検査法の変更について（CLEIA 法の導入について）

１．対象検査項目 現在の検査項目、HBs 抗原、HBc 抗体、HBs 抗体、HTLV-1 抗体、HIV1/2 抗体、

HCV 抗体、梅毒 TP 抗体、パルボウイルス B19 抗原のすべての検査項目につい

て、検査方法を凝集法から化学発光酵素免疫法（ＣＬＥＩＡ法）に変更する。

試薬の性能は、現行と同等又はそれ以上の感度、特異性が確認されている。

HBs 抗原検査の感度は 0.1ng/mL 以上、パルボウイルス B19 抗原検査は

1×106copies/mL 以上となっている。

２．検査システムについて

全献血血液を対象に感染症検査ならびに生化学検査のスクリーニング検査を

自動で行うシステムで、感染症の検査装置、生化学の検査装置及び数種類の検

体ラック搬送ユニットで構成されています。（240 検体/時間） ３．導入スケジュール 11 月 12 月 1 月 2 月 3 月 4 月 6 月 7 月 8 月 移行期間（約 6 ヶ月を予定）

九州の血液センターから、北海道、東京、埼玉、岡山、愛知、広島、宮城、

大阪、石川の各血液センターに順次機器を設置し、動作確認、教育訓練後に運

用を開始する。

1038

1491

300

感染症検査装置

凝集法 ＣＬＥＩＡ法

平成１９年１１月１４日血液事業部会運営委員会配布資料

73

GTYHNテキストボックス資料４－５

参考

検体投入部 遠心機 開栓機 感染症検査装置

感染症検査装置（ＣＬ４８００）

74

凝集法及びＣＬＥＩＡ法の原理 【凝集法】

担体表面の抗体(抗原)と検体中の抗原(抗体)が抗原抗体反応により凝集像を形成する。

【CLEIA 法例】

固相化抗体と ALP 標識抗体で検体中の抗原(抗体)を挟み抗原抗体複合体を形成する。ALP

標識抗体と基質液との反応で発光し、発光量をカウントする

血清学的ウイルス検査の開始時期 1972 年 ＨＢｓ抗原検査を開始

1986 年 ＨＩＶ－１、ＨＴＬＶ－１の抗体検査を開始

1989 年 ＨＣＶ抗体検査の開始、ＨＢｃ抗体検査の開始

1994 年 ＨＩＶ１/２抗体検査を開始

75

血清

学的

検査

に関

する

技術

的情

報（

CL4800）

原理

製造

販売

元

試薬

名

承認

番号

感度

設定

性能

ウイ

ンド

ウ期

間

注）

本表

の試

薬は

、輸

血用

血液

製剤

のた

めの

検査

を目

的と

して

使用

して

いる

もの

であ

り、

診断

を目

的と

して

いる

もの

では

あり

ませ

ん。

※1　

50-pool NAT陽

性者

の追

跡調

査結

果に

基づ

くRPHA法

のウ

イン

ドウ

期の

推定

値

※2　

Schreiber GB et al. The risk of transfusion-transmitted viral infection. N Engl J Med. 1996;334:1685-90.

日本

赤十

字社

市販

のHIV-1 抗

体セ

ロコ

ンバ

ージ

ョン

パネ

ルを

用い

､既

承認

品と

同等

の感

度が

得ら

れる

よう

設定

した

｡

BBI社

製HIV-1ｾﾛｺﾝﾊﾞｰｼﾞｮﾝﾊﾟﾈﾙを

測定

した

結果

､PRB941-04､

PRB951- 06､PRB958-05を

検出

した

｡ま

た､BBI社

製Anti-HIV

2Performance Panel(PRF202)､

BBI社

製 Worldwide HIV-1

Performannce

Panel(WWRB301(M),WWRB302)を

測定

した

結果

､ﾃﾞｰﾀｼｰﾄ上

の陰

性を

除く

全例

を検

出し

た｡

平均

80日

（44～

125日

）※

182日

（54～

192日

）※

2平

均22日

（6～

38日

）※

2

BBI社

製感

度検

定パ

ネル

(PHA807)

