PATOFIZIOLOŠKA DIJAGNOSTIKA POREME ĆAJA … PATOFIZIOLOSKA... · Neutrofili Eozinofili Bazofili...

PATOFIZIOLOKA PATOFIZIOLOKA DIJAGNOSTIKA DIJAGNOSTIKA

POREMEPOREMEAJA BELE AJA BELE KRVNE LOZEKRVNE LOZE

Dr vet. Dr vet. Marko R. Cincovi Marko R. Cincovi

UNIVERZITET U NOVOM SADUUNIVERZITET U NOVOM SADUPOLJOPRIVREDNI FAKULTETPOLJOPRIVREDNI FAKULTET

DEPARTMAN DEPARTMAN ZZA VETERINARSKU MEDICINUA VETERINARSKU MEDICINUPREDMET: PATOLOPREDMET: PATOLO KA FIKA FI ZZIOLOGIJAIOLOGIJA

VEBA VEBA 44..

PLAN IZLAGANJA

PREGLED PREGLED LEUKOLEUKO POEZEPOEZE

MARKERI PATOFIZIOLOKE PROCENE BELE KRVNE LOZEMARKERI PATOFIZIOLOKE PROCENE BELE KRVNE LOZE

PATOFIZIOLOKI POREMEAJI BELE KRVNE LOZEPATOFIZIOLOKI POREMEAJI BELE KRVNE LOZE


MijeloblastMijeloblast


Neutrofilni promijelocitNeutrofilni promijelocit


Neutrofilni mijelocitNeutrofilni mijelocit


Neutrofilni metamijelocitNeutrofilni metamijelocit


Neutrofil sa nesegmentiranim Neutrofil sa nesegmentiranim jedromjedrom


Neutrofil sa Neutrofil sa segmentiranim jedromsegmentiranim jedrom


EOZINOFILNI PROMIJELOCITEOZINOFILNI PROMIJELOCIT


EOZINOFILNI MIJELOCITEOZINOFILNI MIJELOCIT


EOZINOFILNI METAMIJELOCITIEOZINOFILNI METAMIJELOCITI


NESEGMENTIRANINESEGMENTIRANI -- TAPASTITAPASTI EOZINOFILEOZINOFIL


SEGMENTIRANI EOZINOFILSEGMENTIRANI EOZINOFIL


BAZOFILNI MIJELOCITBAZOFILNI MIJELOCIT


SEGMENTIRANI BAZOFILSEGMENTIRANI BAZOFIL


MONOBLASTMONOBLAST


PROMONOCITPROMONOCIT


MONOCITMONOCIT


LIMFOCITLIMFOCIT


LEUKOCITOZALEUKOCITOZA LEUKOPENIJALEUKOPENIJA

NEUTROFILIJANEUTROFILIJA NEUTROPENIJANEUTROPENIJA

EOZINOFILIJAEOZINOFILIJA EOZINOPENIJAEOZINOPENIJA

LIMFOCITOZALIMFOCITOZA LIMFOCITOPENIJALIMFOCITOPENIJA

TREBA ZNATI:TREBA ZNATI:

SKRETANJE U LEVO:Ako se u perifernoj krvi javljaju mla i oblici razvoja granulocitne loze, sa velikim brojom tapastih granulocita i metamijelocita, onda se takva pojava zove skretanje u levo.

SKRETANJE U LEVO, UZ LEUKOPENIJU JE PROGNOSTIKI LO ZNAK!!!

TREBA ZNATI:TREBA ZNATI:

Ako je skretanje u levo ja e izraeno, tako da se u perifernoj krvi pojavljuju mijelociti u ve em broju, uz pojavu promijelocita i mijeloblasta, onda se ta pojava naziva mijeloidna leukemi na reakcijamijeloidna leukemi na reakcija .

Ovo stanje se razlikuje od mijeloproliferativnih bolesti na osnovu:

1.1. nalaza niskih vrednosti alkalne fosfataze u nalaza niskih vrednosti alkalne fosfataze u granulocitimagranulocitima

2.2. prisustvo filadelfijskog hromozomaprisustvo filadelfijskog hromozoma3.3. veliki % mladih elija granulocitne lozeveliki % mladih elija granulocitne loze4.4. eozinofilija i bazofilija u perifernoj krvi govori u eozinofilija i bazofilija u perifernoj krvi govori u

prilog hroni ne granulocitne leukozeprilog hroni ne granulocitne leukoze

Klasifikacija oboljenja bele krvne loze:


LEUKEMIJELEUKEMIJE

MIJELOPROLIFERATIVNE BOLESTIMIJELOPROLIFERATIVNE BOLESTI

MIJELODISPLASTI NI SINDROMMIJELODISPLASTI NI SINDROM

LIMFOMILIMFOMI

MALIGNA PROLIFERACIJA MALIGNA PROLIFERACIJA HISTIOCITNIH I DENDRITIKIH ELIJA (AP )HISTIOCITNIH I DENDRITIKIH ELIJA (AP )

MULTIPLI MIJELOMI I DRUGE MULTIPLI MIJELOMI I DRUGE MONOKLONALNE GAMOPATIJEMONOKLONALNE GAMOPATIJE

DEFINICIJADEFINICIJALeukemije su maligne bolesti krvi kod kojihpostoji progresivno i nesvrsishodno razmnoavanje elija jedne od leukocitnih loza, koje je esto praeno poveanjem leukocita u perifernoj krvi, kao i poveanjem leukocitne mase u organizmu.


