik adalah

usaha menghindarkan setiap kontak antara kultur murni (pure

culture), medium steril dan semua wadah steril serta permukaan meja

kerja, dengan mikroorganisme kontaminan/kompetitor

(mikroorganisme yang tidak diinginkan). Teknik aseptik dibutuhkan

misalnya, pada saat melakukan kultivasi mikroorganisme dan

pemindahan (transfer) kultur murni dari satu vessel (mis. tabung

reaksi) ke tabung reaksi yang lain. Teknik aseptik harus ditegakkan

untuk mencegah terjadinya kontaminasi oleh mikroorganisme

kompetitor pada kultur mikroba (murni) yang digunakan dalam

suatu eksperimen serta pada media dan peralatan yang sudah steril

(Elisa, 2014).

Pada praktikum ini dilakukan pewarnaan negative dan pewarnaan

kapsul yang bertujuan untuk mengamati morfologi bakteri yang sukar

untuk dilakukan dengan pewarnaan biasa, serta untuk memahami

lamhkah-lamhkah prosedur dengan reaksi yang terjadi di dalamnya.

Pada prinsipnya baik pada pewarnaan negative maupun kapsul

memiliki prinsip yang sama yakni melakukan pewarnaan bukan pada

sel bakteri namun pada latar belakang objek glass, dimana pada bakteri

yang berkapsul ini sulit diwarnai dengan pewarnaan biasa karena

Dalam kondisi pH mendekati netral, dinding sel bakteri cenderung

bermuatan negatif dan senyawa pewarna juga bermuatan yang sama

sehingga akan ditolak oleh dinding sel dan tidak dapat menghasilkan

warna pada bakteri. Pewarnaan negatif memerlukan pewarna asam

seperti eosin atau negrosin.pewarna asam memiliki muatan negatif

kromogen,tidak akan menembus atau berpenetrasi ke dalam sel karena

muatan negatif pada permukaan bakteri. oleh karena itu, sel tidak

berwarna mudah dilihat dengan latar belakang berwarna. Sedangkan

pada pewarnaan kapsul ditambahkan air fuksin sebagai zat warna

dengan bermuatan positif sehingga pada hasilnya akan membentuk

hasil mikroskopik yang spesifik dan dilakukan fiksasi. Pada pewarnaan

negative dilakukan pengolesan suspense bakteri pada ujung kanan kaca

preparat dimana teknik pengolesan sampel harus diperhatikan karena

jika Olesan terlalu tebal, maka sel-sel bakteri akan bertumpuk-tumpuk

sehingga sulit untuk menentukan bentuk sel individu dan jika Olesan

terlalu tipis dapat menylulitkan pengamatan secara mikroskopis. lalu

dioleskan tinta cina di samping olesan suspense bakteri sebagai

pewarna, kemudian dicampurkan dengan ujung objek glass yang

lain,dan seret kea rah kiri hingga kaca preparat berwarna hitam merata,

pada proses ini akan terjadi gaya tolak menolak dari dinding sel yang

bermuatan negative dengan tinta cina. Hal tersebut dapat terjadi karena

pewarna yang digunakan adalah pewarna asam dan memiliki

komponen kromoforikyang bermuatan negatif, yang juga dimiliki oleh

sitoplasma bakteri. Sehingga pewarna tidak dapat menembus atau

berpenetrasi ke dalam sel bakteri karena negatif charge pada

permukaan sel bakteri. Pada pewarnaan negatif ini, sel bakteri terlihat

transparan (tembus pandang) (Lay, B. W,1994).

Kemudian diteteskan dengan minyak emersi pada kaca preparat

Hal ini dikarenakan, cahaya yang datang dibiaskan melalui 2 medium

yang berbeda, yaitu udara dan kaca. Oleh karena itu, dibutuhkan suatu

bahan yang mampu membiaskan cahaya dari medium udara dan

medium kaca dengan pembiasan yang mendekati garis normal. Bahan

yang mampu membiaskan cahaya dari medium udara dan medium

kaca dengan pembiasan yang mendekati garis normal adalah minyak

emersi. Selain itu, minyak imersi juga mempunyai indeks bias yang

mendekati atau identik dengan kaca (Kusnadi. 2014).

Setelah ditambahkan minyak emersi dilakukan pengamatan dengan

menggunakan mikroskop pada perbesaran 10 x 10 dan 10 x 100,

berdasarkan hasil praktikum kebanyakan sampel yang dapat terlihat

pada perbesaran 10 x 100, hal ini dikarenakan oleh banyak factor

seperti ketidak mampuan praktikan dalam menggunakan mikroskop,

adanya pembutan olesan sampel yang terlalu tipis sehingga bakteri

yang terkandung dalam sampel tidak dapat terlihat secara jelas dalm

perbesaran 10 x 10.

