PENGARUH GEL GETAH BUAH NANGKA (Artocarpus …repository.ub.ac.id/167959/1/Himmah Islaura Mas’udi...
Transcript of PENGARUH GEL GETAH BUAH NANGKA (Artocarpus …repository.ub.ac.id/167959/1/Himmah Islaura Mas’udi...
-
PENGARUH GEL GETAH BUAH NANGKA (Artocarpus heterophyllus Lam.)TERHADAP KETEBALAN EPITEL PADA PROSES PENYEMBUHAN ULSER
TRAUMATIK TIKUS PUTIH (Rattus norvegicus)
SKRIPSI
Untuk Memenuhi Persyaratan MemperolehGelar Sarjana Kedokteran Gigi
Oleh:
Himmah Islaura Mas’udi
NIM 145070401111018
PROGRAM STUDI SARJANA KEDOKTERAN GIGIFAKULTAS KEDOKTERAN GIGI
UNIVERSITAS BRAWIJAYAMALANG
2018
-
viii
DAFTAR ISI
Halaman Judul....................................................................................................... i
Halaman Persetujuan ............................................................................................ ii
Halaman Pengesahan ........................................................................................... iii
Kata Pengantar...................................................................................................... iv
Abstrak ................................................................................................................ vi
Abstract ................................................................................................................ vii
Daftar Isi ................................................................................................................ viii
Daftar Gambar....................................................................................................... xii
Daftar Tabel........................................................................................................... xiii
Daftar Lampiran..................................................................................................... xiv
Daftar Singkatan.................................................................................................... xv
BAB I. PENDAHULUAN1.1 Latar Belakang.................................................................................. 1
1.2 Rumusan Masalah ............................................................................ 4
1.3 Tujuan Penelitian .............................................................................. 4
1.3.1 Tujuan Umum.......................................................................... 4
1.3.2 Tujuan Khusus ........................................................................ 4
1.4 Manfaat Penelitian ............................................................................ 5
1.4.1 Manfaat Akademis................................................................... 5
1.4.2 Manfaat Praktis ....................................................................... 5
BAB II. TINJAUAN PUSTAKA2.1 Ulser Traumatik................................................................................. 6
2.1.1 Definisi .................................................................................... 6
2.1.2 Klasifikasi ................................................................................. 6
2.1.3 Gambaran Klinis....................................................................... 10
2.1.4 Gambaran Histopatologi........................................................... 10
2.1.5 Diagnosis Banding ................................................................... 11
2.1.6 Penatalaksanaan...................................................................... 11
-
ix
2.2 Penyembuhan Luka .......................................................................... 12
2.2.1 Definisi .................................................................................... 12
2.2.2 Proses Penyembuhan Luka..................................................... 12
2.3 Jaringan Epitel Rongga Mulut ........................................................... 20
2.4 Nangka (Artocarpus heterophyllus) ................................................... 23
2.4.1 Taksonomi............................................................................... 23
2.4.2 Morfologi ................................................................................. 24
2.4.3 Habitat dan Daerah Distribusi.................................................. 24
2.4.4 Kandungan.............................................................................. 24
2.4.5 Sifat dan Khasiat ..................................................................... 25
2.4.6 Getah nangka.......................................................................... 26
2.4.7 Kandungan getah nangka........................................................ 27
2.5 Gel ................................................................................................... 30
2.6 Tikus Putih (Rattus Norvegicus) ........................................................ 30
BAB III. KERANGKA KONSEP3.1 Kerangka Konsep ............................................................................. 33
3.2 Hipotesis Penelitian .......................................................................... 35
BAB IV. METODE PENELITIAN4.1 Desain Penelitian .............................................................................. 36
4.2 Sampel Penelitian ............................................................................. 37
4.2.1 Pemilihan Binatang Coba dan Teknik Randomisasi................. 37
4.2.1.1 Kriteria Inklusi.............................................................. 37
4.2.1.2 Kriteria Eksklusi........................................................... 38
4.2.2 Estimasi Jumlah Pengulangan ................................................ 38
4.3 Variabel Penelitian ............................................................................ 38
4.3.1 Variabel Independen ............................................................... 39
4.3.2 Variabel Dependen.................................................................. 39
4.3.3 Variabel Terkendali.................................................................. 39
4.4 Tempat dan Waktu Penelitian ........................................................... 39
-
x
4.5 Alat dan Bahan Penelitian ................................................................. 40
4.5.1 Pemeliharaan Hewan Coba..................................................... 40
4.5.2 Pembuatan Gel Getah Buah Nangka (Artocarpus Heterophyllus) 40
4.5.3 Perlakuan Hewan Coba .......................................................... 40
4.5.4 Pemeriksaan Histologi ............................................................ 41
4.6 Definisi Operasional .......................................................................... 41
4.6.1 Getah Buah Nangka ............................................................... 41
4.6.2 Gel Getah Buah Nangka ......................................................... 41
4.6.3 Ulser Traumatik ...................................................................... 42
4.6.4 Ketebalan Epitel ..................................................................... 42
4.7 Prosedur Penelitian........................................................................... 43
4.7.1 Persiapan Hewan Coba........................................................... 43
4.7.2 Pemeliharaan Hewan Coba..................................................... 43
4.7.3 Determinasi Buah Nangka........................................................ 44
4.7.4 Pengambilan Getah Buah Nangka ........................................... 44
4.7.5 Pembuatan Gel Topikal ........................................................... 44
4.7.6 Pembuatan Ulser Traumatik .................................................... 46
4.7.7 Pemberian Gel Getah Nangka................................................. 47
4.7.8 Pembedahan Hewan Coba...................................................... 47
4.7.9 Prosedur Pembuatan Preparat ................................................ 47
4.7.10 Pengamatan Sediaan Histologi Mukosa Labial Rahang Bawah
Rattus norvegicus ....................................................................... 48
4.8 Analisis Data ..................................................................................... 49
4.9 Skema Prosedur Penelitian ............................................................... 51
4.9.1 Pembuatan Gel Getah Buah Nangka ...................................... 51
4.9.2 Uji Efektivitas Gel Getah Buah Nangka 0.5%, 1% dan 2% ...... 52
BAB V. HASIL PENELITIAN DAN ANALISIS DATA5.1 Hasil Penelitian .................................................................................. 53
5.2 Analisis Data ...................................................................................... 58
5.2.1 Uji Normalitas Data................................................................... 58
-
xi
5.2.2 Uji Homogenitas Ragam........................................................... 58
5.2.3 Uji One-way Anova................................................................... 59
5.2.4 Uji Post Hoc Multiple Comparison ............................................ 59
5.2.5 Uji Korelasi Pearson ................................................................ 60
5.2.6 Uji Korelasi Regresi .................................................................. 61
5.2.7 Uji Independent T-test .............................................................. 61
BAB VI. PEMBAHASAN ...................................................................................... 62
BAB VII. PENUTUP7.1 Kesimpulan . ...................................................................................... 67
7.1 Saran . ............................................................................................... 68
Daftar Pustaka....................................................................................................... 69
Lampiran ............................................................................................................... 76
-
xii
DAFTAR GAMBAR
Gambar 2.1 Ulser Traumatik akibat trauma elektrik ............................................... 7
Gambar 2.2. Ulser traumatik akibat makanan yang panas..................................... 8
Gambar 2.3. Ulser traumatik akut .......................................................................... 9
Gambar 2.4. Ulser traumatik kronis ....................................................................... 9
Gambar 2.5. Gambaran histopatologis dari mukosa bukal tikus yang dilakukan ulserasi
satu hari sebelumnya ........................................................................ 11
Gambar 2.6. Gambaran histopatologis dari ulser kronis ........................................ 11
Gambar 2.7 Fase yang terjadi dalam penyembuhan luka ...................................... 13
Gambar 2.8 Reepitelisasi yang terjadi pada penyembuhan luka............................ 19
Gambar 2.9 Lapisan-lapisan pada epitel mukosa rongga mulut manusia berdasarkan
tipenya .............................................................................................. 22
Gambar 2.10. Buah Nangka ................................................................................. 23
Gambar 2.11. Getah buah nangka ........................................................................ 26
Gambar 2.12. Rattus norvegicus ........................................................................... 31
Gambar 5.1 Pengukuran ketebalan epitel ..................................................... ......... 55
Gambar 5.2 Ketebalan epitel pada hari ke-3 dengan perbesaran mikroskop 400x. 55
Gambar 5.3 Ketebalan epitel pada hari ke-7 dengan perbesaran mikroskop 400x 56
Gambar 5.4 Diagram rata-rata ketebalan lapisan epitel pada masing-masing
kelompok...................................................................................... 57
-
xiii
DAFTAR TABEL
Tabel 2.1. Kandungan Artocarpus heterophyllus Lam............................................ 24
Tabel 2.2. Aktivitas Farmakologik Artocarpus heterophyllus Lam. ......................... 26
Tabel 4.1 Formulasi sediaan gel getah buah nangka............................................. 43
Tabel 5.1 Hasil pengujian gel).......................................................................... 53Tabel 5.2 Hasil perhitungan rerata ketebalan epitel pada tikus putih (Rattus
norvegicus)................................................................ ...................... 57
-
xiv
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1 Pernyataan Keaslian Tulisan............................................................... 77
Lampiran 2 Hasil Uji Statistik ................................................................................. 78
Lampiran 3 Foto Bahan dan Alat Penelitian........................................................... 92
Lampiran 4 Ethical Clearance ................................................................................ 94
Lampiran 5 Determinasi Nangka (Artocarpus heterophyllus Lam.) ....................... 95
-
xv
DAFTAR SINGKATAN
EGF : Epidermal Growth Factor
FGF : Fibroblast Growth Factor
GAGs : Glikosaminoglikan
HE : Haematoxylin-Eosin
HGF : Hepatocyte Growth Factor
IFN- : Interferon -
IGF-1 : Insulin-like Growth Factor 1
IL-2 : Interleukin-2
IL-6 : Interleukin-6
KGF : Keratinocyte Growth Factor
Lam. : Lamarck
MMP : Matriks metalloproteinase
NO : Nitric Oxide
PDGF : Platelet Derived Growth Factor
TGF-α : Transforming Growth Factor Alfa
TGF-β : Transforming Growth Factor Beta
VEGF : Vascular Endothelial Growth Factor
Th1 : T helper 1
-
vi
ABSTRAK
Mas’udi, Himmah Islaura. 2018. Pengaruh Gel Getah Buah Nangka (Artocarpusheterophyllus Lam.) terhadap Ketebalan Epitel pada ProsesPenyembuhan Ulser Traumatik Tikus Putih (Rattus Norvegicus). Skripsi,Program Studi Sarjana Kedokteran Gigi, Fakultas Kedokteran Gigi,Universitas Brawijaya, Malang. Pembimbing: (1) Dr. drg. Nur Permatasari,MS. (2) drg. Nenny Prasetyaningrum, M. Ked.
Ulser traumatik merupakan lesi di rongga mulut yang sering dijumpai.Epitelisasi mempunyai peran penting dalam perbaikan jaringan. Getahbuah nangka memiliki kandungan flavonoid, tanin, alkaloid, dan artocarpain-Hyang bermanfaat bagi proses penyembuhan luka. Penelitian ini bertujuan untukmengetahui pengaruh gel getah buah nangka (Artocarpus heterophyllus Lam.)terhadap ketebalan epitel pada proses penyembuhan ulser traumatik tikus putih(Rattus norvegicus). Metode penelitian yang digunakan adalah Randomized PostTest Only Control Group Design. Objek penelitian adalah 40 tikus Rattusnorvegicus jantan yang dibagi menjadi 8 kelompok, yaitu kelompok kontrol(pemberian senyawa pembawa gel tanpa getah), kelompok perlakuan 1,perlakuan 2, dan perlakuan 3 (pemberian gel getah buah nangka masing-masingdengan dosis 0,5%, 1%, dan 2%) dengan 2 time series yaitu hari ke-3 dan harike-7 setelah induksi panas. Variabel yang diteliti adalah ketebalan epitel padajaringan ulser traumatik mukosa labial tikus yang diukur dari sediaan preparathistologis dengan pengecatan hematoxylin-eosin. Analisis data menggunakanuji One-Way Anova menunjukkan bahwa perbedaan ketebalan epitelantarkelompok signifikan pada hari ke-3 (p0,05). Kesimpulan pada penelitian ini yaitu gel getah buah nangkaberpengaruh terhadap ketebalan epitel pada proses penyembuhan ulsertraumatik tikus putih (Rattus norvegicus) yang diamati hari ke-3 pasca induksipanas.