LEUKEMIJELEUKEMIJE

Kod leukemijske proliferacije se zapaa izraziti poremeaj u diferentovanju i sazrevanju belih krvnih elija.

Ovaj proces je izraeniji to je leukemija akutnija!!!


LEUKEMIJELEUKEMIJE


LEUKEMIJELEUKEMIJE

PROLIFERACIJA LEUKEMI NIH ELIJA PROLIFERACIJA LEUKEMI NIH ELIJA U KOSTNOJ SRIU KOSTNOJ SRI

POTISKIVANJE NORMALNIH MATI NIHPOTISKIVANJE NORMALNIH MATI NIHELIJA U KOTANOJ SRIELIJA U KOTANOJ SRI

KVALITATIVNE I KVANTITATIVNE PROMENEKVALITATIVNE I KVANTITATIVNE PROMENEU KRVNIM ELIJAMAU KRVNIM ELIJAMA

Naroito u akutnim leukemijamaNaroito u akutnim leukemijama

ANEMIJAANEMIJA INFEKCIJAINFEKCIJA KRVARENJEKRVARENJE


LEUKEMIJELEUKEMIJE

VisokaLimfocitoza sa trombocitopenijomtrombocitopenijom

IV

VisokaLimfocitoza sa anemijomanemijomHb ispod 100g/l

III

SrednjaLimfocitoza sa uveanjem jetre uveanjem jetre i/ili slezinei/ili slezine

II

SrednjaLimfocitoza sa uveanjem uveanjem limfnih lezdalimfnih lezda

I

NiskaLimfocitozaLimfocitoza u perifernoj krvi i kostnoj sri

0

Rizina grupaKlini ke osobineStadijum

Klini ki stadijumi bolesti u Hroni noj limfocitnoj Klini ki stadijumi bolesti u Hroni noj limfocitnoj leukemiji (po Raileukemiji (po Rai --u)u)


LEUKEMIJELEUKEMIJE

PODELA LEUKEMIJAPODELA LEUKEMIJAPO TIPU ELIJAPO TIPU ELIJA

GRANULOCITNEGRANULOCITNE

LIMFOCITNELIMFOCITNE

MONOCITNEMONOCITNE

PODELA LEUKEMIJAPODELA LEUKEMIJAU ODNOSU NA BROJ U ODNOSU NA BROJ

LEUKOCITA LEUKOCITA U PERIF. KRVIU PERIF. KRVI

LEUKEMINELEUKEMINE

SUBLEUKEMINESUBLEUKEMINE

ALEUKEMINEALEUKEMINE

PODELA LEUKEMIJAPODELA LEUKEMIJAPO TOKUPO TOKU

AKUTNEAKUTNE

HRONINEHRONINE


LEUKEMIJELEUKEMIJE

AKUTNE LEUKEMIJEAKUTNE LEUKEMIJE

ALLALLAkutna limfoblasnaAkutna limfoblasna

leukemijaleukemija

AMLAMLAkutna mijeloblasna leukemijaAkutna mijeloblasna leukemija

L1 L1

L2L2

L3 (BurkittL3 (Burkitt ''s leukemija)s leukemija)

M0 M0 AML sa minimalnom diferencijacijomAML sa minimalnom diferencijacijom

M1 M1 AML bez diferencijacijeAML bez diferencijacije

M2 M2 AML sa diferencijacijomAML sa diferencijacijom

M3 M3 Akutna promijelocitna leukemijaAkutna promijelocitna leukemija

M4 M4 Akutna mijelomonocitna (Akutna mijelomonocitna ( Naegeli'sNaegeli's acute leukemiaacute leukemia ))

M5 M5 Akutna monocitna leukemija Akutna monocitna leukemija Schilling's Schilling's ALAL , , AMoLAMoL

M6 M6 Akut. Eritroidna leukemija,Akut. Eritroidna leukemija, diGuglielmo'sdiGuglielmo's syndromesyndrome

M7 M7 Akut. Megakariocitna leukemijaAkut. Megakariocitna leukemija

Akutna monoblasnaAkutna monoblasnaleukemijaleukemija


MIJELOPROLIFERATIVNE BOLESTIMIJELOPROLIFERATIVNE BOLESTI

Klonalna proliferacija mijeloidnih progenitora. Mad a od ovih progenitora nastajuRazliite linije krvnih elija u okviru mijeloproliferativnih bolesti dolazi do poreme aja u jednoj liniji elija. Razlikujemo:

PolycythemiaPolycythemia veravera (PV)(PV)-- Predominantna proliferacija eritroidne loze

EsencijalnaEsencijalna trombocitemijatrombocitemija (ET)(ET)-- Predominantna proliferacija megakariocitne linije

MyelofibrosisMyelofibrosis sa mijeloidnom metaplazijomsa mijeloidnom metaplazijom (MF)(MF) (primarna ili idiopatska mijelofibroza)- Predominantna proliferacija megakariocitne linije , ali se nalazi i fibroza u kotanoj sri.

Hroni na mijelocitna leukemija (CML)- Predominantna proliferacija granulocitne, primarno neutrofilne linije.

Ostale varijante: Hipereozinofilni sindromSistemska mastocitozaMijeloproliferativna-mijelodisplasti na bolestJuvenilna mijelomonocitna leukemija.

Mijelodisplasti ni sindrom predstavlja proliferaciju mijeloidnihMijelodisplasti ni sindrom predstavlja proliferaciju mijeloidnihprogenitora, a odlikuje se neefikasnom hematopoezom .progenitora, a odlikuje se neefikasnom hematopoezom .