を用

いた

検出

感度

は、

サブ

タイ

プadは

0.1ng/mL、

サブ

タイ

プay

は0.1ng/mLで

あっ

た。

BBI社

製セ

ロコ

ンバ

ージ

ョン

パネ

ル（

№PHM935A，

B）

を用

いて

検出

感度

を検

討し

た結

果、

パネ

ル№

PHM935 13を

検出

した

。

最小

検出

感度

は1.0mIU/mLで

あり

､CDC推

奨基

準値

であ

る10mIU/mL以

上を

陽性

とし

た｡

BBI社

製HCVｾﾛｺﾝﾊﾞｰｼﾞｮﾝﾊﾟﾈﾙを

測定

した

結果

､PHV905-07､PHV907-

05､PHV908-04を

検出

した

｡ま

た､

ProMedDx社

より

購入

した

ｼﾞｪﾉﾀｲ

ﾌﾟ既

知検

体71例

を測

定し

た結

果､

全例

を検

出し

た｡

市販

のHBs抗

原感

度パ

ネル

を用

い0.1ng/mLを

検出

する

よう

設定

した

。

HBV陽

性検

体を

用い

､既

承認

品と

同等

の感

度が

得ら

れる

よう

設定

した

｡

WHO標

準物

質(anti-hepatitis

Immunoglobuline-1st Reference

Preparation )を

基準

に設

定し

た｡

市販

のHCV 抗

体セ

ロコ

ンバ

ージ

ョン

パネ

ルを

用い

､既

承認

品と

同等

の感

度が

得ら

れる

よう

設定

した

｡

HBc抗

体陰

性検

体の

測定

を行

い、

陰性

と判

定さ

れる

率は

99.5％

以上

であ

る。

HBs抗

体陰

性検

体の

測定

を行

い、

陰性

と判

定さ

れる

率は

99.5％

以上

であ

る。

HCV抗

体陰

性検

体の

測定

を行

い、

陰性

と判

定さ

れる

率は

99.5％

以上

であ

る。

HIV抗

体陰

性検

体の

測定

を行

い、

陰性

と判

定さ

れる

率は

99.5％

以上

であ

る。

CLEIA法

21700AMZ00716000

21800AMZ10350A01

特異

性試

験

HBs抗

原陽

性パ

ネル

が陽

性、

HBs

抗原

陰性

パネ

ルが

陰性

と判

定さ

れる

。

HBc 抗

体陽

性パ

ネル

が陽

性、

HBc

抗体

陰性

パネ

ルが

陰性

と判

定さ

れる

。

HBs 抗

体陽

性パ

ネル

が陽

性、

HBs

抗体

陰性

パネ

ルが

陰性

と判

定さ

れる

。

HCV 抗

体陽

性パ

ネル

が陽

性、

HCV

抗体

陰性

パネ

ルが

陰性

と判

定さ

れる

。

HIV 抗

体陽

性パ

ネル

が陽

性、

HIV

抗体

陰性

パネ

ルが

陰性

と判

定さ

れる

。

HBs抗

原陰

性検

体の

測定

を行

い、

陰性

と判

定さ

れる

率は

99.5％

以上

であ

る。

CLEIA法

CLEIA法

CLEIA法

2ス

テッ

プサ

ンド

イッ

チ法

に基

づい

た化

学発

光酵

素免

疫測

定法

によ

り、

血清

又は

血漿

中の

抗HIV-1

抗体

及び

抗HIV-2抗

体を

検出

する

もの

であ

る。

2ス

テッ

プサ

ンド

イッ

チ法

に基

づい

た化

学発

光酵

素免

疫測

定法

によ

り、

血清

又は

血漿

中の

抗HCV抗

体を

検出

する

もの

であ

る。

2ス

テッ

プサ

ンド

イッ

チ法

に基

づい

た化

学発

光酵

素免

疫測

定法

によ

り、

血清

又は

血漿

中の

HBs抗

原を

検出

する

もの

であ

る。

2ス

テッ

プサ

ンド

イッ

チ法

に基

づい

た化

学発

光酵

素免

疫測

定法

によ

り、

血清

又は

血漿

中の

抗HBc抗

体を

検出

する

もの

であ

る。

1ス

テッ

プサ

ンド

イッ

チ法

に基

づい

た化

学発

光酵

素免

疫測

定法

によ

り、

血清

又は

血漿

中の

抗HBs抗

体を

検出

する

もの

であ

る。

21900AMX00939000

21900AMX00264000

21900AMX00936000

富士

レビ

オ株

式会

社

ルミ

パル

スプ

レス

ト®HBs Ag-N

ルミ

パル

スプ

レス

ト®オ

ーソ

®HCV

ルミ

パル

スプ

レス

ト®HIV-1/2

ルミ

パル

スプ

レス

ト®HBc Ab-N

ルミ

パル

スプ

レス

ト®HBs Ab-N

CLEIA法

HBV

HCV

HIV

HBs抗

原検

査HBc抗

体検

査HBs抗

体検

査HCV抗

体検

査HIV－

1・

2抗

体検

査

1

76

血清

学的

検査

に関

する

技術

的情

報（

CL4800）

原理

製造

販売

元

試薬

名

承認

番号

感度

設定

性能

ウイ

ンド

ウ期

間

注）

本表

の試

薬は

、輸

血用

血液

製剤

のた

めの

検査

を目

的と

して

使用

して

いる

もの

であ

り、

診断

を目

的と

して

いる

もの

では

あり

ませ

ん。

※1　

50-pool NAT陽

性者

の追

跡調

査結

果に

基づ

くRPHA法

のウ

イン

ドウ

期の

推定

値

※2　

Schreiber GB et al. The risk of transfusion-transmitted viral infection. N Engl J Med. 1996;334:1685-90.