Kata Kunci: Ulser traumatik, getah buah nangka, penyembuhan luka, ketebalanepitel
-
vii
ABSTRACT
Mas’udi, Himmah Islaura. 2018. The Effect of Jackfruit (Artocarpus heterophyllusLam.) Latex Gel on the Epithelium Thickness of Traumatic Ulcer WoundHealing Process of White Rats (Rattus norvegicus). Bachelor Thesis,Faculty of Dentistry, Brawijaya University, Malang. Supervisors: (1) Dr.drg. Nur Permatasari, MS. (2) drg. Nenny Prasetyaningrum, M. Ked.
Traumatic ulcer is a lesion frequently found in the oral cavity.Epithelialization process has an important role to the injured tissue repair.Jackfruit latex contains flavonoid, tanin, alkaloid, and artocarpain-H that hasvarious benefits on the wound healing process. The aim of this research is tounderstand the effect of jackfruit (Artocarpus heterophyllus Lam.) latex gel on theepithelium thickness of traumatic ulcer wound healing process of white rats(Rattus norvegicus). The method used in this study was the Randomized PostTest Only Control Group Design. The object used in this research were 40 maleRattus norvegicus rats divided into 8 groups, which are the control group (givencontrol gel without jackfruit latex), treatment group 1, treatment group 2, andtreatment group 3 (given jackfruit latex gel with the dose of 0,5%, 1%, and 2%,respectively), each on 2 time series, which are on day 3 dan day 7 after heatinduction. The variables tested were epithelium thickness of traumatic ulcer onthe inner lip mucosa, measured by hematoxylin-eosin stained histological slides.The data were then analyzed using One Way Anova, showing that the epitheliumthickness differs significantly between day 3 groups (p0,05). It can be concluded from this researchthat jackfruit (Artocarpus heterophyllus Lam.) latex gel effects the epitheliumthickness of traumatic ulcer wound healing process of white rats (Rattusnorvegicus) on day 3 of heat induction.
Keywords: Traumatic ulcer, jackfruit latex, wound healing, epithelium thickness
-
1
BAB I
PENDAHULUAN
1.1 Latar Belakang
Ulser adalah suatu kerusakan lapisan epitel yang ditutupi oleh
gumpalan fibrin, dengan warna kuning keputihan dan berbatas jelas
(Greenberg et al., 2008). Ulser dapat disebabkan karena berbagai hal,
diantaranya karena kelainan genetik, infeksi, imunologis, neoplasma,
ataupun karena trauma. Ulser yang disebabkan oleh karena trauma disebut
sebagai ulser traumatik. Prevalensi terjadinya ulser pada rongga mulut
diperkirakan mencapai lebih dari 25% dari populasi di seluruh dunia (Paleri
et al., 2010). Ulser traumatik menimbulkan rasa sakit pada daerah lesi dan
bisa bertahan selama beberapa hari, sehingga menyebabkan gangguan
bicara, pengunyahan, dan penelanan yang berpengaruh terhadap
penurunan kondisi tubuh apabila terjadi dalam jangka waktu lama. Sebagian
besar ulser ini disebabkan karena mukosa oral yang tergigit, sehingga
nampak pada regio-regio yang biasanya diapit oleh gigi-geligi, yaitu mukosa
labial bawah, lidah, dan mukosa bukal (Regezi et al., 2012).
Selama ini, perawatan yang sering dilakukan pada kasus ulser
traumatik adalah dengan kortikosteroid topikal. Sediaan topikal berupa gel
atau salep banyak dipilih karena memiliki onset kerja yang cepat dan mudah
digunakan (Mathew, 2015). Salah satu kortikosteroid topikal yang sering
digunakan adalah triamcinolone acetonide, karena memiliki kemampuan
sebagai antiinflamasi, antialergi, dan analgesik sehingga dapat
mempercepat proses penyembuhan ulser dan mengurangi nyeri. Namun,
penggunaan kortikosteroid topikal pada mukosa oral dapat menyebabkan
-
2
efek samping berupa kandidiasis, karena penggunaan obat ini dapat
mengubah kondisi flora normal pada rongga mulut (Parkarwar et al., 2017).
Selain itu, penggunaan kortikosteroid topikal dapat menyebabkan reaksi
hipersensitivitas terhadap obat, mulut terbakar, dan oral hairy leukoplakia
dalam penggunaan jangka panjang (Mehdipour & Zenouz, 2012).
Proses penyembuhan luka bertujuan untuk memulihkan kondisi
jaringan seperti semula. Proses penyembuhan luka merupakan proses yang
sangat kompleks yang terdiri atas beberapa fase, yakni fase inflamasi,
proliferasi, dan remodeling (maturasi). Proses epitelisasi atau proses
pembentukan epitel baru pada jaringan luka merupakan salah satu proses
utama yang dianggap sebagai parameter dalam keberhasilan penyembuhan
luka. Tanpa adanya reepitelisasi, luka tidak dapat dianggap sembuh karena
luka yang terbuka dapat menjadi portal masuknya infeksi pada daerah luka
(Pastar et al., 2014). Proses reepitelisasi berlangsung setelah 24 jam terjadi
luka hingga hari ke-14 (Politis, 2016).
Indonesia merupakan negara yang dikenal dengan keanekaragaman
hayatinya, dimana terdapat banyak tanaman yang digunakan sebagai
alternatif pengobatan terhadap berbagai macam penyakit. Selain sangat
mudah didapatkan di masyarakat, tanaman obat memiliki resiko efek
samping yang lebih sedikit daripada obat sintetis. Salah satunya adalah
tanaman nangka (Artocarpus heterophyllus Lam.), yang dikenal memiliki sifat
antibakteri, antiinflamasi, dan antioksidan (Prakash et al., 2009).
Seluruh bagian dari tanaman nangka, mulai dari buah, daun, akar,
biji, bahkan getahnya memiliki khasiat untuk penanganan berbagai penyakit.
Namun selama ini, pemanfaatan nangka di Indonesia masih terbatas dimana
-
3
sebagian besar masyarakat hanya mengonsumsi daging buah segarnya
saja. Keberadaan getah nangka yang melimpah di seluruh bagian
tanamannya masih sangat jarang digunakan dan dibuang sebagai limbah.
Hal ini sangat disayangkan, karena getah nangka memiliki kandungan
flavonoid, tanin, alkaloid, dan artocarpain-H yang bermanfaat pada proses
penyembuhan luka (Madhavi et al., 2013). Sebagaimana penelitian
sebelumnya yang dilakukan oleh Stefanus (2015) dan Siswanto (2015) yang
menunjukkan efektivitas gel getah buah nangka sebagai antijerawat secara
in vitro dan in vivo.
Flavonoid yang terkandung dalam getah buah nangka memiliki
kemampuan sebagai imunomodulator, yang akan merangsang sel-sel
inflamasi untuk mesekresikan sitokin dan growth factor yang penting
dalam proses penyembuhan luka. Flavonoid juga berperan sebagai
antiinflamasi, yang menyebabkan reaksi inflamasi berlangsung lebih
singkat dan fase proliferasi dapat terjadi lebih cepat. Tanin dan alkaloid
berperan sebagai antioksidan dan antimikroba, sedangkan artocarpain-H
dapat memberikan efek antiinflamasi dan analgesik yang baik melalui
penghambatan prostaglandin, serotonin, dan histamin (Napanggala et al.,
2014; Chanda, 2009).
Berdasarkan data-data diatas, penelitian ini bertujuan untuk
mengetahui pengaruh gel getah buah nangka (Artocarpus heterophyllus
Lam.) terhadap ketebalan epitel pada proses penyembuhan ulser traumatik
tikus putih (Rattus norvegicus), sehingga memiliki potensi untuk
dikembangkan dan diaplikasikan dalam dunia medis di masa mendatang.
-
4
1.2 Rumusan Masalah
Berdasarkan latar belakang tersebut diatas, maka permasalahan yang
muncul adalah:
Apakah gel getah buah nangka (Artocarpus heterophyllus Lam.)
berpengaruh terhadap ketebalan epitel pada proses penyembuhan ulser
traumatik tikus putih (Rattus norvegicus)?
1.3 Tujuan Penelitian
1.3.1 Tujuan Umum
Untuk mengetahui pengaruh gel getah buah nangka (Artocarpus
heterophyllus Lam.) terhadap ketebalan epitel pada proses
penyembuhan ulser traumatik tikus putih (Rattus norvegicus) pasca
induksi panas.
1.3.2 Tujuan Khusus
1. Untuk mengetahui ketebalan epitel pada proses penyembuhan ulser
traumatik tikus putih (Rattus norvegicus) setelah diaplikasikan basis
gel tanpa getah buah nangka pada hari ke-3 dan hari ke-7
2. Untuk mengetahui ketebalan epitel pada proses penyembuhan ulser
traumatik tikus putih (Rattus norvegicus) setelah diaplikasikan gel
getah buah nangka (Artocarpus heterophyllus Lam.) dosis 0,5%,
1%, dan 2% pada hari ke-3 dan hari ke-7
3. Untuk menganalisa pengaruh pemberian gel getah buah nangka
(Artocarpus heterophyllus Lam.) dosis 0,5%, 1%, dan 2% terhadap
ketebalan epitel pada proses penyembuhan ulser traumatik tikus
putih (Rattus norvegicus) pada hari ke 3 dan 7.
-
5
4. Untuk mengetahui hubungan dosis pemberian gel getah buah
nangka (Artocarpus heterophyllus Lam.) terhadap ketebalan epitel
pada proses penyembuhan ulser traumatik tikus putih (Rattus
norvegicus).
1.4 Manfaat Penelitian
1.4.1 Manfaat Akademis
1. Dapat digunakan sebagai dasar teori untuk menambah
wawasan ilmu kedokteran gigi dalam pemanfaatan getah
nangka (Artocarpus heterophyllus Lam.).
2. Dapat digunakan sebagai dasar untuk pengembangan
penelitian selanjutnya dalam bidang kesehatan, khususnya
tentang penyembuhan ulser traumatik.
1.4.2 Manfaat Praktis
1. Dapat digunakan untuk meningkatkan pelayanan kesehatan
rongga mulut dengan menggunakan bahan alami yang sangat
mudah didapatkan oleh masyarakat.
2. Masyarakat dapat memanfaatkan bahan yang selama ini masih
sangat jarang digunakan, sehingga nilai guna getah nangka
bisa meningkat.
-
6
BAB II
TINJAUAN PUSTAKA
2.1 Ulser Traumatik
2.1.1 Definisi
Ulser mukosa adalah suatu kerusakan lapisan epitel yang ditutupi oleh
gumpalan fibrin, dengan warna kuning keputihan dan berbatas jelas (Greenberg
et al., 2008). Ulser merupakan lesi yang terbentuk oleh karena adanya
kerusakan lokal dari jaringan epitelium. Ulser yang terbentuk di mukosa mulut
merupakan gambaran lesi oral yang sangat umum dijumpai pada kebanyakan
orang di berbagai usia maupun jenis kelamin. Prevalensi terjadinya ulser adalah
25% dari populasi di dunia (Paleri et al., 2010).