Kotana sr je normocelularna ili hipercelularna, a posmatrana Kotana sr je normocelularna ili hipercelularna, a posmatrana diferencijacija nije kompletna. diferencijacija nije kompletna.

elije su displasti ne.elije su displasti ne.

Klasifikacija poreme aja (FAB klasifikacija):Klasifikacija poreme aja (FAB klasifikacija):Refraktorna anemijaRefraktorna anemijaRefraktorna anemija sa prstenastim sideroblastimaRefraktorna anemija sa prstenastim sideroblastimaRefraktorna anemija sa vikom blastnih elija (5Refraktorna anemija sa vikom blastnih elija (5 --20% blast el. u sri)20% blast el. u sri)Refraktorna anemija sa 21Refraktorna anemija sa 21 --30% blastnih elija u kotanoj sri30% blastnih elija u kotanoj sriTransformacija u akutnu leukemiju sa preko 30% blas tnih elija Transformacija u akutnu leukemiju sa preko 30% blas tnih elija u sriu sriHroni na mijelomonocitna leukemijaHroni na mijelomonocitna leukemija



KADA POMISLITI NA MIJELODISPLASTINI SINDROM?

Veterinar mora pomisliti na mijelodisplastini sindrom u uslovima neobjanjive anemije, neutropenije, trombocitopenije ili monocitoze, sa ili bez znakova insuficijencije kotane sri.U peninim situacijama razmaz krvi i sri moraju biti detaljno pregledani.



NeNe--Hodkinsovi limfomiHodkinsovi limfomi


LIMFOMILIMFOMI

B Cell LymphomasB Cell Lymphomas Precursor B cell lymphomaPrecursor B cell lymphoma

Precursor B Precursor B lymphoblasticlymphoblastic lymphoma lymphoma Mature B cell lymphomaMature B cell lymphoma

Small Small lymphocyticlymphocytic lymphoma lymphoma LymphoplasmacyticLymphoplasmacytic lymphoma lymphoma SplenicSplenic marginal zone lymphoma marginal zone lymphoma Marginal zone B cell lymphoma of mucosa Marginal zone B cell lymphoma of mucosa

associated lymphoid tissue (MALT associated lymphoid tissue (MALT lymphoma, lymphoma, maltomamaltoma ) )

Nodal marginal zone B cell lymphoma Nodal marginal zone B cell lymphoma ((monocytoidmonocytoid B cell lymphoma) B cell lymphoma)

Follicular lymphoma Follicular lymphoma Mantle cell lymphoma Mantle cell lymphoma Diffuse large B cell lymphoma Diffuse large B cell lymphoma Primary Primary mediastinalmediastinal large B cell lymphoma large B cell lymphoma Intravascular large B cell lymphoma Intravascular large B cell lymphoma EBV positiveEBV positive senile large cell B cell senile large cell B cell

lymphomalymphoma Primary effusion lymphoma Primary effusion lymphoma Burkitt'sBurkitt's lymphoma lymphoma

T/NK Cell LymphomasT/NK Cell Lymphomas Precursor T cell lymphomaPrecursor T cell lymphoma

Precursor T cell Precursor T cell lymphoblasticlymphoblastic lymphoma lymphoma BlasticBlastic NK cell lymphoma NK cell lymphoma

Mature T/NK cell lymphomaMature T/NK cell lymphoma Adult T cell leukemia/lymphoma Adult T cell leukemia/lymphoma ExtranodalExtranodal NK/T cell lymphoma, nasal NK/T cell lymphoma, nasal

type type EnteropathyEnteropathy --associated T cell lymphoma associated T cell lymphoma HepatosplenicHepatosplenic gammagamma --delta T cell delta T cell

lymphoma lymphoma Subcutaneous Subcutaneous panniculitispanniculitis --like T cell like T cell

lymphoma lymphoma Mycosis Mycosis fungoidesfungoides SezarySezary syndrome syndrome Primary Primary cutaneouscutaneous anaplasticanaplastic large cell large cell

lymphoma lymphoma Peripheral T cell lymphoma, unspecified Peripheral T cell lymphoma, unspecified AngioimmunoblasticAngioimmunoblastic T cell lymphoma T cell lymphoma AnaplasticAnaplastic large cell lymphomalarge cell lymphoma

Hodkinsovi limfomiHodkinsovi limfomi


LIMFOMILIMFOMI

Nodular lymphocyte predominant Hodgkin's lymphoma Nodular lymphocyte predominant Hodgkin's lymphoma Classical Hodgkin's lymphoma which includes Classical Hodgkin's lymphoma which includes Nodular Nodular schlerosingschlerosing classical Hodgkin's lymphoma classical Hodgkin's lymphoma Mixed Mixed cellularitycellularity classical Hodgkin's lymphoma classical Hodgkin's lymphoma LymphocyteLymphocyte --rich classical Hodgkin's lymphoma rich classical Hodgkin's lymphoma LymphocyteLymphocyte --depleted classical Hodgkin's lymphomadepleted classical Hodgkin's lymphoma

Langerhans cell histiocytosis (Histiocytosis X, Eosinophilic granuloma, Hand-Schiiller-Christian disease, Letterer-Siwe disease)

Langerhans cell sarcoma (malignant neoplasma) Histiocytic sarcoma (malignant neoplasm) Erdheim-Chester disease Interdigitating dendritic cell sarcoma (malignant

neoplasm) Follicular dendritic cell sarcoma (malignant

neoplasm)