日本

赤十

字社

特異

性試

験

51日

（36～

72日

）※

2

梅毒

TP抗

体陽

性パ

ネル

が陽

性、

梅毒

TP抗

体陰

性パ

ネル

が陰

性と

判定

され

る。

HTLV-Ⅰ

抗体

陽性

パネ

ルが

陽性

、HTLV-Ⅰ

抗体

陰性

パネ

ルが

陰性

と判

定さ

れる

。

B19抗

原陽

性パ

ネル

が陽

性、

B19

抗原

陰性

パネ

ルが

陰性

と判

定さ

れる

。

梅毒

TP抗

体陰

性の

測定

を行

い、

陰性

と判

定さ

れる

率は

99.5％

以上

であ

る。

HTLV-Ⅰ

抗体

陰性

検体

の測

定を

行い

、陰

性と

判定

され

る率

は99.5％

以上

であ

る。

抗梅

毒TP抗

体既

知検

体550例

を測

定し

た結

果､既

承認

品と

の一

致率

は100%で

あっ

た｡

BBI社

製Anti-HTLV-Ⅰ

/Ⅱ

Mixed

Titer Performance Panel

PRP205を

測定

した

結果

､ﾃﾞｰﾀ上

の陰

性を

除く

全例

を検

出し

た｡

ヒト

パル

ボウ

ィル

スB19DNA陽

性ﾊﾟﾈﾙ(n=152)を

測定

した

結果

､DNA

量 106IU/mL以

上で

あっ

た117例

を全

例検

出し

た｡

ルミ

パル

スプ

レス

ト®TP

ルミ

パル

スプ

レス

ト®HTLV-Ⅰ

パル

ボB19抗

原キ

ット

21500AMZ00417000

B19抗

原陰

性検

体の

測定

を行

い、

陰性

と判

定さ

れる

率は

99.5％

以上

であ

る。

抗梅

毒TP抗

体陽

性検

体を

用い

､既

承認

品と

同等

の感

度が

得ら

れる

よう

設定

した

｡

抗HTLV-Ⅰ

抗体

陽性

検体

を用

い､

既承

認品

と同

等の

感度

が得

られ

るよ

う設

定し

た｡

ヒト

パル

ボウ

ィル

スB19抗

原陽

性検

体を

用い

､DNA量

106geq/mL(=IU/mL)を

検出

する

よう

設定

した

。

2ス

テッ

プサ

ンド

イッ

チ法

に基

づい

た化

学発

光酵

素免

疫測

定法

によ

り、

血清

又は

血漿

中の

抗梅

毒ト

レポ

ネー

マ･パ

リー

ダム

(TP)抗

体を

検出

する

もの

であ

る。

2ス

テッ

プサ

ンド

イッ

チ法

に基

づい

た化

学発

光酵

素免

疫測

定法

によ

り、

血清

又は

血漿

中の

抗HTLV-

Ⅰ抗

体を

検出

する

もの

であ

る。

2ス

テッ

プサ

ンド

イッ

チ法

を原

理と

する

化学

発光

酵素

免疫

測定

法(CLEIA)に

よる

血清

又は

血漿

中の

ヒト

パル

ボウ

ィル

スＢ

19抗

原検

出用

試薬

であ

る。

富士

レビ

オ株

式会

社

CLEIA法

CLEIA法

梅毒

抗体

検査

HTLV-Ⅰ

抗体

検査

21700AMZ00702000

CLEIA法

ヒト

パル

ボB19抗

原検

査

2

77

検査年

月検査数

梅毒

(抗体

)HBV

HBs抗

原HBV

HBc抗体

HCV

(HCV抗体)

HIV

(HIV抗体)