Ulser traumatik adalah bentukan lesi ulseratif yang disebabkan oleh
karena adanya trauma mekanik, suhu, elektrik, maupun kimia. Lokasinya sering
berada pada mukosa pipi, mukosa bibir, palatum, dan tepi perifer dari lidah
(Neville et al., 2016).
2.1.2 Klasifikasi
Berdasarkan etiologinya, ulser traumatik dapat dibedakan menjadi:
a. Ulser traumatik mekanis
Ulser yang disebabkan oleh karena terjadinya trauma mekanis pada
mukosa oral kebanyakan sembuh dalam beberapa hari. Trauma mekanis yang
terjadi biasanya disebabkan karena permukaan yang tajam seperti tepi protesa,
alat ortodonti, tergigit secara tidak sengaja saat menyunyah, menyikat gigi yang
terlalu keras, tusuk gigi, atau alat makan seperti garpu. Ulser bersifat sakit,
-
7
dikelilingi oleh eritema, dasarnya ditutup oleh eksudat fibrous dan selanjutnya
terbentuk jaringan granulasi dan regenerasi epitel (Neville et al., 2016).
b. Ulser traumatik elektrik
Gambar 2.1. Ulser Traumatik akibat trauma elektrik (Neville et al., 2016)
Terdapat dua macam ulser traumatik elektrik, yaitu contact burns dan arc
type. Contact burns disebabkan oleh karena sengatan listrik secara langsung
dari sumber listrik ke tempat pijakan. Arus listrik tersebut bisa menyebabkan
serangan jantung dan bisa berakibat fatal. Pada arc type¸ saliva berperan
sebagai media penghantar listrik, dan arus listrik mengalir diantara sumber listrik
dan mulut. Pada rongga mulut, arc type ini terjadi lebih sering daripada contact
burns (Neville et al., 2016).
Sejumlah 90% dari kejadian ulser traumatik elektrik terjadi pada anak-
anak dengan umur kurang dari 4 tahun. Bagian dari rongga mulut yang paling
sering terkena adalah bibir, dengan melibatkan komisura bibir. Pada awalnya,
bagian yang terkena sengatan listrik seringkali tidak terasa sakit, hangus, berupa
daerah berwarna kekuningan dengan atau tanpa adanya perdarahan, dengan
pembengkakan yang dapat bertahan hingga 12 hari. Pada hari keempat, area
yang terkena sengatan listrik dapat menjadi nekrotik dan terkelupas. Gigi yang
berdekatan dengan daerah yang terkena bisa menjadi nonvital, dengan atau
-
8
tanpa adanya nekrosis pada tulang alveolar di sekelilingnya. Pasien yang
terkena sengatan listrik bertegangan tinggi bisa terkena paralisis nervus fasialis
yang proses penyembuhannya bisa dalam hitungan minggu sampai bulan
(Neville et al., 2016).
c. Ulser traumatik termal
Gambar 2.2. Ulser traumatik akibat makanan panas (Neville et al., 2016)
Sebagian besar ulser traumatik akibat termal pada rongga mulut
disebabkan karena makanan atau minuman yang panas. Biasanya, ulser
tersebut terjadi di palatum atau mukosa bukal posterior. Lesi ini tampak sebagai
zona eritema dan ulserasi dengan sisa epitel yang nekrotik di sekelilingnya.
(Neville et al., 2016).
Regezi et al. menyebutkan bahwa ulser traumatik dapat dibedakan
menjadi 2 macam berdasarkan perjalanan penyakitnya, yaitu:
a. Ulser traumatik akut
Ciri-ciri:
1) Nyeri
2) Memiliki dasar kekuningan dengan halo eritema
3) Ada riwayat trauma sebelumnya
4) Sembuh dalam kurun waktu 7-10 hari setelah faktor penyebabnya
dihilangkan
-
9
Gambar 2.3. Ulser traumatik akut (Regezi et al., 2012)
b. Ulser traumatik kronis
Ciri-ciri:
a. Nyeri ringan atau tidak nyeri sama sekali
b. Dasar kekuningan dengan tepi yang mengalami peninggian
c. Adanya riwayat trauma (jika pasien ingat)
d. Penyembuhannya lama jika teriritasi, khususnya jika terjadi di lidah
e. Gambaran klinisnya mirip dengan karsinoma atau ulser karena infeksi
f. Dapat disebabkan karena terdapat sisi yang tajam pada gigi, restorasi,
dan alat kedokteran gigi seperti gigi tiruan (Regezi et al., 2012; Anura,
2014)
Gambar 2.4. Ulser traumatik kronis (Regezi et al., 2012)
-
10
2.1.3 Gambaran Klinis
Ulser traumatik biasanya tampak sebagai lesi tunggal yang nyeri dengan
permukaan merah atau putih-kekuningan dan tepi kemerahan, serta memiliki
tekstur yang halus. Secara klinis, tampak adanya ulserasi dan nekrosis dari
mukosa dengan adanya riwayat trauma. Perluasan dan letak dari ulserasi
tergantung dari agen yang menjadi penyebab trauma, intensitas trauma, durasi,
serta adanya infeksi ada saat terjadinya trauma (Greenberg et al., 2008;
Laskaris, 2012).
2.1.4 Gambaran Histopatologi
Ulser yang akut memperlihatkan hilangnya epitel permukaan yang
digantikan dengan jaringan fibrin yang didominasi neutrofil. Dasar dari ulser
mengandung pembuluh kapiler yang terdilatasi, yang selanjutnya diisi oleh
jaringan granulasi. Reepitelisasi dimulai dari tepi ulserasi, dengan sel-sel yang
berproliferasi diatas jaringan granulasi dan dibawah jaringan fibrin (Regezi et al.,
2012).
Pada ulser kronis, terjadi pembentukan jaringan granulasi dengan adanya
jaringan parut pada bagian dalam luka. Terlihat infiltrasi dari sel radang akut dan
kronis. Reepitelisasi terkadang gagal terbentuk karena trauma yang terjadi terus
menerus atau faktor lokal yang kurang menguntungkan. Hal ini kemungkinan
terjadi karena kurangnya ekspresi molekul adhesi (integrin), dan/atau kurangnya
reseptor matriks ekstraseluler terhadap integrin keratinosit. Pada granuloma
traumatik, jejas pada jaringan dan inflamasi dapat menyebar pada otot skeletal
disekelilingnya. Secara histologis, ciri khasnya berupa dominasi dari infiltrasi
makrofag dan eosinofil (Regezi et al., 2012).
-
11
Gambar 2.5 Gambaran histopatologis mukosa bukal tikus yang dilakukan ulserasi
satu hari sebelumnya (Cavalcante et al., 2011)
Gambar 2.6. Gambaran histopatologis ulser kronis (Regezi et al., 2012)
2.1.5 Diagnosis Banding
Diagnosis banding dari ulser traumatik adalah karsinoma sel skuamosa
dan kanker lainnya, sifilis, tuberkulosis, aphthae, eosinofilik, dan ulser lainnya
(Laskaris, 2012).
2.1.6 Penatalaksanaan
Eliminasi faktor penyebab harus dilakukan pada ulser traumatik yang
pencetusnya jelas. Anestesi topikal atau pemberian lapisan pelindung dapat
diaplikasikan sebagai penghilang nyeri sementara. Apabila faktor pencetus
trauma tidak jelas atau lesi tidak merespon terhadap perawatan, maka
diindikasikan untuk dilakukan biopsi (Neville et al., 2016). Sebagian besar dari
lesi ulser pada membran mukosa rongga mulut cukup diobservasi
penyembuhannya saja. Namun, jika terdapat nyeri yang sangat mengganggu,
-
12
dapat diberikan perawatan secara topikal seperti kortikosteroid topikal (Regezi et
al., 2012).
2.2 Penyembuhan Luka
2.2.1 Definisi
Luka terjadi karena rusaknya struktur dan fungsi anatomis normal akibat
proses patologis yang berasal dari internal maupun eksternal yang mengenai
organ tertentu. Efek yang akan muncul ketika terdapat luka antara lain
kehilangan seluruh atau sebagian fungsi organ, perdarahan dan pembekuan
darah, kontaminasi bakteri serta kematian sel. Luka yang tidak sembuh dalam
waktu yang lama dikhawatirkan mengalami komplikasi (Setyarini et.al., 2013)
Proses penyembuhan luka adalah proses penggantian dan perbaikan
fungsi dari jaringan yang rusak. Sifat penyembuhan pada semua luka bervariasi,
bergantung pada lokasi, keparahan, dan luas cedera (Hardjito et.al., 2012).
Penyembuhan luka merupakan sebuah proses transisi yang merupakan salah
satu proses paling kompleks dalam fisiologi manusia yang melibatkan
serangkaian reaksi dan interaksi kompleks antara sel dan mediator (Prasetyono,
2009).
2.2.2 Proses Penyembuhan Luka
Proses penyembuhan luka terdiri dari tiga fase yaitu, hemostasis dan
inflamasi, proliferasi, dan remodeling jaringan (van Neck et al., 2012). Urutan dari
ketiga fase tersebut mengikuti dari fase yang terjadi sebelumnya, namun juga
tumpang tindih dalam satu waktu. Durasi dari setiap fase tergantung pada ukuran
luka (Larjava et al., 2012)
-
13
Gambar 2.7. Fase yang terjadi dalam penyembuhan luka (Larjava et al., 2012)
2.2.2.1 Fase Hemostasis dan Inflamasi
Hemostasis dan inflamasi terjadi segera setelah luka terbentuk.
Tujuannya adalah untuk mencegah perdarahan dan keluarnya cairan yang terlalu
banyak, serta sebagai penghalang dari invasi mikroorganisme. Hemostasis
didapatkan melalui vasokonstriksi dan pembekuan darah. Proses pembekuan
darah bermula dari terbentuknya platelet plug yang diikuti dengan bekuan fibrin¸
yang menyediakan matriks sementara untuk migrasi sel. Platelet juga
menghasilkan beberapa growth factor dan sitokin, diantaranya fibroblast growth
factor (FGF), epidermal growth factor (EGF), platelet derived growth factor
(PDGF), transforming growth factor beta (TGF-β), dan vascular endothelial
growth factor (VEGF). Faktor-faktor ini berada di dalam bekuan fibrin dan
berfungsi sebagai promotor proses penyembuhan luka dengan merekrut sel-sel
inflamasi ke arah terjadinya luka dan menginisisasi angiogenesis (van Neck et
al., 2012).
-
14
Setelah perdarahan dapat dikontrol, dimulailah fase inflamasi. Fase
inflamasi adalah reaksi pertahanan jaringan hidup terhadap semua bentuk luka
dengan melibatkan fungsi darah dan pembuluh darah, saraf, limfa, cairan, serta
sel-sel di sekitar luka. Proses ini akan memusnahkan, melarutkan, atau
membatasi agen-agen penyebab infeksi sekaligus merintis jalan untuk proses
perbaikan atau pemulihan terhadap jaringan yang rusak (Abdurrahmat, 2014).
Mikroorganisme patogen yang memasuki jaringan melalui luka yang
terbuka akan mengaktifkan sistem komplemen dalam tubuh. Glikoprotein
permukaan sel mikroorganisme yang masuk ke daerah luka akan berakibat
dilepaskannya opsonin, histamin, chemotoxin, dan kinin oleh sistem komplemen,
yang akan menyebabkan vasodilatasi kapiler, meningkatkan permeabilitas
kapiler, sehingga sejumlah protein plasma dan sel darah akan keluar dari kapiler
darah menuju tempat terjadinya infeksi atau jejas (Abdurrahmat, 2014; Kumar,
2013).