MALIGNA PROLIFERACIJA MALIGNA PROLIFERACIJA HISTIOCITNIH I DENDRITIKIH ELIJA (AP )HISTIOCITNIH I DENDRITIKIH ELIJA (AP )

Multiple Multiple myelomamyeloma PlasmacytomasPlasmacytomas Waldenstrom'sWaldenstrom's macroglobulinemiamacroglobulinemia Primary Primary amyloidosisamyloidosis Heavy chain diseases Heavy chain diseases

IgGIgG heavy chain disease heavy chain disease IgAIgA heavy chain disease heavy chain disease IgMIgM heavy chain diseaseheavy chain disease

Monoclonal Monoclonal gammopathygammopathy of undetermined of undetermined significance (MGUS) significance (MGUS)


MULTIPLI MIJELOMI I DRUGE MULTIPLI MIJELOMI I DRUGE MONOKLONALNE GAMOPATIJEMONOKLONALNE GAMOPATIJE

1.1. Pregled punktata limfne lezdePregled punktata limfne lezde

2.2. OdreOdreivanje broja leukocitaivanje broja leukocita

3.3. OdreOdreivanje leukocitne formuleivanje leukocitne formule

4.4. Pregled razmaza periferne krviPregled razmaza periferne krvi i i koko tane tane srisri

5.5. Citohemijske osobine elija u Citohemijske osobine elija u bolestimabolestimabelebele lolo zeze


Napraviti razmaz uve ane limfne lezde i posmatrati najpre na malom pa na velikom uveli anju.


1. Pregled punktata limfne lezde

REZULTATIREZULTATI

Uveanje l.. je bitan nalaz u benignim i malignim bolestima li mUveanje l.. je bitan nalaz u benignim i malignim bolestima li mfocitne loze.focitne loze.

U toku baterijske infekcije vidi se infiltracija ne utrofilnih grU toku baterijske infekcije vidi se infiltracija ne utrofilnih gr anulocita, kada se anulocita, kada se vidi slika piogenog limfadenitisa.vidi slika piogenog limfadenitisa.

U TBCU TBC--u vide se dinovske Langhansove elije.u vide se dinovske Langhansove elije.

U malgnim bolestima moe se primetiti da maligne elije u potpunU malgnim bolestima moe se primetiti da maligne elije u potpun osti iliosti ilidelimi no potiskuju zdravo tkivo limfnog vora.delimi no potiskuju zdravo tkivo limfnog vora.

Zahvatanje Zahvatanje limfnih vorova limfnih vorova u limfomima i u limfomima i leukemijamaleukemijama



Nodularna infiltracija

Nodularna i difuznainfiltracija

Difuzna infiltracija

Parakortikalnainfiltracija

Infiltracija mantl zone

Neoplasti ne Neoplasti ne elije elije limfomalimfoma



Mali limfocit

Centrocit

Centroblast

Imunoblast

Limfoplazmocit i plazmocit

Limfoblasti

Pleomorfne elije

Sezary elije

elije Burkittovog NHL

Reed-Sternbergova elija

Varijante RS elija

Histiociti

Morfologija Morfologija ReedReed--SternbergoviSternbergovih elija u h elija u Hodginovom Hodginovom limfomulimfomu




2. Odreivanje broja leukocita

POTREBAN MATERIJALPOTREBAN MATERIJAL

Melaner za leukocita,Turkov rastvor,Neubauerov hem ocitometar,Melaner za leukocita,Turkov rastvor,Neubauerov hem ocitometar,MikroskopMikroskop

IZVOIZVOENJEENJE

Uvui kap krvi u melaner za leukocite do ozanke 1.Uvui kap krvi u melaner za leukocite do ozanke 1.Obrisati vrh melanera i potom uvu i Turkov rastvor do nivoa 11.Obrisati vrh melanera i potom uvu i Turkov rastvor do nivoa 11.Tako je postignuto razblaenje 1:10.Tako je postignuto razblaenje 1:10.Lagano mu kati melaner nekoliko minuta.Lagano mu kati melaner nekoliko minuta.Na komoricu staviti pokrovno staklo,tako da bude do bro fiksiran Na komoricu staviti pokrovno staklo,tako da bude do bro fiksiran (trebaju da se vide Newtonovi obojeni koturovi)(trebaju da se vide Newtonovi obojeni koturovi)


2. Odreivanje broja leukocita

IZVOIZVOENJEENJE

Neubauerova Neubauerova komoricakomorica

Br.leu./Br.leu./ L = N/4 x 10 x 10L = N/4 x 10 x 10

RazreRazreenjeenjeBr leukocita u jednomBr leukocita u jednom

kvadrati ukvadrati uBr. LEU u 1mmBr. LEU u 1mm

UU Litri Litri -- red veli ina je 10red veli ina je 10 ^9^9


3. Odreivanje leukocitne formule

Izvaditi krv i napraviti razmaz periferne krvi, Izvaditi krv i napraviti razmaz periferne krvi, koji e biti posmatran na uve anju od 1000x.koji e biti posmatran na uve anju od 1000x.

Diferenciranje leukocita se vri na 100 ili 200 elija. Diferenciranje leukocita se vri na 100 ili 200 elija.

Broji se kao to je dato na donjoj emi, a rezultat e upisujemo pBroji se kao to je dato na donjoj emi, a rezultat e upisujemo p rema datoj tabeli.rema datoj tabeli.