HTLV-1抗

体ﾋﾄﾊ

ﾟﾙﾎﾞｳｲﾙｽ

B19(抗

原)

116

108

211

44

38

171

13

0.24

0.22

0.43

0.09

0.08

0.35

0.03

個別NAT

実施数

100

207

44

38

個別NAT

陽性数

26

25

19

0

101

25

168

46

14

124

1

0.20

0.05

0.33

0.09

0.03

0.24

0.00

※　NAT（HBV：HBV-DNA，HCV：HCV-RNA，HIV：HIV-1RNA）

陽性数

陽性

率（％

）検査

項目

別陽

性率

（日

本赤

十字

社九

州血

液センター）

2007年

12月

PK7200

（凝

集法

）50,973

2008年

1月

CL4800ｼｽﾃﾑ

（CLEIA法

）49,076

検査項目

陽性数

陽性

率（％

）

参 考

78

平成 20 年 10 月 29 日

薬事・食品衛生審議会

血液事業部会運営委員会資料

感染症検査結果陽性血液にかかる当面の取り扱いについて

日本赤十字社 血液事業本部

１．はじめに

献血血液の HBV 及び HCV をはじめとした感染症検査については、平成２０年１

月の九州センターより従来の凝集法から CLEIA 法（化学発光酵素免疫法）の

CL4800 への移行準備を進めて、８月には全国導入を終了したところです。

一方、感染症検査結果が陽性と判定された方へは、通知事業として検査結果を

お知らせしており、また輸血医療を実施した医療関係者へは「血液製剤等に係る

遡及調査ガイドライン」に基づいて情報を提供し、遡及調査を行っています。

２．遡及調査への当面の対応について

CLEIA 法導入後、献血血液のスクリーニングで使用する感染症検査試薬につい

ては、感度の一層の向上が達成されたものの、特に HBs 抗原検査結果においては

陽性と判定される事例が多くなっていました。

１） HBV

CLEIA 法導入前は、凝集法で HBs 抗原検査が陽転した場合、EIA 法による中和

試験を実施して、陽性の場合に遡及調査を実施していました。

CLEIA 法導入後は、HBs 抗原検査結果が陽性（C.O.I．値 1.0 以上が陽性）と判

定された場合、確認試験としての中和試験の対象範囲が C.O.I．値 2.0 以上に限

定されていたことから、C.O.I．値 1.0 以上 2.0 未満に関しては全例陽性と判断

せざるを得なかったため、遡及調査件数が急増しました。

その後、試薬の改善が行われ 10 月 20 日以降は C.O.I．値 1.0 以上 2.0 未満に

ついても中和試験が可能となり、中和試験または個別 NAT のいずれかが陽性

の場合に遡及調査を実施することとしました。

２） HCV

CLEIA 法導入前は、凝集法で HCV 抗体検査が陽転した場合、遡及調査を実施し

ていました。

CLEIA 法導入後は、CLEIA 法にて陽転の血液と前回の血液について個別 NAT を

実施して、いずれかが陽性の場合に遡及調査を実施することとしました。

３） HIV

CLEIA 法導入前は、凝集法で HIV 抗体検査が陽転した場合、追加試験として EIA

法を行い、更に確認試験として個別 NAT で陽性の場合に遡及調査を実施していま

した。

CLEIA 法導入後は、確認試験としてウエスタンブロット法及び個別 NAT を実施

して、いずれかが陽性の場合に遡及することとしました。

79

平成

20年

10月

29日

日本

赤十

字社

血液

事業

本部

出荷

適否

基準

C.O

.I.　