Pada awal proses peradangan (30 menit-1 jam), neutrofil akan melakukan
fagositosis dengan cepat dan selanjutnya mati akibat mikroorganisme yang
memiliki virulensi yang lebih tinggi dari neutrofil. Pada tahap berikutnya monosit
yang telah sampai ke daerah luka akan berubah menjadi makrofag dan
mengganti kedudukan neutrofil untuk melakukan fagositosis. Monosit memiliki
ukuran yang lebih besar serta kemampuan fagositosis yang lebih tinggi daripada
neutrofil sehingga lebih banyak mikroorganisme yang dapat dibunuh. Tahap
inflamasi ini dapat berlangsung antara 1 sampai dengan 4 hari, tergantung dari
besarnya luka serta tingkat kontaminasi mikroorganisme atau tingkat infeksi yang
terjadi pada luka tersebut (Abdurrahmat, 2014).
-
15
2.2.2.2 Fase proliferasi
Setelah stimulus penyebab luka dihentikan, hemostasis tercapai, respon
inflamasi terlaksana, dan luka bebas dari debris, barulah fase proliferasi dapat
dimulai untuk memperbaiki defek. Fase ini ditandai dengan angiogenesis, migrasi
fibroblas, pembentukan jaringan granulasi, dan reepitelisasi. Pada tahap lanjutan
dari fase proliferasi ini, matriks fibrin/fibronectin provisional akan digantikan oleh
jaringan granulasi yang baru (Young et al., 2011; van Neck et al., 2012).
a. Angiogenesis
Angiogenesis adalah proses pembentukan pembuluh darah baru dari
pembuluh darah yang sudah ada, khususnya dari venula. Angiogenesis dipicu
sejak saat bekuan fibrin melepas TGF-β, Platelet-Derived Growth Faktor (PDGF)
dan Fibroblast Growth Factor (FGF). Dalam menanggapi hipoksia, Vascular
Endothelial Growth Factor (VEGF) dilepaskan dan dengan kombinasi dengan
sitokin lain, akan menginduksi sel endotel untuk memicu neovaskularisasi dan
perbaikan pembuluh darah yang rusak (Young et al., 2011). Proses
neovaskularisasi mencapai puncaknya pada hari ke-5 setelah terjadi luka.
Tahapan yang terjadi dalam perkembangan pembuluh darah kapiler baru
menurut Kumar et al. (2013) adalah:
1) Vasodilatasi sebagai respon dari NO dan peningkatan permeabilitas yang
diinduksi VEGF
2) Separasi perisit dari permukaan abluminal (luar) pembuluh darah
3) Migrasi sel endotel menuju daerah perlukaan
4) Proliferasi sel endotel
5) Remodeling menjadi kapiler
-
16
6) Perekrutan sel periendotel (perisit pada kapiler kecil dan sel otot halus
pada pembuluh yang lebih besar) untuk menyokong pembuluh endotel
7) Supresi proliferasi endotel, serta migrasi dan deposisi membran basal.
Awalnya pusat luka relatif avaskular, sehingga hanya mengandalkan
difusi darah dari kapiler yang rusak di tepi luka. Sebagai hasil dari proses
angiogenesis, terbentuklah jaringan pembuluh darah kapiler di seluruh bagian
yang mengalami luka, yang berasal dari cabang pembuluh darah yang sehat.
Kapiler yang rapuh dan permeabel memberikan kontribusi lebih lanjut pada
edema jaringan dan wujud dari jaringan granulasi (Young et al., 2011).
b. Migrasi fibroblas
Migrasi fibroblas terjadi pada hari kedua hingga keempat setelah
perlukaan. Fibroblas dirangsang untuk berproliferasi oleh faktor pertumbuhan
(terutama oleh TGF-β, dan PDGF), dan kemudian bermigrasi ke tempat
terjadinya luka dan mendominasi populasi sel selama satu minggu pertama.
Pada area perlukaan, fibroblas berproliferasi dan memproduksi beberapa
molekul struktural, termasuk fibrin, fibronektin, glikosaminoglikan (GAGs), dan
selanjutnya diikuti pembentukan kolagen. Komponen-komponen ini membentuk
matriks provisional berdasar fibrin/fibronektin, yang berperan dalam
pembentukan jaringan granulasi yang menggantikan bekuan fibrin (van Neck et
al., 2012; Young et al., 2011).
Pembentukan jaringan granulasi dimulai 3 sampai 5 hari setelah
terbentuknya luka dan dicirikan dengan adanya angiogenesis. Pembuluh kapiler
yang baru akan menginvasi matriks fibrin/fibronectin sementara dalam waktu
beberapa hari, yang kemudian membentuk sebuah jejaring mikrovaskular yang
disebut dengan stroma vaskular. Stroma ini, bersama dengan makrofag dan
-
17
fibroblas, akan membentuk jaringan granulasi akut sebagai pengganti dari
matriks fibrin/fibronektin sementara. Kemudian, kolagen akan terakumulasi dan
angiogenesis berkurang sehingga kepadatan jejaring mirovaskular akan hilang
(van Neck et al., 2012).
Jaringan granulasi terdiri dari berbagai tipe kolagen (mayoritas kolagen
tipe 3) dibandingkan dengan jaringan yang tidak mengalami luka. Setelah matriks
cukup terbentuk, fibroblas akan berubah menjadi fenotip myofibroblas dan
mengembangkan pseudopodia (kaki semu) untuk menghubungkan ke fibronektin
dan kolagen serta membantu dalam kontraksi luka. Kolagen yang disintesis oleh
fibroblas merupakan kunci dari kuatnya jaringan yang terbentuk (Young et al.,
2011).
c. Reepitelisasi
Penyembuhan luka sangat dipengaruhi oleh reepitelisasi, karena semakin
cepat proses reepitelisasi maka semakin cepat pula luka tertutup sehingga
semakin cepat penyembuhan luka (Prasetyo et al., 2010). Secara umum,
reepitelisasi melibatkan beberapa proses, yaitu migrasi keratinosit epitel dari tepi
luka, proliferasi keratinosit yang digunakan untuk menambah epithelial tongue
yang meningkat dan bermigrasi, diferensiasi neo-epitelium menjadi epitel yang
berlapis, pengembalian zona membran basal yang utuh yang menghubungkan
epitel dengan dermis di bawahnya, dan repopulasi sel-sel khusus yang mengatur
fungsi sensoris (sel Merkel), pigmentasi (melanosit), dan fungsi imun (sel
Langerhans) (Widagdo, 2004).
Jaringan epitel terpisah dari jaringan ikat dibawahnya oleh sebuah
membran basal yang dilekatkan via hemidesmosom. Pada saat terjadi reaksi
inflamasi tahap awal, sitokin-sitokin proinflamasi dan faktor pertumbuhan yakni
-
18
FGF, EGF, TGF-β, TGF-α, IGF-1, dan HGF, akan menginisiasi pengaktifan sel-
sel keratinosit di membran basal. Keratinosit kemudian mengalami perubahan
fenotip parsial yang mengakibatkan bentuknya menjadi lebih datar dan motil,
sehingga sel epitel pada tepi luka mulai melepaskan perlekatan
hemidesmosomnya dan menunjukkan tanda-tanda pertama migrasi ke arah
lateral. Studi histologis menunjukkan bahwa migrasi keratinosit dari ujung luka
menuju matriks provisional ini berlangsung selama 24 jam pertama terjadinya
luka (Larjava et al., 2012).
Keratinosit mulai bergerak ke area luka pada 24 jam setelah perlukaan.
Selama migrasi, keratinosit bergerak secara lateral dan meregenerasi membran
basal. Sel epitel bermigrasi melalui matriks fibrin-fibronektin provisional sampai
sel-sel tersebut bertemu dengan sel epitel dari ujung lainnya. Migrasi ini
merupakan proses yang kompleks yang bergantung pada reseptor permukaan
sel integrin. Ekspresi dari integrin menyediakan kekuatan adhesi yang optimal
pada sel-sel yang bermigrasi terhadap matriks ekstraselular (Larjava, 2012; van
Neck et al., 2012).
Setelah epitel yang bermigrasi bergabung dengan sisi lainnya dan
permukaan luka telah tertutup, migrasi epitel berhenti karena penghambatan
kontak. Pada tahap ini sudah terbentuklah epitel berlapis dengan disertai
membran basal. Proses reepitelisasi ini berlangsung kurang dari 48 jam pada
luka sayatan, namun bisa memakan waktu yang lebih lama pada kasus dengan
defek yang lebih luas. Proses reepitelisasi yang sempurna biasanya tercapai
dalam waktu 14 hari. Pembentukan jaringan granulasi dan remodeling akan tetap
berjalan setelah proses reepitelisasi selesai (Larjava et al, 2012; Regan et al.,
2011).
-
19
Gambar 2.8 Reepitelisasi pada penyembuhan luka (Schäfer&Werner, 2008)
d. Kontraksi luka
Luka mulai berkontraksi pada hari ke-7 setelah terjadinya luka, yang
utamanya dimediasi oleh myofibroblast. Myofibroblas adalah fibroblast yang
memilki mikrofilamen intraseluler aktin sehingga memiliki kemampuan untuk
mengkontraksi matriks. Myofibroblas dapat mengonstriksikan luka dengan
bantuan interaksi spesifik antara integrin dan matriks kolagen. Interaksi antara
aktin dan myosin menyebabkan badan sel terletak lebih berdekatan sehingga
memperkecil area jaringan yang harus mengalami perbaikan dari luka, dan
-
20
sebagai pelindung dari faktor-faktor yang dapat mengganggu proses
penyembuhan (Young et al., 2011; Regan et al., 2011).
2.2.2.3 Remodeling jaringan/ Fase Maturasi
Fase remodeling jaringan adalah tahap akhir dan paling panjang dari
proses penyembuhan luka. Fase ini dimulai pada saat fase proliferasi sedang
berlangsung, dari hari ke-7 hingga bisa mencapai satu tahun setelahnya. Pada
fase ini, terjadi remodeling dari jaringan granulasi dibawah lapisan epitel yang
baru. Remodeling jaringan akan terjadi ketika terjadi homeostasis antara sintesis
dan degradasi kolagen (Prasetyono, 2009).
Kolagen tipe 3 yang terbentuk dan didepositkan oleh fibroblas selama
fase proliferasi akan digantikan oleh kolagen tipe 1 selama beberapa bulan
selanjutnya, melalui proses lambat dari degradasi kolagen tipe 3. Degradasi ini
dimediasi oleh matriks metalloproteinase (MMP) yang disekresikan oleh
makrofag, fibroblas, dan sel-sel endotel. Kekuatan tensil dari luka akan
meningkat secara perlahan, menunjukkan pergantian dari tipe kolagen dan
meningkatnya persilangan kolagen. Saat berawalnya fase maturasi, kekuatan
dari luka hanya 20%-30% dari jaringan normal, yang kemudian akan meningkat
menjadi 70%-80% saat fase remodeling berakhir (Prasetyono, 2009).
2.3 Jaringan Epitel Rongga Mulut
Mukosa mulut mengandung dua lapisan yaitu lapisan epitel dan jaringan
pengikat (lamina propria). Epitel mulut merupakan epitel berlapis pipih yang
merupakan lapisan terluar dari mukosa mulut, sedangkan lamina propria
merupakan lapisan serat-serat yang saling terikat dan berfungsi memberikan
kekuatan pada epitel. Lamina propria mengandung pembuluh darah, kelenjar
saliva minor, saraf, fibroblas,dan sel-sel lainnya. Sel-sel epitel sebagian besar
-
21
merupakan sel keratosit, yang apabila mengalami proses pematangan, maka sel
tersebut akan terdorong ke permukaan atas. Proses ini berasal dari mitosis yang
terjadi pada sel epitel mukosa. Sel-sel epitel yang terdorong ke lapisan paing
atas tidak mempunyai inti dan selnya semakin tipis. Epitel mukosa mulut
merupakan susunan lapisan sel yang berbeda karena mengalami proses mitosis
sel yang terus menerus. Setiap sel dalam tubuh mempunyai pola pematangan
tertentu, demikian pula mukosa mulut mempunyai waktu pergantian yang
khusus. Waktu pergantian jaringan epitel mukosa mulut antara 14 sampai 24 hari
(Yohana et al., 2015).