MonocitiMonociti

LimfocitiLimfociti

BazofiliBazofili

EozinofiliEozinofili

65/10065NeutrofiliNeutrofili%10010101010101010101010UkupnoUkupno

Vrsta Vrsta leukocitaleukocita BROJANJEBROJANJE



1055-601-43-825-3020-30Koko

530-3512-555-6010-15Maka

520-2512-565-709-13Pas

550-5512-535-408-12Koza

560-6512-525-307-10Ovca

5-655-6012-530-3515-22Svinja

5-630-4012-550-608-11Konj

560-6512-525-307-10ovek

MonocitiLimfocitiBazofiliEozinofiliNeutrofili

Procenat pojedinih vrsta leukocita (%)Ukupan broj leukocita u 1l krvi(x 10^9)

Vrsta

DIJAGNOSTIKA LEUKOZE GOVEDA PREMA BROJU DIJAGNOSTIKA LEUKOZE GOVEDA PREMA BROJU LEUKOCITA I DIERENCIJALNOJ BELOJ LOZILEUKOCITA I DIERENCIJALNOJ BELOJ LOZI!!! Maksimalno 30% goveda ispolji limfocitozu!!! Maksimalno 30% goveda ispolji limfocitozu

LeukoznaLeukoznaPreko 75Preko 75Preko 18,0Preko 18,0

SumnjivaSumnjiva6060--757510,010,0--18,018,0

NormalnaNormalnaDo 60Do 60Do 10,0Do 10,0Preko 3 godine

LeukoznaLeukoznaPreko 75Preko 75Preko 18Preko 18

SumnjivaSumnjiva6565--757512,012,0--18,018,0

Do 3 godine NormalnaNormalnaDo 65Do 65Do 12,0Do 12,0

Prosu ivanje% limfocitaBroj leukocita x10^9

Starost goveda

Leukozni klju po Gtzeu i sar. (1953)

DIJAGNOSTIKA LEUKOZE GOVEDA PREMA BROJU DIJAGNOSTIKA LEUKOZE GOVEDA PREMA BROJU LEUKOCITA I DILEUKOCITA I DI FFERENCIJALNOJ BELOJ LOZIERENCIJALNOJ BELOJ LOZI

LeukoznaSumljivaNormalna

Preko 7,55,5-7,5Do 5,56-7

Preko 8,06,0-8,0Do 6,05-6

Preko 8,56,5-8,5Do 6,54-5

Preko 9,57,5-9,5Do 7,53-4

Preko 10,58,5-10,5Do 8,52-3

Preko 12,010,0-12,0Do 10,01-2

Preko 13,011,0-13,0Do 11,00-1

Broj limfocita u 10^9/l periferne krviStarost u godinama

Leukozni klju za lanice Evropske ekonomske zajednice (1978)

Slian je i Jugoslovenski leukozni klju po Stamatoviu iz 1979.


4. Pregled razmaza periferne krvi i kotane sri

DiferencijalnaDiferencijalna dijagnozadijagnoza ALL ALL premaprema oblikuobliku elijaelija



Pravilnog oblika,Pravilnog oblika,Izraeni Izraeni nukleolusinukleolusi

Nepravilnog Nepravilnog oblika, oblika, Izraeni Izraeni nukleolusinukleolusi

Pravlnog oblikaPravlnog oblikaDiskretni nukleolusiDiskretni nukleolusi

JedroJedro

Umereno obilna, Umereno obilna, Bazofilna, Bazofilna, Izraene vakuoleIzraene vakuole

Raznolike u Raznolike u koli ini i stepenu koli ini i stepenu bazofilijebazofilije

OskudnaOskudnaUmerena bazofilijaUmerena bazofilija

CitoplazmaCitoplazma

Velike,Velike,JednakeJednake

VelikeVelikeNejednakeNejednake

MaleMaleUniformneUniformne

elijeelije

L3L3L2L2L1L1


AL-L1, aspirat kotane sriBlastne elije tipa L1 su male, esto po dimenziji sli ne normalnim perifernimlimfocitima. Jedro je okruglo do ovalno sa jednako raspore enim hromatinom.Nukleolusi na elno nisu vidljivi. Citoplazma je svetlo plava, sa r asutim i nevidljivim granulama. Povrine elije je ravna ili sa finim membranskim projekcijam a.


DIFERENCIJALNA DIJAGNOZA

Mikromegakariocitna akutna leukemija (M7)

Mikroblastina AML

Hematogoni

Reaktivna limfocitoza


ALAL --L2, L2, aspirat kotane sriaspirat kotane sriSline predhodnom osim to su 1,5Sline predhodnom osim to su 1,5 --2 puta ve e. Hromatin moe biti grupisan, a 2 puta ve e. Hromatin moe biti grupisan, a nukleolus vidljiv. Membrana moe biti sa raznim per foracijama.nukleolus vidljiv. Membrana moe biti sa raznim per foracijama.



Blasti na varijanta mantleLimfoma

Blasti na varijantaNK elijske leukemije

Blasti na varijantaNK/T elijske leukemije

Male elije nehematopoeznih

kancera


AL-L3, Burkitt's Leukemia/Lymphoma, aspirat kotane sriNeto ve e od AL-L1 i prili no uniformnog izgleda. Citoplazma je izrazito bazofilna, i sadri lipidne vakuole.Mogue je primetiti nukleoluse.



Pleomorfni limfomi B i T elijske linije

L2 ALL

M0 i M1 AML

Nehematoloki tumori


AML-M0, aspirat kotane sriDimenzija kao i neutrofili. Minimalna dierencijacij a. Oskudna citolazma siva do svetlo plava. Visok odnos jedro:citoplazma.