Pada hasil praktikumnya diperoleh hasil dimana sel bakteri berwarna

transparan dengan berlatar belakang warna hitam, hal ini sesuai dengan

literature.

Pada percobaan selanjutnya dilakukan pewarnaan kapsul, yang dimana

kapsul merupakan lapisan polimer yang terletak di luar dinding sel

yang berfungsi dalam penyesuaian diri dengan lingkungannya.

Misalnya berperan dalam mencegah terhadap kekeringan, mencegah

atau menghambat terjadinya pencantelan bakteriofag, bersifat

antifagosit sehingga kapsul memberikan sifat virulen bagi bakteri.

Kapsula juga berfungsi untuk alat mencantelkan diri pada permukaan.

Lapisan kapsul cukup tebal sehingga sulit diwarnai, oleh karena itu

diperlukan suatu pewarnaan khusus. Salah satu cara pewarnaan

kapsula menurut Raebiger yaitu dengan menggunakan pewarna larutan

formol-gentian violet Raebiger atau kristal violet. Satu lagi cara untuk

perwarnaan kapsula bakteri adalah dengan pewarnaan negatif

(pewarnaan tidak langsung ). Pada pewarnaan negatif latarbelakangnya

diwarnai zat warna negatif sedangkan bakterinya diwarnai dengan zat

warna basa. Kapsula tidak menyerap warna sehingga terlihat lapisan

terang yang tembus dengan latar belakang yang berwarna (Djaenuri

dan Iskandar,2006).

Pada proses pewarnaan kapsul hamper sama dengan pewarnaan

negative, namun pada pewarnaan kapsul ini sebelum ditambahkan

emersi dan dilakukan pengamatan, dilakukan fiksasi terlebih dahulu,

fiksasi ini dilakukan sebelum pewarnaan yang bertujuan untuk

Merekatkan sel mikroba pada gelas objek, membunuh mikroorganisme

secara cepat dengan tidak menyebabkan perbahan-perubahan bentuk

dan strukturnya, mengubah afinitas (daya ikat) zat warna,membuat sel-

sel mikroba lebih kuat (keras), melepaskan granuler (butiran) protein

menjadi gugu reaktif NH3+ yang akan bereaksi dengan gugus OH dari

zat warna, mencegah otolisis sel, yaitu pecahnya sel yang disebabkan

olehenzim-enzim yang dikandungnya sendiri, dan mempertinggi sifat

reaktif gugus-gugus tertentu (karboksil amino primer dan sulfhidril)

(Lay, B. W,1994).

Selanjutnya sampel yang telah difiksasi dibiarkan dingin, lalu ditetesi

zat pewarna tunggal air fuksin dan dibiarkan di atas bak pewarnaan,

dimana pada penggunaan air fuksin ini dibiarkan selama 5 menit,

Waktu yang diperlukan ini bertujuan agar zat warna pada dinding sel

bakteri dapat terwarnai dengan sempurna dan perbedaan waktu yang

diperlukan pada setiap zat pewarna berbeda dikarenakan oleh sifat

fisika,kimia serta daya afinitas zat warna tersebut untuk menempel

pada dinding sel bakteri. Setelah didiamkan sesuai waktu yang

diperlukan,selanjutnya preparat sampel dikeringkan dengan kertas

saring untuk mncegah adanya kelebihan zat warna pada sampel,

kemudian di tetesi minyak emersi, Hal ini dikarenakan, cahaya yang

datang dibiaskan melalui 2 medium yang berbeda, yaitu udara dan

kaca. Oleh karena itu, dibutuhkan suatu bahan yang mampu

membiaskan cahaya dari medium udara dan medium kaca dengan

pembiasan yang mendekati garis normal. Bahan yang mampu

membiaskan cahaya dari medium udara dan medium kaca dengan

pembiasan yang mendekati garis normal adalah minyak emersi. Selain

itu, minyak imersi juga mempunyai indeks bias yang mendekati atau

identik dengan kaca (Kusnadi. 2014).

