Obtención de mandarinos triploides sin semillas · Obtención de plantas a partir de semillas...
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Obtención de mandarinos triploides sin semillas
L. NavarroCentro de Protección Vegetal y Biotecnología
Instituto Valenciano de Investigaciones Agrarias (IVIA) Instituto Valenciano de Investigaciones
I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
SEPTIEMBRE OCTUBRE NOVIEMBRE DICIEMBRE ENERO FEBRERO MARZO ABRIL MAYO10 20 30 10 20 30 10 20 30 10 20 30 10 20 30 10 20 30 10 20 30 10 20 30 10 20 30
Fuente: Bono, R., Soler, J., Buj, A.
FORTUNEORTANIQUE
NADORCOTTMONCADA
HERNANDINA-CLTARDELLENDALE
TOMATERAFINA
NOVANOUR
CLAUSELLINACULTIFORTOROGROS
MARISOL
LORETINACAPOLA
IWASAKIBASOLCLEMENRUBI
OKITSU
NULESSIN
ARRUFATINA
ORONULESCLEMENPONS
SATSUMA OWARI
BEATRIZESBAL
OROVALCLEMENULES (OROGRANDE)
Periodos de recolección de mandarinos
I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
Ventajas de los híbridos triploides
Las plantas triploides tienen muybaja fertilidad y generalmente no producen semillas ni inducen la formación de semillas en otras
variedades por polinización cruzada
I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
Hibridación convencional
X
I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
Obtención de triploides
X
I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
Obtención de triploides
X
I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
Obtención de triploides
X
I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
Problemas para obtener poblaciones elevadas de triploides
Obtención de plantas a partir de semillas abortadas
Análisis del nivel de ploidía de las plantas regeneradas
Inexistencia de parentales tetraploides de alta calidad
I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
Rescate de embrionesI V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIASSemillas con embriones
triploides
Análisis de ploidía por citometría de flujo
Pico 1: Diploide
Pico 2: Triploide
I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
Pico 1: Diploide
Pico 2: Tetraploide
I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
Obtención de plantas autotetraploides estables de variedades poliembriónicas
Parentales masculinos tetraploides obtenidos
AnanaAfourerFairchildKaraKinnowMapoMinneolaMurcott
OrtaniquePageSunburstTardivo de CiaculliSanguinelliDuncanStar Ruby
I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
Obtención de plantas autotetraploides estables de variedades monoembriónicas
Microinjerto de 2 semanasAplicación de unagota de solución decolchicina al 0.1%
Clemenulesautotetraploide
estable
I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
Parentales femeninos tetraploides obtenidos
ClemenulesFinaMarisolMoncada
I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
Eficiencia de los métodos para obtenerhíbridos triploides de cítricos
2.74x X 2x
0.92x X 4x
0.12x X 2x
Nº plantas triploides por flor polinizadaCruzamientos
I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
Programa de triploides del IVIA
Obtención y evaluación de variedades triploides
Año 0: Polinización, cultivo embrionesAño 1: Análisis ploidía, trasplante a invernaderoAño 2: Injerto en campoAños 4 a 7: Inicio evaluación preliminar en el árbol originalAños 7-10: Inicio evaluación secundaria (sobreinjerto dos árboles en IVIA)Años 10- : Saneamiento y experimentación a gran escala
I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
Híbridos obtenidosCruzamientos 2x X 2x : más de 4.000
Parentales femeninosFortuneClemenulesHernandinaMarisolFinaMonrealBrunoGuillerminaLoretinaOrograndeSoymaTomateraEllendaleEncoreWilking
Parentales masculinosFortune ChandlerNova Kara Murcott DaisyM. Común SatsumaEllendale ValenciaAfourer Tangelo OrlandoOrtanique Tangelo Minneola HernandinaFinaClemenulesLoretinaFreemontN. Comuna
I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
Híbridos obtenidosCruzamientos 2x X 4x : más de 3.400
Parentales femeninosClemenulesHernandinaFinaMarisolBrunoTomateraMoncadaFortuneEllendale
Parentales masculinosTangelo OrlandoNaranjo PineappleNovaMandarino comúnMoncada
I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
Híbridos obtenidosCruzamientos 4x X 2x : más de 3.000