12.0

以上

が陽

性、

12.0

未満

が陰

性（但

し、

HB

s抗体

200m

IU/ｍ

L以

上の

場合

は適

合と

する

）

判定

法

確認

試験

C.O

.I.　

1.0

以上

の「陽

性」検

体に

つい

て中

和試

験を

実施

（10

月20日

～）

通知

、遡

及調

査の

確認

試験

とし

て個

別N

AT（TM

A法

）を

実施

WB

法及

び個

別N

AT

（TM

A法

）IF

法（日

赤内

部試

薬）

通知

、遡

及調

査の

確認

試験

とし

て個

別N

AT（P

CR

法）

を実

施

献血

者へ

の通

知中

和試

験陽

性の

場合

に通

知個

別N

AT（TM

A法

）陽

性の

場合

に通

知C

L法

及び

IF法

の２

法陽

性の

場合

に通

知個

別N

AT（P

CR

法）の

結果

を付

記し

て全

員に

通知

受血

者の

遡及

調査

確認

試験

陽性

又は

個別

NA

Tが

陽性

の場

合に

遡及

調査

実

施（10月

20日

～）

※

今回

陽性

の検

体及

び前

回の

検体

につ

いて

個別

NA

T（TM

A法

）を

実施

して

陽性

の場

合に

遡及

調査

実施

WB

法ま

たは

個別

NA

T（TM

A法

）が

陽性

の場

合に

遡及

調査

実施

HB

c抗

体陽

性で

前回

献血

ある

方が

対象

。今

回及

び前

回の

検体

で個

別N

ATを

実施

して

、結

果を

付記

して

遡及

調査

する

。

1回

目の

検査

で陽

性を

示し

た検

体は

、2重

測定

して

合計

3回

の試

験の

内2回

以上

で陽

性の

場合

に「陽

性」と

判定

する

。（「陽

性」と

判定

され

た血

液は

輸血

用血

液製

剤及

び血

漿分

画原

料と

しな

い。

）C.O

.I.　

1.0

以上

が陽

性、

1.0

未満

が陰

性　

新し

い感

染症

検査

法（C

L4800）の

判定

と陽

性血

液に

かか

る当

面の

取り

扱い

につ

いて

（案

）

HB

s抗原

HC

V抗

体H

IV抗

体H

TLV

－１

抗体

HB

c抗

体　

　　

　　

　　

検査

項目

対応

※10月

19日

以前

の受

血者

の遡

及調

査　

確認

試験

実施

可能

例（C

.O.I

2.0

以上

）：確

認試

験陽

性の

場合

に遡

及調

査を

実施

（当

該陽

性献

血と

遡及

調査

対象

献血

の個

別H

BV

-N

ATを

実施

し医

療機

関へ

情報

提供

。）

　 確

認試

験実

施不

能例

（C

.O.I

1.0

以上

、2.0

未満

）：遡

及調

査の

実施

（当

該陽

性献

血と

遡及

調査

対象

献血

の個

別H

BV

-N

ATを

実施

し医

療機

関へ

情報

提供

。）

80

165

176

149

173

192

167

221

171

158

245

353

361

524

603

564

654

643

623

467

199

0

100

200

300

400

500

600

700

4月5月

6月7月

8月9月

10月

11月

12月

1月2月

3月

件数

平成19

年度

平成20

年度

遡及調査月別発生状況

平成

20年

1月C

L480

0導入開始

平成

20年

8月C

L480

0全面導入

追加試験適用拡大

81

日本赤十字社におけるHBs抗原検査実施体制

HBs抗原検査（CLEIA法）：1回測定

陽性か

1回以上陽性か

Yes

HBs抗原検査（CLEIA法）：2回測定

検査判定「不適」

HBs抗原検査（CLEIA法）：中和試験※個別HBV-NAT追加試験

Yes

陽性か

Yes（and/or）

※中和試験HBs抗原陽性検体の特異性を確認する目的で、検査系にHBs抗体を添加し、HBs抗原検査の反応が抑制されることを確認する試験。抑制率（%）が50%以上を陽性と判定する。

献血者から始まる遡及調査

82