Sel-sel epitel mukosa mulut tersusun dari 4 lapisan secara berurutan dari
yang paling dalam ke permukaan, yaitu lapisan geminativum/basalis, lapisan
spinosum, lapisan granulosum, dan lapisan corneum. Stratum basalis
mengandung sel-sel induk yang bermitosis secara berkelanjutan dan anak
selnya ditransfer ke lapisan yang lebih superfisial. Lapisan ini terdiri dari selapis
sel berbentuk kubus yang berbatasan dengan lamina propia. Stratum spinosum
memiliki karakteristik sel yang mulai matang dan terdiri dari beberapa lapis sel
berbentuk bulat/oval. Stratum granulosum lebih matang dari stratum spinosum
dan mengandung granula keratohyalin yang banyak sebagai bakal sel keratin.
Lapisan ini terdiri dari beberapa lapis sel yang lebih gepeng. Stratum corneum
terdiri dari selapis/ berlapis-lapis sel berbentuk pipih yang tidak berstuktur dan
tidak memiliki inti sel (Jones et al., 2013).
Berdasarkan struktur perbedaan regional, diferensiasi, dan kecepatan
penggantian sel, maka mukosa mulut mamalia dapat dikelompokkan menjadi 3
tipe yaitu mukosa pengunyahan (masticatory), mukosa penutup (lining), dan
mukosa khusus (specialized). Lokasi mukosa pengunyahan pada regio rongga
-
22
mulut yang menerima tekanan kunyah seperti gingiva dan palatum durum.
Jaringan epitelnya parakeratinised (mempunyai lapisan keratin tipis yang
beberapa selnya masih memiliki inti sel yang tidak sempurna). Lokasi mukosa
penutup berada pada dasar mulut, permukaan inferior lidah, permukaan dalam
bibir dan pipi, palatum molle dan mukosa alveolaris kecuali gingiva. Tipe
epitelnya nonkeratinised (tidak memiliki lapisan keratin). Mukosa khusus berada
pada dorsum lidah dan berfungsi untuk pengecapan, dengan tipe epitel
ortokeratinised (memiliki lapisan keratin yang tebal yang terdiri dari sel-sel yang
sudah tidak berinti. (Jones et al., 2013).
Gambar 2.9 Lapisan-lapisan pada epitel mukosa rongga mulut manusiaberdasarkan tipenya (a) ortokeratinised (b) parakeratinized (c) nonkeratinised
(Squier&Brogden, 2010)
-
23
2.4 Nangka (Artocarpus heterophyllus)
Tanaman nangka merupakan jenis tanaman yang banyak berada di
daerah tropis, seperti di Indonesia. Seluruh bagian dari tanaman nangka memiliki
khasiat sebagai pengobatan tradisional, diantaranya sebagai pengobatan
demam, luka, penyakit kulit, konvulsi, diuretik, konstipasi, penyakit mata, gigitan
ular, dan lain-lain (Prakash et al., 2009).
Gambar 2.10. Buah Nangka (Elevitch et al., 2006)
2.4.1 Taksonomi
Taksonomi nangka adalah sebagai berikut:
Kingdom :Plantae
Subkingdom :Tracheobionta
Divisi :Magnoliophyta
Kelas :Magnoliopsida
Subkelas :Hamamelidae
Ordo :Urticales
Famili :Moraceae
Genus :Artocarpus
Spesies :Artocarpus heterophyllus Lam.
-
24
2.4.2 Morfologi
Tanaman nangka merupakan tanaman buah tahunan yang berkerabat
dekat dengan cempedak, kluwih, dan sukun. Umur tanamannya panjang, dapat
mencapai puluhan tahun. Tinggi tanaman dapat mencapai 25 m. Panjang buah
nangka berkisar 30-90 cm, diameter 25-50 cm, dengan berat rata – rata 15-20
kg, walaupun ada yang menghasilkan 60 buah per pohon per tahun.
2.4.3 Habitat dan Daerah Distribusi
Tanaman nangka diperkirakan berasal dari hutan hujan di Malaysia dan
Ghat Barat di India, dan juga ditemukan di Afrika tengah dan timur, Asia
tenggara, kepulauan Karibia, Brazil, Australia, Puerto Rico, dan kepulauan
Pasifik (Madhavi et al., 2013).
2.4.4 Kandungan
Sejumlah penelitian telah menunjukkan bahwa tanaman nangka
mengandung berbagai macam senyawa, diantaranya karotenoid, flavanoid,
volatile acids sterols dan tanin, dengan konsentrasi yang bervariasi tergantung
varietasnya (Arora, 2016).
Tabel 2.1 Kandungan Artocarpus heterophyllus Lam. (Arora et al., 2016)
-
25
2.4.5 Sifat dan Khasiat
Tumbuhan nangka dilaporkan memiliki sifat antibakteri, antiinflamasi,
antidiabetes, antioksidan, dan sifat sebagai immunomodulator. Artocarpus
heterophyllus dapat digunakan sebagai pengobatan untuk demam, luka, penyakit
kulit, konvulsi, diuretik, konstipasi, penyakit mata, gigitan ular, dan lain
sebagainya (Prakash et.al., 2009).
Ekstrak etanol, metanol, dan kloroform dari getah buah nangka memiliki
kemampuan sebagai antimikroba. Zat tersebut secara teori efektif terhadap
penyembuhan luka dengan cara mencegah infeksi, dan mencegah meluasnya
luka akibat toksik bakteri. Antimikroba pada getah buah nangka reaktif terhadap
beberapa bakteri dan jamur gram positif (Bacillus cereus, Bacillus subtillis dan
Staphylococcus aureus), gram negatif (Escherichia coli dan Pseudomonas
aeurignosa), dan jamur yakni Aspergillus flavus, Aspergillus niger, Candida
albicans and Saccharomyces cerevisiae (Madhavi et al., 2010).
-
26
Tabel 2.2 Aktivitas Farmakologik Artocarpus heterophyllus Lam.
(Arora et al., 2016)
2.4.6 Getah nangka
Gambar 2.11 Getah buah nangka
Getah pada tanaman nangka dapat ditemukan pada seluruh bagian dari
tanaman ini. Penggunaan getah nangka diantaranya adalah sebagai bahan
kosmetik, obat-obatan, dan industri pangan. Getah nangka telah dijadikan
sebagai obat tradisional karena memiliki sifat mempercepat terbentuknya bekuan
darah, berperan dalam homeostasis, penyembuhan luka, dan sebagai
antimikroba (Madhavi et al., 2013).
-
27
2.4.7 Kandungan Getah Nangka
Penelitian yang dilakukan oleh Madhavi (2013) menunjukkan bahwa
ekstrak getah nangka memiliki kandungan fenol, flavonoid, tanin, protein,
karbohidrat, glikosida, dan alkaloid dalam jumlah yang berarti. Dalam penelitian
tersebut juga dapat diketahui bahwa ekstrak getah nangka memilik sifat
antimikroba dan antijamur yang signifikan, apabila dibandingkan dengan obat-
obatan antibakteri dan antijamur standar. Jumlah total dari kandungan flavonoid
berkisar antara 7.76±0.15to7.63±0.45µg/gm, yang setara dengan kandungan
quercetin dalam mg. Jumlah total dari kandungan tanin setara dengan
kandungan asam tanat dalam mg, yaitu 2.13±0.15 to1.76±0.05 µg /gm. Jumlah
total dari alkaloid setara dengan kandungan boldine dalam mg, 8.56±0.30to
7.26±0.25 mg/gm.
Penelitian sebelumnya yang dilakukan oleh Stefanus (2015) dan
Siswanto (2015) menunjukkan efektivitas gel getah buah nangka sebagai
antijerawat secara in vitro dan in vivo. Buah nangka termasuk ke dalam salah
satu famili dan genus yang menghasilkan berbagai jenis senyawa flavonoid,
tanin, dan alkaloid.
a. Flavonoid
Flavonoid termasuk senyawa fenolik alam yang potensial sebagai
antioksidan dan mempunyai bioaktivitas sebagai obat. Flavonoid bermanfaat
untuk melindungi struktur sel, meningkatkan efektivitas vitamin C, mencegah
keropos tulang, sebagai astringen, antiinflamasi, dan antibiotik (Redha, 2010).
Peran flavonoid dalam penyembuhan luka disebutkan karena memiliki sifat
astringen dan antimikroba, yang akan membantu dalam kontraksi luka dan
peningkatan kecepatan epitelisasi (Soni et al., 2012).
-
28
Flavonoid memiliki kemampuan imunomodulator yang mampu
meningkatkan produksi IL-2 (Interleukin-2) yang merangsang proliferasi dan
diferensiasi sel T, sel B, dan sel NK (Parlinaningrum dkk, 2014). Sel T kemudian
berdiferensiasi menjadi Th1 yang mensekresi berbagai macam produk seperti
IFN-, sitokin yang berperan dalam proses inflamasi, aktivasi makrofag, dan
mitogen fibroblas (Kumar et al., 2013). Makrofag yang aktif berfungsi untuk
melakukan fagositosis, memproduksi sitokin, perbaikan jaringan (fibroblast
stimulating factor, fibronektin, kolagenase), dan memproduksi hormon
pertumbuhan (growth factor). Growth factor ini bertanggung jawab atas terjadinya
inflamasi dan proses mitogen fibroblas yang penting dalam proses penyembuhan
luka (Napanggala et al., 2014).
Aktivitas antiinflamasi flavonoid dilakukan melalui penghambatan
siklooksigenase dan lipoksigenase sehingga terjadi pembatasan jumlah sel
inflamasi yang bermigrasi ke jaringan perlukaan, sehingga reaksi inflamasi akan
berlangsung lebih singkat dan kemampuan proliferatif dari TGF-β tidak
terhambat. Proses ini mengakibatkan fase proliferasi dapat segera terjadi
(Napanggala et al., 2014).
Kandungan flavanoid yang terkandung dalam getah merupakan
antioksidan kuat yang mampu merangsang dan meningkatkan kecepatan
epitelisasi serta mengurangi lipid peroksidasi. Penurunan lipid peroksidasi oleh
flavonoid akan mencegah nekrosis, memperbaiki vaskularisasi, dan
meningkatkan viabilitas kolagen dengan meningkatkan kekuatan anyaman
kolagen. Sebagai antioksidan, flavonoid dapat meningkatkan level enzim
antioksidan pada jaringan granulasi. Flavonoid juga bekerja dalam proses
-
29
membunuh atau menghambat pertumbuhan mikroorganisme pada jaringan yang
hidup seperti pada kulit dan membran mukosa (Rupina dkk, 2016).
b. Tanin
Pada proses penyembuhan luka, tanin berperan sebagai anti radikal
bebas dan antimikroba yang membantu dalam kontraksi luka dan peningkatan
kecepatan epitelisasi. Radikal bebas dapat menjadi salah satu faktor yang
menyebabkan tertundanya penyembuhan luka. Oleh karena itu, ekstrak herbal
yang mengandung antioksidan dan antimikroba bisa menjadi terapi yang baik
untuk mempercepat penyembuhan luka (Thakur et al., 2011).
c. Alkaloid
Alkaloid merupakan suatu golongan senyawa organik yang terbanyak
ditemukan di alam. Alkaloid merupakan salah satu metabolit sekunder yang
terdapat pada tumbuhan, yang bisa dijumpai pada bagian daun, ranting, biji, dan
kulit batang. Semua alkaloid mengandung atom nitrogen yang bersifat basa dan
merupakan bagian dari cincin heterosiklik. Alkaloid mempunyai kegiatan fisiologi
yang menonjol dan sering digunakan secara luas dalam bidang pengobatan
(Nilda dkk, 2011).