AML M0CytochemistryThe blasts are myeloperoxidase (MPO), Sudan black B, and nonspecific esterase (NSE) negative. ImmunophenotypeStem cell and hematopoietic progenitor cell markers: CD34+, HLA-DR+, and TdT+ Myeloid lineage markers: CD117+, CD13+ and CD33+. Note that the cytochemistry stain for MPO is usually negative, but positive byimmunophenotyping. T cell markers: CD7 is frequently positive, and is an example of what has been designated bilineage, biphenotypic, mixed lineage, or hybrid acute leukemias. CytogeneticsAlthough no signature abnormality has been identified, complex karyotypes and abnormalities of chromosomes 5, 7, and 11 are relatively common.


AML-M1, aspirat kotane sriDimenzija kao i neutrofili. Minimalna dierencijacij a. Oskudna citolazma siva do svetlo plava. Visok odnos jedro:citoplazma.


AML M1Cytochemistry:The blasts are positive for myeloperoxidase (MPO) and Sudan black B, but negative for non-specific esterase (NSE). Immunophenotype:Stem cell and early hematopoietic progenitor markers: CD34+, HLA-DR+, Tdt+ Myeloid lineage markers: CD117+, CD13+, CD33+, MPO+


AML-M2, aspirat kotane sriAML-M2 sa eozinofilijomAML-M2 sa bazofilijom


AML M2Cytochemistry:The blasts are positive for myeloperoxidase (MPO), Sudan black B, and chloroacetate esterase (reflecting the abortive maturation effort). The non-specific esterase stain is negative in the agranular blasts. In acute basophilic leukemia, the diagnostic finding is metachromatic positivity with toluidine blue. Immunophenotype:Stem cell and early hematopoietic progenitor cell markers: CD34+, HLA-DR+, Tdt. Myeloid lineage markers: CD117+, CD13+, CD33+ Lymphoid lineage markers: CD19, a B cell marker, is usually weakly positive, except in the acute basophilic subtype, and CD56 Cytogenetics:A signature cytogenetic abnormality, t(8;21) is seen in 30% or more of cases, and is seen more in the younger adults with this subtype. No signature cytogenetic abnormality has been identified in the acute basophilic subtype.


AML-M3, aspirat kotane sri

M3 AML with "angel wings"


AML M3Cytochemistry:The cells are strongly myeloperoxidase, Sudan black B and chloroacetate esterase positive. Immunophenotype:Stem cell and hematopoietic progenitor cell markers: CD34-, HLA-DR-Myeloid lineage markers: CD13+ and CD33+; CD117- and CD15-. Cytogenetics:The signature and diagnostic cytogenetic abnormality is the t(15;17), and has the same diagnostic significance as the t(9;22) in chronic myelocytic leukemia. It is a balanced translocation from the long arm of chromosome 17, the locus of the retinoic acid receptor- gene, to a site on the long arm of chromosome 15 which is the locus for the promyelocytic leukemia (PML) gene.



Atipi ni, mladi eozinofil




Mijeloperoksidaza bojenje Nespecifi na esetraza bojenje


AML M4Cytochemistry:The clonal cells stain positive for the myeloid markers, myeloperoxidase (MPO) (d)and chloroacetate esterase, and the monocytic marker, non-specific esterase (NSE) (e) which is not inhibited by flouride. The cells with features of myeloblasts show more MPO positivity while those with features of monocytes show more NSE positivity- some cells stain with both. In the M4Eo subtype, the eosinophils stain like normal neutrophils (e.g. MPO+, Sudan black B+, NSE+) and not normal eosinophils. Immunophenotype:Stem cell and hematopoietic progenitor cell markers- CD34 positivity variable in the M4 subtype, but usually strongly positive in M4Eo subtype Myeloid lineage markers- CD13+, CD33 Monocyte lineage markers- CD14+, CD116, CD11c, CD4 Cytogenetics:The signature cytogenetic abnormality found in the M4Eo subtype is inv(16).

AML M5Cytochemistry:In the M5a variant, the non-specific esterase (NSE) is positive (c), and myeloperoxidase (MPO) and Sudan black B are negative. In addition to a positive MSE stain, the Sudan black B may be positive in M5b variant. Immunophenotype:Stem cell and hematopoietic progenitor cell markers- CD34-, HLA-DR -Monocytic lineage markers- CD14, CD116, CD11c, CD64, CD68, CD4, and lysozyme Myeloid lineage markers- CD33, CD13, CD117 Note: In general the M5b subtype shows more positivity with more mature monocyte markers. Cytogenetics: Cytogenetic abnormalities are found in most cases, but a signature abnormality has not been identified. Abnormalities involving the 11q23 are not infrequent, including those cases that occur following exposure to the topisomerase II inhibitors (VP-16 and VM-26).



Mijeloblast i eritroblast

Atipi ni eritroblast

elije sa vakuolama




PAS + bojenjePAS + bojenje

Bojenje Fe, prusko plavoBojenje Fe, prusko plavo


AML M6Cytochemistry:The myeloperoxidase (MPO), Sudan black B, and nonspecific esterase (NSE) stains are negative in the proerythroblasts. The myeloblastic elements may be MPO, Sudan black B or NSE positive depending on the lineage of the myeloblastic leukemia component. The periodic acid-Schiff (PAS) stain frequently shows large PAS positive cytoplasmic granules in the erythroblastic elements (g-h).Immunophenotype:Stem cell and hematopoietic progenitor cell markers- CD34-, HLA-DR-Erythroid lineage markers- The erythroid cells ae positive for glycoforin A Myeloid lineage markers- The myeloblasts are variably positive for CD13, CD33, and CD117. Monocytic lineage markers- Depending on the number of monolytic elements present, CD14, CD11b and 11a, CD4, and CD64 are variably positive. Cytogenetics:No signature cytogenetic abnormality has been identified in this subtype. Complex abnormalities, usually involving chromosomes 5 and 7 are most common, similar to those seen in the myelodysplastic syndromes.