Parentales femeninosClemenulesMarisolFina
Parentales masculinosAfourerMurcottSatsumaKaraRio RedMoncadaIokanAnanaEllendaleM. ComúnPummelo PinkI V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
Más de 10.500 híbridos de 190 combinaciones parentales disponibles para evaluar
I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
Floración triploides
88.24
74.93
22.22
0.31
% de híbridos con flores
Años desde plantación en campo (2 años después de la
polinización)
I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
Triploides Clemenules 2n x Orlando tangelo 4n
Triploides Fortune 2n x mandarino Común 2n
I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
Mandarino Garbí (IVIA-Tri-1)ForMur 96-081
Parental femenino: Fortune diploideParental masculino: Murcott diploidePolinización : Abril 1996Plantación: Septiembre 1998Sobreinjerto: Abril 2004Primera floración: 2002Evaluación fruta: 2004-2008
I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
Mandarino Garbí (IVIA-Tri-1)ForMur 96-081
Características del frutoÉpoca maduración óptima: 2ª-3ª semana de
MarzoCalibre: 65-75 mmEspesor de la corteza: 2.5 mmÍndice de color: 15Acidez: 19.2 g/lAzucares: 18º BrixÍndice de madurez: 9.4Zumo: 48%Semillas: 0-0.1 por fruto
No se han observado síntomas de Alternaria
I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
Mandarino Garbí (IVIA-Tri-1)ForMur 96-081
Datos de cata frutosFruto atractivoFacilidad de pelado aceptableAroma de aceites esenciales agradableTextura pulpa fundenteResiduo gajo escasoValoración organoléptica buena
I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
IVIA-Tri-1ForMur 96-081
I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIASMandarino GarbíFortune Murcott
Mandarino Garbí (IVIA-Tri-1)ForMur 96-081
Características del árbolÁrbol vigoroso, con hojas grandes,
crecimiento erecto y buena compatibilidad con citrange Carrizo
Aparentemente con buena producción y sin vecería
I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
Árbol madre
1999-2000 2000-2001 2001-2002 2002-2003 2003-2004 2004-2005 2005-2006 2006-2007 2007-2008
Floración Fructif icación
Abundant e
Int e rmedia
Esca sa
Nula
Mandarino Garbí (IVIA-Tri-1)
837.2888.21292230
% nudos
Long(mm)
% nudos
Long(mm)
Long(mm)
Long(mm)
Long(mm)
Long(mm)
Octubre 2008Octubre 2006Octubre 2005
Nov 2004
Octubre 2003Primeras
Evolución espinosidad ultimas brotaciones árbol madre
Mandarino Garbí (IVIA-Tri-1)Características del árbol
El 90% de los nudos de la última brotación de los árbolesde 2ª evaluación tienen espinas de una media de 5 mm de longitud
I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
Mandarino Garbí (IVIA-Tri-1)
Mandarino Garbí (IVIA-Tri-1)
Mandarino Safor (IVIA-Tri-2)ForKar 96-037
Parental femenino: Fortune diploideParental masculino: Kara diploidePolinización : Abril 1996Plantación: Abril 1998Sobreinjerto: Abril 2004Primera floración: 2001Evaluación fruta: 2002-2008
I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
Mandarino Safor (IVIA-Tri-2) Características del fruto
Época maduración óptima: Finales febrero a principios de marzo
Calibre: 60-65 mmEspesor de la corteza: 2.6 mmÍndice de color: 18Acidez: 16.6 g/lAzucares: 16º BrixÍndice de madurez: 9.6Zumo: 52%Semillas: 0-0.05 por fruto
No se han observado síntomas de Alternaria
Mandarino Safor (IVIA-Tri-2)Datos de cata frutos
Fruto de color intenso atractivoFacilidad de pelado aceptableTextura pulpa fundenteSin residuo de gajoValoración organoléptica buena
I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
Mandarino SaforFortune Kara
Mandarino Safor (IVIA-Tri-2)Características del árbol
Árbol vigoroso, con hojas grandes, crecimiento llorón y buena compatibilidad con citrange Carrizo
Aparentemente con buena producción y sin vecería
Árbol madre
1999-2000 2000-2001 2001-2002 2002-2003 2003-2004 2004-2005 2005-2006 2006-2007 2007-2008
Floración Fructif icación
Abundant e
Int e rmedia
Esca sa
Nula
Mandarino Safor (IVIA-Tri-2)
63.4203781116
% nudos
Long(mm)
% nudos
Long(mm)
Long(mm)
Long(mm)
Long(mm)
Long(mm)
Octubre 2008Octubre 2006Octubre 2005
Nov 2004
Octubre 2003Primeras
Evolución espinosidad ultimas brotaciones árbol madre
Mandarino Safor (IVIA-Tri-2)Características del árbol