Alkaloid dapat berfungsi sebagai zat antioksidan (Hanani dkk, 2005).
Pengaruh alkaloid dalam bidang kesehatan dapat berupa pemicu sistem saraf,
menaikkan tekanan darah, mengurangi rasa sakit, antimikroba, obat penenang,
obat penyakit jantung dan lain-lain lain (Simbala, 2009).
d. Artocarpain H
Ekstrak getah tanaman nangka mengandung protease yakni Artocarpain-H
yang dilaporkan memiliki aktivitas analgesik dan antiinflamasi. Efek antiinflamasi
yang signifikan oleh Artocarpain-H ini dapat dikarenakan adanya
-
30
pemghambatan mediator inflamasi seperti histamin, serotonin, dan prostaglandin.
Hasil penelitian menunjukkan bahwa kandungan Artocarpain-H dapat berfungsi
sebagai agen terapeutik yang efektif untuk kondisi inflamasi akut (Chanda et al.,
2009)
2.5 Gel
Gel merupakan suatu sediaan semipadat yang jernih, tembus cahaya dan
mengandung zat aktif, merupakan dispersi koloid yang mempunyai kekuatan
yang disebabkan jaringan material saling berikatan pada fase terdispersi. Gel
bermanfaat pada pengobatan karena kemampuan bahan ini untuk berikatan
dengan mukosa membran. Obat topikal dengan sediaan gel lebih baik dan dapat
diterima karena lebih mudah diaplikasikan. Sediaan gel akan tetap melekat pada
mukosa cukup lama. Perlekatan obat yang cukup lama akan mempermudah
penetrasi obat ke lesi dan melindungi lesi dari kontaminasi benda asing (BPOM,
2015). Formulasi gel yang baik dilihat berdasarkan sifat fisik sediaan gel, yaitu
pH, daya lekat, daya sebar, homogenitas dan viskositas (Husnani, 2017) .
2.6 Tikus Putih (Rattus norvegicus)
Hewan laboratorium atau hewan percobaan adalah hewan yang sengaja
dipelihara dan diternakkan untuk dipakai sebagai hewan model guna
mempelajari dan mengembangkan berbagai macam bidang ilmu dalam skala
penelitian atau pengamatan laboratoris. Tikus putih (Rattus norvegicus) banyak
digunakan sebagai hewan percobaan pada berbagai penelitian (Widiartini et. al,
2013).
-
31
Menurut Krinke (2000), klasifikasi tikus putih (Rattus norvegicus) adalah
sebagai berikut:
Kingdom : Animalia
Phylum : Chodata
Subphylum : Vertebrata
Class : Mammalia
Order : Rodentia
Family : Muridae
Genus : Rattus
Soecias : norvegicus
‘
Gambar 2.9. Rattus norvegicus (Al-Hajj et al., 2016)
Keunggulan tikus putih dibandingkan tikus liar antara lain lebih cepat
dewasa, tidak memperlihatkan perkawinan musiman, dan umumnya lebih cepat
berkembang biak. Kelebihan lainnya sebagai hewan laboratorium adalah sangat
mudah ditangani, dapat ditinggal sendirian dalam kandang asal dapat
mendengar suara tikus lain dan berukuran cukup besar sehingga memudahkan
penelitian. Biasanya pada umur empat minggu beratnya 35-40 g, dan berat
dewasa rata-rata 200-250 g, tetapi bervariasi tergantung pada galurnya.
-
32
Beberapa galur tikus yang sering digunakan dalam penelitian antara lain galur
Wistar, Sprague-Dawley, Long Evans, dan Holdzman (Widiartini dkk, 2013).
Tikus putih (Rattus norvegicus) strain wistar dipilih sebagai sampel
karena tikus merupakan hewan coba yang tergolong jinak, mudah diperoleh
dalam jumlah banyak, mempunyai respon yang lebih cepat, mudah
perawatannya, dan fungsi metabolismenya mirip dengan manusia serta harganya
lebih terjangkau dibandingkan dengan menggunakan marmot (Cavia cobaya).
Para ilmuwan telah memunculkan banyak strain atau galur tikus khusus untuk
eksperimen. Sebagian besar berasal dari tikus Wistar albino, yang masih
digunakan secara luas (Sulistiawati, 2011).
-
33
BAB III
KERANGKA KONSEP
3.1 Kerangka Konsep
Keterangan:
: Alur yang diteliti
: Alur yang tidak diteliti
: Meningkat akibat kandungan dalam gel getah buah nangka
: Variabel yang diteliti
: Variabel yang tidak diteliti
Fase inflamasi
Ulser traumatik
Gel getah buah nangka
Flavonoid Alkaloid Tanin
Artocarpain-H IL-6, IL-1, TNF-α,
TGF-β, EGF, FGF, VEGF, PDGF ↑
Angiogenesis ↑
Epitelisasi ↑
Fibroblast ↑
Kolagen ↑
Fase remodeling
Penyembuhan luka
-
34
Proses penyembuhan luka pada ulser traumatik diawali dengan proses
hemostasis dan inflamasi, yang diikuti fase proliferasi dan fase maturasi
(remodeling) jaringan. Flavonoid yang terkandung dalam getah buah nangka
memiliki kemampuan sebagai imunomodulator, yang akan merangsang sel-sel
inflamasi untuk mesekresikan sitokin dan growth factor yang penting dalam
proses penyembuhan luka. Flavonoid dan artocarpain-H berperan sebagai
anttinflamasi, sehingga reaksi inflamasi akan berlangsung lebih singkat dan fase
proliferasi dapat terjadi lebih cepat (Napanggala et al., 2014; Chanda, 2009).
Hemostasis terjadi melalui vasokonstriksi dan pembekuan darah. Setelah
didapatkan keadaan hemostasis, terjadi fase inflamasi dimana neutrofil dan
monosit yang kemudian digantikan oleh makrofag bergerak menuju tempat
terjadinya luka. Aktivasi platelet dan makrofag menyebabkan pelepasan berbagai
faktor pertumbuhan dan sitokin yang berpengaruh terhadap penyembuhan luka
(Li et. al., 2007).
Faktor pertumbuhan berupa FGF,TGF-β, dan EGF-α akan menstimulasi
kemotaksis dan proliferasi fibroblast, yang akan mensintesis kolagen dan matriks
ekstraseluler baru. Sedangkan VEGF, PDGF, dan FGF akan menstimulasi
proliferasi endotel yang berpengaruh dalam proses pembentukan pembuluh
darah baru. Semua proses ini, disertai Keratinocyte Growth Factors (KGF) dan
IL-6 yang menarik keratinosit untuk bermigrasi, akan meningkatkan kecepatan
epitelisasi jaringan luka (van Neck et al., 2012).
Selain itu, flavonoid, tanin, dan alkaloid yang terkandung dalam getah
buah nangka juga berperan sebagai antioksidan dan antimikroba, yang
-
35
membantu dalam kontraksi luka serta merangsang dan meningkatkan kecepatan
epitelisasi, angiogenesis, dan proliferasi fibroblas (Rupina et al., 2016).
Penelitian ini akan menguji pengaruh pemberian gel getah buah nangka
(Artocarpus heterophyllus Lam.) dalam mempercepat proses reepitelisasi.
Pemberian gel getah buah nangka akan mempengaruhi kecepatan dari
pembentukan jaringan baru dan berdampak pada semakin cepatnya proses
penyembuhan luka pada ulser traumatik tikus putih (Rattus norvegicus).
3.2 Hipotesis Penelitian
Gel getah buah nangka (Artocarpus heterophyllus Lam.) berpengaruh
terhadap ketebalan epitel pada proses penyembuhan ulser traumatik tikus putih
(Rattus norvegicus).
-
36
BAB IV
METODE PENELITIAN
4.1 Desain Penelitian
Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental murni dengan
Randomized Post Test Only Control Group Design. Subjek dibagi menjadi 8
kelompok dalam 2 time series secara random, dengan tiap kelompok terdiri dari 5
ekor tikus. Kelompok I merupakan kelompok kontrol yang diberikan senyawa
pembawa gel tanpa getah, kelompok II, III, dan IV merupakan kelompok
perlakuan yang masing-masing diberi gel getah buah nangka secara topikal
dengan dosis 0,5%, 1%, dan 2%. Perlakuan diberikan sehari 2 kali setiap hari
selama 3 dan 7 hari. Pembedahan hewan coba dilakukan pada hari ke-3 karena
merupakan puncak migrasi epitel mukosa ke perlukaan, sedangkan hari ke-7
merupakan puncak fase proliferasi. Kemudian jaringan diobservasi dan
dibandingkan pengaruh gel getah buah nangka terhadap ketebalan epitel.
4.1. Kerangka Desain Penelitian
RS
P3 (3)
K (7)
P1 (7)
P2 (3)
P1 (3)
K (3)
P3 (7)
P2 (7)
Observasi
-
37
Keterangan :S = SampelR = RandomK (3) = Kelompok kontrol yang diberi perlakuan induksi panas, diaplikasikansenyawa pembawa gel tanpa getah nangka, dan dilakukan pembedahan padahari ke-3K (7) = Kelompok kontrol yang diberi perlakuan induksi panas, diaplikasikansenyawa pembawa gel tanpa getah nangka, dan dilakukan pembedahan padahari ke-7P1 (3) = Kelompok perlakuan 1 yang diberi perlakuan induksi panas dandiaplikasikan gel getah nangka 0,5% kemudian dilakukan pembedahan pada harike-3P1 (7) = Kelompok perlakuan 1 yang diberi perlakuan induksi panas dandiaplikasikan gel getah nangka 0,5% kemudian dilakukan pembedahan pada harike-7P2 (3) = Kelompok perlakuan 2 yang diberi perlakuan induksi panas dandiaplikasikan gel getah nangka 1% kemudian dilakukan pembedahan pada harike-3P2 (7) = Kelompok perlakuan 2 yang diberi perlakuan induksi panas dandiaplikasikan gel getah nangka 1% kemudian dilakukan pembedahan pada harike-7P3 (3) = Kelompok perlakuan 3 yang diberi perlakuan induksi panas dandiaplikasikan gel getah nangka 2% kemudian dilakukan pembedahan pada harike-3P3 (7) = Kelompok perlakuan 3 yang diberi perlakuan induksi panas dandiaplikasikan gel getah nangka 2% kemudian dilakukan pembedahan pada harike-7
4.2 Sampel Penelitian
4.2.1 Pemilihan Binatang Coba dan Teknik Randomisasi
4.2.1.1 Kriteria Inklusi
Sampel penelitian dipilih berdasarkan ketentuain kriteria inklusi, yaitu:
a. Tikus putih strain wistar
b. Berjenis kelamin jantan
c. Usia 2,5-3 bulan
d. Berat badan 150-180 gram
-
38
e. Sehat, yang ditandai dengan gerakannya yang aktif, mata jernih,
bulu yang tebal dan berwarna putih mengkilap
f. Tidak ada abnormalitas anatomis yang tampak
4.2.1.2 Kriteria Eksklusi
Sampel penelitian dipilih berdasarkan ketentuan kriteria eksklusi,
yaitu:
a. Tikus yang pernah digunakan dalam penelitian sebelumnya
b. Tikus yang kondisinya menurun atau mati selama penelitian
berlangsung
4.2.2 Estimasi Jumlah Pengulangan
Jumlah sampel pada penelitian, setiap tikus mendapatkan perlakuan
berbeda dalam rongga mulut, yaitu dibagi menjadi 4 perlakuan (kontrol, P1,
P2, dan P3). Penelitian ini menggunakan 2 time series yaitu hari ke 3 dan 7.