Veliki nezreo megakarioblast


AML M7Cytochemistry:May show positivity with acid phosphatase, PAS and NSE stains. Myeloperoxidase and Sudan black B stains are negative. Immunophenotype:Stem cell and hematopoietic progenitor markers- CD34- and HLA-DR-; a unique feature is that the leukocyte common antigen (CD45) is negative Megakaryocyte lineage markers- CD41 (glycoprotein IIb/IIIa) and/or CD61 (glycoprotein IIIA) usually positive. CD36 (glycoprotein IIIb) is positive. Myeloid lineage markers- CD13 and CD33 may be positive Cytogenetics:No signature cytogenetic abnormality has been identified. In infants under one year of age the t(1;22) often is present.


Kvalitativne nenormalnosti krvnih loza u mijelodisp lasti nom sinKvalitativne nenormalnosti krvnih loza u mijelodisp lasti nom sin dromudromu

Najee mali mononuklearni tipa I (1Najee mali mononuklearni tipa I (1 --3 azurofilne granule), tipa II (do 15 3 azurofilne granule), tipa II (do 15 azurofilnih granula) i tipa III (izrazito granulisa ni blasti sa azurofilnih granula) i tipa III (izrazito granulisa ni blasti sa ili bez Auerovih ili bez Auerovih tapi a)tapi a)

BlastiBlasti

ei promonociti, dvo ili troei promonociti, dvo ili tro --jedarne jedarne dendriti ke elije, seadendriti ke elije, sea --blue histiociti. blue histiociti. Emperipoleza limfocita u Emperipoleza limfocita u retikuloendotelskim elijamaretikuloendotelskim elijama

esti promonociti, vakuolisani esti promonociti, vakuolisani monociti, multilobarni monociti, monociti, multilobarni monociti, dvojedarne dendriti ke elijedvojedarne dendriti ke elije

MonocitiMonociti

MikroMikro --megakariociti, hipo ili megakariociti, hipo ili asegmentisani megakariociti, asegmentisani megakariociti, polinuklearni megakariocitipolinuklearni megakariociti

Dinovski trombociti, fragmenti Dinovski trombociti, fragmenti megakariocita, sivi (gray) trombociti, megakariocita, sivi (gray) trombociti, mikrotrombocitimikrotrombociti

MegakariocitiMegakariociti

Promijelociti sa retkim ili odsutnim Promijelociti sa retkim ili odsutnim azorpfilnim granulama, hipo ili azorpfilnim granulama, hipo ili agranulirani mijelociti i neutrofili, agranulirani mijelociti i neutrofili, dinovski metamijelociti i mikro i dinovski metamijelociti i mikro i makromakro --neutrofilineutrofili

PseudePseude --pelger neutrof., pelger neutrof., hipersegmentisani neutrof., Ringhipersegmentisani neutrof., Ring --neutrof. sa prstenastim jedrom, neutrof. sa prstenastim jedrom, DDhleova tela, agranulisanost hleova tela, agranulisanost (kompletna ili segmentirana)(kompletna ili segmentirana)

GranulocitiGranulociti

Eritroidna hiperplazija, ring (prstenasti) Eritroidna hiperplazija, ring (prstenasti) sideroblasti, displazni eritroblastisideroblasti, displazni eritroblasti

Dimorfija, makrocitoza, Dimorfija, makrocitoza, anizopoikilocitoza, bazofilno anizopoikilocitoza, bazofilno punktirani eritroblasti, retki punktirani eritroblasti, retki dakriociti, displasti ni erdakriociti, displasti ni er --blastiblasti

EritronEritron

Kotana srKotana srPeriferna krvPeriferna krvelijska lozaelijska loza


Kriterijumi za odvajanje hroni ne granulocitne leukemije (HGL) oKriterijumi za odvajanje hroni ne granulocitne leukemije (HGL) o d d atipi ne HGL i hroni ne mijelomonocitne leukemije (CMML)atipi ne HGL i hroni ne mijelomonocitne leukemije (CMML)


CMMLCMMLPromijelociti, mijelociti i metamijelociti ine zajedno manje odPromijelociti, mijelociti i metamijelociti ine zajedno manje od 15% leukocita periferne 15% leukocita periferne krvi (tipi no je manje od 5%)krvi (tipi no je manje od 5%)Monociti ine vie od 1x10Monociti ine vie od 1x10 ^9/l leukocita9/l leukocitaDisgranulopoeza uobi ajena ali ne i obaveznaDisgranulopoeza uobi ajena ali ne i obavezna

Atipi na HGLAtipi na HGLPromijelociti, mijelociti i metamijelociti ine vie od 15% leukPromijelociti, mijelociti i metamijelociti ine vie od 15% leuk ocita u perifernoj krviocita u perifernoj krviMonociti ine vie od 3% svih leukocita u krviMonociti ine vie od 3% svih leukocita u krviPostoji disgranulopoeza na nivou mijelocita, metami jelocita i zrPostoji disgranulopoeza na nivou mijelocita, metami jelocita i zr elih neutrofilaelih neutrofila

HGLHGLVrhovi neutrofila i mijelocita+metamijelocita u leu kocitnoj formVrhovi neutrofila i mijelocita+metamijelocita u leu kocitnoj form uliuliMonociti ine manje od 3% leukocitne formuleMonociti ine manje od 3% leukocitne formuleZnaci dishematopoeze ne postoje ili su minimalniZnaci dishematopoeze ne postoje ili su minimalniBazofilijaBazofilija


Odreivanje broja Leu i diferencijacije bele krvne slike, uz detaljno uzimanje anamneze i fizikalni pregled mogu ukazati na leukemiki status.