Setelah ditambahkan minyak emersi dilakukan pengamatan dengan

menggunakan mikroskop pada perbesaran 10 x 10 dan 10 x 100,

berdasarkan hasil praktikum kebanyakan sampel yang dapat terlihat

pada perbesaran 10 x 100, hal ini dikarenakan oleh banyak factor

seperti ketidak mampuan praktikan dalam menggunakan mikroskop,

adanya pembutan olesan sampel yang terlalu tipis sehingga bakteri

yang terkandung dalam sampel tidak dapat terlihat secara jelas dalm

perbesaran 10 x 10.

Pada hasilnya dalam pewarnaan kapsul menunjukan adanya bakteri

yang berwarna merah akibat air fuksin yang menunjukan adanya sel

fegetatif,ada pula yang berwarna transparan, dalam hal ini bakteri

berkapsul yang tidak terwarnai da nada juga yang memiliki bagian luar

transparan dan bagian dalam berwarna merah. Dari hasil pengamatan

ini baik dari pewarnaan negative dan pewarnaan kapsul, menunjukan

bahwa suspense bakteri mengandung bakteri Klebsiella sp yang

merupakan suatu bakteri gram negative yang tidak bergerak (non

motil), tidak berselubung, melakukan fermentasi laktosa, fakultatif

anaerob, ditemukan sebagai flora normal di mulut, kulit dan usus.

Bakteri ini berasal dari family Enterobacteriaceae. Morfologi khas dari

Klebsiella dapat dilihat dalam pertumbuhan padat in vitro tetapi

morfologinya sangat bervariasi dalam bahan klinik. Biasanya

Klebsiella simpainya besar dan teratur. Selain itu Klebsiela koloninya

besar, sangat mukoid dan cenderung bersatu apabila dieramkan.

K.pneumoniae dapat menyebabkan pneumonia bacterial.

K.pneumoniae banyak terdapat dalam saluran nafas dan feses sekitar 5

% orang normal. K.pneumoniae dapat menyebabkan konsolidasi luas

disertai nekrosis hemoragik pada paru-paru (Syahrurachman, dkk,

1994).

Klebsiella kadang-kadang menyebabkan infeksi saluran kemih dan

bakteremia dengan lesi fokal pada pasien yang lemah. Pneumonia

dapat terjadi akibat menghirup bakteri yang ada di udara. Selain itu

dapat juga disebarkan melalui darah yang berasal dari tempat lain

misalnya luka, dan perpindahan langsung bakteri dari infeksi di dekat

paru-paru. Jika melalui saluran nafas, bibit penyakit yang masuk akan

dilawan oleh berbagai macam sistem pertahanan yang dimiliki oleh

tubuh kita. Yang dimaksud dengan sistem pertahanan tubuh, misalnya

struktur kulit, proses batuk, hingga sel-sel pembunuh yang berada

dalam darah maupun cairan limfe kita (sistem antibodi) (Pearce

Evelyn. 2009).

Gejalagejala yang biasanya timbul dari penderita peneumonia antara

lain batuk berdahak dimana dahaknya seperti lendir berwarna hijau

atau seperti nanah, nyeri dada, menggigil, demam, mudah lelah, sesak

nafas, sakit kepala, nafsu makan berkurang, mual, muntah, tidak enak

badan, kekakuan sendi, kekakuan otot, kulit lembab, batuk darah, nyeri

perut, dan pernafasan yang cepat. Untuk mendiagnosa diadakan

berbagai macam pemeriksaan antara lain dengan menggunakan

stetoskop, rontgen dada, pembiakan dahak dan penghitungan gas darah

arteri.Untuk pengobatan dapat digunakan senyawa yang memiliki

cincin laktam (Syahrurachman, dkk,1994).

VIII. KESIMPULAN dan SARAN

8.1 Kesimpulan

Pewarnaan negative atau Pewarnaan tidak langsung merupakan

teknik pewarnaan yang hanya mewarnai latar belakang kaca

objek, dan tidak mewarnai sel bakteri, pada prosesnya terjadi

reaksi tolak menolak antara dinding sel bakteri dengan zat

warna). Pada hasilnya diperoleh adanya bakteri Klebsiella sp.

dengan bentuk basil transparan.

Kapsul atau lapisan lendir merupakan Struktur tambahan

penyusun sel bakteri, yang merupakan lapisan yang berada di

luar dinding sel bakteri, pada pewarnaannya menggunakan

pewarnaan burry gins, yang memiliki prinsip yang sama

dengan pewarnaan negative, namun pada pewarnaan ini

dilakukan fiksasi dan pewarna air fuksin, sehingga hasil yang

diperoleh terdapat sel baktri yang berwarna merah dengan sisi

sel yang transparan. Hal ini menunjukan bahwa bakteri

Klensiella sp, merupakan bakteri berkapsul yang bersifat

pathogen penyebab pneumonia.