El 8% de los nudos de la última brotación de los árbolesde 2ª evaluación tienen espinas de una media de 4 mm de longitud
I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
Mandarino Safor (IVIA-Tri-2)
I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
Mandarino Safor (IVIA-Tri-2)
AVASA Pri-43ForEll 96-058
Parental femenino: Fortune diploideParental masculino: Ellendale diploidePolinización : Abril 1996Plantación: Septiembre 1998Sobreinjerto: Mayo 2002Primera floración: 2001Evaluación fruta: 2002-2008
I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
AVASA Pri-43 ForEll 96-058Características del fruto
Época maduración óptima: Finales de marzoCalibre: 60-70 mmEspesor de la corteza: 3.8 mmÍndice de color: 15Acidez: 20.5 g/lAzucares: 16º BrixÍndice de madurez: 7.8Zumo: 49%Semillas: 0-0.5 por fruto
Se han observado síntomas de Alternaria muy leves en cuatro frutos de 891 analizados (0.45%)
AVASA Pri-43 ForEll 96-058
Datos de cata frutosFruto atractivoFacilidad de pelado aceptableAroma aceites esenciales agradableTextura pulpa fundenteResiduo de gajo escasoValoración organoléptica buena
I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
AVASA Pri-43Fortune Ellendale
1999-2000 2000-2001 2001-2002 2002-2003 2003-2004 2004-2005 2005-2006 2006-2007 2007-2008
Floración Fructif icación
Abundant e
Int e rmedia
Esca sa
Nula
AVASA Pri-43 ForEll 96-058Características del árbol
Árbol de vigor medio, crecimiento abierto y buena compatibilidad con citrange Carrizo
Aparentemente con buena producción y sin vecería
Árbol madre
AVASA Pri-43 ForEll 96-058
005231062020
% nudos
Long(mm)
% nudos
Long(mm)
Long(mm)
Long(mm)
Long(mm)
Long(mm)
Octubre 2008Octubre 2006Octubre 2005
Nov 2004
Octubre 2003Primeras
Evolución espinosidad ultimas brotaciones árbol madre
AVASA Pri-43 ForEll 96-058Características del árbol
Las ramas de la última brotación de los árboles de 2ª evaluación no tienen espinas
I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
AVASA Pri-43 ForEll 96-058
AVASA Pri-43 ForEll 96-058
Comparación híbridos triploides disponibles
Ninguna8%, 4 mm90%, 5mmEspinas ramas terminalesAbiertoLlorónErectoCrecimiento árbol0-0.50-0.050-0.1Semillas por fruto
495248Zumo (%)60-7060-6565-75Calibre (mm)
Med. Feb-Med. Abril
Feb-Med. AbrilMed. Feb-Fin Abril
Periodo recolección7.89.69.4Índice maduración151618Azucares (º Brix)
20.516.619.2Acidez (g/l)151815Índice color
4ª Marzo4ª Feb-1ª Mar.2ª-3ª MarzoÉpoca optima maduración2002-20082002-20082004-2008Evaluación fruta
AVASA Pri-43SaforGarbí
SEPTIEMBRE OCTUBRE NOVIEMBRE DICIEMBRE ENERO FEBRERO MARZO ABRIL MAYO10 20 30 10 20 30 10 20 30 10 20 30 10 20 30 10 20 30 10 20 30 10 20 30 10 20 30
HERNANDINA-CLTARDELLENDALE
FORTUNEORTANIQUE
SAFORAVASA PRI-43
GARBÍ
GOLD NUGGETNOUR
NADORCOTTMONCADA
TOMATERAFINA
KIYOMINOVA
BEATRIZESBAL
OROVALCLEMENULES (OROGRANDE) - NULESSIN
CLAUSELLINACULTIFORTOROGROS
MARISOL
LORETINACAPOLA
IWASAKIBASOL
CLEMENRUBIOKITSU
ARRUFATINA
ORONULES
CLEMENPONSSATSUMA OWARI
PRIMOSOLE
SATSUMASCLEMENTINAS
HÍBRIDOSHÍBRIDOS TRIPLOIDES
Periodos de recolección de mandarinos
SEPTIEMBRE OCTUBRE NOVIEMBRE DICIEMBRE ENERO FEBRERO MARZO ABRIL MAYO10 20 30 10 20 30 10 20 30 10 20 30 10 20 30 10 20 30 10 20 30 10 20 30 10 20 30
IVIA TRI-5IVIA TRI-6
AVASA PRI-44
SAFORAVASA PRI-43
GARBÍ
AVASA PRI-46AVASA PRI-47
IVIA TRI-8AVASA PRI-48
IVIA TRI-3AVASA PRI-49
IVIA TRI-4IVIA TRI-7
Periodo de recolección de triploides seleccionados
I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
Identificación por marcadores moleculares
I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
162 nt164 nt
160 nt
170 nt
Clemenules 2x
3x
Nul X OrlT3x
Nul X OrlT
3x
Fin X OrlT
3x
Fin X OrlT
Orlando 4x
Grupo de investigación sobre triploides del IVIADirección y Coordinación: L. NavarroPolinizaciones, cultivo in vitro: J. Juárez, P. Aleza,
C. Ortega, A. Navarro, M. Hernández, V. Ortega, J. M. Arregui, C. Martí
Caracterización molecular: P. AlezaCultivo invernadero y campo: J. A. Pina, J.F.
Ballester, P. Aleza, R. Montalt, D. Conchilla, F. Ahuir, R. López, A. Conchilla, J.D. Peris, F.J. Martí
Saneamiento: J. Juárez, P. Aleza, M.C. Vives, J. A. Pina
Evaluación: J. Cuenca, P. Aleza, M. Hernández, C. Ortega, V. Ortega, Panel catadores (J.M. Julve)