Menurut Hanafilah tahun 2005, jumlah sampel tiap perlakuan didapatkan dari
rumus (t - 1) (r - 1) ≥ 15, dengan t adalah jumlah perlakuan dan r adalah
jumlah sampel yang diperlukan disetiap perlakuan. Dari rumus tersebut maka
diperoleh hasil perhitungan :
(t - 1) (r - 1) ≥ 15
(4 perlakuan x 2 time series – 1) (r – 1) ≥ 15
(8 - 1)(r – 1) ≥ 15
7 (r – 1) ≥ 15
7 r – 7 ≥ 15
7 r ≥ 22
r ≥ 3,14 ≈ 4 + 1 = 5 (untuk menghindari berkurangnya jumlah sampel
penelitian akibat tikus mati sebelum dan/atau selama penelitian)
-
39
Sampel yang digunakan adalah 5 tikus untuk setiap kelompok
perlakuan. Total tikus yang akan digunakan pada penelitian ini sejumlah 4
(perlakuan) x 2 (hari pengamatan) x 5 (tikus yang dibedah setiap time series)
= 40 tikus. Maka diperlukan sampel sejumlah 20 tikus untuk satu kali
pembedahan.
4.3 Variabel Penelitian
Variabel dalam penelitian ini dibagi menjadi 3, yaitu:
4.3.1 Variabel Independen
Gel getah buah nangka (Artocarpus heterophyllus Lam.) diberikan kepada
kelompok perlakuan. Dosis gel getah buah nangka yang digunakan secara
topikal adalah 0,5%, 1%, dan 2%.
4.3.2 Variabel Dependen
Ketebalan lapisan epitel yang terlihat dalam preparat histologi
4.3.3 Variabel Terkendali
a. Makanan dan minuman sampel
b. Kebersihan kandang
c. Jenis kelamin tikus
d. Jenis tikus
e. Berat badan tikus
f. Umur tikus
4.4 Tempat dan Waktu Penelitian
Penelitian ini dilakukan di UPT Materia Medica Batu, Laboratorium Fisiologi
Hewan Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam (FMIPA) Universitas
-
40
Brawijaya, Laboratorium Farmasi, Laboratorium Biokimia, dan Laboratorium
Patologi Anatomi Fakultas Kedokteran Universitas Brawijaya Malang dalam
jangka waktu ±4 bulan dimulai dari bulan September sampai Desember 2017.
4.5 Alat dan Bahan Penelitian
4.5.1 Pemeliharaan Hewan Coba
Alat yang dibutuhkan adalah kandang tikus ukuran 15 x 30 x 42 cm3
yang diisi 2-3 ekor tikus dan diberi alas sekam yang diganti 2 kali setiap
minggu, tutup kandang dari anyaman kawat, tempat makan, dan botol air
minum. Diet normal terdiri dari 67% Comfeed PAR-S dan terigu dalam
perbandingan 2:1 dengan air secukupnya diberikan dalam bentuk pelet
4.5.2 Pembuatan Gel Getah Buah Nangka (Artocarpus heterophyllus
Lam.)
Alat yang dibutuhkan untuk membuat gel getah buah nangka adalah
freeze dryer, neraca digital, gelas ukur, pipet, gelas beaker, mortar, pestle,
spatula, dan wadah untuk menyimpan gel. Alat yang dibutuhkan untuk uji gel
adalah pH meter, object glass, glass lab, dan beban. Bahan yang dibutuhkan
adalah getah buah nangka, natrium metabisulfit 0,7%, etanol 96%, karbopol ,
TEA, gliserol, natrium metabisulfit, metil paraben, propil paraben, dan
aquadest.
4.5.3 Perlakuan Hewan Coba
Alat yang dibutuhkan adalah cement stopper, bunsen, gunting bedah,
pinset, talenan, dan tabung organ. Bahan yang dibutuhkan adalah
handscoon, masker, ketamine, formalin 10%, dan alkohol 70%.
-
41
4.5.4 Pemeriksaan Histologi
Alat yang dibutuhkan adalah talenan, pisau scalpel, pinset, saringan,
tissue cassete, mesin prosesor otomatis, mesin vakum, mesin blocking,
freezer, mesin dan pisau mikrotom, water bath, object glass, kaca penutup,
rak khusus untuk pewarnaan, oven. Bahan yang dibutuhkan adalah
potongan jaringan yang telah difiksasi dengan formalin 10%, ethanol
absolute, xylol, paraffin, lithium carbonate, entellan, larutan Hematoksilin,
larutan eosin.
4.6 Definisi Operasional
4.6.1 Getah buah nangka
Getah buah nangka (Artocarpus heterophyllus Lam.) adalah zat cair
pekat berwarna putih yang terdapat pada buah nangka. Getah buah nangka
diperoleh dari buah nangka di UD Putra Fajar Kota Batu, dan diambil dengan
cara dipotong pada bagian tengahnya, lalu getah yang keluar ditampung
dalam wadah steril dan ditambahkan natrium metabisulfit 0,7% untuk
mencegah terjadinya oksidasi (Siswanto, 2015). Nangka yang dipilih adalah
nangka yang sudah matang. Ciri-ciri buah nangka yang sudah matang yaitu
memiliki duri yang besar dan jarang, mempunyai aroma nangka yang khas
walaupun dalam jarak yang agak jauh, setelah dipetik daging buahnya
berwarna kuning segar.
4.6.2 Gel getah buah nangka
Gel getah buah nangka adalah sediaan semipadat yang mengandung
zat aktif dari getah buah nangka. Gel yang digunakan pada penelitian ini
berasal dari getah buah nangka (Artocarpus heterophyllus Lam.) yang telah
-
42
dilakukan proses freeze drying, kemudian dicampurkan dengan basis dalam
3 dosis yakni 0,5%, 1%, dan 2%. Dosis tersebut sesuai dengan penelitian
oleh Siswanto (2015) dan Stefanus (2015) yang meneliti formulasi gel serbuk
getah nangka sebagai antijerawat secara in vitro dan in vivo. Warna gel
adalah putih kekuningan (Siswanto, 2015).
4.6.3 Ulser traumatik
Ulser traumatik adalah bentukan lesi ulseratif yang disebabkan oleh
karena adanya trauma (Neville et al., 2016). Ulser traumatik dibuat dengan
cara induksi panas, yakni menggunakan ujung cement stopper berdiameter
4mm yang dipanaskan dengan bunsen selama 10 detik atau sampai warna
cement stopper berubah merah, kemudian ditempelkan pada mukosa labial
rahang bawah tikus putih selama 4 detik untuk membentuk ulser. Tikus
sebelumnya dianastesi dengan ketamine 0,2 ml (10mg/kgBB) secara
intramuskular. Kemudian jaringan perlukaan dibiarkan selama 24 jam atau
sampai terbentuk ulser. Ulser yang sudah terbentuk ditandai dengan adanya
daerah eritema yang awalnya terlihat di bagian tepi dan bagian tengah ulser
berupa membran fibrinopurulen berwarna abu-abu kuning.
4.6.4 Ketebalan Epitel
Ketebalan epitel adalah ukuran tebalnya epitel berlapis pipih pada
lapisan terluar dari mukosa mulut. Penghitungan ketebalan lapisan epitel
dilihat dan diukur pada preparat biopsi eksisi sekitar ulser yang diambil pada
hari ke-3 dan hari ke-7 setelah ulserasi yang kemudian dilakukan pewarnaan
Hematoksilin-Eosin (HE). Ketebalan epitel diukur dengan menggunakan
mikrometer okuler pada mikroskop digital dan software viewer gambar
dengan pembesaran 400x (Atik et al., 2009). Untuk satu gambar histologi,
-
43
pertama ditentukan panjang area luka yang diukur ketebalan epitelnya
sepanjang 4000 µm (setara dengan kedalaman luka ulserasi, yaitu ± 4 mm)
dalam pembesaran 100x agar seluruh area terlihat. Ujung luka satu dengan
ujung luka yang lain ditandai, kemudian ditentukan 5 garis pengukur dengan
jarak yang sama. Selanjutnya perbesaran diubah menjadi 400x dan dengan
mikrometer digital dibuat garis yang ditarik dari ujung epitel berkeratin hingga
lamina basalis, dan secara otomatis akan menunjukkan besarnya ketebalan
jaringan epitel hingga ke-5 titik terukur. Terakhir, diambil rata-rata dari data
tersebut. Adanya peningkatan tebal epitel pada jaringan luka, dilihat dari
perbedaan ketebalan epitel dibandingkan dengan kontrol (Widagdo, 2004;
Pastar et al., 2013).
4.7 Prosedur penelitian
4.7.1 Persiapan Hewan Coba
Hewan coba diseleksi berdasarkan kriteria sampel, kemudian dibagi
menjadi 8 kelompok, masing-masing terdiri dari 5 ekor tikus yang dipelihara
di dalam tempat pemeliharaan hewan coba.
4.7.2 Pemeliharaan Hewan Coba
Tikus dipelihara dan diadaptasikan dalam laboratorium selama 1
minggu. Tempat pemeliharaan tikus menggunakan box plastik berukuran 15
x 30 x 42 cm3 yang masing-masing diisi 2-3 ekor tikus, ditutup dengan kawat
kasa, diberi alas sekam yang diganti 2 kali setiap minggu. Kebutuhan
makanan tikus dewasa adalah 40 gram/hari/ekor. Diet normal terdiri dari
Comfeed PAR-S dan terigu dalam perbandingan 2 : 1 dengan air
secukupnya diberikan dalam bentuk pelet.
-
44
4.7.3 Determinasi Buah Nangka
Determinasi buah nangka dilakukan di UPT Materia Medica Batu.
4.7.4 Pengambilan Getah Buah Nangka
Getah buah nangka (Artocarpus heterophyllus Lam.) diperoleh dari
UD Putra Fajar Batu. Getah buah nangka diperoleh buah nangka yang
dipotong pada bagian tengahnya, lalu getah yang keluar ditampung dalam
wadah steril dan ditambahkan natrium metabisulfit 0,7% untuk mencegah
terjadinya oksidasi (Siswanto, 2015).
4.7.5 Pembuatan Gel Topikal
Getah yang telah dimasukkan ke dalam wadah steril kemudian
dikirim ke laboratorium Fisiologi Hewan di Fakultas Matematika dan IPA
(FMIPA) Universitas Brawijaya untuk dilakukan proses freeze drying. Proses
tersebut memakan waktu minimal 24 jam setelah getah nangka dibekukan
terlebih dahulu. Hasil yang didapatkan dari proses tersebut berupa sediaan
getah dalam bentuk serbuk dan siap dibentuk menjadi sediaan gel di
laboratorium Farmasi Fakultas Kedokteran Universitas Brawijaya. Prosedur
pembuatan gel dilakukan dengan cara:
a. Persiapan alat dan bahan
b. Mengukur jumlah bahan yang dibutuhkan sesuai formulasi gel
-
45
Tabel 4.1 Formulasi sediaan gel getah buah nangka (Febiati, 2016)
BahanFormula
Kontrol 0,5% 1% 2%
Getah buah nangka(Artocarpus
heterophyllus Lam.)- 0,15 gram 0,3 gram 0,6 gram
Karbopol 940 0,6 gram 0,6 gram 0,6 gram 0,6 gram
TEA 0,375 gram 0,375 gram 0,375 gram 0,375 gram
Gliserol 3,75 gram 3,75 gram 3,75 gram 3,75 gram
Natrium metabisulfit 0,15 gram 0,15 gram 0,15 gram 0,15 gram
Metil paraben 0,054 gram 0,054 gram 0,054 gram 0,054 gram
Propil paraben 0,06 gram 0,06 gram 0,06 gram 0,06 gram
Aquadest 25,011 gram 24,861gram 24,711 gram24,411gram
Total 30 gram 30 gram 30 gram 30 gram
c. Pembuatan gel getah buah nangka
(1)Alat dan bahan disiapkan, ditimbang bahan-bahan yang diperlukan
(2)Karbopol 940 dikembangkan dalam aquadest sebanyak 20 kali berat
dari karbopol 940 di dalam lumpang dan alu, lalu digerus hingga
terbentuk dispersi yang homogen.