8.2 Saran

Dalam proses pratikum harus ditingkatkan ketelitian dan kecermatan

praktikan agar diperoleh hasil pengamatan yang maksimal dan sesuai

dengan tujuan praktikum

DAFTAR PUSTAKA

Anna Rahmawati. 2013. Pewarnaan bakteri berkapsul. Tersedia online di :

http://staff.uny.ac.id/sites/default/files/pengabdian/anna-rakhmawati-ssimsi/ppm-

2013-praktik-layanan-praktikum.pdf [ Diakses pada 23-03-2015].

Arnia dan Efrida Warganegara. 2013. Identifikasi Kontaminasi Bakteri Coliform

Pada Daging Sapi Segar Yang Dijual Di Pasar Sekitar Kota Bandar

Lampung.Universitas Lampung. Vol. ISSN 2337-3776. Tersedia online di :

http://juke.kedokteran.unila.ac.id/index.php/majority/article/download/39/38

[ Diakses pada 23-03-2015].

Dewi Elfidasari,Nita Noriko,dkk. 2013.Deteksi Bakteri Klebsiella pneumonia

pada Beberapa jenis Rokok Konsumsi Masyarakat. Universitas Al Azhar

Indonesia . Jurnal AL-AZHAR INDONESIA SERI SAINS DAN TEKNOLOGI,

Vol. 2, No. 1. . Tersedia online di :

http://jurnal.uai.ac.id/index.php/SST/article/download/97/pdf_12 [ Diakses pada

23-03-2015].

Djaenuri dan Iskandar. 2006. ISOLASI DAN IDENTIFIKASI KLEBSIELLA

PNEUMONIAE DARI KELINCI DAN MARMOT. Balai Besar Penelitian

Veteriner. Tersedia online di :

http://balitnak.litbang.pertanian.go.id/index.php?option=com_phocadownload&v

iew=category&id=70:3&download=1245:3&start=40&Itemid=1 [ Diakses pada

23-03-2015].

Elisa. 2014 Teknis Aseptis. Tersedia online di :

http://elisa.ugm.ac.id/user/archive/download/26222/305ef68a209e3fa6c70cc447e

84ca3db [ Diakses pada 23-03-2015].

Joko Susilo, dan Teguh R. Sartono. 2002. Deteksi Bakteri Klebsiella Pneumoniae

Pada Sputum Dengan Metode Imunositokimia Menggunakan Anti Outer

Membrane Protein Berat Molekul 40 Kda Klebsiella Pneumoniae Sebagai

Antibodi. PPDS Paru FK Unibraw. Tersedia online di :

Sumarnohttp://jkb.ub.ac.id/index.php/jkb/article/download/233/225

[ Diakses pada 23-03-2015].

Kusnadi. 2014. Identifikasi bakteri. Tersedia online di:

http://file.upi.edu/Direktori/FPMIPA/JUR._PEND._BIOLOGI/196805091994031

KUSNADI/BUKU_COMMON_TEXT_MIKROBIOLOGI,_Kusnadi,dkk/ientifikasi

_bakteri.pdf [diakses pad 16-03-2015 ].

Lay, B. W. 1994. Analisis Mikroba di Laboratorium. Jakarta: PT. Raga Grafindo

Persada.

Pearce Evelyn. 2009. Anatomi dan Fisiologi untuk Paramedis. Yuliani Sri,

penerjemah; Jakarta: PT Gramedia Pustaka Utama. Terjemahan dari: Anatomy

and Physiology for Nurses.

Rahayu. 2014. Pewarnaan negative. Tersedia online di :

http://eprints.undip.ac.id/43761/3/DEWIAYU_G2A009195_BAB2KTI.pdf

[ Diakses pada 23-03-2015].

Syahrurachman, dkk. 1994. Buku Ajar Mikrobiologi Kedokteran Edisi Revisi.

Jakarta: UI Press.

Wara pertiwi, Teguh R.Sartono,dkk. 2013. Sensitivitas dan Spesifisitas metode

Dot Blot menggunakan Antigen Outer Membrane Protein Klebsiella pneumoniae

yang Direspon Secretory-Immunoglobulin A Sputum Penderita Terinfeksi

Klebsiella pneumoniae . tersedia online di :

http://jurnalrespirologi.org/jurnal/Juli09/JRI%20Malang%20drWara-

OK%20revisi%20lagi.pdf [ Diakses pada 23-03-2015].