Ipak, konana dijagnozakonana dijagnoza se postavlja imuno-citohemijskim metodama pomou odreivanja elijskih markera, primenom tehnike rozeta, imunofluorescentna tehnika, tehnika monoklonskih At i dr.


5. Citohemijske i imunoloke osobine elija u leukemiji

Citohemijska ispitivanja omogu uju dokazivanje prisustva Citohemijska ispitivanja omogu uju dokazivanje prisustva specifi nih enzima i drugih materija u pojedinim elijama, jer specifi nih enzima i drugih materija u pojedinim elijama, jer bojenjem po Pappenheimu nije mogu e lako diferentirati bojenjem po Pappenheimu nije mogu e lako diferentirati blastne elije i razli ite nezrele forme; to je zna ajno za blastne elije i razli ite nezrele forme; to je zna ajno za dijagnostiku akutnih leukemija.dijagnostiku akutnih leukemija.

Vri se ispitivanje aktivnosti mijeloperoksidaze bo jenjem sudan Vri se ispitivanje aktivnosti mijeloperoksidaze bo jenjem sudan crnim B.crnim B.

Perjodnom kiselinom (Schiffova PAS reakcija) se boj e elije u Perjodnom kiselinom (Schiffova PAS reakcija) se boj e elije u cilju dokazivanja glikogena.cilju dokazivanja glikogena.

Dokazivanje kisele fosfataze, alkalne fosfataze, ne specifi ne Dokazivanje kisele fosfataze, alkalne fosfataze, ne specifi ne alfaalfa --naftol butirat esteraze, dokazanje muramidaze (lizo zomske naftol butirat esteraze, dokazanje muramidaze (lizo zomske aktivnsti).aktivnsti).

TakoTakoe se vri i diferenciranje elija na osnovu prisustva e se vri i diferenciranje elija na osnovu prisustva karakteristi nih antigena na povrini elija ili antigena u samokarakteristi nih antigena na povrini elija ili antigena u samo j j eliji, pomo u monoklonskih At.eliji, pomo u monoklonskih At.





--/+ + /+ + ++

+/+++/++----MuramidazaMuramidaza

+ + ++ + ++/+++/+++/+ ++/+ ++++/+/--Kisela fosfatazaKisela fosfataza

+++ + ++ + ++/+ ++/+ +--Nespecifi na butiratNespecifi na butirat --esterazaesteraza

+++/ +/ +/+ ++/+ ++ + ++ + ++ ++ +++Hloracetat esterazaHloracetat esteraza

+ + ++ + ++/+ ++/+ ++/+ ++/+ +++++PASPAS

++--/+/++/+ ++/+ ++ + ++ + ++++/+++/++Peroksidaza Sudan BPeroksidaza Sudan B

MM--66MM--55MM--44MM--33MM--22MM--11

Vrsta leukemijeVrsta leukemije



--------MuramidazaMuramidaza

--------Peroksidaza Peroksidaza Sudan BSudan B

--+ + / + + ++ + / + + +-- / +/ +-- / +/ +Kisela Kisela fosfatazafosfataza

---- / +/ ++ / + ++ / + +-- / + +/ + +PASPAS

L3L3L1L1--L2L2L1L1--L2L2L1L1--L2L2FAB FAB PODELAPODELA

BB--ALLALLTT--ALLALLCALLACALLA00--ALLALL

Vrsta leukemijeVrsta leukemije

O-ALL = Ni B ni T akutna limfoblasna leukemijaCALLA = akutna limfoblasna leukemija sa prisutnim z ajedni kim antigenom

T-ALL = Akutna T limfoblasna leukemijaB-ALL = Akutna B limfoblasna leukemija

Imunofenotipska klasifikacija ALL



TdTCD3CD7/CD2T-ALL

TdTCD3CD7Pre T-ALL

T-ALL

//CD19/CD22 IgB-ALL

TdTCD19Pre-B ALL

TdTCD22CD19/CD10Common-B ALL

TdTCD22CD19Rana B-prekursor ALL

B-ALL

JedroJedroCitoplazmaCitoplazmaMembranaMembranaTip leukemijeTip leukemije

Osnovni panel monoklonalnih antitela za dijagnostik u limfomaOsnovni panel monoklonalnih antitela za dijagnostik u limfoma



Citoplazma B-elijeLambda

CitoplazmaB-elijeKappa

Goldijeva zonaRS elijeCD30

MembranaT-elije i nezrele B-elije

CD45RO

MembranaT-elijeCD3

CitoplazmaB-elijeCD79a

MembranaB-elijeCD20

BOJENJEELIJAANTITELO

PITANJA?PITANJA?

PATOFIZIOLOŠKA DIJAGNOSTIKA POREME ĆAJA … PATOFIZIOLOSKA... · Neutrofili Eozinofili Bazofili...

Documents

Transcript of PATOFIZIOLOŠKA DIJAGNOSTIKA POREME ĆAJA … PATOFIZIOLOSKA... · Neutrofili Eozinofili Bazofili...