(3)Setelah mengembang ditambahkan natrium metabisulfit, metil paraben
dan propil paraben yang telah dilarutkan di dalam gliserol hingga
homogen.
(4)Kemudian ditambahkan getah buah nangka (Artocarpus heterophyllus
Lam.) dan aquadest sampai volume yang diinginkan dengan
pengadukan perlahan secara kontinyu sampai membentuk gel yang
homogen.
(5)Tambahkan dengan TEA tetes demi tetes sampai pH yang diinginkan
-
46
(6)Gel disimpan dalam wadah gel (Febiati, 2016).
d. Evaluasi sediaan gel dilakukan, meliputi:
(1)Uji organoleptik
Uji organoleptik dilakukan untuk melihat tampilan fisik sediaan dengan
cara melakukan pengamatan terhadap bentuk, warna dan bau dari
sediaan yang telah dibuat.
(2)Uji homogenitas
Gel dioleskan diatas kaca objek, kemudian kaca objek tersebut
dikatupkan dengan kaca objek lainnya dan dilihat apakah gel tersebut
homogen atau tidak. Homogenitas ditunjukkan dengan tidak adanya
butiran kasar.
(3)Uji pemeriksaan pH
Elektroda dicuci dan dibilas dengan air suling. Dikalibrasi pH meter
dengan menggunakan larutan dapar pH 7 (dapat fosfat ekimolal) dan
dapar pH 4 (dapar KHP) kemudian nilai pH gel getah nangka ditentukan
(Stefanus, 2015).
(4)Uji daya lekat
Gel sebanyak 0,5 gram diletakkan di atas glass lab dan ditutup dengan
glass lab yang lain. Kemudian gel diberikan beban sebesar 20 gram
selama 1 menit, dan diameter gel diukur dengan menggunakan
penggaris. Beban diganti menjadi 50 gram dan 100 gram masing-masing
selama 1 menit dan diukur dengan cara yang sama.
4.7.6 Pembuatan Ulser Traumatik
Pembuatan ulser traumatik yang ddinduksi panas didahului dengan
anastesi menggunakan ketamine 0,2 ml intramuscular¸ kemudian diinduksi
-
47
dengan ujung cement stopper kedokteran gigi yang sebelumnya telah
dipanaskan dengan bunsen selama 10 detik dan ditempelkan pada mukosa
labial rahang bawah tanpa tekanan selama 4 detik sehingga terbentuk ulser
setelah diinkubasi pasca induksi.
1) Mempersiapkan alat dan bahan
2) Melakukan anestesi intramuskular menggunakan ketamine 0,2 ml
3) Ujung cement stopper kedokteran gigi yang sebelumnya telah dipanaskan
dengan bunsen selama 10 detik pada mukosa labial tikus selama 4 detik
(Herlina, 2016).
4.7.7 Pemberian Gel Getah Nangka
Pemberian gel getah nangka dilakukan 24 jam setelah induksi panas
(ulser telah terbentuk) dengan frekuensi 2 kali sehari sampai hari ke-3 dan
hari ke-7 pada kelompok perlakuan (P1, P2 dan P3), sedangkan kelompok
kontrol diberikan senyawa pembawa gel tanpa getah.
4.7.8 Pembedahan Hewan Coba
Pada hari ke-3 dan hari ke-7, hewan coba dieuthanasia dengan
menggunakan injeksi ketamine dosis letal secara IM pada paha tikus.
Setelah itu, jaringan ulser diswab dengan alkohol 70% lalu dibuat biopsi
eksisi.
4.7.9 Prosedur Pembuatan Preparat
a. Fiksasi
Pada tahap fiksasi, dilakukan perendaman jaringan ulser pada larutan
formalin 10% selama 18-24 jam. Kemudian jaringan dicuci dengan
menggunakan aquadest selama 15 menit (Jusuf, 2009).
-
48
b. Embedding
Jaringan ulser dimasukkan pada beberapa cairan, yaitu aseton selama 1
jam x 4, xylol selama setengah jam x 4, paraffin cair selama 1 x 3 dan
penanaman jaringan mukosa pada paraffin blok (Jusuf, 2009).
c. Slicing
Blok yang sudah tertanam jaringan ulser diletakkan pada balok es selama
±15 menit, kemudian blok ditempelkan pada cakram mikrotom rotary
kemudian sayat jaringan ulser secara vertical dengan ukuran 4 micron.
Sayatan jaringgan ulser yang berbentuk pita diambil dengan menggunakan
kuas kecil, kemudian diletakkan pada waterbath yang mengandung gelatin
dengan suhu 36ºC. setelah sayatan ulser merentang, sayatan diambil
dengan menggunakan object glass dan didiamkan selama 24 jam (Jusuf,
2009).
d. Staining
Object glass dimasukkan dalam xylol selama 15 menit x 3, alkohol 96%
selama 15 menit x 3, kemudian dicuci dengan air mengalir selama 15 menit.
Setelah itu, object glass dimasukkan pada pewarna Haematoxylin selama 15
menit dan dicuci dengan air mengalir selama 15 menit. Object glass
dimasukkan ke dalam Lithium Carbonate selama 20 detik, dan dicuci dengan
air mengalir selama 15 menit. Object glass dimasukkan ke dalam pewarna
Eosin selama 15 menit, alkohol 96% selama 15 menit x 3, dan xylol selama
15 menit x 3. Terakhir, preparat ditutup dengan menggunakan deck glass
Entellan (Jusuf, 2009).
-
49
4.7.10 Pengamatan Sediaan Histologi Mukosa Labial Rattus norvegicus
Pengamatan sediaan histologi mukosa labial tikus yang dibedah pada
hari ke-3 dan hari ke-7 dilakukan dengan menggunakan mikrometer okuler
pada mikroskop digital dan software viewer gambar dengan pembesaran
400x (Atik et al., 2009). Untuk satu gambar histologi, pertama ditentukan
panjang area luka yang diukur ketebalan epitelnya sepanjang 4000 µm
(setara dengan lebar luka ulserasi, yaitu ± 4 mm) dalam pembesaran 100x
agar seluruh area terlihat. Ujung luka satu dengan ujung luka yang lain
ditandai, kemudian ditentukan 5 garis pengukur dengan jarak yang sama.
Selanjutnya perbesaran diubah menjadi 400x dan dengan mikrometer digital
dibuat garis yang ditarik dari ujung epitel berkeratin hingga lamina basalis,
dan secara otomatis akan menunjukkan besarnya ketebalan jaringan epitel
hingga ke-5 titik terukur. Terakhir, diambil rata-rata dari data tersebut.
4.8 Analisis Data
Hasil pengukuran ketebalan lapisan epitel pada kelompok kontrol dan
perlakuan dianalisis secara statistik dengan menggunakan aplikasi analisis
statistik dengan tingkat signifikasi 0,05 (p = 0,05) dan taraf kepercayaan 95% (α
= 0,05). Langkah-langkah uji hipostesis komparatif dan korelatif adalah sebagai
berikut :
1. Uji normalitas data : bertujuan untuk menginterpretasikan apakah suatu data
memiliki distibusi normal atau tidak. Untuk penyajian data yang terdistribusi
normal, maka digunakan mean dan standar deviasi sebagai pasangan ukuran
pemusatan dan penyebaran, uji hipotesis menggunakan uji parametrik.
Sedangkan untuk penyajian data yang tidak terdistribusi normal digunakan
-
50
median dan minumun-maksimum sebagai pasangan ukuran pemusatan dan
penyebaran, uji hipotesis menggunakan uji non parametrik.
2. Uji homogenitas varian : bertujuan untuk menguji berlaku atau tidaknya
asumsi ANOVA, yaitu apakah data yang diperoleh dari sertiap perlakuan
memiliki varian yang homogen. Jika didapatkan varian yang homogen, maka
analisa dapat dilanjutkan dengan uji ANOVA.
3. Uji One-Way ANOVA : bertujuan untuk membandingkan nilai rata-rata dari
masing-masing kelompok perlakuan dan mengetahui minimal ada dua
kelompok yang berbeda signifikan.
4. Post Hoc test (uji Least Significant Difference) : bertujuan untuk mengetahui
kelompok mana yang berbeda secara signifikan dari hasil tes ANOVA. Uji Pos
Hoc yang digunakan adalah uji Turke dengan tingkat kemaknaan 95% (p <
0,05).
5. Uji korelasi Pearson : bertujuan untuk mengetahui besarnya perbedaan
secara kualitatif kelompok yang berbeda secara signifikan yang telah
ditentukan sebelumnya dari hasil Uji Pos Hoc (LSD)
6. Uji korelasi-regresi : bertujuan untuk mengetahui kekuatan hubungan antara
dosis gel getah buah nangka terhadap ketebalan lapisan epitel (Dahlan,
2008).
7. Independent T-test: untuk membandingkan dua rata-rata dua grup yang tidak
berhubungan.
-
51
4.9 Skema Prosedur Penelitian
4.9.1 Pembuatan Gel Getah Nangka
Getah Buah Nangka
Freeze dry selama 24 jam
Karbopol dikembangkan dalamaquadest
Ditambah natrium metabisulfit,
metil paraben, dan propil paraben
yang telah dilarutkan dallam
gliserol
Campurkan dan tambahkan aquadest sampai
volume yang diinginkan sambil diaduk hingga
homogen
Tambahkan dengan TEA tetes demi tetes sampai
pH yang diinginkan sambil diaduk hingga
homogen
Gel disimpan dalam wadah tertutup
-
52
4.9.2 Pengaruh Gel Getah Buah Nangka 0.5%, 1% dan 2%
Sample Rattus norvegicus
(40 Ekor)
Penyesuaian selama
7 hari
Injeksi ketamine 0,2 ml dan perlakuan induksipanas pada mukosa labial bawah
Kontrol Perlakuan 1(P1)
Perlakuan 2(P2)
Perlakuan 3(P3)
Tunggu ulserterbentuk
selama 24 jam
Aplikasipembawa geltanpa getah
Aplikasi gelgetah
nangka 0,5%
Aplikasi gelgetah
nangka 1%
Aplikasi gelgetah
nangka 2%
Dilakukan euthanasia menggunakan ketamine dosis letal danpembedahan mukosa labial rahang bawah pada hari ke 3 dan ke-7
Pembuatan preparat histologi jaringan
Perhitungan ketebalan lapisan epitel
Analisis data
Kesimpulan
Tunggu ulserterbentuk
selama 24 jam
Tunggu ulserterbentuk
selama 24 jam
Tunggu ulserterbentuk
selama 24 jam
-
53
BAB V
HASIL PENELITIAN DAN ANALISIS DATA
5.1 Hasil Penelitian
Penelitian ini menggunakan hewan coba berupa tikus putih (Rattus
norvegicus) yang dibagi menjadi 8 kelompok, yaitu kelompok kontrol (K),
perlakuan 1 (P1), perlakuan 2 (P2), dan perlakuan 3 (P3) masing-masing pada
hari ke-3 dan hari ke-7. Tikus diberikan perlakuan berupa induksi panas pada
mukosa labial bawah